Determinación de Cu2+ en cerveza mediante el

espectrofotómetro de absorción atómica.

OBJETIVOS.

− Determinación directa del contenido de cobre en cerveza por EAA.

− Aprender a utilizar el Espectrofotómetro de Absorción Atómica.
− Familiarizarse con el programa Excel para la realización de la recta de calibrado
con la absorbancias de los patrones.
− Familiarizarse con las técnicas y cálculos necesarios para la determinación de las
concentraciones de las muestras problema.
− Realizar una disolución madre de cobre de concentración conocida
− Realizar una disolución hija a partir de la disolución madre
− Realizar una serie de patrones de diferentes concentraciones a partir de la
disolución hija.
− Comparar los resultados de las muestras con el resto de resultados de los
diferentes grupos de trabajo
− Calcular el error relativo de la muestra , frente a la media de los resultados
obtenidos en conjunto ( valor verdadero)

MATERIALES.

• Balanza analítica • Tapones para matraces

• Matraces aforados de 50mL • Espectrofotómetro emisión
100mL y 200mL atómica
• Pipetas aforadas • Tubos de ensayo
• Pipetas graduadas • Soporte o pie de sujeción
• Pipeta automática • Aro con nuez
• Pipeta Pasteur • Papel de filtro
• Vasos de precipitado • Ultrasonidos
• Aspiradores
REACTIVOS
• Agua destilada
• Embudo • Agua destilada.
• Zapato de laboratorio • Sulfato de cobre pentahidratado
• Espátula o cucharilla • Cerveza (Cruzcampo)
• Frasco lavador
PROCEDIMIENTO
-Lavar todo el material que se va a utilizar y enjuagar finalmente con agua destilada

Tratamiento de la cerveza

-Se desgasifica la cerveza en el aparato de ultrasonidos para eliminar los carbonatos

presentes en ésta, conforme se va desgasificando se va retirando la espuma formada con
una cucharilla hasta que la cerveza deje de producir espuma. Posteriormente se deja
enfriar ya que esta se calienta en el desgasificado.

-Se filtra la cerveza en un embudo de 4 pliegues para eliminar posibles sustancias

interferentes o sólidos presentes en la cerveza.

Disoluciones

-Se prepara una disolución madre de cobre de 1000 ppm en 500 mL pesando cantidad
correspondiente de CuSO4.5H2O al 99,75 % de riqueza en la balanza analítica con ayuda
de un pesasustancias (zapatito).

-Con ayuda del zapatito se vierte el CuSO4.5H2O en un matraz aforado de 500mL, se

diluye y enrasa con agua destilada con ayuda de una pipeta Pasteur para el aforo.

-Con la masa pesada y los pesos moleculares del compuesto y del cobre se calcula la
concentración en ión cobre de la disolución madre en ppm.

-A partir de la disolución madre se prepara una disolución hija de cobre de 100ppm en

250mL.

-Para ello se calcula que volumen de la disolución madre se necesita. Como el volumen
no será exacto, será necesario volver a calcular la concentración de esta disolución hija.

-Se toma el volumen estimado, en este caso 25mL, con una pipeta aforada de doble
aforo de 25 mL y se vierte en un matraz aforado de 250mL que se enrasa con agua
destilada, con ayuda de una pipeta Pasteur para el aforo.

Patrones

-Se preparan los patrones primarios con las siguientes concentraciones: 10,20, 30, 40
ppm de Cu+2 en 100mL.

-Primero se tiene que calcular que cantidad de la disolución hija que será necesaria para
cada uno de los patrones, se debe ajustar el volumen para que se pueda tomar
fácilmente y después recalcular las concentraciones de los patrones.

-Se usará pipetas aforadas de 10, 20 ,50 mL para tomar los diferentes volúmenes.
-Se toma el volumen deseado y se vierte en el matraz aforado de 100mL que
corresponda, y finalmente se enrasa con agua destilada con ayuda de una pipeta
Pasteur.

