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NUTRICIÓN MICROBIANA

Suministrar a las células los ingredientes químicos y


energía que requieren para sintetizar los monómeros
de sus biomoléculas.

Escherichia coli
Macronutrientes:Se requieren en grandes
cantidades: C,H,O,N,S,P y otros como Na,K, Ca,
Mg , Fe.
Utilizados en la síntesis de macromoléculas

Nutrientes
Micronutrientes: Se requieren en pequeñas
concentraciones:
Cr,Co,Cu,Mn,Mo,Ni,Se,W,V,Zn
Utilizados en general como cofactores de
enzimas biosintéticas

Compuestos orgánicos necesarios en


Factores de
pequeñas cantidades y solo por algunas
crecimiento células
Clasificación de los organismos por sus
requerimientos de Factores de Crecimiento

Protótrofos:
No requieren factores de crecimiento.
Pueden sintetizar lo que necesitan a partir de los nutrientes
del medio

Auxótrofos:
Requieren factores de crecimiento:
Vitaminas (cofactores de enzimas)
Amino ácidos
Purinas y pirimidinas
Los micro y macronutrientes así como los factores de crecimiento
requeridos para favorecer la propagación de los microorganismos,
deben ser proporcionados en soluciones nutritivas llamadas:

MEDIOS DE CULTIVO

Los medios de cultivo son mezclas de sustancias orgánicas e


inorgánicas que proporcionan los nutrientes necesarios para que
los microorganismos lleven a cabo sus funciones vitales.
MEDIOS DE CULTIVO
CLASIFICACIÓN DE MEDIOS DE CULTIVO

Complejos ó naturales:No se conoce su


composición química exacta
Por su
composición
Simples,definidos ó sintéticos:Se conoce
su composición química exacta
MEDIOS SIMPLES Ó SINTÉTICOS

Medio de Ashbey
Manitol 15 gr
Sulfato de magnesio 0.2gr
Fosfato dibásico de potasio 0.2 gr.
Cloruro de calcio 0.2 gr
Sol. Acuosa de Trióxido 0.05 ml
de Molibdeno al 10%
Sol.de Cloruro 0.05 ml
férrico 10%
Agua 1000 ml
MEDIOS SIMPLES Ó SINTÉTICOS

Medio Mineral
Nitrato de amonio 15 gr
Sulfato de magnesio 2gr
Fosfato dibásico de potasio 0.2 gr.
Cloruro de calcio 0.1 gr
Agua de la llave 1000 ml
CLASIFICACIÓN DE MEDIOS DE CULTIVO

Sólidos: Solidificados con el carbohidrato


complejo: agar agar (1.5-2%) extraído de
algas marinas del género Gellidium. Útiles
para separar microorganismos y favorecer
el desarrollo de colonias aisladas

Líquidos: (Caldos) Útiles para enriquecer


Por su estado y propagar cultivos, rehidratar cepas y
físico hacer diluciones

Semisólidos: (Agar 0.4-0.5%) Usados


para determinar la movilidad de loas
microorganismos
CLASIFICACIÓN DE MEDIOS DE CULTIVO

Selectivos: Favorecen el desarrollo de un tipo de


microorganismo y suprimen el crecimiento de otros.

Enriquecimiento: Favorecen la multiplicación,


enriquecimiento ó aumento de un grupo de
microorganismos .
Enriquecidos: Permiten el desarrollo de heterótrofos
exigentes y son muy ricos en nutrientes
Por su uso
Diferenciales: Contienen sustancias nutritivas ó
indicadoras que ponen de manifiesto alguna actividad
metabólica característica de un microorganismo.
De mantenimiento: Preservan satisfactoriamente la
viabilidad de las células de un cultivo
Enriquecimiento: Favorecen la multiplicación,
enriquecimiento ó aumento de un grupo de microorganismos .

