UTILIZACIÓN DE MICROORGANISMOS NATIVOS PARA

EL TRATAMIENTO DE SEDIMENTOS DE LAS AGUAS

NEGRAS PROVENIENTES DE LA INDUSTRIA MINERA
UNIVERSIDAD MAYOR DE Fecha de Revisión Nombre: Página Ingeniera Química
SAN ANDRES
Ambiental y
FACULTAD DE Agosto 2015 Univ. Abraham Reyes A. 1 Alimentos
INGENIERIA

UNIVERSIDAD MAYOR DE SAN ANDRES

FACULTAD DE INGENIERIA

UTILIZACIÓN DE MICROORGANISMOS NATIVOS PARA EL

TRATAMIENTO DE SEDIMENTOS DE LAS AGUAS NEGRAS
PROVENIENTES DE LA INDUSTRIA MINERA

AUTOR: Reyes Ayaviri Abraham

Agosto 2015

La Paz – Bolivia
 UTILIZACIÓN DE MICROORGANISMOS NATIVOS PARA
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INFORMACIÓN DEL ARTÍCULO de iones sulfato, Fe(ll) y Fe(llll

Historial del Artículo:
Propuesto Agosto 2004
Revisado Agosto 2004
Aprobado Agosto 2004
UNIVERSIDAD DE COLIMA
Biolixiviación de minerales sulfuro-ferroso :
aislamiento y caracterización
de cultivos puros y mixtos de microorganismos
RESUMEN
Se evaluó el efecto de cultivos puros y
mixtos de microorganismos sobre la
bioíixiviación de sustratos minerales
con contenidos de sulfuros,
procedentes de depósitos residuales
Gales) de una mina de fierro, en
Minatitlán, Colima. En este estudio se
encontró una biodiversidad
microorganismos quimiolitotróficos y
heterolróficos acidofilicos, provenientes
del DAM (Drenaje Ácido de Minas), jales
y suelo de la mina. En los sitios bajo
estudio, se obtuvieron valores bajos de
pH de 1.2, lo que favorece
condiciones para el desarrollo de
los microorganismos acidofilicos. De
acuerdo a la caracterización fisiológica
realizada sobre 13 cultivos
microorganismos acidofílicos,
caracterizados como Thiobacíllus sp,
Penici/lium sp y Rhodotor(//a
fueron los que predominaron y que
tuvieron mayor actividad bxidativa.
Para estos tres cultivos
microorganismos, se midió
capacidad oxidativa; asi como para su
combinación, reportada como cultivo
mixto. El tiempo para probar la
capacidad y velocidad oxidativa de los
microorganismos aislados en matraces
agitados, fiJe de cuarenta y cinco días
con mediciones de los parámetros
indicadores de la reacción cada cinco
días. Los parámetros utilizados 'como
indicadores de la oxidación fueron: pH,
potencial rédox, acidez, concentración
disueltos, así como las proteínas
totales y la concentración de
microorganismos libres. Para evaluarla
capacidad oxidativa de los distintos
cultivos aislados, se utilizaron tres
fuentes de energía diferentes, donde los
jales fueron el substrato común para
las tres, usándolo en uno de los
tratamientos como única fuente de
energía. En las dos restantes, además
se adicionó sulfato ferroso 'como una
de las fuentes y sulfato ferroso mas
extracto de levadura en la segunda.
Este último substrato como fuente de
energía, fue el que mejor resultó para los
cultivos mixtos. Bajo estas condiciones
de fuente de energía, la capacidad y
velocidad de oxidación de los minerales
de sulfurosos fue mayor para el cultivo
mixto .(2.0 rnq.h" Fe(lI)) en comparación
a los cultivos puros (1.5 mq.h").
ABSTRACT
las Pure and mixed bacterial cultures
were evaluated in vitro, in terms of
their lixlvlatlon capacity of mineral
substratum originated from an iron
de mine al Minatitlán, Colima. A diverse
los chemiolitotrophic and heterotrcphíc
microbiota was ob.served'in the acid
sp mine drainage and soil. pH values as
low as 1.2 were registereq, favoring the
development of acidophilic
de microorganisms. The physiological
su characterization of 13 microbial isolates
showed that Ihose idenlified as
Thiobacillus sp., Penicillium sp. and
Rhodo(orula sp. were predominant and
showed the greater oxidation capacity.
The oxidative capaclty of this three
isolates was measured in mono and
mixed cultures. To evaluate the
oxidative rate of.the isolates, measures
were recorded each five days during a
period of forty days. Tl1e evaluated
oxidation parameters were: pH, redox
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potential, sulfate ion concentration,