-A partir de los patrones primarios se preparan unos patrones secundarios de 5 mL, de

cada patrón primario se toma 5 mL y se lleva a un matraz de 50 mL, un patrón por
matraz, posteriormente se enrasa con cerveza con cuidado de no crear espuma en el
proceso.

-Una vez preparados los patrones secundarios se calcula la concentración de cobre de

cada uno en ppm por la fórmula C1xV1=C2xV2

-El patrón de 0 ppm en 50 mL solo contendrá 5 mL de agua destilada y 45 mL de cerveza,

este será el patrón “muestra”

Espectrofotómetro de Absorción Atómica

-Se utiliza una lámpara de cátodo hueco para el cobre

-Para utilizar el espectrofotómetro de absorción atómica se puede realizar desde el

mismo aparato o bien desde un ordenador, desde éste último se trabajará en este caso.

-En primer lugar se debe elegir el método (Method of adition calculated intercept).

-Después se selecciona el elemento que se desea analizar (cobre).

-Se introducen las concentraciones recalculadas (reales) de los patrones secundarios de

cobre con 4 decimales.

-Se acciona la pestaña “Manual”.

-El primer patrón en el que se introduce el capilar que absorbe la muestra será el blanco.
Que sólo será agua destilada. Se analiza “Analizar blanco” y se obtiene una absorbancia
(que será la media de las tres medidas que realiza el aparato).

-Seguidamente se realiza con el resto de patrones “Analizar estándar” (previa

homogeneización), comenzando por el patrón que contiene sólo agua y cerveza.

-Entre patrón y patrón (o muestra) se lava con agua destilada para limpiar la llama.

Recta de calibrado

-Cuando se termina el proceso, en el mismo ordenador se pueden ver las absorbancias

medias, la gráfica resultante y la concentración de la muestra. De esta forma se puede
detectar si existe algún patrón anómalo y repetirlo si fuese necesario (se repite todo el
proceso).
-Se anotan las absorbancias y se crea una recta de calibrado en Excel.

-Mediante sustitución en la recta de calibrado obtenida, para y = 0, se calcula la

concentración de cobre que hay en la cerveza. Hay que tener en cuenta las diluciones
realizadas.

CÁLCULOS
*Todos los cálculos han sido realizados con todos los decimales

Disolución madre (1000 ppm Cu+2 en 500 mL):

𝑚𝑚𝑚𝑚
ppm = ;
𝑉𝑉(𝐿𝐿)

𝑋𝑋 𝑚𝑚𝑚𝑚
50𝑝𝑝𝑝𝑝𝑝𝑝 𝐶𝐶𝐶𝐶 =
0,5𝐿𝐿

𝑋𝑋𝑋𝑋𝑋𝑋 = 500 𝑚𝑚𝑚𝑚 𝑍𝑍𝑍𝑍2+ → 0,5 𝑔𝑔 𝐶𝐶𝐶𝐶2+

249,68 𝑔𝑔 𝐶𝐶𝐶𝐶𝐶𝐶𝑂𝑂4 ∗5𝐻𝐻2 𝑂𝑂

𝑋𝑋𝑋𝑋 𝐶𝐶𝐶𝐶𝐶𝐶𝑂𝑂4 ∗ 5𝐻𝐻2 𝑂𝑂 = 0,5 𝑔𝑔 𝐶𝐶𝐶𝐶2 × = 1,9644 𝑔𝑔
63,55 𝑔𝑔 𝐶𝐶𝐶𝐶 2+

-Como la cantidad de CuSO4*5H2O pesada no es exacta (1,9647 g pesado) se recalcula la

concentración de Cu+2

Recalculo de la concentración real de la disolución madre:

CuSO4*5H2O pesado = 1,9647 g 100% riqueza

63,55 𝑔𝑔 𝐶𝐶𝐶𝐶 +2
𝑋𝑋𝑋𝑋𝐶𝐶𝐶𝐶+2 = 0,1,9647𝑔𝑔 𝐶𝐶𝐶𝐶𝐶𝐶𝑂𝑂4 ∗ 7𝐻𝐻2 𝑂𝑂× = 0,50007 𝑔𝑔 𝐶𝐶𝐶𝐶+2
249,68 𝑔𝑔 𝐶𝐶𝐶𝐶𝐶𝐶𝑂𝑂4 ∗ 5𝐻𝐻2 𝑂𝑂

La riqueza del compuesto va del 99 -100,5 %, tomandose como riqueza la media de estas dos ,
siendo el 99,75 %.