Caldo Selenito-Cistina y Caldo Tetrationato


CALDO SELENITO CISTINA
Peptona de caseína 5 gr
L(-) Cistina 0.01 gr
Lactosa 4 gr
Fosfato de sodio 10 gr
Selenito de sodio 4 gr Agar 15 gr
Agua 1000 ml
BASE CALDO TETRATIONATO
Peptona de caseína 2.5 gr
Peptona de carne 2.5 gr
Mezcla de sales Biliares 1 gr
Carbonato de calcio 10 gr
Tiosulfato de sodio 30 gr

Agua 1000 ml
Se agrega I2/KI
Enriquecidos: Permiten el desarrollo de heterótrofos
exigentes y son muy ricos en nutrientes

Agar sangre, Agar


chocolate
Extracto de corazón 10 gr
Triptosa 10 gr
Cloruro de sodio 5 gr
Agar 15 gr
Sangre de carnero al 5%
Agua 1000 ml.
Medios diferenciales y selectivos
Para: Salmonella typhi

Sulfito de E. Carne 5 gr, Peptona carne 10 gr, D (+)Glucosa 5 gr, Sulfato


ferroso 0.3 gr, Fosfato dibásico de sodio 4 gr, Sulfito de Bismuto 8
Bismuto gr, Verde brillante 0.025 gr, Agar 15 gr, Agua 1000 ml

E. Levadura 3 gr, Cloruro de sodio 5 gr, Xilosa 3.5 gr, Lactosa 7.5 gr, Lisina 5 gr,
XLD Citrato de fierro y amonio 0.8 gr, Desoxicolato de sodio 2.5 gr, Tiosulfato de
sodio 6.8 gr, Rojo fenol 0.08 gr,Agar 13.5 gr, Agua 1000 ml.

Hecktoen Proteosa peptona 12 gr, Cloruro de sodio 5 gr, E. Levadura 3 gr, Sacarosa 12 gr,
Lactosa 12 gr Salicina 2 gr,Tiosulfato de sodio 5 gr,Citrato de fierro y amonio 1.5
gr,Mezcla de sales biliares 9 gr,Azul de bromotimol 0.064 gr y fucsina ácida
0.04 gr, Agar 13.5 gr, Agua 1000 ml.
Agar Mac Conkey

Colonias Lactosa (-) Colonias Lactosa (+)

Peptona de caseína 17 gr, Peptona de carne 3 gr, Lactosa 10


gr, Cloruro de sodio 5 gr,Sales biliares 1.5 gr, Cristal violeta
0.001 gr, Rojo neutro 0.03 gr,Agar 15 gr , Agua 1000 ml.
Agar EMB

Peptona de caseína 10 gr, Fosfato monobásico de potasio 2 gr, Lactosa 10 gr,Sacarosa


5 gr, Azul de metileno 0.065gr,Eosina Y amarillenta 0.4 gr.

Salmonella, Shigella Lac (-),Sac(-)


Proteus,Citrobacter,Aeromonas (Lac -), Sac (+)
E. coli: Lac(+), Sac (+)
E. Carne 5 gr , peptona de carne 5 gr, Citrato de sodio
Agar Salmonella - 10 gr, Citrato de fierro, Tiosulfato de sodio 8.5
gr.,Lactosa 10 gr., Bilis desecada de buey 8.5 gr. Verde
Shigella brillante 0.0003 gr. Rojo neutro 0.025 gr.,Agar 12 gr.
No se esteriliza

Agar Cetrimida Peptona de gelatina 20 gr, Cloruro de Magnesio 1.4


gr,Sulfato de potasio 10 gr, N-Cetil-N-N-N
Timetilamonio bromuro (Cetrimida) 0.3 gr.,Agar 13.6
gr.
Manitol Sal Agar

Peptona de carne 10gr


Extracto de carne 1 gr
Manitol 10 gr
Cloruro de sodio 75gr
Rojo de fenol 0.025 gr
Agar 12gr
Agua 1000 ml.

