TERAPIA GENICA:

+terapia : tratamiento
+nos sirve para tratar una enfermedad génica; que es una transfería de material
genético nuevo a células de un individuo dando lugar a un beneficio terapéutico
para el mismo; para tratar una enzima como puede ser enfermedad metabólica (1
gen afectado), anemia (hereditarias), enfermedades autoinmunes, neoplasias,
infecciosa.

grupos:
enfermedades hereditarias monogenicas
neoplasias
enfermedades cardiovasculares
enfermedades infecciosas
enfermedades multigenicas (diabetes)
> mas complejo de tratar
> varios genes alterados, y hacer un estudio mas profundo
> tratar varios genes al mismo tiempo s muy complejo

dos formas
ADITIVA:

+adiccion de genes
+para potenciar la expresión de un gen o al contrario para disminuir ese gen.

ej: neoplasia; supresor de tumores (p53) alterado entonces la verificación no se

da, tampoco la división celular que va a tener errores y se descontrolara la división
celular. Entonces con terapia génica se puede insertar un gen normal y potenciar
la función de p53 y la división celular se regula

ej: protooncogen y mutados originan oncogenes como el k-ras (respuesta celular

al estar mutado es división celular ) y se puede tratar expresándoselo un gen q
inhiba la función de k-ras

SUSTITUTIVA:

+remplazando los genes

+enfermedades monogenicas, se remplaza una copia no funcional con una
funcional
ej: gen como el vector al interior de la célula el sistema inmune lo detecta y chao;
genes se puede integrar al genoma por eso el gen se va a estar expresando y se
integra donde le corresponde, puede inhibir la función o pueden activar los
portooncogenes

el gen se puede quedar por fuera del genoma y hacer un estado episonal (entra al
núcleo pero no se integra en el genoma) y se expresa por periodos cortos o
transitoria

Characteristics De La Terapia Génica

+ insertion de una gen en un lugar no especifico del genoma

+ cambio de un gen anormal por reconbinacion homologa
+reparacion de una gen anormal por mutación reversa selectiva
+activacion o inactivation de un gen

Clasificación ‘dependiendo del tipo de células que se vaya a clasificar’

Células Somática: solo se expresa en un tejido en especifico

Células Germinales: se transmite de generación en generación (individuos)

Forma de hacerlo
estrategias:

Ex Vivo
> se toma biopsia del paciente, la célula se cultiva, a estas células se les pone en
contacto con un vector y allí analizar que pasa con el gen o hacer pruebas para
saber si si esta funcionado o ver si la proteína esta expresando correctamente y ya
después de todo y saber q esta bien se lleva al paciente de nuevo (mas efectiva)

In Vivo
> se lleva el vector directamente al organismos por vía intravenosa o muscular o
en casos respiratorios por inhalador; es mas rápido
> en tropismos respiratorios puede ser menos especifica

Características Del Vector

- especifico
- no ser detectado por el sistema inmune
- que no sea virulento
- transferencia sea eficiente y del tamaño adecuado para aplicación clínica;
enmascarar el vector para q el sistema inmune no lo detecte
- purificar en grandes cantidades
- no generar reacciónes alérgicas o inflamatorias
- seguro para el paciente y el medio ambiente
- expresión se debe presentar por largos periodos de tiempo

Medios Empleados En Terapia Genica

+ Medios Físicos
- Microinyeccion;
directamente al nucleo de la celula
ex vivo

- Electroporacion
celdas en el q se pone la celula que se quiere modificar con el material genético a
la que se le aplica corriente eléctrica y se van abrir los poros y membranas,
entrando el material genético, después se pone en medio de cultivo viendo como
ventaja que se puede hacer cn varias células al tiempo y desventaja se pueden
morir otras varias
ex vivo

- Pistola Genetica
dispara genes, bala hecha de oro o tugsteno que son inertes y no van a reaccionar
en la célula; alrededor de ellos esta envuelto el material genético
ex vivo

+Medios Químicos

- compuestos químicos no toxicos para la célula y que pueden entrar al interior de

la célula
- fosfado de calcio, limpios cationicos, liposomas (es una bicapa lipidica y por
medio de endocitosis)

gen pequeño en las técnicas anteriores

+ Vectores Virales (biológicos)

-tiene virus
-virus infectan de forma natural a la célula que reconocen los factores específicos
en la membrana para entrar