Se le aplica la riqueza a los gramos de Cu+2 obtenidos:

100
0,50007 𝑔𝑔 𝐶𝐶𝐶𝐶+2 = 0,4988 𝑔𝑔 𝐶𝐶𝐶𝐶+2
99,75

Se calcula los ppm de Cu+2 de la disolución :

0,4988 ∗ 103 𝑚𝑚𝑚𝑚

𝑋𝑋𝑝𝑝𝑝𝑝𝑝𝑝 𝐶𝐶𝐶𝐶2+ = = 997,633 𝑝𝑝𝑝𝑝𝑝𝑝 𝑍𝑍𝑍𝑍2+ ;
0,5𝐿𝐿

Disolución hija (100 ppm en 250 mL) :

-Preparación de una disolución hija de 100 ppm de ión cobre en un matraz aforado de
250 mL, a partir de una disolución madre de 997,633 ppm de ión cobre:

𝐶𝐶1 ×𝑉𝑉1 = 𝐶𝐶2 ×𝑉𝑉2

997,633 𝑝𝑝𝑝𝑝𝑝𝑝×𝑉𝑉1 = 100𝑝𝑝𝑝𝑝𝑝𝑝×250 𝑚𝑚𝑚𝑚

𝑉𝑉1 = 25,0593 𝑚𝑚𝑚𝑚

C1: Concentración de disolución madre.

V1: mL necesarios de la disolución madre, para obtener la disolución hija.

C2: Concentración de la disolución hija.

V2: Volumen de la disolución hija,

-Como no se puede tomar dicha cantidad, redondearemos a 25 mL, y se recalcula la

concentración que tendrá realmente la disolución hija:

𝐶𝐶1 ×𝑉𝑉1 = 𝐶𝐶2 ×𝑉𝑉2

997,633𝑝𝑝𝑝𝑝𝑝𝑝×25 𝑚𝑚𝑚𝑚 = 𝐶𝐶2 × 250𝑚𝑚𝑚𝑚

𝐶𝐶2 = 99,763 𝑝𝑝𝑝𝑝𝑝𝑝 Cu+2

1º patrones (10, 20, 30,40, 50 ppm en 100 mL)

Cálculo del volumen necesario para realizar los distintos patrones de ión Cu+2 a la
concentración indicada:

- Patrón 10 ppm
𝐶𝐶1 ×𝑉𝑉1 = 𝐶𝐶2 ×𝑉𝑉2
99,763 𝑝𝑝𝑝𝑝𝑝𝑝×𝑉𝑉1 = 10 𝑝𝑝𝑝𝑝𝑝𝑝×100 𝑚𝑚𝑚𝑚

𝑉𝑉1 = 10,024 𝑚𝑚𝑚𝑚

-Como no se puede tomar esta cantidad, se toma 10mL, recalculándose la concentración:

𝐶𝐶1 ×𝑉𝑉1 = 𝐶𝐶2 ×𝑉𝑉2

99,763 𝑝𝑝𝑝𝑝𝑝𝑝×10 𝑚𝑚𝑚𝑚 = 𝐶𝐶2 ×100 𝑚𝑚𝑚𝑚

𝐶𝐶2 = 9,976 𝑝𝑝𝑝𝑝𝑝𝑝

- Patrón 20 ppm
𝐶𝐶1 ×𝑉𝑉1 = 𝐶𝐶2 ×𝑉𝑉2
99,763 𝑝𝑝𝑝𝑝𝑝𝑝×𝑉𝑉1 = 20 𝑝𝑝𝑝𝑝𝑝𝑝×100 𝑚𝑚𝑚𝑚
 𝑉𝑉1 = 20,05𝑚𝑚𝑚𝑚

