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TIPOS DE CONTENEDORES Y

ANTICOAGULANTES UTILIZADOS EN LA
EXTRACCIÓN DE SANGRE PARA TOMA
DE MUESTRAS

Módulo Pre-Clínico bases para el laboratorio, Septiembre 2018


INTRODUCCION
La sangre está compuesta por dos fracciones: el 55% del total de la sangre corresponde a la fase
denominada acuosa o no celular, que a su vez está conformada de
90% de agua y un 10% de elementos en solución (proteínas,
aminoácidos, compuestos de desecho y sustancias inorgánicas).
El 45% restante de la sangre se conoce como fase celular (plaquetas,
glóbulos blancos y glóbulos rojos). Figura 1

Figura 1: Componentes de la Sangre

Cerca del 80% de los exámenes realizados en el laboratorio corresponde a exámenes procesados a partir de
muestras de sangre, principalmente desde la fracción acuosa, la cual denominaremos suero, si es recolectada
desde un paciente en el interior de un tubo sin anticoagulante, o plasma si la depositamos en un tubo que
contenga algún tipo de anticoagulante.

Frente a un trauma de la piel, el proceso de coagulación se


activa de forma instantánea (figura 2), culminando con la
formación de una malla de fibrina, que atrapa todos los
elementos celulares de la sangre. La punción venosa para
extraer sangre a un individuo, provoca que la cascada de la
coagulación se inicie en el sitio de punción o en el interior del
contenedor donde ésta se extrae, cascada que si no es
detenida terminará con la formación de un coagulo. Un
anticoaugulante es una sustancia o elemento que in vitro
evitará la formación del coágulo de fibrina.
Figura 2: Cascada de la Coagulación sanguínea
Para el laboratorio el uso de anticoagulantes es muy relevante ya que, nos permiten realizar análisis en los
cuales es necesario trabajar con muestras no coaguladas, por ejemplo exámenes realizados en el área de
hematología, endocrino entre otras.

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CONTENEDORES Y ANTICOUAGULANTES DISPONIBLES
Hay dos clases de anticoagulantes, los de tipo endógeno producido por el organismo y los exógenos que no
son producidos por el organismo, dentro de estos últimos los denominados de no uso terapéutico, son
utilizados en toma de muestra para la recolección de sangre venosa para la realización de exámenes de
laboratorio.

Su mecanismo de acción varía según su tipo, pudiendo estar relacionado con la inhibición de ciertos factores
de la coagulación ó inhibiendo al calcio, cofactor crítico, para que esta reacción fisiológica ocurra.
Adicionalmente algunos de los anticoagulantes usados para el trabajo de laboratorio deben no provocar o
evitar la hemólisis de los glóbulos rojos, la que corresponde a la ruptura de los mismos, o no debiesen alterar
la morfología de las células sanguíneas o conservar los factores de la coagulación.

Existen diferentes contenedores para la extracción de sangre, que varían en su función para el
análisis y el tipo de aditivo o anticoagulante incorporado en este. Para diferenciarlos a simple vista
se emplea un código de colores regulado por la norma ISO 6710, norma que específica los
requisitos para los contenedores de sangre con o sin vacío de un solo uso.

Con/sin
Aditivo

Con/sin Aditivo

CITRATO

EDTA

Figura 4: Clasificación ISO 6710, para


HEPARINA contenedores de sangre

CITRATO

FLORURO

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1. TUBOS CON ANTICOAGULANTE
1.1 EDTA Ácido etilen-diamino-tetra-acético

El EDTA es una agente secuestrante o quelante de varios iones, entre los que destaca el Calcio,
Magnesio, Molibdemo, formando un anillo heterocíclico entre el anticoagulante, que representa al
ligando, quie se coordina con un ión ubicado en el centro

Figura 5: Anillo Heterocíclico formado por EDTA y Calcio


COLOR: LILA (ISO 6710)
USOS : Se utiliza para el estudio cuantitativo y cualitativo de las células sanguíneas, para el
recuento y estudio de su morfología (hemograma) en exámenes como Hemograma, recuentos
celulares (plaquetas, glóbulos blancos entre otros), también en estudios Inmunohematológicos,
como la determinación de grupo sanguíneo ABO y Rh y en la determinación de parámetros como la
Insulina, HbA1c, entre otros.

PRESENTACIÓN: se utiliza como sal disódica o tripotásica del


ácido etilendaimintetracético (EDTAK3), presentándose en forma
líquida o como liofilizado. Figura 6
Una gota de EDTA (50 µL) impide la coagulación de hasta 6 ml de
sangre (0.342 mol/L.