dissolved Fe (11) and Fe (111), and total
microbial protein and free cells
concentration. Three treatments "jales"
was used as an energy source in all
treatments, in the first treatment "jale"
was the only energy s.ource.The second
treattilent ferrous sulphate was added,
and in the last one ferrous sulphate
and yeast extract were added. The best
results for mixed culture were obtained
in the third treatment, where the
oxidation rate of sulfur mineral was of
2.0 mg h-1 Fe (II), compared with 1.5 mg
h-1 Fe (111) for the monoculture.
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1.1 INTRODUCCION
Desde los años 40 s, fue demostrado que
entre los procesos implicados en la
oxidación de minerales sulfurosos, existen
reacciones biológicas que involucran la
actividad de microorganismos. En
particular se ha reconocido a bacterias de
la especie Thiobacillus ferrooxidans, por
su habilidad para acelerar. la disolución
oxidativa de minerales sulfurosos
presentes en materiales residuales de
minas, lo que incrementa la generación de
acidez producto de la oxidación de algunos
minerales sulfurosos (Colmer y Hinfle,
1947; Colmer el al.,. 1950). Este hallazgo
ha sido importante no solo para la
economía industrial (con la aplicación de
los procesos de biolixiviación), sino
también para aminorar los efectos del
impacto ambiental controlando la actividad
de estos microorganismos (Matschullat el
al., 1999). Por lo que, la biotecnología se
considera en la actualidad, como una
alternativa de solución a problemas que
incluyen al impacto ambiental (Hall, 1998;
Deshayes, 1992; Tiedje, 1997).
El ambiente extremadamente ácido,
puede ser completamente natural. Sin
embargo, la influencia antropogénica
(directa y/o indirecta) también ha influido
en el incremento de la acidez en diferentes
ambientes, ocasionado en parte por los
residuos mineros depositados
arrastrados en los medios circundantes.. La
mayoría de los sitios extremadamente
ácidos en el mundo, tiene su origen
principalmente en la actividad humana,
además de las minas de carbón y metales.
Una variedad de actividades microbianas
genera acidez, esto incluye a la nitrificación
y la formación y acumulación de ácidos
orgánicos, debido al proceso de
fermentación como producto del
metabolismo aerobio. Sin embargo, el
origen del medio ambiente
extremadamente ácido y aerobio, se asocia
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comúnmente a la desigual oxidación
microbiana de especies reducidas de azufre
[azufre elemental (SO),azufre sulfuro (S2),
tiosulfato (S2032-),etc.)] y de fierro (Fe2+)
(Johnson, 1998; Johnson y Halberg,2003).
Aluminio y muchos metales pesados)
son generalmente mayores. Debido a
que las concentraciones de metales
solubles tienden a ser mucho mayor en
las áreas vecinas de pH mayores.
Los tipos de metales pesados
presentes en algunos ambientes
extremadamente ácidos, son dictados
por la geoquímica local; una
concentración alta de los metales se
pueden originar directamente en la
oxidación de los minerales sulfurados o
en el desgaste acelerado del mineral,
el cuál sucede bajo condiciones de
extrema acidez. También pueden
encontrarse en medios ambientes
extremadamente ácidos, elevadas
concentraciones de elementos metaloides
solubles, de los cuales el más importante,
desde el punto de vista eco toxicológico,
es el arsénico, que se encuentra en varios
minerales sulfurados tales como la
arsenopirita (FeAsS) y realgar (AsS)
(Tuovinen et al., 1994; Boult et al., 1997;
Bruneel el 01.,2003).
La producción del llamado drenaje ácido de
minas (DAM) por alteración meteórica de
los residuos de la industria minera, es
o considerada como uno de los más grandes
problemas de contaminación
ambiental asociada a las actividades
mineras y metalúrgicas (Ferris etal., 1989;