Como no se puede tomar esta cantidad, se toma 20 mL, recalculándose la concentración:

𝐶𝐶1 ×𝑉𝑉1 = 𝐶𝐶2 ×𝑉𝑉2

99,763 𝑝𝑝𝑝𝑝𝑝𝑝×20𝑚𝑚𝑚𝑚 = 𝐶𝐶2 ×100 𝑚𝑚𝑚𝑚

𝐶𝐶2 = 19,953 𝑝𝑝𝑝𝑝𝑝𝑝

- Patrón 30 ppm
𝐶𝐶1 ×𝑉𝑉1 = 𝐶𝐶2 ×𝑉𝑉2
99,763 𝑝𝑝𝑝𝑝𝑝𝑝×𝑉𝑉1 = 30 𝑝𝑝𝑝𝑝𝑝𝑝×100 𝑚𝑚𝑚𝑚

𝑉𝑉1 = 30,07𝑚𝑚𝑚𝑚

Como no se puede tomar esta cantidad, se toma 30 mL, recalculándose la concentración:

𝐶𝐶1 ×𝑉𝑉1 = 𝐶𝐶2 ×𝑉𝑉2

99,763 𝑝𝑝𝑝𝑝𝑝𝑝×30𝑚𝑚𝑚𝑚 = 𝐶𝐶2 ×100 𝑚𝑚𝑚𝑚

𝐶𝐶2 = 29,929 𝑝𝑝𝑝𝑝𝑝𝑝

- Patrón 40 ppm
𝐶𝐶1 ×𝑉𝑉1 = 𝐶𝐶2 ×𝑉𝑉2
99,763 𝑝𝑝𝑝𝑝𝑝𝑝×𝑉𝑉1 = 40 𝑝𝑝𝑝𝑝𝑝𝑝×100 𝑚𝑚𝑚𝑚

𝑉𝑉1 = 40,09 𝑚𝑚𝑚𝑚

-Como no se puede tomar esta cantidad, se toma 40 mL, recalculándose la concentración:

𝐶𝐶1 ×𝑉𝑉1 = 𝐶𝐶2 ×𝑉𝑉2

99,763 𝑝𝑝𝑝𝑝𝑝𝑝×40 𝑚𝑚𝑚𝑚 = 𝐶𝐶2 ×100 𝑚𝑚𝑚𝑚

𝐶𝐶2 = 39,905 𝑝𝑝𝑝𝑝𝑝𝑝

- Patrón 50 ppm
𝐶𝐶1 ×𝑉𝑉1 = 𝐶𝐶2 ×𝑉𝑉2
99,763 𝑝𝑝𝑝𝑝𝑝𝑝×𝑉𝑉1 = 50 𝑝𝑝𝑝𝑝𝑝𝑝×100 𝑚𝑚𝑚𝑚

𝑉𝑉1 = 50,12 𝑚𝑚𝑚𝑚

-Como no se puede tomar esta cantidad, se toma 50 mL, recalculándose la concentración:

 𝐶𝐶1 ×𝑉𝑉1 = 𝐶𝐶2 ×𝑉𝑉2
99,763 𝑝𝑝𝑝𝑝𝑝𝑝×50 𝑚𝑚𝑚𝑚 = 𝐶𝐶2 ×100 𝑚𝑚𝑚𝑚

𝐶𝐶2 = 49,882 𝑝𝑝𝑝𝑝𝑝𝑝

Concentración de los patrones Volumen tomado de la

(ppm) disolución hija (mL)
10 ppm 10 mL
20 ppm 20 mL
30 ppm 30 mL
40 ppm 40 mL
50 ppm 50 mL

2º patrones (5 mL de cada patrón en 50 mL)

-De cada patrón se coge 5mL y se lleva a matraces de 50 mL, enrasándose con cerverza
con cuidado para no producir espuma. Un patrón por cada matraz.

