Académique Documents
Professionnel Documents
Culture Documents
Bacteriile
___________________________________________________________________
II.2. BACTERIILE
31
Microbiologia alimentelor
___________________________________________________________________
32
Microorganisme prezente în alimente. Bacteriile
___________________________________________________________________
33
Microbiologia alimentelor
___________________________________________________________________
34
Microorganisme prezente în alimente. Bacteriile
___________________________________________________________________
35
Microbiologia alimentelor
___________________________________________________________________
36
Microorganisme prezente în alimente. Bacteriile
___________________________________________________________________
37
Microbiologia alimentelor
___________________________________________________________________
38
Microorganisme prezente în alimente. Bacteriile
___________________________________________________________________
39
Microbiologia alimentelor
___________________________________________________________________
40
Microorganisme prezente în alimente. Bacteriile
___________________________________________________________________
41
Microbiologia alimentelor
___________________________________________________________________
Incluziunile
Sunt formaţiuni structurale inerte care apar în citoplasma bacteriilor
la sfârşitul perioadei lor de creştere activă. Prezenţa şi abundenţa lor variază
în funcţie de condiţiile de mediu.
În funcţie de compoziţia chimică pot fi clasificate în: polimeri
organici (incluziunile de glicogen, amidon); polimeri anorganici
(incluziunile de polimetafosfat) şi incluziunile anorganice simple (granulele
de carbonat de calciu).
După structura lor sunt de două tipuri: incluziuni înconjurate de
membrane şi incluziuni neînconjurate de membrane.
Capacitatea celulei bacteriene de a depune substanţele de rezervă sub
formă de polimeri reprezintă şi o reacţie de apărare a echilibrului osmotic
celular. Prin acest proces de polimerizare, compuşii liberi devin osmotic
inerţi, în timp ce acumularea lor ca atare ar mări presiunea osmotică
intracelulară dincolo de limita de rezistenţă a peretelui celular.
Vacuolele
Vacuolele sunt formaţiuni sferice cu diametrul de 0,3-0,5µm, mai
puţin refringente decât citoplasma, care apar în celula bacteriană în perioada
ei de creştere activă. Numărul lor este variabil în raport cu mediul de cultură
(6-20/celulă). Ele conţin diferite substanţe dizolvate în apă şi sunt
înconjurate la periferie de un înveliş lipoproteic unistratificat, gros de
aproximativ 3 nm, numit tonoplast.
După unii cercetători, vacuolele ar constitui o entitate permanentă
absolut necesară celulei bcteriene, după alţii ar fi o structură temporară care
apare sub influenţa condiţiilor de mediu.
Sunt mai frecvente la celulele tinere şi pot conţine lichid, având în
acest fel rol în reglarea presiunii osmotice faţă de mediul extern, sau pot fi
pline cu gaz, constituit de regulă din azot. Vacuolele pline cu gaz sunt
structuri prezente numai la procariote, fiind întâlnite la bacteriile imobile
acvatice.
Bacteriile care conţin vacuole pline cu gaze au o densitate globală
mai mică decât apa şi de aceea plutesc la suprafaţa acesteia. De asemenea,
vacuolele pline cu gaz reglează raportul suprafaţă/volum al celulelor
bacteriene.
42
Microorganisme prezente în alimente. Bacteriile
___________________________________________________________________
Sporul
Reprezintă o formă primitivă de diferenţiere celulară, care constă în
formarea în celula vegetativă a unui nou tip de celulă, având o ultrastructură,
compoziţie chimică şi enzimatică diferite şi o rezistenţă deosebită la
condiţiile nefavorabile de mediu. Toate bacteriile sporogene, cu excepţia
genului Desulfotomaculum (Gram-variabili) sunt Gram-pozitive, fapt care ar
putea reflecta intervenţia anumitor constrângeri mecanice specifice, impuse
de natura peretelui celular, în procesul de sporogeneză.
Sporogeneza este excepţională la coci şi reprezintă un caracter de
specie, cu valoare taxonomică importantă la bacteriile cilindrice din familia
Bacillaceae; sporul apare ca o structură constantă la bacteriile anaerobe
aparţinând genului Clostridium şi în mod facultativ la bacteriile aerobe din
această familie grupate în genul Bacillus.
Procesul de sporogeneză se desfăşoară în mai multe etape şi anume
(Fig.7):
- pregătirea celulei pentru procesul de sporogeneză;
- formarea presporului:
- constituirea unui sept transversal în urma invaginării
membranei citoplasmatice, care separă cei doi
cromozomi;
- evoluţia pe două căi diferite a celor două segmente
celulare, una din ele devenind prespor, iar a doua
spornagiu (reprezentat de restul celulei vegetative);
- maturarea sporului
43
Microbiologia alimentelor
___________________________________________________________________
Diversitatea sporilor
Gama sporilor bacterieni este largă şi se întinde de la endosporii
rezistenţi până la zoosporii fragili şi extrem de mobili, deosebindu-se după
modul de formare, structură şi rezistenţă la factorii de mediu.
Principalele tipuri de spori sunt următoarele:
- sporul endogen (endosporul) reprezintă forma cea mai
caracteristică pentru bacterii; apare în interiorul unei celule vegetative,
numită sporangiu, ca o formaţiune foarte refringentă, dotată cu mare
rezistenţă la condiţii nefavorabile;
- sporii de origine hifală sunt întâlniţi la actinomicete şi poartă
denumiri împrumutate din micologie, datorită faptului că grupul respectiv a
fost considerat mult timp ca fiind deosebit de bacterii;
- artrosporii (numiţi adesea incorect conidii), similari celor
de la fungi, se formează prin segmentarea hifelor de către o serie de septuri
transversale care cresc inelar sau se invaginează, separând hifele existente.
Artrosporii maturi sunt menţinuţi în lanţuri de o teacă
44
Microorganisme prezente în alimente. Bacteriile
___________________________________________________________________
45
Microbiologia alimentelor
___________________________________________________________________
46
Microorganisme prezente în alimente. Bacteriile
___________________________________________________________________
47
Microbiologia alimentelor
___________________________________________________________________
1 2 3 4
48
Microorganisme prezente în alimente. Bacteriile
___________________________________________________________________
49
Microbiologia alimentelor
___________________________________________________________________
50
Microorganisme prezente în alimente. Bacteriile
___________________________________________________________________
51
Microbiologia alimentelor
___________________________________________________________________
52
Microorganisme prezente în alimente. Bacteriile
___________________________________________________________________
Proteinele
Componenţi esenţiali pentru viaţa celulei bacteriene, proteinele
reprezintă în medie 60% din greutatea uscată a bacteriilor. În afară de
proteinele simple în celula bacteriană se mai găsesc proteine combinate cu
molecule neproteice, alcătuind heteroproteide (complexe glicoproteice sau
lipoproteice). În total sunt aproximativ 106 molecule de 2000-3000 tipuri
diferite. Pentru fiecare tip, numărul moleculelor variază între 1 şi 105.
Din punct de vedere al rolului lor biologic, proteinele pot fi împărţite
în:
- proteine constitutive (structurale), care fac parte din structura
diferitelor componente celulare;
- proteine enzimatice, care sunt biocatalizatorii întregii activităţi
metabolice a celulei bacteriene.