Crundwell, 2003). Los procesos químicos
y biológicos que se dan en este tipo de
medios, pueden ser el detonador de una
serie de reacciones de oxidación
inicialmente especificas del azufre de los
minerales sulfurosos, como la pirita
(FeS2). La formación de ácido sulfúrico, es
el producto terminal de estas reacciones
químicas y biológicas (Colmer, 1947).
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Los componentes bióticos de ambientes
extremadamente ácidos (pH<3) en la
naturaleza, por ejemplo en algunas
zonas geotermales, son
predominantemente microbiológicos,
reconociéndose hoy en día
microorganismos, acidofilicos obligados,
que no son solo generadores de
condiciones de acidez, sino también son
considerados como una alternativa para
remediar ambientes alterados (Tichy et al,
1998). Debe reconocerse que aun cuando
se han aislado arqueas, bacterias,
hongos, levaduras, protozoarios. Y algas
en sitios con residuos mineros (García
et al, 2001), las bacterias son los
microorganismos predominantes en sitios
ácidos a extremadamente ácidos
(Gonzalez­ Toril el al., 2003).
1.2 Hipótesis
La generación de DAM identificada en los
residuos de una operación minera que
actualmente explota mineralizaciones de
óxidos de fierro, es producto de la
oxidación de minerales sulfurosos
presentes en los residuos. La biolixiviaclón
de los minerales sulfurosos es el principal
proceso involucrado en la generación de
DAM, siendo este proceso más eficiente
en presencia de cultivos mixtos de
microorganismos, en comparación con
cultivos puros aislados de los mismos.
1.3 Objetivo General
Evaluar el efecto de cepas microbianas
quimiolitotróficas y heterotróficas, aisladas
desde depósitos residuales de minas de
hierro, sobre el proceso de disolución
oxidativa de los minerales sulfurosos
presentes en estos jales.
Objetivos específicos.
• Aislar y caracterizar a los
microorganismos presentes en depósitos
residuales con alto contenido de pirita, que
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favorecen el proceso de disolución de
fierro y de producción de ácido.
• Evaluar el proceso de biolixiviación
del fierro por oxidación de especies de
minerales en presencia de cultivos puros y
mixtos aislados a partir de los depósitos
residuales.
2. Antecedentes
2.1. La química del átomo de azufre
La elevada complejidad y reactividad
química que presentan los compuestos
inorgánicos de azufre reducido (CIAR), se
explica porque el átomo de azufre presenta
varios estados de oxidación (Tabla 1)
(Suzuki 1999, Steudel R., 2000). Entre los
CIAR, en los sulfuros (H2S) el átomo de
azufre se encuentra en el estado más
reducido (-2) en tanto que en el sulfato se
halla en el estado más oxidado (+6). La
pirita (FeS2) es uno de los sulfuros
metálicos más abundante en la naturaleza
y su oxidación química genera azufre
molecular. El azufre molecular puede
adoptar muchas formas estructurales,
entre los cuales se considera al anillo
octamérico (S8) como la forma más estable
(Figura 1). Se ha propuesto que el sulfito
(SO3 -2) es uno de los intermediarios más
importantes de la oxidación biológica de
los CIAR (Kelly, 1988). Otro de los
intermediarios químicos importantes es el
trióxido de azufre, el cual en su forma
hidratada como ácido sulfúrico (H2SO4) se
disocia de sus protones formando ion
hidrosulfato (HSO4 - ) y finalmente el
sulfato (SO4 -2) (Tabla 1). Este último
compuesto es el producto final de la
oxidación completa de los CIAR por
microorganismos.
2.1 Biolixiviación microbiana.
La recuperación de metales pesados a
través del uso de microorganismos se ha
desarrollado rápidamente en la última
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década y está ya establecida como una de oxidación química y bacteriana. El

