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Curso: 2002/03
Centro: Facultad de Ciencias Experimentales
Estudios: Ingeniero Químico
Asignatura: BIOSEPARACIONES
Código: 46994201
Ciclo: 2º
Curso: 4º
Cuatrimestre: 2º
Carácter: Obligatoria
Créditos teóricos: 4,5
Créditos prácticos: 1,5
Área: Ingeniería Química
Departamento: Ingeniería Química
Descriptores: Operaciones de separación de materiales biológicos. Centrifugación. Separaciones a través
de membranas. Diseño de procesos post-reactor
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TEMARIO DE TEORÍA

I. INTRODUCCIÓN. CONCEPTOS BÁSICOS

Tema 1.- Bioseparaciones. Introducción. Características de las bioseparaciones. Estrategia para el


aislamiento: métodos analíticos, datos de estabilidad, propiedades del producto, diseño de un
proceso de purificación: escala, concentración y precio. Biomoléculas de interés en la industria
farmacéutica y biotecnológica: proteínas, metabolitos primarios y secundarios

Tema 2.- Bioseparaciones industriales. Procedimiento general de purificación: liberación de productos,


retirada de insolubles, concentración y separación, purificación y acabado. Ejemplos de separaciones
industriales: anticuerpos monoclonales, insulina humana, vacuna de la rabia, penicilina, proteasas, L-
lisina, ácido cítrico

II. LIBERACIÓN DE PRODUCTOS POR ROTURA CELULAR

Tema 3.- Rotura celular. Métodos mecánicos. Métodos de rotura celular. El homogeneizador de alta
presión: mecanismo de rotura; diseño del proceso: cinética de la rotura, variables que influyen en el
proceso: presión, número de pases, factores fisiológicos, diseño de la válvula; necesidades energéticas y
generación de calor; escalamiento. El molino de bolas: diseño del molino: agitador, cámara y separador
de medios; mecanismo de la operación; rotura de microorganismos: liberación de proteínas y enzimas
intracelulares, rotura de células en discontinuo y en continuo, grado de rotura, control durante las
operaciones y reproducibilidad; parámetros operacionales: velocidad del agitador, velocidad de
alimentación, material, tamaño, densidad y carga de bolas, concentración de células, temperatura;
consideraciones económicas.

III. OPERACIONES PARA LA RETIRADA DE INSOLUBLES

Tema 4.- Operaciones para la retirada de insolubles. Introducción. Filtración: equipos de filtración;
filtro continuo rotatorio: velocidad y tiempo de filtración, lavado de la torta; pretratamientos:
calentamiento, adición de coadyuvantes, coagulación y floculación; pruebas de laboratorio.
Microfiltración. Centrifugación: centrífugas: centrífuga de cámara y de discos, decantador de tornillo
sinfín; escalamiento de la centrifugación. Filtración centrífuga.

IV. OPERACIONES DE CONCENTRACIÓN DEL PRODUCTO

Tema 5.- Separación por membranas. Conceptos de ósmosis inversa, ultrafiltración, microfiltración y
diálisis. Aplicaciones. Ecuaciones de transporte de disolvente y soluto (coeficiente de rechazo):
ultrafiltración y microfiltración, ósmosis inversa. Membranas, características: permeabilidad, selectividad
(peso molecular de corte), resistencia. Polarización por concentración, modelo de película y fricción.
Factores que afectan a la resolución: Presión, flujo tangencial, concentración, propiedades de la
disolución. Módulos. Instalaciones de separación por membranas: operaciones discontinuas y continuas.
Diafiltración: operaciones discontinua y continua. Diálisis: operaciones discontinua y continua en
contracorriente.

Tema 6.- Precipitación. Introducción. Métodos de precipitación y aplicaciones: precipitación


isoeléctrica, precipitación con disolventes orgánicos, precipitación con sales, adición de polímeros no
iónicos, precipitación con polielectrolitos, precipitación por acción de la temperatura. Mecanismo físico
de la precipitación. Precipitaciones a gran escala

V. OPERACIONES DE PURIFICACIÓN

Tema 7.- Cromatografía. Introducción. Modos cromatográficos, fases estacionarias. Rendimiento y


pureza. Migración diferencial y ensanchamiento de banda, Resolución. Columna cromatográfica como
una serie de etapas de equilibrio. Ecuación de van Deemter. Análisis cinético. Escalamiento
cromatográfico

Tema 8.- Procesos de separación eléctricos. Electroforesis. Introducción. Operaciones de separación


eléctricas. Ecuaciones de transporte para la electroforesis. Electoforesis capilar y de gel: equipos y
materiales. Electroforesis de proteínas: electroforesis de gel para proteínas nativas, concentración
isoeléctrica, electroforesis de gel de poliacrilamida con dodecil sulfato sódiso (SDS PAGE). Efectos
ensanchadores de banda y medida de la resolución. Electroforesis de gel preparativa en discontinuo
(pGE): equipo y operación; perfiles de concentración del soluto: volumen de muestra cargada, difusión
del soluto en el gel, dispersión térmica, dispersión en las conducciones externas, dilución del soluto en la
cámara de elución. Electroforesis preparativa de flujo continuo (PCFE): equipo de película delgada,
dispersión térmica, perfil de velocidades axial y lateral y dispersión del soluto, dilución del soluto.

VI. OPERACIONES DE ACABADO

Tema 9.- Formulación de productos. Liofilización. Introducción. Formulación del producto:


dosificación, excipientes. Encapsulación. Descripción del proceso de liofilización: congelación,
sublimación (secado primario), desorción (secado secundario). Equipo. Optimización del ciclo
formulación-liofilización

VII. DISEÑO DE PROCESOS DE SEPARACIÓN

Tema 10.- Síntesis y diseño de procesos de downstream. Introducción. Propiedades y operaciones


implicadas. Reglas heurísticas de los procesos de bioseparación. Sistemas expertos o de inteligencia
artificial (IA). Técnicas de programación matemática y métodos evolucionarios. Integración de las etapas
de pre-fermentación, fermentación y bioseparación. Consideraciones sobre la formulación final del
producto y el impacto medioambiental

Tema 11.- Normas para la fabricación correcta y control de calidad. Introducción. La instalación para
la fabricación. Equipos y servicios. Personal. Materias primas. Validación: diseño, instalación, operación,
resolución. Actividades específicas para la cualificación de la resolución en procesos basados en la
cromatografía. Validación de las operaciones asépticas. Validación de los sistemas computerizados.
Validación propia (de conjunto). Sistemas de documentación. Control de calidad: en el ensayo de
procesos de productos intermedios, del producto global (identidad del producto, pureza, concentración,
perfil de contaminantes y actividad del producto), métodos de validación, estudios de estabilidad,
programa de control medioambiental.

BIBLIOGRAFÍA

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