Echipamentul enzimatic
Enzimele sunt biocatalizatori organici elaboraţi de celula vie şi sunt
caracterizate prin semnificaţia lor în raport cu substratul - moleculele asupra
cărora acţionează - şi prin comportarea lor ca acceleratori ai unor reacţii
implicând formarea sau desfacerea unei anumite legături covalente din
structura substratului lor. Odată reacţia desăvârşită, enzima se eliberează
pentru a se adsorbi pe noua moleculă de substrat, fiind capabilă să catalizeze
astfel până la 106 reacţii specifice pe minut.
Echipamentul enzimatic este specific pentru o specie bacteriană sub
raport calitativ şi cantitativ şi reprezintă de aceea un important criteriu
taxonomic.
Sub aspect chimic, enzimele bacteriene sunt fie proteine simple, fie
proteine conjugate. În acest din urmă caz, enzima activă (holoenzima) este
formată din două componente, inactive atunci când sunt separate şi anume:
apoenzima - proteina care determină specificitatea reacţiei enzimatice şi
coenzima - un compus termostabil organic sau anorganic.
După locul de acţiune în raport cu celula în care s-au format,
enzimele bacteriene se împart în:
- exoenzime (enzime extracelulare), sintetizate în celulă şi apoi
eliminate în mediul exterior; de aceea sunt considerate secreţii bacteriene.
În această categorie se încadrează hidrolazele care descompun structuri
moleculare complexe în molecule mai mici accesibile celulei bacteriene;
53
Microbiologia alimentelor
___________________________________________________________________
54
Microorganisme prezente în alimente. Bacteriile
___________________________________________________________________
55
Microbiologia alimentelor
___________________________________________________________________
56
Microorganisme prezente în alimente. Bacteriile
___________________________________________________________________
57
Microbiologia alimentelor
___________________________________________________________________
58
Microorganisme prezente în alimente. Bacteriile
___________________________________________________________________
59
Microbiologia alimentelor
___________________________________________________________________
60
Microorganisme prezente în alimente. Bacteriile
___________________________________________________________________
61
Microbiologia alimentelor
___________________________________________________________________
Multiplicarea
Formele de multiplicare
Bacteriile se multiplică în marea majoritate a cazurilor prin diviziune
directă sau sciziparitate şi numai la un număr limitat de grupuri taxonomice
pot fi întâlnite şi alte forme, cum sunt multiplicarea prin ramificare şi
înmugurire (la unele bacterii fotosintetizante), prin corpi elementari (la
micoplasme). La actinomicete multiplicarea se poate realiza şi prin forme
proprii ciupercilor (prin spori).
Multiplicarea bacteriilor, este în general asexuată. Ea poate fi uneori
precedată de forme rudimentare de sexualitate care constau într-un schimb
de material genetic între două celule bacteriene, prin fenomenul de
conjugare. Procesele de conjugare pot avea loc între celulele aceleaşi specii
bacteriene, dar şi între celulele aparţinând unor specii apropiate filogenetic
(ex. Escherichia coli şi Salmonella).
a) Multiplicarea prin diviziune directă sau simplă (sciziparitate).
Constă în divizarea unei celule bacteriene în două celule fiice. La bacteriile
de formă alungită, ea are loc transversal, pe un plan perpendicular pe
marele ax al celulei, în centrul acesteia şi rareori
excentric. La coci, diviziunea poate avea loc după unul, două sau trei
planuri. În urma diviziunii celulele fiice se pot desprinde una de alta, dar la
numeroase specii ele rămân lipite. În acest din urmă caz, în funcţie de
direcţiile şi planurile diviziunilor celulare, rezultă grupările caracteristice
unor specii bacteriene.
Diviziunea celulei are loc în momentul când bacteria a ajuns la
maturitate şi începe cu modificări ale materialului nuclear, care se alungeşte
şi apoi se segmentează. În funcţie de felul în care se produce separarea
celulei bacteriene în cele două celule fiice, sunt descrise două modele de
diviziune:
- diviziunea prin strangulare care se caracterizează prin invaginarea
concomitentă atât a membranei citoplasmatice, cât şi a peretelui celular
(Fig.12).
62
Microorganisme prezente în alimente. Bacteriile
___________________________________________________________________
63
Microbiologia alimentelor
___________________________________________________________________
64
Microorganisme prezente în alimente. Bacteriile
___________________________________________________________________
65
Microbiologia alimentelor
___________________________________________________________________
66
Microorganisme prezente în alimente. Bacteriile
___________________________________________________________________
67
Microbiologia alimentelor
___________________________________________________________________
mediu. Dezvoltarea pe medii solide, sub formă de colonii izolate, stă la baza
tehnicilor uzuale de izolare a bacteriilor în culturi pure.
Gazonul sau pânza este forma de dezvoltare în cazul însămânţărilor
abundente când coloniile confluează, formând un gazon bacterian. La
bacteriile care au un aparat ciliar foarte activ, dezvoltarea sub formă de
gazon este rezultatul invaziei mediului (a fenomenului de roire).
2.8. Ecologia bacteriilor
Bacteriile sunt ubicvitare, nu există mediu natural la nivelul căruia să
fie posibilă viaţa, din care bacteriile să fie absente. Aspectele calitative şi
cantitative ale microflorei sunt determinate în primul rând de biotop, de
zona geografică, de climă şi de alţi factori care acţionează la nivelul
biotopului.
Solul este sediul unei mari cantităţi de bacterii, concentraţia lor
maximă este în straturile superficiale, la nivelul aparatului radicular al
plantelor. În straturile profunde numărul germenilor scade proporţional cu
adâncimea. La suprafaţă, datorită efectului antimicrobian al luminii solare
directe, încărcătura bacteriană este de asemenea mai redusă. Microflora
solului are un rol important în circuitele naturale, mineralizarea compuşilor
organici, după cum şi capatarea azotului atmosferic fiind în cea mai mare
parte rezultatul activităţii biologice a bacteriilor. Frecvenţa cea mai mare în
sol o au actinomicetele şi bacteriile sporogene (genurile Bacillus şi
Clostridium).
Solul poate fi şi biotopul unor specii bacteriene patogene pentru
animale. Infecţiile pentru care sursa primară de contaminare este solul sunt
desemnate cu termenul de infecţii telurice. Ele sunt în numeroase cazuri în
relaţie directă cu păşunatul. Distribuţia bacteriilor patogene în sol variază în
funcţie de specie. Astfel Bacillus cereus poate fi izolat aproape din orice
probă de sol de oriunde, Clostridium tetani, Clostridium botulinum sunt
mult mai rare, fără ca prezenţa lor să fie corelată cu o anumită zonă
geografică. Bacillus anthracis, Clostridium chauvoei au o distribuţie zonală
demonstrată de apariţia cazurilor sau a focarelor numai în anumite regiuni.
