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Composição do DNA
Timina = Adenina
Citosina = Guanina
Ácido nucleico é um
polímero;
Qual é a diferença no
que diz respeito à pentose
entre um DNA e um RNA?
Estrutura do ácido
nucleico
Bases Púricas;
Bases Pirimídicas;
Dupla hélice
Complementaridade dos
pares de bases que ligam
uma hélice à outra, no
interior da molécula
Orientações das hélices nucleotídeo
em direções opostas
(antiparalelismo) em torno
do mesmo eixo
Ligações entre as
fitas de DNA
Tipos de DNA
Interferência na interação do
DNA com as proteínas;
O que os diferencia é a
espessura, o número de pares
de base por volta da hélice e a
exposição das bases
nitrogenadas ao meio externo;
O tipo B é o mais comum
nas células.
O tipo A é produzido em
baixa umidade.
Estrutura de Genes e Genomas
Eucarióticos
Estrutura básica de um gene
terminador
Bases nitrogenadas
Nucleotídeo
Pontes de
hidrogênio
Duplicação ou Replicação do DNA
1959
1958 - Kornberg isola a DNA Prêmio Nobel
de Medicina
polimerase, enzima responsável pela
duplicação do DNA de Escherichia coli
1959 – Kornberg junto com Ochoa
descreveram o processo bioquímico de
síntese do DNA
Arthur Kornberg
(1918 – 2007)
Severo Ochoa
(1905 – 1993)
Hipóteses sobre a Replicação do DNA
Duplicação ou Replicação do DNA
Cultivo em meio
15NH
4Cl
1953 – Watson e
Crick propuseram que a
duplicação do DNA Cultivo em meio
deveria ser 14NH
4Cl
semiconservativa
1958 - Matthew
Meselson e Franklin
Stahl demonstram que
a duplicação do DNA é
semiconservativa
Duplicação ou Replicação do DNA
A DNA polimerase apóia-se no segmento de DNA pareado à
fita molde e, adicionando nucleotídeos na direção 5’-3’,
estende a nova fita.
Duplicação ou Replicação do DNA
Origem da Replicação
Procariotos Eucariotos
Transcrição do RNA
O fluxo da informação genética
Como as células decodificam e usam a informação
contida em seus genomas?
Transcrição
Processo molecular que converte a informação
genética de um segmento de DNA (gene) em uma fita
de RNA;
Transcrição x Replicação
1. Precursores são trifosfatos
de ribonucleosídeo;
Molde de DNA;
Cofator Mg⁺²;
Reconhecimento;
Iniciação;
Alongamento;
Terminação.
Transcrição
RNA pol: catalisa a formação de ligações fosfodiéster
que conectam os nucleotídeos entre si, formando uma
cadeia linear;
Transcrição
Pelo processo de transcrição são sintetizados todos os
RNAs da célula:
Modificação da
extremidades 5´: uma
estrutura chamada quepe
é adicionada;
Clivagem da extremidades
3´e adição de 80 a 250
resíduos de adenilato.
Capeamento do mRNA
Promove a ligação do
mRNA ao ribossomo;
Protege o mRNA de
nucleases.
Splicing do RNA
Remoção dos íntrons do RNA recém-sintetizado;
Splicing do RNA
Vantagens do splicing do RNA
Polipeptídeo
Síntese de Proteínas
O fluxo da informação genética
Como as células decodificam e usam a informação
contida em seus genomas?