-Se calcula la concentración de Cu+2 en ppm de cada nuevo patrón resultante:

Patrón 10 ppm

𝐶𝐶1 ×𝑉𝑉1 = 𝐶𝐶2 ×𝑉𝑉2

9,766 𝑝𝑝𝑝𝑝𝑝𝑝×5 𝑚𝑚𝑚𝑚 = 𝐶𝐶2 ×50 𝑚𝑚𝑚𝑚

𝐶𝐶2 = 0,9976 𝑝𝑝𝑝𝑝𝑝𝑝

Patrón 20 ppm

𝐶𝐶1 ×𝑉𝑉1 = 𝐶𝐶2 ×𝑉𝑉2

19,953 𝑝𝑝𝑝𝑝𝑝𝑝×5 𝑚𝑚𝑚𝑚 = 𝐶𝐶2 ×50 𝑚𝑚𝑚𝑚

𝐶𝐶2 = 1,9953 𝑝𝑝𝑝𝑝𝑝𝑝

Patrón 30 ppm

𝐶𝐶1 ×𝑉𝑉1 = 𝐶𝐶2 ×𝑉𝑉2

29,929 𝑝𝑝𝑝𝑝𝑝𝑝×5 𝑚𝑚𝑚𝑚 = 𝐶𝐶2 ×50 𝑚𝑚𝑚𝑚

𝐶𝐶2 = 2,9929 𝑝𝑝𝑝𝑝𝑝𝑝

 Patrón 40 ppm

𝐶𝐶1 ×𝑉𝑉1 = 𝐶𝐶2 ×𝑉𝑉2

39,905 𝑝𝑝𝑝𝑝𝑝𝑝×5 𝑚𝑚𝑚𝑚 = 𝐶𝐶2 ×50 𝑚𝑚𝑚𝑚

𝐶𝐶2 = 3,9905 𝑝𝑝𝑝𝑝𝑝𝑝

Patrón 50 ppm

𝐶𝐶1 ×𝑉𝑉1 = 𝐶𝐶2 ×𝑉𝑉2

49,882 𝑝𝑝𝑝𝑝𝑝𝑝×5 𝑚𝑚𝑚𝑚 = 𝐶𝐶2 ×50 𝑚𝑚𝑚𝑚

𝐶𝐶2 = 4,9882 𝑝𝑝𝑝𝑝𝑝𝑝

El patrón muestra (0 ppm Cu+2) se prepara en un matraz de 50 mL , añadiendo 5 mL de

agua destilada y 45 mL de cerveza.

-Se mide el patrón muestra y los demás patrones en el espectrofotómetro de absorción

atómica a una longitud de onda de 213,86 nm, obteniéndose los siguientes resultados:

Patrones
Absorbancia
ppm Cu+2
0 ppm 0,0103
0,9976 ppm 0,1196
1,9953 ppm 0,2123
2,9929 ppm 0,3070
3,9905 ppm 0,3977
4,9882 ppm 0,5082

• Previa a la media de los patrones hay que realizar el autocero del equipo con el
blanco (agua destilada).

- Las absorbancias obtenidas son el resultado de dos medidas de absorbancia de

cada patrón, utilizando aquellas que más beneficiasen la linealidad de la recta.
Aun así se descartó el penúltimo valor para mejorar la linealidad de la recta.
Recta patrón

y = 0,0989x + 0,0145
Recta patrón Cu+2 R² = 0,9995
R= 0,9997
0,6

0,5

0,4
Absorbancia

0,3

0,2

0,1

0
-1,0000 0,0000 1,0000 2,0000 3,0000 4,0000 5,0000 6,0000
-0,1
Concentración cobre

Concentración muestra

-Como la técnica utilizada es de las adiciones estándar, una vez obtenida la recta de
calibrado se iguala y= 0, calculándose X (concentración Cu2+ ppm), siendo:

Y= 0,0989 X + 0,0145; Para Y =0  0 = 0,0989 X + 0,0145  X = -0,1466 ppm Cu+2

-La concentración aunque salga negativa, debido al tipo de técnica, ésta será igualmente
positiva, siendo la concentración de 0,1466 ppm Zn+2 en los 50 mL de patrón.