În afara speciilor bacteriene pentru care solul este nişa ecologică obişnuită,
se mai pot găsi numeroase bacterii patogene care ajunse accidental în sol pot
supravieţui un timp foarte îndelungat, în special în solurile bogate în
substanţe organice şi în cele cu umiditate mare. În acest mod numeroase
68
Microorganisme prezente în alimente. Bacteriile
___________________________________________________________________
69
Microbiologia alimentelor
___________________________________________________________________
70
Microorganisme prezente în alimente. Bacteriile
___________________________________________________________________
71
Microbiologia alimentelor
___________________________________________________________________
72
Microorganisme prezente în alimente. Bacteriile
___________________________________________________________________
73
Microbiologia alimentelor
___________________________________________________________________
74
Microorganisme prezente în alimente. Bacteriile
___________________________________________________________________
75
Microbiologia alimentelor
___________________________________________________________________
76
Microorganisme prezente în alimente. Bacteriile
___________________________________________________________________
77
Microbiologia alimentelor
___________________________________________________________________
1 2 3 4 5 6 7 8
Rhizobiaceae
1. Chromobacterium Bacil - Aerob/facul- Psihrofil Sol, apă Cereale, Pigment,
tativ anaerob carne, lactate, proteoliză
legume
Achromobacteriaceae
1. Alcaligens Bacil - Aerob/facul- Psihrofil Apă, sol, intestin Lactate Vâscozitate,
tativ anaerob mâzgă, roteo-
lipoliză
2. Achromobacter Bacil - Aerob Psihrofil, Apă, sol, Carne, peşte, Proteo-
polimorf Halofil alimente lactate, ouă, lipoliză
saramuri,
sucuri
3. Flavobacterium Bacil - Aerob Psihrofil, Apă, sol, peşte Peşte, carne, Proteo-
polimorf halofil marin ouă, lactate, pectinoliză,
murături, mâzgă,
bere, legume pigment
congelate
Entebacteriaceae
1. Shigella Bacil - Aerob/ Euriterm Intestin, ape Lactate, Fermentaţie
facultativ poluate carne, ouă
anaerob
2. Salmonella Bacil - Aerob/facul- Euriterm, Intestin, apă, sol Lactate,
tativ anaerob psihrotrof carne, ouă
Bacil - Aerob/facul- Euriterm, Intestin, apă, Lactate, Fermentarea
3. Escherichia tativ anaerob psihrofil sol, alimente carne, ouă berii
Bacil - Aerob/ Euriterm, Intestin Lactate,
4. Citrobacter facultativ psihrofil carne, ouă
anaerob
Apă, sol, rezidii, Lactate,
Bacil - Aerob/ Euriterm,
intestin, carne, ouă
5. Enterobacter facultativ psihrofil
alimente
anaerob
Microbiologia alimentelor
___________________________________________________________________
1 2 3 4 5 6 7 8
Brucellaceae
1. Pasteurella Bacil - Aerob/facul- Euriterm Apă, sol, Carne, organe
tativ anaerob intestin, leziuni,
rozătoare
2. Brucella Bacil - Aerob Mamifere, Lactate, carne
păsări, alimente,
gunoi, apă
Bacterioidaceae
1. Bacteroides Bacil - Anaerob Halofil Intestin Peşte, carne Proteoliză
bipolar
Micrococacceae
1. Micrococcus Coc + Aerob Psihrofil, Sol, apă, lactate, Lactate, Pigment
halofil peşte marin carne, peşte, proteoliză
saramuri
2.Staphylococcus Coc + Facultativ Euriterm, Leziuni, Lactate,
aerob/anaerob halofil purtători carne, peşte
Microorganisme prezente în alimente. Bacteriile
___________________________________________________________________
1 2 3 4 5 6 7 8
3.Sarcina Coc +/- Aerob/anae- Halofil, Sol, apă, intestin Pigment
rob psihrofil
Brevibacteriaceae
1.Brevibacterium Bacil + Aerob/facul- Psihrofil, Lactate, peşte, Brânză, peşte, Pigment,
tativ anaerob halofil legume, sol, lapte proteo-
intestin, vite lipoliză
Lactobacillaceae
1.Streptococcus Coc + Aerob/facul- Psihrofil, Leziuni, Lactate, Înverzire,
tativ anaerob halofil purtători, carne, creme acrire
intestin
2. Aerococcus Coc + Aerob Faringe, aer, Carne, lactate
piele
3. Pediococcus Coc + Aerob/micro- Psihrofil, Bere, murături, Bere, Tulburare
aerofil halofil suc fructe murături, bere, suc,
salam, suc maturare
salam
4. Leuconostoc Coc + Facultativ Psihrofil, Zaharoase, Zaharoase, Mâzgă, gaz,
anaerob/micro osmofil, lactate, suc, lactate, suc, acrire
aerofil halofil vegetale vegetale,
saramuri,
vinuri
5. Lactobacillus Bacil + Facultativ Psihrofil, Vegetale Lactate, Acrire,
anaerob/micro Termofil fermentate, murături, înverzire
Aerofil lactate, intestin mezeluri (carne)
maturate
Propionibacteriaceae
1.Propionibacterium Bacil + Facultativ Brânzeturi Brânzeturi Pigment
bipolar anaerob/aerob maturate
Microbiologia alimentelor
___________________________________________________________________
1 2 3 4 5 6 7 8
Corynebacteriaceae
1. Corynebacterium Bacil +/- Aerob/facul- Psihrofil, Mucoase, Lactate, Pigment,
bipolar tativ anaerob halofil intestin, sol, carne, lipoliză, gaz
leziuni, plante legume,
saramuri,
2.Microbacterium Bacil + Aerob Termofil Lactate conserve Pigment
3. Cellulomonas Bacil +/- Aerob/facul- Sol, praf, plante Lactate Înmuiere,
bipolar tativ anaerob descompuse Legume, celuloliză
fructe
Bacillaceae
1. Bacillus Bacili +/- Aerob/ Termofil Sol, apă, intestin Carne, lactate, Pigment,
anaerob conserve proteoliză
2. Clostridium Bacili +/- Microaerofil/ Termofil Sol, apă, intestin Carne, Proteo-lipo-
anaerob conserve liză, gaz
Mycobacteriaceae
1. Mycobacterium Bacili + Aerob/ facul- Psihrofil, Leziuni Carne, lactate
tativ anaerob termofil,
halofil
Microorganisme prezente în alimente. Bacteriile
___________________________________________________________________
83
Microbiologia alimentelor
___________________________________________________________________
84
Microorganisme prezente în alimente. Bacteriile
___________________________________________________________________
85
Microbiologia alimentelor
___________________________________________________________________
86
Microorganisme prezente în alimente. Bacteriile
___________________________________________________________________
87
Microbiologia alimentelor
___________________________________________________________________
88
Microorganisme prezente în alimente. Bacteriile
___________________________________________________________________
89
Microbiologia alimentelor
___________________________________________________________________
P. acidilactici
P. inopinatus
P. halophilus
P.dextrinicus
P. damnosus
P. pentosaceus
P. parvulus
urinaeequi
P.