Staphylococcus aureus y Staphylococcus epidermidis en


Manitol Sal Agar
Agar Baird Parker

Peptona de caseína 15 gr
Extracto de carne 4.8 gr
Extracto de levadura 1 gr
Piruvato de sodio 10 gr
Glicina 12 gr S. aureus creciendo en agar
Cloruro de Litio 5 gr Baird Parker
Agar 15 gr
Agua 1000 ml
Se adiciona de 50 ml una suspensión al 50% de yema de
huevo estéril y telurito de potasio al 1%
Medios Generales

Agar cerebro corazón


Tripticase soya agar
Agar nutritivo
Agar cuenta estándar
Agar extracto de levadura

Crecen la mayoría de los microorganismos que se trabajan de


rutina en Microbiología
Efecto de la concentración de nutrientes en los medios de
cultivo

• La concentración de nutrientes puede afectar tanto a la velocidad de


crecimiento como al rendimiento del crecimiento de un
microorganismo.

• A concentraciones muy bajas de nutrientes, la velocidad de


crecimiento se reduce, mientras que a niveles moderados y altos de
nutrientes llega a ser máxima.
Efecto de la actividad de agua en los medios de cultivo

• El agua es el disolvente en donde ocurren las reacciones


químicas y enzimáticas de la célula y es indispensable para el
desarrollo de los microorganismos

• El valor mínimo de aW en el cual las bacterias pueden crecer


varía ampliamente, pero el valor óptimo para muchas especies
es mayor a 0.99. Algunas bacterias halófilas (bacterias que se
desarrollan en altas concentraciones de NaCl) crecen mejor con
aW = 0.80
ESTERILIZACIÓN
Muerte de todos los organismos viables y sus virus.

Calor seco
Calor húmedo
MÉTODOS DE Incineración
ESTERILIZACIÓN
Filtración
Radiaciones
Agentes Químicos
MÉTODOS DE ESTERILIZACIÓN

Calor seco: 180ºC, 2 hrs. Material de vidrio


limpio, polvos, material quirúrgico.
Calor Húmedo: 121ºC, 1.1Kg/cm2 ó 15 lb/in2
15 min. Medios de cultivo, soluciones no
termolábiles, ropa de quirófano, material de
polipropileno, cultivos para desechar.
Esterilización por Incineración: Con este método se oxida
calor totalmente toda la materia orgánica, con
calor directo , es decir se transforma en
carbón.Su uso se limita a eliminación de
residuos biológicos potencialmente
infecciosos.(Cultivos, restos de sangre,
heces, animales muertos, tejidos, asas de
cultivo etc.)
Esterilización por calor húmedo

AUTOCLAVE
Esterilización por calor húmedo
AUTOCLAVE

Control: Suspensión de esporas de


Geobacillus stearothermophilus
MÉTODOS DE ESTERILIZACIÓN

FILTRACIÓN:
Se utiliza para sustancias
termolábiles como sueros,
vitaminas, antibióticos,azúcares
etc.cuyas soluciones se hacen
pasar a través de membranas
generalmente de ésteres de
celulosa, cuyo tamaño de poro
oscila entre 0.22 y 0.45 micras.
MÉTODOS DE ESTERILIZACIÓN
RADIACIONES:
Son utilizadas radiaciones electromagnéticas:
Microondas: Efecto térmico
Radiaciones UV (220-300nm) :Roturas en el
DNA. Se utilizan para la
esterilización de superficies,
áreas de trabajo.
Radiaciones ionizantes: Rayos X, Rayos
gama( 160Co y 137Cs) utilizadas para la
esterilización de suministros quirúrgicos,material de
laboratorio de un solo uso, medicamentos, injertos
y en la industria de alimentos.
MÉTODOS DE ESTERILIZACIÓN

Métodos químicos de esterilización


Aplicación de óxido de etileno: Material desechable de
plástico