-Cálculo de la concentración de Cu+2 de la cerveza del patrón:

𝐶𝐶1 ×𝑉𝑉1 = 𝐶𝐶2 ×𝑉𝑉2

𝐶𝐶1 ×45 𝑚𝑚𝑚𝑚 = 0,1466 × 50𝑚𝑚𝑚𝑚

𝐶𝐶1 = 0,1629 𝑝𝑝𝑝𝑝𝑝𝑝 𝐶𝐶𝐶𝐶+2

Esta es la concentración de cobre que tenemos en la botella de cerveza, 0,1629 ppm de

Cu+2.

Teoría de Rechazo

Cu2+ de la cerveza:

Ppm Cu+2
Grupo 1 2 3 4
Cerveza 0,1678 ppm 0,1407 ppm 0,1887 ppm 0,1629 ppm
Se comprueba si hay algún valor rechazable (normalmente los datos de los extremos) por
la Q de Dixon.

|𝒗𝒗𝒗𝒗𝒗𝒗𝒗𝒗𝒗𝒗 𝒓𝒓𝒓𝒓𝒓𝒓𝒓𝒓𝒓𝒓𝒓𝒓𝒓𝒓𝒓𝒓𝒓𝒓𝒓𝒓 − 𝒗𝒗𝒗𝒗𝒗𝒗𝒗𝒗𝒗𝒗 𝒎𝒎á𝒔𝒔 𝒑𝒑𝒑𝒑ó𝒙𝒙𝒙𝒙𝒙𝒙𝒙𝒙|

𝑸𝑸𝑸𝑸𝑸𝑸𝑸𝑸 =
𝒗𝒗𝒗𝒗𝒗𝒗𝒗𝒗𝒗𝒗 𝒎𝒎𝒎𝒎𝒎𝒎𝒎𝒎𝒎𝒎 − 𝒗𝒗𝒗𝒗𝒗𝒗𝒗𝒗𝒗𝒗 𝒎𝒎𝒎𝒎𝒎𝒎𝒎𝒎𝒎𝒎

Qexp > Q crit se rechaza el dato discordante

Q exp < Q crit se acepta el dato discordante

- Para el dato 0,1407 ppm

|0,1407 − 0,1629|
𝑄𝑄𝑒𝑒𝑒𝑒𝑒𝑒 = 0,462 < 𝑄𝑄𝑐𝑐𝑐𝑐𝑐𝑐𝑐𝑐 95% (0,829) → 𝑆𝑆𝑆𝑆 𝑎𝑎𝑎𝑎𝑎𝑎𝑎𝑎𝑎𝑎𝑎𝑎 𝑒𝑒𝑒𝑒 𝑑𝑑𝑑𝑑𝑑𝑑𝑑𝑑
0,1887 − 0,1407

- Para el dato 0,1887 ppm

|0,1887 − 0,1678|
𝑄𝑄𝑒𝑒𝑒𝑒𝑒𝑒 = 0,435 < 𝑄𝑄𝑐𝑐𝑐𝑐𝑐𝑐𝑐𝑐 95% (0,829) → 𝑆𝑆𝑆𝑆 𝑎𝑎𝑎𝑎𝑎𝑎𝑎𝑎𝑎𝑎𝑎𝑎 𝑒𝑒𝑒𝑒 𝑑𝑑𝑑𝑑𝑑𝑑𝑑𝑑
0,1887 − 0,1407