Creşterea la:
35ºC - + + + + + + +
40ºC - - - + + + - +
50ºC - - - - - + - -
Creşterea la:
pH 4,2 + + - - + + - -
pH 7,5 - + d + + + + +
pH 8,5 - - - - d d + +
Creşterea în:
4% NaCl - + + + + + d +
6,5 % NaCl - + d - + + + +
18% NaCl - - - - - - + -
Producerea - - ND - + + - -
de catalază
Hidrolizarea - - - - + + - -
argininei
Formarea de
acizi din:
- maltoză d + + + + - + +
- melibioză d - - - - - + -
- zaharoză d - d d - - + +
- trehaloză + d + - + d + +
- dextrină - - d + - - - +
Acidul lactic DL DL DL L – (+) DL DL D- (-) L - (+)
format
+ = reacţie pozitivă; - = reacţie negativă; d = diferit de la o tulpină la alta;
ND = nedeterminată
91
Microbiologia alimentelor
___________________________________________________________________
92
Microorganisme prezente în alimente. Bacteriile
___________________________________________________________________
93
Microbiologia alimentelor
___________________________________________________________________
94
Microorganisme prezente în alimente. Bacteriile
___________________________________________________________________
95
Microbiologia alimentelor
___________________________________________________________________
96
Microorganisme prezente în alimente. Bacteriile
___________________________________________________________________
Tabel 11
Specia
thermophylus
B. coagulans
thuringiensis
B. macerans
B.megateriu
B. anthracis
B. circulans
B. mycoides
B. pumilus
B. brevuis
B. subtilis
B.stearo-
B.cereus
B.
m
Caracterul
Diametrul celulei - + - + - - - + + - - +
> 1,0 µm
Spori rotunzi - - - - - - - v - - - -
Sporangiu - + + - + v + - - - + -
deformat
Catalaza + + + + + + + + + + d +
Creşterea - + - + d + + - + - - +
anaerobă
Testul Voges- + + - + - + - - + + - d
Proskauer
Formarea acizilor
din:
D-Glucoză + + d + + + + + + + + +
L-Arabinoză + - - - + d + d - + d -
D-Xiloză + - - - + d + d - + d -
D-Manitol + - d - + d + d - + d -
Hidroliza
- cazeinei + + d + d d - + + + d +
- gelatinei + + d + d - + + + + + +
- amidonului + + d + + + + + + - + +
Reducerea + + d + d d + d + - d +
nitraţilor la nitriţi
Creşterea la pH
6,8 + + + + + + + + + + + +
5,7 + - d + d + + d + + - +
Creşterea la:
5ºC - - - - - - - d - - - -
10ºC d - - d d - d + d + - d
30ºC + + + + + + + + + + - +
40ºC + + + d + + + d d + + +
50ºC d - + - - + d - - d + -
55ºC - - - - - + - - - - + -
65ºC - - - - - - - - - - + -
Creşterea în NaCl
2% + + ND ND ND + ND ND ND + ND +
5% + + + ND d - - ND ND + D +
7% + + ND d d - - d d + - +
10% N N - ND - - - ND ND ND - ND
D D
+ = reacţie pozitivă; - = reacţie negativă; v = reacţie variabilă; d = reacţie diferită de la o tulpină la alta;
ND = reacţie nedeterminată
97
Microbiologia alimentelor
___________________________________________________________________
98
Microorganisme prezente în alimente. Bacteriile
___________________________________________________________________
99
Microbiologia alimentelor
___________________________________________________________________
100
Microorganisme prezente în alimente. Bacteriile
___________________________________________________________________
102
Microorganisme prezente în alimente. Bacteriile
___________________________________________________________________
103
Microbiologia alimentelor
___________________________________________________________________
104
Microorganisme prezente în alimente. Bacteriile
___________________________________________________________________
C. sporogenes
C. beijerinckii
pasteurianum
bifermentans
C. botulinum
C. butyricum
saccharoly-
C. septicum
perfringens
tip C,D
ticum
C.
C.
C.
C.
Caracteristica
Mobilitate ± ± - - ± ± + ± ±
Producerea de H2 4 4 4 4 4 4 4 4 4
Producerea de indol - ± - + - - - - -
Producerea de + ± + - - - - - -
lecitinază
Producerea de lipază - + - - - + - - -
Hidroliza amidonului ± - ± + - - ± + -
Formarea acizilor din:
Fructoză + w- + + + -w + + +
Galactoză + -w +w - +w - + + w-
Glicogen - - d - - - d + -
Inozitol - ± ± - - +
Lactoză + - + w + - + + -w
Maltoză + d + +w + -w + + +
Melibioză ± -w -w w - - d + +
Rafinoză - - d + - - ± + +
Ramnoză - - - + - - ± - -
Amidon -w - d - - - ± + -w
Sucroză + - + w - - + + +
Trehaloză w+ - d w +w - + +
Xiloză - - - w - - ± + w
+
+ = reacţie pozitivă; - = reacţie negativă; ± = reacţie pozitivă pentru 61-89% din tulpini;
d= 40-60% din tulpni au reacţie pozitivă; w = dezvoltare slabă; 4 = aprecierea pe o scală de la -4 la +4
105
Microbiologia alimentelor
___________________________________________________________________
106
Microorganisme prezente în alimente. Bacteriile
___________________________________________________________________
107
Microbiologia alimentelor
___________________________________________________________________
dezvoltare este de 25-37ºC. Creşte foarte slab sau deloc la 45ºC. Creşterea
este stimulată prin fermentarea carbohidraţilor şi inhibată la 6,5% NaCl,
20% bilă şi pH 8,5. Digeră gelatina dar nu şi laptele sau carnea. Toxina
elaborată nu invadează ţesuturile fiind astfel patogenă numai în anumite
condiţii. Tulpinile din această grupă au fost izolate din sol, sedimente
marine, alimente, peşte, păsări şi mamifere;
- grupa a III-a cuprinde tipurile C şi D. Bacteriile din această grupă
sunt mobile datorită cililor dispuşi peritrih. Celulele au dimensiuni cuprinse
între 0,5-2,4 x 3,0-22,0 µm şi sunt dispuse singure sau în perechi. Sporii
formaţi sunt ovali, dispuşi subterminal şi deformează celula vegetativă.
Temperatura optimă de dezvoltare este 30-37ºC şi în mod asemănător cu
tulpinile din grupa a II-a sunt stimulate de fermentarea carbohidraţilor şi
inhibate la 6,5% NaCl, 20% bilă şi pH 8,5. Digeră gelatina, toate tulpinile
acidifică laptele şi numai anumite tulpini digeră laptele şi carnea. Tulpinile
din această grupă au fost izolate din carcasele animalelor şi păsărilor, din sol
şi nămoluri precum şi de pe vegetalele putrezite;
- grupa a IV-a cuprinde tipul G. Bacteriile din această grupă sunt de
dimensiuni mai reduse comparativ cu restul grupelor respectiv 1,3-1,9 x 1,6-
9,4 µm. Sporii sunt rar observaţi, sunt ovali, dispuşi subterminal şi
deformează celula. Temperatura optimă de dezvoltare este de 30-37ºC
observându-se creşteri bune atât la 25ºC cât şi la 45ºC. Concentraţia de
6,5% NaCl şi cea de 20% bilă inhibă dezvoltarea tulpinilor. Digeră gelatina
şi cazeina rapid, în timp ce laptele şi carnea sunt digerate după 3 săptămâni.