técnica biotecnológica. La movilización de
cationes metálicos desde minerales
insolubles por medio de la oxidación
biológica es conocida como biolixiviación.
Desde el punto de vista económico,
constituye un método eficiente y de bajo
costo para la recuperación de metales a
partir de minerales de baja ley.
Actualmente es usado ampliamente en
faenas mineras. Por ejemplo, en Chile y
Estados Unidos aproximadamente el 18%
del cobre total se recupera mediante
biolixiviación, mientras que en Sudáfrica y
Australia se está aplicando para
incrementar la extracción de oro
(Lindström y cols., 1992). El desarrollo de
campos como la biología molecular,
química analítica y ciencia de superficies
(nanobiotecnología), han contribuido a
mejorar la comprensión de este bioproceso
(Rohwerder y cols., 2003). En el hábitat en
el que ocurre la biolixiviación coexisten
metales y/o azufre en distintos estados de
oxidación en contacto con el aire, el agua y
los microorganismos. En general, los
ambientes lixiviantes contienen grandes
cantidades de sulfuros metálicos y están
sometidos simultáneamente a reacciones
producto final de la oxidación de los
compuestos azufrados es el ácido sulfúrico,
el cual disminuye el pH del agua. Cuando se
vierten las aguas ácidas de las minas a los
ríos y lagos se generan graves problemas
de polución ambiental. Por esta razón es
importante entender el proceso de
biolixiviación con el fin de controlar el daño
ecológico originado en forma natural o por
acción de la actividad humana.
2.3 Oxidación del tiosulfato
De acuerdo a la información bioquímica,
fisiológica y los recientes datos genómicos
disponibles se han postulado al menos tres
vías para la oxidación del tiosulfato. En una
de las vías el tiosulfato se oxidaría
completamente hasta sulfato (Friedrich y
cols., 2001), en la segunda el tiosulfato
sería oxidado a través del tetrationato
como intermediario principal (De Jong y
cols., 1997) y en la tercera, el tiosulfato
sería hidrolizado a azufre y sulfito. Friedrich
y cols., (2001) sostienen que genes sox de
Paracoccus pantotrophus serían esenciales
para la oxidación del tiosulfato, siendo este
un mecanismo común para la oxidación de
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los CIAR en las bacterias quimiolitotróficas
y fototróficas. Es interesante observar que
la mayoría de los genes sox se inducen
cuando la bacteria crece en tiosulfato
(Wodara y cols., 1997; Friedrich y cols.,
2000). Este grupo de genes no existe en A.
ferrooxidans (Ramirez y col., 2004), lo que
representaría un interesante problema
científico a resolver. Varios organismos
acidófilos pueden utilizar el tiosulfato
como única fuente de energía, entre los
que destacan A. caldus, A. thiooxidans y A.
ferrooxidans. El mecanismo de la oxidación
biológica del tiosulfato en estos
microorganismos aún es motivo de
controversia. Sin embargo, se postula que
en la segunda vía el tiosulfato sería
convertido a tetrationato (Figura 2)
mediante la enzima tiosulfato
deshidrogenasa (TD) (Suzuki, 1999). Esta
enzima ha sido parcialmente purificada a
partir de tres microorganismos lixiviantes:
A. acidophilum (Meulenberg y col., 1993),
A. thiooxidans (Chan y Suzuki, 1994;
Nakamura y col., 2001) y A. ferrooxidans
(Silver y Lundgren, 1968). En A.
ferrooxidans podría estar compuesta por
tres polipéptidos y presentaría una
actividad óptima a pH 5 (Visser y col.,
1997).
2.4 Microrganismos y su aplicación en la
biogeotecnología de metales.
Microorganismos y áreas de aplicación en
hidrometalurgia Hasta ahora los siguientes
procesos microbiológicos son de
importancia en la hidrometalurgia.
a) Oxidación de sulfuros, azufre elemental
y fierro ferroso.
b) Producción de compuestos orgánicos,
peróxidos, etc. por microorganismos
organotróficos, los cuales atacan minerales
oxidando o reduciendo los elementos con
valencia variable.
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c) Acumulación de elementos químicos o
su precipitación por microorganismos.
Rol de la bacteria en la oxidación de Fe2, S
y sulfuros.
La oxidación de Fe3, S y sulfuros esta
mediada básicamente por las bacterias del
género Thibacillus, Leptospirillum,
Sulfolobus, Sulfobacillus y Acidianus.
Especialmente importante para la
hidrometalurgia son las bacterias
acidofílicas, a bajos valores de pH los
metales son solubilizados y pueden
eventualmente recuperarse como un
producto comercial.
Oxidación de Fe2+, S.
Tabla Nº 1. Microorganismos de
importancia en Hidrometalurgia (Anexo)
Ferroxidans y otras bacterias. La reacción
de oxidación se realiza probablemente de
acuerdo al esquema siguiente:
bacteria
4Fe2 + O2 + 4H4 ----------> 4Fe3+ + 2H2O
(1)
G300C =-38.0 Kj.mol-1
Esta reacción es importante para lixiviación
de metales pues permite la acumulación de
biomasa bacteriana en minerales y
soluciones; obtener una fuerte oxidación
de muchos sulfuros y producir un alto
potencial redox en el medio.
Oxidación de los sulfuros.
La bacteria es capaz de oxidar los
siguientes sulfuros.
- Pirita y Marcasita
(FeS2)
- Pirrotita
(FeS)
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- Chalcopirita - Marmatita
(CuFeS2) (ZnS)