Intervalo de confianza

∑ 𝑋𝑋𝑋𝑋 ∑(𝑿𝑿𝑿𝑿−𝑿𝑿)𝟐𝟐 𝑡𝑡 𝑥𝑥 𝑠𝑠
𝑥𝑥̅ = 𝑺𝑺 = � �±
𝒙𝒙
𝑁𝑁 𝑵𝑵−𝟏𝟏 √𝑛𝑛

Cu+2 ppm

𝑥𝑥̅ = 0,1650 ppm Cu+2

S = 0,01970 ppm Cu+2

t 95%(g.l =3) = 3,1824

Intervalo de confianza

𝟑𝟑, 𝟏𝟏𝟏𝟏𝟏𝟏𝟏𝟏 𝒙𝒙 𝟎𝟎, 𝟎𝟎𝟎𝟎𝟎𝟎𝟎𝟎𝟎𝟎

𝟎𝟎, 𝟏𝟏𝟏𝟏𝟏𝟏𝟏𝟏 ± = 𝟎𝟎, 𝟏𝟏𝟏𝟏𝟏𝟏𝟏𝟏 ± 𝟎𝟎, 𝟎𝟎𝟎𝟎𝟎𝟎𝟎𝟎 𝒑𝒑𝒑𝒑𝒑𝒑 𝑪𝑪𝒖𝒖+𝟐𝟐
√𝟒𝟒

Por lo tanto, en el 95% de las veces, la concentración de cobre en la cerveza se encontrará

entre 0,1337 – 0,1963 ppm Cu+2.
Error Relativo

-La media de la clase se considerará el valor verdadero.

|valor medido − valor verdadero|

𝐸𝐸𝐸𝐸 = · 100
valor verdadero
Cobre en la cerveza

|0,1629 − 0,1650|
𝐸𝐸𝐸𝐸 = · 100 = 𝟏𝟏, 𝟐𝟐𝟐𝟐% 𝐩𝐩𝐩𝐩𝐩𝐩 𝐝𝐝𝐝𝐝𝐝𝐝𝐝𝐝𝐝𝐝𝐝𝐝𝐝𝐝
0,1650

CONCLUSIÓN
-En esta práctica se ha determinado la cantidad de cobre (Cu) presente en una muestra
cerveza, mediante el método de adiciones estándar por espectrofotometría de absorción
atómica (EAA), empleando una llama de aire/ acetileno.

-Este método se basa en incrementar la señal, al añadir cantidades conocidas del analito
a analizar a un volumen de muestra también conocido, por lo que cada patrón llevará la
misma cantidad de muestra, y después mediante el espectrofotómetro de absorción
atómica se producirá la transformación de los átomos de dichos patrones en estado de
vapor (atomización) y medir la radiación electromagnética absorbida por dichos átomos
en el programa informático; es decir se basa en la absorción de la energía de resonancia
por los átomos de los patrones de la muestra, en este caso los átomos de Cu de las
muestra de cerveza, pasando de un estado energético inferior a otro superior.

-Para poder determinar la concentración de Cu+2 de la muestra de cerveza se tiene que

elaborar una recta de calibrado, a partir de disoluciones patrón con concentraciones
crecientes del analito que se quiere analizar, en este caso se realizó unas disoluciones
patrón primarias de Cu+2 de 10,20,30,40, 50 ppm en 100 mL a partir de una disolución
madre de Cu+2 de 100 ppm, las cuáles se utilizaron para la realizar unas disoluciones
patrón secundarias de menor concentración para medir en el EAA, diluyendo 5 mL de
cada patrón en cerveza en matraces de 50 mL, ya que la concentración de Cu en cerveza
generalmente es muy pequeña , y poder así además minimizar los errores en la
preparación de dichos patrones que si fuesen directamente. Para la medida de los
patrones se calibra el aparato con un blanco (agua destilada) y posteriormente se mide
la muestra (5 mL de agua destilada + 45 mL de cerveza), seguida del resto de los patrones
ya que el método utilizado es por adiciones estándar.

-Previo al enrase de los patrones, la cerveza debe desgasificarse en el aparato de

ultrasonidos para eliminar posibles interferencias de carbonatos, enrasando
posteriormente con cuidado para evitar la formación de espuma y cometer menor error
en la concentración a la hora del enrase
 -Una vez medidas las absorbancias de los patrones y de la muestra, se realiza la recta de
calibrado correspondiente comparándose la linealidad de dicha recta, repitiendo o
eliminando el patrón que afecte a dicha linealidad en este caso por conveniencia se
repitieron todos los patrones y se utilizaron las absorbancias más beneficiosas para la
linealidad de la recta, obteniéndose la siguiente ecuación de la recta y = 0,0989 x +
0,0145. Con un coeficiente de correlación (R) de 0,9997, que nos indica que la recta de
calibrado es buena, ya que su valor es muy próximo a 1, que es realmente lo deseable.