Tulpinile din această grupă au fost izolate din sol şi din infecţiile
septicemice umane.
Tipurile A, B, E şi F produc toxiinfecţii alimentare la om, iar tipurile
C şi D la bovine, cabaline, oi, nurci şi păstrăvi. Tipul G nu a fost
deocamdată implicat în îmbolnăviri la om şi animale.
Sporii de C.botulinum sunt mai rezistenţi la căldură decât sporii altor
bacterii anaerobe patogene. În prezent sterilizarea conservelor vegetale se
face ţinând cont de eficienţa tratamentelor aplicate asupra sporilor de
C.botulinum. În urma studiilor întreprinse asupra termorezistenţei sporilor
botulinici s-au constatat următoarele (Bărzoi D. şi colab.):
- termorezistenţa variază în raport cu tipul şi tulpina, fiind mai
rezistenţi sporii tipului A decât cei ai tipului B;
108
Microorganisme prezente în alimente. Bacteriile
___________________________________________________________________
109
Microbiologia alimentelor
___________________________________________________________________
110
Microorganisme prezente în alimente. Bacteriile
___________________________________________________________________
111
Microbiologia alimentelor
___________________________________________________________________
112
Microorganisme prezente în alimente. Bacteriile
___________________________________________________________________
113
Microbiologia alimentelor
___________________________________________________________________
114
Microorganisme prezente în alimente. Bacteriile
___________________________________________________________________
celulele se prezintă sub formă de bastonaşe foarte scurte sau chiar capătă
aspect de cocobacili. Au metabolism de tip fermentativ metabolizând mulţi
hidraţi de carbon, peptona, piruvatul sau lactatul. Principalii produşi ai
fermentaţiei sunt dioxidul de carbon, cantităţi mari de acid propionic şi
acetic la care se adaugă, deşi în cantităţi mici acidul isovaleric, formic,
succinic şi lactic. Toate speciile genului produc acid din glucoză şi amoniac
din substraturile proteice. Temperatura optimă de dezvoltare este 30-37ºC,
unele specii dezvoltându-se bine la 25ºC în timp ce altele preferă
temperatura de 45ºC, pH optim este 7, speciile acestui gen se dezvoltă bine
în mediile cu 20% bilă, 6,5% NaCl, condiţii care de cele mai multe ori sunt
improprii dezvoltării altor bacterii.
Familia Mycobacteriaceae
Genul Mycobacterium
Însuşirea de bază a bacteriilor încadrate în acest gen este
acidorezistenţa, proprietate tinctorială care constă în rezistenţa bacteriilor la
acţiunea decolorantă a acizilor care au fixat în prealabil o substanţă
colorantă. Acido-rezistenţa micobacteriilor se pune în evidenţă prin
coloraţia Ziehl-Neelsen. Această proprietate este determinată de compoziţia
chimică a peretelui celular care din punct de vedere morfologic este format
din patru straturi în compoziţia cărora intră o cantitate foarte mare de lipide
şi acizi micolici. Micobacteriile sunt clasificate în funcţie de mai multe
criterii: după rapiditatea cu care se dezvoltă pe suprafaţa mediilor de cultură,
după patogenitatea faţă de om şi animale.
Micobacteriile sunt bacili drepţi sau curbaţi, cu dimensiuni de 0,2-
0,6 x 1,0-10,0 µm. Unele specii ale genului sunt cocobacilare, filamentoase
sau chiar ramificate. Sunt imobile, nu formează spori şi nici capsulă.
Speciile genului sunt aerobe şi microaerofile.
Întâlnite în apă, sol, pe vegetale şi în particulele de praf,
micobacteriile se multiplică numai în organismul bolnav. Capacitatea de
supravieţuire, în afara organismului, depinde de materialul în care se găsesc
bacilii. Astfel, în fecalele animalelor, în pământ şi pe păşuni rezistă până la
un an, în spută, la adăpost de lumină 3-4 luni, iar în cadavrele îngropate şi
intrate în putrefacţie, mai multe luni. Sensibilitatea micobacteriilor la
acţiunea temperaturii este ceva mai mare decât a altor bacterii nesporulate,
viabilitatea acestor germeni fiind un criteriu de stabilire a eficienţei
diferitelor metode de pasteurizare a laptelui. Astfel germenii pot rezista 40
115
Microbiologia alimentelor
___________________________________________________________________
116
Microorganisme prezente în alimente. Bacteriile
___________________________________________________________________
117
Microbiologia alimentelor
___________________________________________________________________
118
Microorganisme prezente în alimente. Bacteriile
___________________________________________________________________
enterocolitica
Enterobacter
Hafnia alvei
pneumoniae
Edwarsiella
liquefaciens
Escherichia
Citrobacter
dysenteriae
Salmonella
aerogenes
Kebsiella
Yersinia
Shigella
vulgaris
Serratia
freundii
Proteus
tarda
typhi
coli
Caracterul
Mobilitate + + + [+] + - + + + - -
Lichefierea - - - - - - + - + - -
gelatinei la
220 C
Producerea de - + - + - - + - - d d
indol
Testul roşu- + + - + d [-] + + [+] + +
metil
Testul Voges- - - + - d + - - [+] - -
Proskauer
Producerea de + + + + + + [+] - D - -
gaz din
glucoză
Lactoza d - + + - + - - - - -
Sucroza d - + D - + + - + - +
D-manitol + - + + + + - + + - +
Dulcitol d - - D - d - - - - -
Rafinoză d - + D - + - - + - -
Ramnoză + - + [+] + + - - [-] d -
Maltoză + + + + + + + + + [-] d
D-Xyloză + - + + + + + [+] + - d
Trehaloză + - + + + + d + + [+] +
Celobioză d - + - [-] + - - [-] - [+]
Melibioză d - + [+] - + - + [+] - -
NO3-→NO2 + + + + + + + + + + +
+ = 90-100% reacţie pozitivă; [+] = 76-89 % reacţie pozitivă; d = 26-75% reacţie pozitivă;
[-] =11-25% reacţie pozitivă, - = 0-10 % reacţie pozitivă
119
Microbiologia alimentelor
___________________________________________________________________
Genul Escherichia
Genul cuprinde 2 specii: E. coli şi E.blattae. Deşi unii autori citează
încă 3 specii ale genului, acestea nu au fost incluse în determinatoarele în
vigoare şi nici nu sunt implicate în patologia omului sau animalelor.
Escherichia coli. Izolată pentru prima dată de Escherich, E.coli este
specia reprezentativă atât a genului cât şi a familiei Enterobacteriaceae,
fiind cel mai mult studiată şi utilizată în cercetările de bacteriologie şi
genetică microbiană pe de o parte şi un indicator igenico-sanitar utilizat în
industria alimentară, pe de altă parte. Mai este cunoscută şi sub denumirea
comună de colibacil.
Prezenţa colibacililor, cât şi al altor enterobacteriacee lactozo-
pozitive în apă şi alimente constituie un important indicator igenico-sanitar.