+ Adenovirus:
- infectan el sistema respiratorio
- ADN de doble cadena
- se les elimina todos los genes que tiene que ver con virulencia o q causen
enfermedad; mas no los genes que tengan que ver con el tropismo y así hacerlos
mas seguros
- para eliminar esto se utiliza las enzimas de restricción, quedando un espacio y se
inserta el gen que se va a utilizar y para que se unan se utiliza la de extremos
pegajosos y ya se puede entrar el material genético en la capside

- pone en contacto al virus con la celular, entrando por endocitosis y se dirige al

nucleo de la célula; pero queda en estado episomal (no pueden integrar su
genoma) y va durar muy poco tiempo
- ventaja: se puede tener una alta concertación del virus, y no es detectado por el
sistema inmunológico, infectan a células en estado aquiescente y en división
también
- reacción adversa hace inflamación, y no va integrar su material genético con el
material de la célula
- terapia costosa y que lleva mucho tiempo hacerla

+ Parvovirus
- hacen parte de los virus asociados a adenovirus, necesitan de estos para infectar
las células
- tropismo por el cromosoma 19 (mas especifico)
- no genera respuesta inmunológicas
- forma episomal, no tiene como integrar su material genético al material de la
célula

+ Retrovirus
- su material genético es ARN (dogma central)
- infecta la célula por endocitosis y antes de entrar al núcleo activan a transcriptas
reversa y dejan el ADN estable y ahí sí entran al núcleo; activando allí a la
‘integrasa’ integrando su material genético al material de la célula
- si se da el proceso

+ Lentivirus
-son los mas estudiados
-capacidad de infectar células que están en división celular
( en profase el núcleo se disuelve para …) no pueden entrar por el complejo del
poro y por eso estos deben esperar que la célula este en división

Desventajas En General De Terapia Génica

- mutagenesis insertional
- respuesta inmune
- expresión transitoria
- enfermedades multifactoriales

Vectores Utilizados
herpes virus

1990 empezaron ensayos de terapia con la adenosil (niño burbuja)

2015 enfermedad neoplacica

strimvelis > es la primera ex vivo cell madre

glybera
gendicine

- 2 o 3 artículos por cada tema

CELULAS MADRE

- son las precursoras de otras células

- células indiferenciadas; necesita proceso de división celular

División Celular Simétrica :

da dos celulas madres o indiferenciadas, ósea que cada célula que sale va ser
una célula madre

División Celular Asimétrica:

se obtiene primero una celular madre; una sigue en división simétrica y la otra si s
diferencia

+ se reconocen por sus marcadores de superficie especifico

(((cuales son los marcadores de superficie de una celular madre??????

consulta)))

clasificación de acuerdo a su potencial, capacidad de generar órganos y tejidos :

4tipos:
cm totipotenciales
> puede generar todos los tejidos embrionarios incluida la placenta
> solo se encuentra en el cigoto
> ya en fecundación entra en etapa de blastocisto y pasarían a ser
> recline nacido,

cm pluripotenciales
> en etapa de blastocisto
> capacidad de generar órganos y tejidos de las tres capas embrionaria
(mesonero ectodermo y endodermo)

cm multipotenciales
> capacidad de diferenciarse en una de las tres capas embrionarias

cm unipotencial
> solo se diferencia en un solo tejido o órgano en especifico
ej: cellas adiposas

clasificación
+ cellos madre embrionarias
(etapa blastocito) totipotenciales, en la masa interna del blastocito
+células madre adultas
adulto desde el nacimiento
medula ósea piel pula dentaría cordón umbilical ten adiposo

importantes?
- son indiferenciadas
- regeneración de tejidos
- reparación
- medula ósea fuente importante de célula madre
en la piel y en el tejido digestivo

también efecto terapéutico

+al ser indiferenciadas se pueden manipular para hacer un efecto terapéutico
+ las embrionarias se pueden cultivar (fibroblastos de ratón son las células
nodrizas
+ se pueden dividir constantemente por tiene activa la telomerasa (lo contrario
causa envejecimiento )
+ en cm embrionarias se puede hacer clonación; se le agrega factores de
creciente especifico para que se diferencie cumpliendo una función especial
+ ayudan a corregir enfermedades como un infarto se le regenera células cardiaca
y prevenir