Tradução
Conversão da
informação contida
no RNA mensageiro
em aminoácidos que
são unidos para
formação das
proteínas
Tipos de RNAs
Com o término da TRANSCRIÇÃO, temos a formação de
alguns tipos de RNA
RNA mensageiro
RNA
transportador
RNA ribossômico
RNA mensageiro
RNA mensageiro (mRNA) – contém a mensagem do
gene e é traduzido no citoplasma de forma linear
RNA ribossomal (rRNA)
é onde se liga o tRNA que
está ligado à cadeia
polipeptídica (peptidil-tRNA)
Sítio de entrada
dos aminoacil-
tRNA
RNA transportador (tRNA)
RNA transportador (tRNA) – é um conector entre a linguagem
do DNA e a linguagem da proteína
Existe pelo menos um para cada aminoácido
Código Genético
1964 - M. Nirenberg, R. Holley e G. Khorana - três
bases constituem um códon, que corresponde a um
aminoácido da proteína
Código Genético
Os nucleotídeos seriam as letras do código genético, formando
palavras sempre com 3 letras;
Cada palavra colocará em ordem um aminoácido e vários
aminoácidos formando uma proteína ou um polipeptídeo
Propriedades do código genético
A unidade do código
genético é
constituída de três
letras
Tem ponto inicial
Não é superposto
Não tem vírgulas
É redundante
É universal
Tem ponto final
Reconhecimento dos códons
Mecanismos da síntese protéica
1. O mRNA É TRADUZIDO NO SENTIDO 5’ 3’;
códon P A
Etapas da síntese de proteínas
códons
Transcrição de um segmento
de DNA de E. coli gerando
moléculas de mRNA que são
imediatamente traduzido pelos
múltiplos ribossomos.
Síntese e processamento de proteínas
Transcrição
Processamento
Transcrito pós-traducional
primário
Processamento
pós-transcricional
mRNA maduro
Modificações
covalentes nos
Tradução Dobramento aminoácidos
Proteína
(inativa)
Proteína ativa
1
3. Inserções: Causadas
pela inserção de um
ou mais pares de
bases:
Tipos de mutação gênica
4. Duplicação:
Introdução de
cópia (s) extra (s)
de um ou mais
nucleotídeos
Tipos de mutação gênica
5. Inversão: Inversão
de um conjunto de
nucleotídeos
Consequências das mutações
nucleotídicas
Mutação silenciosa (substituições sinônimas): possível
devido ao código genético ser redundante;
A substituição NÃO resulta em mudança do aminoácido:
Consequências das mutações
nucleotídicas
Mutação não sinônima de sentido trocado (missense): a
substituição resulta em mudança do aminoácido.
Consequências das mutações
nucleotídicas
Mutação não sinônima neutra: a substituição resulta em
mudança de aminoácido por outro de propriedades
similares (função protéica não alterada).
Consequências das mutações
nucleotídicas
Mutação sem sentido (nonsense): a substituição resulta em
criação de um códon de parada (proteína menor).
Consequências das mutações
nucleotídicas
Mudança de quadro de
leitura (frameshift):
deleções, inserções ou
duplicações (não
divisíveis por 3) levam
à tradução do
aminoácido incorreto,
criação ou perda de
códon de parada
(proteínas maiores ou
menores):
Mutações induzidas por radiações
Parte do espectro eletromagnético com comprimentos de
onda mais curtos e com maior energia que a luz visível:
subdividida em radiação não ionizante (UV) e radiação
ionizante (raios X, gama, cósmicos).
Mutações induzidas por radiações
Mutações induzidas por radiações
Radiação não-ionizante:
pouca energia e
penetração superficial
em tecidos. Entretanto
é prontamente
absorvida por muitas
moléculas orgânicas.
Dois produtos principais
de absorção de UV
pelas pirimidinas são os
hidratos e os dímeros.
Mutações induzidas por radiações
Radiação ionizante: alta energia e grande penetração em
tecidos. Ao colidirem com átomos liberam elétrons, deixando
radicais livres ou íons positivamente carregados.
Mecanismos de reparo do DNA
Hibridização da
membrana com
sonda radioativa
Eletroforese do
DNA em gel de
agarose
Exposição a
filme de
Raios-X
Transferência para
membrana
Transferência de ácidos nucléicos do gel para membrana
de náilon (Blot)
Peso de 0,3-0,5 Kg
Ponte de papel