Numărul de germeni pe unitatea de volum reprezintă indicele sau titrul coli,
iar tehnica de numărare a acestor germeni poartă numele de colimetrie.
Indicele coli reprezintă criteriul de apreciere al gradului de poluare al apei şi
alimentelor cu materii fecale. În standardele de stat sunt prevăzute valorile
120
Microorganisme prezente în alimente. Bacteriile
___________________________________________________________________
121
Microbiologia alimentelor
___________________________________________________________________
122
Microorganisme prezente în alimente. Bacteriile
___________________________________________________________________
semnificaţia patogenă cea mai mare pentru om, la care produce toxiinfecţii
alimentare grave, această tulpină fiind descrisă în continuare.
Din punct de vedere morfologic şi cultural, tulpina O157:H7 prezintă
caracteristicile descrise pentru specia E.coli, deosebirile constând în
caracterele biochimice (nu fermentează sorbitolul, nu produc β-D-
galactozidază şi β-D-glucoronidază). Se dezvoltă la 30-42ºC dar nu şi la 44-
45ºC. Supravieţuieşte la temperaturi mai mici de -80ºC în carnea de vită
tocată. După un an de păstrare a cărnii la -20ºC, procentul de viabilitate al
celulelor a fost de 30%. Temperatura limită la care nu se mai multiplică
supravieţuind însă timp îndelungat, este de 5ºC. La temperaturi de 6,5-7,2ºC
se multiplică cu o rată destul de redusă. Temperatura de 64,3ºC distruge
bacteria într-un minut în carnea de vită, porc sau pasăre în timp ce în lapte
este distrusă la aceeaşi temperatură în 16 secunde, în timpul pasteurizării.
Temperatura de 57ºC utilizată pentru opărirea coagulului pentru brânzeturi o
distruge în 90 minute. Termorezistenţa acestei tulpini creşte în absenţa
oxigenului, atunci când celulele se află în faza staţionară de multiplicare sau
când sunt înglobate în grăsime sau soluţii zaharoase. De asemenea rezistă şi
chiar se multiplică în medii cu 2,5-6,5% NaCl fiind relativ rezistentă la
aciditate (iaurt, suc de mere păstrat la 8ºC) astfel că aceste alimente acide
pot produce uşor toxiinfecţii alimentare. Anumiţi conservanţi alimentari ca
sorbatul şi benzoatul limitează multiplicarea celulelor la fel ca şi radiaţiile
ionizante care în doze mici pot să omoare bacteria prezentă în carnea tocată
unde se ştie că rezistă timp îndelungat. Se apreciază că rezistenţa acestei
bacterii este foarte asemănătoare cu cea a salmonelelor (Bârzoi D. şi colab.,
2002).
Tulpina O157:H7 este răspunzătoare de îmbolnăviri grave la om
manifestate de obicei prin colită hemoragică şi poate avea caracter
epidemiologic de toxiinfecţie alimentară, sursa de infecţie fiind reprezentată
de alimente, în special carnea de bovine şi mai rar cea de porc sau a
rumegătoarelor la care bacteria se dezvoltă în mod normal în intestinul gros
şi de unde este eliminată o dată cu dejecţiile, în special fecaloide.
Bacteria ajunge la alte animale neinfectate prin intermediul
materialelor vegetale rezultate de pe terenurile fertilizate cu gunoi de grajd.
Tot astfel bacteria poate ajunge la om prin intermediul unor vegetale (salată,
ridichi de lună, pătrunjel) cultivate pe terenuri fertilizate cu gunoi de grajd
sau irigate cu ape contaminate. Prin experienţe efectuate asupra puilor de
123
Microbiologia alimentelor
___________________________________________________________________
124
Microorganisme prezente în alimente. Bacteriile
___________________________________________________________________
125
Microbiologia alimentelor
___________________________________________________________________
126
Microorganisme prezente în alimente. Bacteriile
___________________________________________________________________
127
Microbiologia alimentelor
___________________________________________________________________
128
Microorganisme prezente în alimente. Bacteriile
___________________________________________________________________
129
Microbiologia alimentelor
___________________________________________________________________
130
Microorganisme prezente în alimente. Bacteriile
___________________________________________________________________
131
Microbiologia alimentelor
___________________________________________________________________
132
Microorganisme prezente în alimente. Bacteriile
___________________________________________________________________
133
Microbiologia alimentelor
___________________________________________________________________
134
Microorganisme prezente în alimente. Bacteriile
___________________________________________________________________
135
Microbiologia alimentelor
___________________________________________________________________
cazuri gazoanele lor pot conflua, iar în alte cazuri între cele două tulpini
rămâne o linie tranşantă de demarcare. Acest mod de comportare a fost
numit „fenomenul Dienes” şi a fost adoptat ca un criteriu de stabilire a
identităţii sau heterogenităţii tulpinilor. Variantele neivadante produc colonii
rotunde, semiopace, de tip S nepigmentate. Fenomenul de roire poate fi
inhibat prin încorporarea în mediu a unor substanţe ca acidul boric 0,1%,
sulfatiazolul 0,02%, etc.
Prorietăţi biochimice
Speciile genului Proteus fermentează constant glucoza cu producere
de gaz, mai lent şi neregulat fructoza, galactoza şi glicerolul, dezaminează
fenilalanina reducând-o în acid fenilpiruvic, reacţionează diferit la testul
roşului metil, produce indol cu excepţia speciei P.mirabilis. Diferenţierea
speciilor pe baza caracterelor biochimice este redată în tabelul 19.
136
Microorganisme prezente în alimente. Bacteriile
___________________________________________________________________
flagelari „H” termolabili, pe baza cărora s-au descris mai multe serotipuri la
fiecare specie de Proteus. Consideraţi multă vreme ca germeni nepatogeni
sau oportunişi, în prezent optica privind patogenitatea acestor germeni s-a
schimbat datorită implicării lor în tot mai multe infecţii intraspitaliceşti, în
toxiinfecţii alimentare şi infecţii cu diferite localizări la om.
Ecologie. Speciile genului Proteus se întâlnesc frecvent în tubul
digestiv al omului şi animalelor, în sol şi apă unde participă la efectuarea
circuitelor biogeochimice din natură. Sunt principalii agenţi de putrefacţie.
Degradează rapid alimentele datorită proteazelor pe care le eliberează.
Prezenţa lor pe alimente semnifică, de regulă, o contaminare de dată recentă.
Genul Yersinia, Van Loghem, 1944
Cuprinde şapte specii, Y.pseudotuberculosis, Y.enterocolitica,
Y.intermedia, Y.pestis, Y.frederiksenii, Y.ruckeri, Y.kristensenii două dintre
ele fiind transferate de curând din genul Pasteurella. Denumirea genului a
fost atribuită ca omagiu adus lui Yersin, cel care a descris pentru prima
dată agentul pestei (Yersinia pestis).