- Bornita - Galena
(Su,FeS4) (PbS)

- Covelita - Geocronita
(Cu2S) Pb5(Sb,As2)S8,Ga2S3

- Tetrahedrita Mecanismos de oxidación bacterial de Fe2

(Cu8SB2S7) +, S y sulfuros

- Enargita La oxidación de Fe2+ y compuestos

(3Cu2,S.AS2S5) reducidos de azufre; por la bacteria es en
extremo complejo y un proceso de
- Arsenopirita múltiples etapas las cuales no han sido
(FeAsS) profundamente investigadas.
- Realgar Involucra la adhesión bacteriana a
(AsS) minerales, su destrucción, solubilización de
azúfre, transporte de S, Fe2+ o iones de
- Orpimenta
otros metales hacia la célula y su oxidación.
(As2S3)
Como ha sido demostrado por la oxidación
- Cobaltita
de la pirita, por T. ferrooxidans, el
(CoAsS)
potencial electrodo mineral (EP) es
- Petlandita considerablemente bajo mientras que el
(Fe,Ni)9S8 potencial redox del medio (Eh) es alto,
produciendo un medio oxidante.
- Violarita
(Ni2FeS4) En ausencia de bacterias, mientras EP de la
pirita y Eh del medio tienen similares
- Bravoita valores, la oxidación no se realiza.
(Ni,Fe)S2
Este modelo ha sido también propuesto
- Milerita para otros minerales. En una mezcla de
(NiS) diferentes sulfuros formando parejas
galvánicas la bacteria preferencialmente
- Polidimita oxida a aquellos con un bajo EP, por
(Ni3S4) ejemplo: sulfuroanodo.
- Antimonita Obviamente, la dirección de oxidación
(Sb2S3) microbiológica de los sulfuros coincide con
la oxidación electroquímica. Por lo tanto
- Molibdenita
puede ser considerado como un proceso
(MoS2)
electroquímico biológicamente
- Esfalerita intensificado o corrosivo. También un
(ZnS) ataque bacteriano al sulfuro aumenta la
deformación de la estructura cristalina
facilitando el proceso de oxidación.
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Características de las bacterias oxidantes
de Fe2+, S y sulfuros.
Género Thiobacillus
Pequeños bacilos gran negativos. Móviles
por medio de un flagelo polar. No forman
esporas, estrictamente aerobios (excepto
Thiobacillus denitrificans, que es aerobio
facultativo).
T. ferrooxidans.- Es fácilmente aislado de
los drenajes de las minas.
Crecen sobre medio líquido con Fe2+ y
Sulfuros, como en medio solido de sílica gel
o poliacrilamida.
Características de Thiobacillus acidofílicos
quimiolitoautotróficos obligados (Anexo)
Características de los Thiobacillus
acidofílicos quimiolitoautotróficos
facultativos (Anexo)
Características de las especies del género
Sulfobacillus (Anexo)
Características de las especies del género
Leptospirillum ferrooxidans (Anexo)
Características de los termoacidofílicos que
participan en los ciclos del azufre y fierro
(Anexo).
Otros heterotróficos contaminantes de T.
ferrooxidans
Asociación sintrófica de bacterias fierro y
azufre oxidantes
3. Composición de medios nutrientes
Aislamientos sucesivos de nuevos y ya
conocidos microorganismos activos en el
proceso biogeoquímico y una alta
velocidad de lixiviación de metales
depende de la calidad del medio nutritivo.
A continuación veremos la composición de
los medios nutritivos probados para el
aislamiento y cultivo de los
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microorganismos más importantes en la
biogeotecnología de metales.
Metodos de enumeracion de
microorganismos
Método de dilución en serie.
Este método es el más antiguo de todos.
Aún es muy usado para numerar células
viables de microorganismos autotróficos y
heterotróficos.
Con la finalidad de obtener la dilución final
(1010) se usa el medio nutritivo adecuado
en vez del agua. En la práctica para
enumerar bacterias en 1 ml de solución ó 1
gr de mineral se usan tablas basadas en la
variación estadística de métodos.
Enumeración de colonias
Las colonias son obtenidas por inoculación
de medio sólido o por fijación sobre un
filtro de membrana después de filtración.