- Tras comprobar la recta, calculamos la concentración de cobre en el matraz de la

muestra (5mL de agua destilada + 45mL de cerveza), para ello debemos extrapolar al eje
de abscisas la recta obtenida y de este modo obtenemos la concentración de la muestra,
igualando Y=0 y obteniendo así el valor de X, que equivaldrá a la concentración de cobre
en el matraz muestra de 50mL, siendo ésta de 0,1466 ppm Cu+2, que tras realizar los
cálculos necesarios para deshacer la disolución, se obtuvo una que la concentración de
cobre en la botella de cerveza de 0,1629 ppm de Cu+2.

-Por último se compartieron los datos con todos los grupos del laboratorio para poder así
comparar los resultados determinando el error relativo propio con la media del
laboratorio. El error relativo para la concentración de Cu+2 en cerveza obtenido es del
1,27% por defecto, un error bastante pequeño, cuyas posibles causas se pueden justificar
mediante, un mal enrase de los patrones por generación de espuma, la temperatura
propia de la cerveza superior a 20ºC tras el proceso de desgasificación, una falta de
homogenizado de los matraces y la pequeña rotura del tubo del espectrofotómetro.

-Además del error relativo, con los datos de los grupos de laboratorio se realizó un
intervalo de confianza del 95%, para conocer el valor en el que la concentración de Cu de
la muestra estaría el 95% de los casos, siendo el intervalo comprendido entre 0,1337 –
0,1963 ppm de Cu.

-En vista del resultado referente al cobre se puede concluir que la cerveza es apta para el
consumo humano para dicho parámetro ,ya que la OMS aunque no haya establecido un
valor de referencia para el contenido de cobre en la cerveza , ha emitido una guía sobre
la calidad de agua potable denominada Guidelines for Drinking Water Quality , en la que
se establece para los seres humanos un valor provisorio de 2mg/L en cerveza , que a
niveles superiores 5mg/L le imparten un color y un sabor amargo y que el límite tolerable
de cobre para un adulto es de 10 mg/día. Otras fuentes establecen un límite tolerable de
1 ppm Cu+2, pero en dicho caso igualmente sería apta.

Los valores obtenidos resultan coherentes y entran dentro de lo establecido por la ley ya
que de acuerdo al artículo 40.2 de la Ley 14/1986, de 25 de abril, General de Sanidad,
contenidos mayores a 1 mg/L .

Búsquedas bibliográficas resaltan el aporte de cobre proveniente de las materias primas

utilizadas para elaborar cerveza indicando que “contenidos mayores a 1 mg/litro ejerce
una acción catalítica en la oxidación de la cerveza conduciendo a un “haze” irreversible,
además de sabor a cobre, desagradable y metálico y que niveles de cobre de 0,15 mg/l
han sido reportados como causantes de “gushing” (salida a borbollones) por esas razones
es recomendado a los cerveceros no exceder concentraciones de cobre superiores a 0,05
mg /l”.

Otro trabajo dedicado a algunos de los factores de inestabilidad de la cerveza señala que
distintas cocciones de cerveza proveniente de la misma cervecería tienen distintas
concentraciones de cobre y resalta la importancia de una remoción rápida de la levadura
del mosto fermentado, del que sugiere que podría excretarse cobre al mosto, en la etapa
final de la fermentación.

A pesar de la cantidad de cobre que también puedan aportar las materias primas (en
algunos casos, provenientes de los funguicidas utilizados como en el caso del cultivo de
los lúpulos), hay reportes que indican que en el mosto frío sólo una porción del cobre
está en la forma soluble debido a que una porción considerable es precipitada con el
“trub”. El mismo trabajo continúa mencionando que a pesar de esa precipitación, sería
de esperar que el remanente soluble, pase a etapas posteriores del proceso.