> clonación reproductiva

clonación de una oveja

donadora de ovocitos, q se le hace una denucleacion ( con solo 23 cromosomas),
- cellos somáticas tiene 46 cromosomas
- se tomo el núcleo
+ idéntica pero no hubo recombinación genética

cuales son las alternativas

producir células madre pluripotenciales inducidas; llevar una célula indiferenciada
a ser pluripontencial

+ genes: mantienen el estado indiferenciado de la cm

oct-4
sox-2
c-myc
klf4

el organismo de se va desarrollando estos genes van a disminuir su expresión y la

célula aumento el proceso de diferenciación
vectores virales con estos genes a virus y activaron cascadas y pasaron de una
célula indiferenciada a una diferenciado

se puede encontrar en el tejido adiposo buena cantidad de células madre

en el cordón umbilical en su sangre
en la medula ósea la mayor cantidad

para que sirven?

- combinar cm con terapia génica, se le inyecta el gen y después se le pasa en la

enfermedad

GENOMAS

+todo el conjunto de genes o material genético del organismo y así definir su

secuencia

+ estructura básica de un gen eucariota

-regiones reguladora
regiones codificantes ;

-determinan como se debe expresar y en q momento se expresa

-conocida como gen ORF (opne reading game); desde el codon de inicio hasta la
region de terminación o de paro); allí hay una secuencia q son los exones
(information codifican) y los intrones(regiones no codificares)
-en modificación se eliminan los intrones y se forma el adn mensajero
-regiones reguladoras: en parte están los promotores, caja tata, caja caat.
-sitio +1(se pega la arn polimerasa y comienza la trasncriocion), (5`no codificante)
hay una adenina o guaina y es donde se inicia la transcripción, esta antes del
codon de inicio, y entre estos hay otra región (secuencia) reguladora del gen
- después del codon de paro hay una secuencia especifica auaa se encuentra 20
nucleotiods antes del se termine transcripción (3`no codificante)
-unico codificante son los expones y el resto no es codificante
- de adn a arn es el transcriptoma, osea, todo lo q se transcribe
- sisntesis de proteínas y ese conjunto de todas las proteínas vana ser los
proteomas
- metaboloma es el conjunto de todas las proteínas e interacción entre ellas

COMPLEJIDAD DEL GENOMA

- humano > 10 a la 9 pb, nuestro genoma tiene 3x 109 pb > 3 gb , en 23
cromosomas
- algunos objetos, animales o objetos tiene mas material genético que el humano
pero no tiene que ver con las funciones q cumple; pero si es importante la forma
de como interactuar y se expresa esos genes

humanos entre 20 y 25 mil genes, es mucho mas compleja como interactúan

nuestros genes

GENOMA HUMANO

+ igual q en apuntes.. ;)
+ borradores del genoma en el año 2mil
+20769 genes codificantes para proteinas y genes que especifican para arn no
codificante
14165 genes inactivos
+ 1,5% solo de genoma humano que codifica para proteínas
menos del 50% son secuencias de copia unica( genes para proteínas, intrones,
secuanacis reguladoras
+ mas del 50% son secuencias repetitivas o adn repetitivo
es material no codificante 1 secuencias agrupadas en tándem

ORGANIZCION DEL GENOMA HUMANO

GENOMA MITOCONDRIAL esta en los apunte ;)

GENOMA NUCLEAR esta en los apuntes ;)

adn de copia unica

-familias genicas clásicas; son los genes de las histonas(empaquetar el material

genético), genes de los arn ribosomales
-son repetidos (familias) por se necesitan para empaquetar por medio de las
histonas por es mucha cantidad
- familias multigenica agrupada; aquellas proteínas por diferentes subunidades y
cada una codificada por un gen diferente

and disperso (familias multigenicas dispersas)

genes de la hemoglobina

adn no codificante
agrupado y altamente repetitivo

secuancias dispersas
longitud variable (polimorfica)

secuencias repetidas en tandem

- snp se diferencian en un solo nucleotido; hacen q los humanos nos parezcamos
en un 99.99% y la diferencia es 0.01% (importante por un medicanemteo puede
hacerle efecto a una persona o una enfermedad le de a una persona y a otra no)

CONSULTA
cual es el mecanismo de transposición y de retrotrasnpociion de genes
como afecta la variabilidad genica?
regulation de la expresión genica
epigenetic y que medicamentos hay?