El número óptimo de colonias estimadas
por placa está entre 30 - 300.
Enumeración usando un microscopio
La enumeración directa de células es
realizada en porta-objetos al microscopio o
usando diferentes tipos de cámaras de
conteo, por ejemplo: Thoma, Petrov,
Hauser, etc. A continuación detallaremos
varios métodos modernos para
enumeración de T. ferrooxidans. Estos
métodos son viables para numerar a estas
bacterias sino también para numerar
diferentes especies de thiobacillus. Esto es
en extremo importante ya que el mismo
medio puede ser usado para cultivar
bacteria de diferente taxonomía haciendo
difícil su identificación.
Método indirecto de tinción de anticuerpos
fluorescentes.
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Este método viable para la identificación
de T. ferrooxidans es un medio mixto de
varias horas. Para lo cual se necesita:
a) Filtros del tipo policarbonato;
b) Suero de conejo FITC conjugado
comercialmente viable.
c) Suero de conejo anti-T.ferrooxidans sin
purificar.
Determinacion de la actividad bacterial
Determinación la fijación de co2
La actividad del crecimiento bacteriano de
los quimiolitoautotróficos en botaderos,
tanques de lixiviación puede ser
determinado por la intensidad de fijación
de CO2. Describiremos algunos ejemplos
de la aplicación de este método. Agua
ácida de mina conteniendo bacterias y
Fe2+ (volumen de muestra 10 ml) es
colectada y colocada en frascos de 12 - 15
ml y selladas con tapas de goma.
Otros métodos de determinación de
actividad bacterial
En la lixiviación de botaderos y módulos es
posible determinar la velocidad de
oxidación bacterial del Fe2+ solo en la
solución. La actividad de las bacterias
oxidantes de Fe2+ en soluciones se ha
demostrado, no ser siempre favorable, y el
número de células es frecuentemente bajo
variando de 2.5 x 104 a 2.5 x 106
células/ml.
La muestra de agua también difieren en
actividad bacterial.
Por lo tanto, la eficiencia de oxidación de
Fe2+ debe ser determinada en diferentes
lugares de la operación de lixiviación.
Muestras de agua de mina (30 ml) son
colocadas en un frasco Erlenmeyer de 100
ml, cubiertos con papel de aluminio y las
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muestras son colocadas en su temperatura
natural.
Fundamentos Electroquimicos De La
Biolixiviacion
La bacteria del tipo "Thiobacillus" además
de propiciar la formación de sulfato
ferroso, azufre elemental y compuestos
solubles de azufre inorgánico, también
puede oxidar muchos minerales sulfurados
utilizándolos como donadores de
electrones. Simultáneo al proceso de
oxidación, la bacteria utiliza el CO2 como
su fuente de carbono.
Electroquimica De Minerales Sulfurados
Los minerales nobles son los menos
suceptibles a oxidación y por ende los más
activos son fácilmente oxidables. Cuando
dos sulfuros entran en contacto con un
medio lixiviante se establece una celda
galvánica dentro de la cual el sulfuro más
activo se corroe mientras que el más noble
se protege catódicamente.
La energía para el proceso de disolución
galvánica es la diferencia de potencial
entre el par galvánico, mientras que la
velocidad de oxidación anódica es la
corriente galvánica que fluye a través de
este circuito.
Influencia Del Potencial Y Ph
El potencial de oxidación, Eh, de un sistema
de lixiviación es tan importante como el
potencial de reposo. Debe existir una
gradiente entre el potencial (Eh) del medio
y el potencial de los sulfuros para que
produzca una disolución.
Los dos parámetros más importantes que
controlan las reacciones de biolixiviación
son el potencial y el pH puesto que
influyen directamente en la actividad
metabólica de la bacteria.
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Mecanismos De Reaccion 3. Resultados.