Yersiniile au forme cocoide, cocobacilare sau bacilare, cu
dimensiuni de 0,5-0,8 x 1-3 µm sunt necapsulate, două specii sunt mobile,
fermentează glucoza, fructoza, galactoza, riboza, maltoza, trehaloza,
manoza, manitolul şi N-acetilglucozamida fără a produce gaz. Sunt β-
galactozidazo-pozitive, majoritatea tulpinilor nu fermentează lactoza, nu
produc indol şi nu metabolizează citratul de amoniu.
Caracterele diferenţiale ale speciilor de Yersinia sunt redate în
tabelul 20.
Condiţii de cultivare. Temperatura optimă de multiplicare pentru
yersinii este de 30-37ºC, limitele fiind cuprinse între -4ºC şi 45ºC. Se
dezvoltă pe medii nutritive simple. În mediul lichid produce turbiditate
medie şi formează flacoane caracteristice care atârnă de o membrană situată
la suprafaţa mediului, sub forma unor stalactite. Pe mediile solide formează
colonii mici, neomogene, semiopace şi nepigmentate.
Se izolează mai greu din alimente necesitând medii de preîmbogăţire
şi de îmbogăţire selectivă.
137
Microbiologia alimentelor
___________________________________________________________________
enterocolitica
frederiksenii
pseudotuber
kristensenii
intermedia
Yersinia
Yersinia
Yersinia
Yersinia
Yersinia
Yersinia
Yersinia
ruckeri
Caracterul
ulosis
diferenţial pestis
Mobilitate (25º) C - + + + + + d
Lizin decarboxilază - - - - - - +
Ornitin decarboxilază - - + + + + +
Urează - + + + + + -
Gelatinază - - - - - - +
Citrat (25ºC) - - - + d - +
Testul Voges- - - + + + - d
Proskauer (25ºC)
Producere de indol - - d + + d -
Producere de acid
din:
- ramnoză - + - + + - -
- sucroză - - + + + - -
- celobioză - - - + - - -
- melibioză d + - + - - -
- sorbitol - - + + + + -
- rafinoză - d - + - - -
Producerea de acid + + + + + + +
din: glucoză,
fructoză, galactoză,
riboză, manoză,
maltoză, trehaloză,
manitol
+ = reacţie pozitivă; - = reacţie negativă; d = reacţie diferită de la o tulpină la alta
140
Microorganisme prezente în alimente. Bacteriile
___________________________________________________________________
Unele specii ale genului sunt fitopatogene iar altele sunt patogene pentru om
şi animale.
Morfologie. Celulele au formă de bastonaşe drepte sau curbe, fără a
fi helicale, cu dimensiuni cuprinse între 0,5-1,0 µm diametru şi 1,5-5,0 µm
lungime. Sunt mobile datorită flagelilor dispuşi polar, au metabolism
respirator, niciodată fermentativ, cu nutriţie chemoorganotrofă, unele specii
sunt chemolitotrofe, capabile să utilizeze hidrogenul molecular sau dioxidul
de carbon ca sursă de energie. Marea majoritate a speciilor sunt aerobe,
excepţie făcând speciile denitrificatoare care utilizează nitratul ca acceptor
de hidrogen, fiind astfel capabile de respiraţie anaerobă.
Unele specii ale genului produc acizi din zaharuri şi alcooli. S-a
constatat de asemenea că unele specii de Pseudomonas produc pigmenţi
difuzibili sau nu în mediul de cultură, de culori diferite de la cei fluorescenţi
la cei fenazinici (pigmenţi albaştri, roşii, galbeni, verzi).
În manualul Bergey care tratează taxonomia bacteriilor, gruparea
speciilor din genul Pseudomonas este făcută în funcţie de similitudinile sau
deosebirile compoziţiei acizilor ribonucleici ribozomali (ARNr), existând
astfel cinci grupe.
Noskova (citat de Bârzoi D. şi colab., 2002) a propus o altă grupare
a speciilor genului Pseudomonas, în funcţie de capacitatea de a produce
pigment difuzibil în mediu şi de a forma acizi din glucoză. Pe baza acestei
grupări speciile sunt cuprinse într-una din cele 4 subgrupe:
- subgrupa I-a:
- produc pigmenţi difuzibili în mediul de cultură
- produc acizi din glucoză
Specii reprezentative: P.fluorescens, P.putida, P.geniculata. Sunt
psihrofile şi sunt deseori implicate în alterarea cărnii refrigerate.
- subgrupa a II-a:
- nu produc pigmenţi difuzibili în mediul de cultură
- produc acizi din glucoză
Specii reprezentative: P.putrefaciens, P.fragi.
- subgrupa a III-a:
- nu produc acizi din glucoză
- alcalinizează mediul Hugh-Leifson
141
Microbiologia alimentelor
___________________________________________________________________
- subgrupa a IV-a :
- nu produc acizi din glucoză
- nu alcalinizează mediul Hugh-Leifson
Condiţii de cultivare. Temperatura de dezvoltare este de 4 - 43ºC,
optimul fiind cuprins între 25-30ºC. Speciile psihrofile ale genului se pot
dezvolta chiar şi la temperaturi cuprinse între -9ºC şi 5ºC. Pe măsură ce
scade temperatura mediului, se prelungeşte şi durata per generaţie (la
P.fluorescens apare o generaţie după 25 ore la temperatura de -2ºC şi după
4,8 ore la temperatura de 8,7ºC). Sunt mai puţin rezistente decât alte bacterii
nesporogene la acţiunea temperaturilor subminime şi maxime.
Astfel, la temperaturi de -2ºC până la -10ºC, bacteriile din acest gen
sunt rapid omorâte. Speciile psihrofile sunt distruse la temperatura de 37ºC.
pH-ul optim de dezvoltare este 7-8,5 majoritatea speciilor fiind incapabile
să se dezvolte la pH ≤ 6,0. Sunt pretenţioase la umiditatea atmosferică astfel
că pe suprafaţa produselor congelate la -1,0ºC au nevoie de 98-98,5%
umiditate atmosferică.
Rezistenţa la antibiotice este diferită, în special în ceea ce priveşte
tetraciclina. Astfel, tulpinile care colorează mediul de cultură sunt rezistente
atât la oxitetraciclină cât şi la clortetraciclină, în timp ce speciile care nu
colorează mediul sunt rezistente la oxitetraciclină şi sensibile la
clortetraciclină. Acest fenomen a fost observat pe suprafaţa carcaselor de
pasăre tratate cu clortetraciclină unde numărul bacteriilor din genul
Pseudomonas a scăzut de la 60% la 5% din numărul total de germeni.
Speciile genului Pseudomonas au o intensă activitate inhibantă
asupra microflorei de asociaţie a alimentelor. Foarte pregnant se manifestă
activitatea inhibantă asupra speciei Staphylococcus aureus şi asupra unor
specii de enterobacterii. Inhibă de asemenea levurile şi mucegaiurile
prezente pe suprafaţa alimentelor. Datorită caracterului lor psihrofil speciile
acestui gen sunt agenţii alterării cărnii refrigerate depozitată în condiţii
aerobe.
Unele specii ale genului Pseudomonas, prezente în alimente, sunt
patogene pentru om şi animale astfel încât în ultimul timp s-a propus ca
prezenţa acestor germeni în alimente, în special carne şi produse din carne
să fie considerată ca indicator igenico-sanitar.
