I.

Introduccion Desde que en 1872 Salkowski (I) describi6 la primera reacci6n de color para el colesterol, han aparccido una
gran cantidad de metodos y procedimicntos dado el interes cHnico de su valoraci6n (2). Hoy sc cueman por centenares los
mClodos descrilOs para la delerminaci6n de la concentraci6n de coleslcrol, algunos de elias pequeftas modificaciones de
Olros preexislcntes. No se dispone de una c1asificaci6n adecuada que los englobe a lodos, aunque
desde un punto de vista practico se les sueIe clasificar en metodos enzimaticos y en metodos no
enzimaticos, que otros autores han Uamado metodos quimicos (2). EI objetivo de este documento es
revisar los metodos de delerminad6n del colesterol y recomendar los metodos indicados a distintos
niveles: melOdo definitivo, melodo de referenda y metodo rutinario.
2.1.4. Conclusion Para la selecci6n de un metodo ha de tenerse en cuenta, que a medida que aumenta
el numero de pasos que se utilicen, disminuye el efecto de las interferencias, que supone un aumento
de la exactitud del metodo. Pero del mismo modo que aumenta su complejidad, aumenta la
probabilidad de error, disminuyendo su precisi6n. Desde un punto de vista pnictico, disminuye el
numero de determinaciones que pueden realizarse en una serie analltica. Todo ello motiva que los
metodos mas complejos (de tres y cuatro pasos) se reserven como metodos de referenda y se prefiera
utilizar cotidianamente los metodos menos complicados.
Sistema de Liebermann-Burchard. En este sislema se forma un ion pentaenilico con un maximo de
absordon a 620 nm (color verde), que es e1 imermediario que medimos, si bien no parece ser el
producto final de la rcaccion. La formaci6n dc CSIC intermediario lienc un bajo rendimiento en cltiempo
que se considera optimo para la medici6n espectrometrica del colesterol y estO explica In baja
sensibilidad de los mctodos que ulilizan este sistema al ser comparados con los que tIIilizan hierro(lIl).
En este sistema, otros esteroides como el 5.7-colestadien-3-01 y el 7-colesten-3-,B-ol, producen 2 y 4
veces mas color que cantidades equivalellles de colesterol (40

La prueba de Liebermann-Burchard o anhídrido acético se utiliza para la detección del colesterol. La

formación de un color verde o verde-azul después de unos minutos es positiva.

Lieberman – Burchard es un reactivo que se utiliza en una prueba colorimétrica para detectar el
colesterol, que le da un color verde intenso. Este color comienza como un color rosado violáceo y
avanza a un color verde claro y luego a un verde muy oscuro. El color se debe al grupo hidroxilo (-OH)
del colesterol que reacciona con los reactivos y aumenta la conjugación de la falta de saturación en el
anillo fusionado adyacente. Dado que esta prueba utiliza anhídrido acético y ácido sulfúrico como
reactivos, se debe tener precaución para no recibir quemaduras graves.

Método: disolver uno o dos cristales de colesterol en cloroformo seco en un tubo de ensayo seco.
Agregue varias gotas de anhídrido acético y luego 2 gotas de HCl 2 H 2 y mezcle cuidadosamente. Una
vez finalizada la reacción, la concentración de colesterol puede medirse mediante espectrofotometría.
LIEBERMAN-BURCHARD : Es un reactivo utilizado en un ensayo colorimétrico para detectar el colesterol, lo que da un
color verde intenso. Este color comienza como un color rosa violáceo y progresa a través de un verde claro y luego de
color verde muy oscuro. El color es debido al grupo hidroxilo (-OH) de colesterol reaccionar con los reactivos y el
aumento de la conjugación de la instauración en el anillo fusionado adyacente. Puesto que este ensayo utiliza anhídrido
acético y acido sulfúrico como reactivos , se debe tener precaución para no recibir quemaduras graves .
INTRODUCCIÓN
El colesterol es unesterol(lípido) quese encuentra en los tejidos corporales yen elplasma sanguíneode
losvertebrados.Se presenta en altasconcentraciones en elhígado,médulaespinal,páncreasycerebro. El
nombrede «colesterol» procede del griego kole(bilis) y stereos (sólido), por haberseidentificado por
primera vez en loscálculos de lavesícula biliarporMichelEugène Chevreulquien le dio el nombrede
«colesterina», término quesolamente se conservó en el alemán(Cholesterin). Abundan en las grasas
deorigen animal.La fórmula química del colesterol serepresenta de dos formas: C
27H 46 O /C 27 H 45 OH.
Es unlípidoesteroide,moléculadeciclopentanoperhidrofenantreno(oesterano), constituida por
cuatrocarbociclos condensados o fundidos,denominados A, B, C y D, quepresentan varias
sustituciones:
1.Dosradicales metiloen lasposiciones C-10 y C-13.
2.Una cadenaalifáticaramificada de 8carbonos en la posición C-17.
3.Ungrupo hidroxiloen la posición C-3.
4.Una insaturación entre los carbonosC-5 y C-6.En la molécula de colesterol se puededistinguir
unacabeza polarconstituidapor elgrupo hidroxiloy una cola oporciónapolarformada por elcarbociclo de
núcleos condensados ylos sustituyentesalifáticos. Así, elcolesterol es una molécula tanhidrófoba que la
solubilidad decolesterol libre en agua es de 10-8
My,al igual que los otroslípidos, esbastante soluble en disolventesapolares como elcloroformo(CHCl3).
➢OBJETIVO
Determinar la concentración de colesterolen la yema de huevo por el método deLiberman-Burchard

BIBLIOGRAFÍA Pavia, Donald; Lampman, Gary; Kriz George. Introduction to organic laboratory techniques. Saunders
editores. 1976. Plummer, David. Bioquímica práctica. Mc Graw Hill. 1981. Rawn, D. J. Bioquímica. Tomo I. Edit
Interamericana. Mac Graw Hill. España 1989. Robyt, John; White Bernard. Bioquemical Techniques. Waveland Press. 1987.