Electrobioquimicos
3.1. Adherencia Bacteriana sobre Pirita.
Las probables reacciones involucradas en la
biolixiviación de sulfuros complejos son:

1. Pb - Zn - Cu:

ZnS = Zn2+ + 2e- + S (Oxidación anódica

de la esfalerita)

PbS = Pb2+ + 2e- + S (Oxidación anódica

de la galena)

(PbSO4 precipita en un medio

biolixiviante)

CuFeS2 = Cu2+ + Fe2+ + 4e- + S

(Oxidación anódica de la chalcopirita)

O2 + 4H+ + 4e- = 2H2O (Reducción

catódica del oxígeno en la superficie de los
minerales más nobles, tales como pirita y
chalcopirita)

La oxidación de la esfalerita será una

reacción prominentemente anódica,
mientras que la reacción anódica de la
chalcopirita sucede solamente si ésta entra
en contacto con la pirita.
2. Cu - Ni - Fe;
FeS = Fe2+ + S + 2e- (Oxidación anódica
de la pirrotita)
(FexNi1-x)9S8 = 9xFe2+ + 9(1-x)Ni2+ + 8S
+ 18e-
(Oxidación anódica de la pentladita)
La reacción total generalizada puede
expresarse de la siguiente forma:
2MS + O2 + 4H+ = 2M2+ + 2S + 2H2O
El azufre elemental producto de la
oxidación anódica se acumula en la
superficie lixiviada y puede actuar como
una barrera difusional disminuyendo la
velocidad de lixiviación.
Al contactar las cepas nativas con la
muestra de pirita, se estima que al cabo de
90 minutos el 98,5% de las células se han
adherido al mineral. La adherencia de At.
ferrooxidans sobre la muestra de pirita es
considerablemente más baja al compararla
con las cepas nativas proveniente de
minera Escondida. En este caso sólo se
logra un 33,3% de adherencia de las
bacterias sobre el mineral, la cual ocurre
durante el instante en que se contactan
mineral e inóculo, comparación de
adherencia bacteriana en figura 9. En
tiempos posteriores (mayor a 15 minutos)
la concentración bacteriana en solución no
varía. El experimento se monitoreó luego
de 24 horas, y la concentración de las
bacterias en solución se mantuvo en
1,6x108 bact/ml. Concluyendo así que la
 UTILIZACIÓN DE MICROORGANISMOS NATIVOS PARA
EL TRATAMIENTO DE SEDIMENTOS DE LAS AGUAS
NEGRAS PROVENIENTES DE LA INDUSTRIA MINERA
UNIVERSIDAD MAYOR DE Fecha de Revisión
SAN ANDRES
FACULTAD DE Agosto 2015
INGENIERIA
cepa de At. ferrooxidans utilizada en el
experimento tiene una baja afinidad a
crecer sobre la superficie de la pirita.
3.2 Conclusiones.
La biolixiviación de pirita mediada por la
acción metabólica de At. ferrooxidans está
controlada por la difusión del agente
oxidante a través de los subproductos de la
reacción y requiere un tiempo para su
disolución total de 833 días ante una
concentración inicial de ión férrico en
solución de 2,4g/l. Al aumentar al doble la
concentración del ión oxidante, 5g/l el
tiempo disminuye en 6 veces llegando a
141 días. Por ende, se concluye que en la
biolixiviación por la cepa pura al
incrementar la concentración del ión
férrico en la solución, se favorece para la
conversión final de la pirita, pasando de un
27% de recuperación a un 45%. La
utilización de un cultivo mixto de cepas
nativas provenientes de PLS de Minera
Escondida presentaron los mejores
rendimientos tanto en conversión como
del tiempo de biolixiviación de la pirita,
55% y 122 días, respectivamente. Lo
anterior se atribuye a la alta actividad
azufre oxidante presentada por las cepas
nativas que permite disminuir las barreras
difusionales existentes por la generación
de productos insolubles en la reacción de
disolución de la pirita. Esto se
complementa con la baja tasa de
Nombre: Página Ingeniera Química
Ambiental y
Univ. Abraham Reyes A. 11 Alimentos
adherencia presentada por el cultivo puro
de At. ferrooxidans (33,3%) en
comparación con la cepas nativas (~100%).
En relación a los experimentos de
biolixiviación sin adherencia, se observó
que el hecho de que los microorganismos
de Escondida no pudieran adherirse a la
superficie de la pirita implicó una menor
recuperación de hierro y una menor
velocidad de lixiviación al comparar con el
caso de la biolixiviación con posibilidad de
contacto. Por ende, se establece que la
adherencia bacteriana sobre el mineral
puro de pirita influye positivamente en la
lixiviación de éste.
3.3 Bibliografía.
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