Cele mai importante specii ale genului sunt: P.aeruginosa, P.mallei,
P.pseudomallei, P.cocovenenans care vor fi descrise în continuare.
142
Microorganisme prezente în alimente. Bacteriile
___________________________________________________________________
143
Microbiologia alimentelor
___________________________________________________________________
144
Microorganisme prezente în alimente. Bacteriile
___________________________________________________________________
145
Microbiologia alimentelor
___________________________________________________________________
146
Microorganisme prezente în alimente. Bacteriile
___________________________________________________________________
147
Microbiologia alimentelor
___________________________________________________________________
148
Microorganisme prezente în alimente. Bacteriile
___________________________________________________________________
149
Microbiologia alimentelor
___________________________________________________________________
150
Microorganisme prezente în alimente. Bacteriile
___________________________________________________________________
A.liquefacie
A.pasteuria
(66 tulpini)
(12 tulpini)
A.hansenii
(7 tulpini)
tulpini)
A.aceti
ns (10
nus
Caracteristici
151
Microbiologia alimentelor
___________________________________________________________________
152
Microorganisme prezente în alimente. Bacteriile
___________________________________________________________________
153
Microbiologia alimentelor
___________________________________________________________________
singur cil dispus polar care imprimă bacteriei o mobilitate foarte accentuată.
Aparţine grupei bacteriilor Gram negative.
Germen microaerofil, necesită la izolare condiţii de anaerobioză şi o
atmosferă îmbogăţită în CO2. Tulpinile de laborator se adaptează treptat la
condiţii aerobe. Pentru izolare necesită medii selective. Antibioticele care se
pot adăuga în mediu pentru a conferi selectivitate sunt bacitracina,
polimixina.
Din punct de vedere al proprietăţilor biochimice, speciile genului
Campylobacter se caracterizează printr-o slabă activitate enzimatică faţă de
glucide şi polialcooli, este indol negativ, urează negativ, nehemolitic. Unele
specii produc oxidază şi catalază; reduc nitraţii în nitriţi, metabolizează
malonatul. În funcţie de producerea de H2S, speciile genului se împart în
pozitive şi negative, acest gen de bacterii caracterizându-se printr-o
heterogenitate mai mare, comparativ cu alte genuri de bacterii. O altă
grupare a speciilor de Campylobacter este realizată în funcţie de activitatea
catalazei: specii catalazo-pozitive şi catalazo-negative.
Este o bacterie considerată fragilă din punct de vedere al rezistenţei
la condiţiile de mediu: este uşor distrusă de factorii naturali de mediu:
lumină solară, uscăciune, căldură (la 58ºC este distrusă în 5 minute), este
sensibilă la numeroase antibiotice printre care: cloranfenicol, streptomicină,
eritromicină şi oxitetraciclină.
Mecanismele patogenităţii sunt încă insuficient cunoscute la această
bacterie. Principalul factor de patogenitate este producerea de toxine cum
sunt: enterotoxina, citotoxina, endotoxina. Enterotoxina produsă de specia
C.jejuni este asemănătoare cu enterotoxina holerică. Aceasta este o proteină
cu greutate moleculară mare, este termostabilă inactivându-se la 56ºC în 60
minute, în condiţii de pH extrem (2 sau 8) sau după o depozitare timp de o
lună la 4ºC. Producerea de toxine este favorizată de prezenţa fierului în
mediul de cultură.
Specii mai importante sunt: C.fetus, C.jejuni, C.coli, C.lari,
C.concisus.
C.fetus este specia tip a genului, are habitatul în intestinul
rumegătoarelor. Ajunsă la om, prin intermediul preparatelor din carne
insuficient tratate termic, poate produce infecţii sistemice cu septicemii,
artrite, meningite, meningoencefalite, avorturi în special la persoanele
154
Microorganisme prezente în alimente. Bacteriile
___________________________________________________________________
155
Microbiologia alimentelor
___________________________________________________________________
cadrul genului există specii atât saprofite cât şi parazite pentru animalele
acvatice, fiind cunoscute sub denumirea de vibrioni de apă; alte specii sunt
patogene pentru om: V.cholarae, V.vulnificus, V. parahaemolyticus.
Majoritate speciilor de Vibrio fiind halofile se izolează din mediile marine
din zonele calde şi temperate, din estuare, lacuri sărate sau sălcii, peşte,
moluşte şi crustacei care pot concentra vibrionii în organele şi carnea lor.
Vibrionii sunt izolaţi mai frecvent în anotimpul călduros, când frecvenţa
toxiinfecţiilor alimentare este mai mare. Din apele a căror temperatură nu
scade sub 10ºC, vibrionii au fost izolaţi în tot timpul anului.
Genul cuprinde 20 specii, reprezentativă fiind specia Vibrio cholarae
(agentul holerei la om). Caracterele diferenţiale ale unor specii importante în
industria alimentară sunt prezentate în tabelul 23.
V.anguillarum
Specia V.parahemol-
V.cholerae
itycus
Caracteristica
Flagelarea:
3-12 flageli polari - - - -
flageli laterali - - + -
Pigmentarea:
galben-orange - - - -
negru-albăstrui - - - -
roşu - - - -
Hidroliza argininei - - - +
Oxidază + - + +
Reducerea nitraţilor la nitriţi + - + +
Formarea de gaz din glucoză - - - -
Producerea de acetoină şi/sau diacetil + + - +
Creşterea la:
4ºC - - - -
30ºC + + + +
35ºC + + + +
40ºC + + + -
Producerea de:
- amilaze + + + +
- gelatinaze + + - +
- lipaze + + + +
- chitinaze + + + +
156
Microorganisme prezente în alimente. Bacteriile
___________________________________________________________________
Utilizarea: - - - -
D-xylozei - - d +
L-arabinozei d d + +
+ d + d
D-manozei
+ + - +
D-galactozei + + + +
Sucrozei - - - +
Trehalozei - - - -
Celobiozei - d - -
Lactozei - - + -
Melibiozei
Etanolului
+ = reacţie pozitivă; - = reacţie negativă; d = reacţie diferită de la o tulpină la alta
157
Microbiologia alimentelor
___________________________________________________________________
158
Microorganisme prezente în alimente. Bacteriile
___________________________________________________________________
159
Microbiologia alimentelor
___________________________________________________________________
160
Microorganisme prezente în alimente. Bacteriile
___________________________________________________________________
Testul ureazei
d
Temperatura de dezvoltare Sursa de carbon:
30-36ºC + - glucoză, fructoză +
38ºC d - sucroză d
40ºC - - manoză, arabinoză, manitol,
rafinoză -
Toleranţa la etanol
5,5% etanol +
7,7% etanol d
+ = reacţie pozitivă; - = reacţie negativă; d = reacţie diferită de la o tulpină la alta;
w = reacţie slabă
161
Microbiologia alimentelor
___________________________________________________________________
162
Microorganisme prezente în alimente. Bacteriile
___________________________________________________________________
163
Microbiologia alimentelor
___________________________________________________________________
164
Microorganisme prezente în alimente. Bacteriile
___________________________________________________________________
165