Figura 6: Tubos con EDTA según ISO 6710

CARACTERÍSTICAS: Es uno de los anticoagulantes exógenos por excelencia, ya que cumple con los
parámetros para ser considerado un buen anticoagulante, ya que no alterara la morfología de las
células sanguíneas y asegurar ésta por 24 horas si las muestras son conservadas a 4°C.

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1.2 CITRATO DE SODIO

El Citrato de Sodio es una agente precipitante de del calcio extracelular presente en la sangre, ya
que impide su impide su ionización, volviéndole insoluble en el interior del contenedor e
impidiendo así su participación en la cascada de coagulación como cofactor para los complejos que
actúan como activador del factor X.

Figura 7: Estructura química del citrato de sodio

COLOR : NEGRO (exclusivo VHS) y CELESTE (exclusivo pruebas de coagulación) (ISO 6710)

USOS : Exámenes hematológicos como VHS, tiempos de coagulación TP, TTPK, concentración de
factores, recuento de plaquetas, también se usa en el área de Inmunohematología (Grupo-Rh),
entre otros.

PRESENTACIÓN: Sal trisódica, 3.2% (0,105-0,109 M), la


proporción más utilizada corresponde a la relación 9
partes de sangre por 1 de citrato, en presentación
liquida.

Figura 8: Presentación de tubos con citrato según ISO 6710

CARACTERISTICAS: Tiene alto poder anticoagulante, dado que al precipitar el calcio e impedir su ionización,
este ión no se encuentra disponible para realizar sus funciones fisiológicas, dejando a todos los factores de la
cascada de la coagulación libres en el plasma para su determinación en el laboratorio ya sea de función y/o
concentración.

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1.3 HEPARINA

Único anticoagulante endógeno utilizado en toma de muestras, es un mucopolisacarido que posee


grupos sulfatos, cuya acción es inhibir el paso de protrombina a trombina en la cascada de la
coagulación, favoreciendo la acción de la ATIII, que es el anticoagulante natural que regula a esta
etapa de la cascada.

Figura 6: Estructura química de la HEPARINA

COLOR : VERDE (ISO 6710)

USOS : Usado para la determinación de parámetros bioquímicos y endocrinos

PRESENTACIÓN: como heparina de sodio o heparina de litio,


generalmente en forma líquida en el interior del tubo.

Figura 9: Presentación de tubos con Heparina según ISO 6710

CARACTERISTICAS: Permite la determinación de una gran variedad de parámetros bioquímicos y


endocrinos, sin embargo es mayoritariamente utilizada para la determinación de iones como Na, K,
CL, Ca, entre otros.

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2. TUBOS CON MEZCLAS DE ANTICOAGULANTE
TUBO GRIS: FLORURO DE SODIO + EDTA

FLORURO DE SODIO: No es una anticoagulante


como tal ya que no tiene función sobre la
cascada de la coagulación o es muy leve. Su
acción se relaciona con la inhibición de la vía
glicolítica del glóbulo rojo, por la inactivación
sobre enzima enolaza, que realiza el paso de 2-
fofoglicerato a fofoenolpiruvato, dejando así
estables los niveles de glucosa para ser
determinados en el laboratorio y que no sean
afectados por el metabolismo del glóbulo rojo, el
cual sigue ocurriendo en el contenedor.
Figura 10: Estructura química del Floruro de Sodio

COLOR : GRIS (ISO 6710)

USOS : Usado para la determinación de glicemia (no


excluyente)

PRESENTACIÓN: Sal monosódica, se usa en


combinación con EDTA para mejorar su capacidad
anticoagulante. Generalmente su presentación es
líquida.

Figura 11: Presentación de tubos con Floruro de Sodio según ISO 6710

CARACTERISTICAS: El floruro de sodio mantiene estable los niveles de glicemia hasta por 6 semanas post-
extracción. Sin embargo de no contar con este tipo de contenedor en el laboratorio, este parámetro puede
ser determinado desde suero, antes de 1 hora de extraída la sangre

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3. TUBOS SIN ANTICOAGULANTE
3.1 TAPA ROJA
Se usa para el estudio de determinaciones en suero, este tipo de tubo no lleva ningún
anticoagulante, por el contrario su pared interna está recubierta por aspersión con una
sustancia activadora del coágulo que facilita y acelera el proceso de retracción del coágulo. Se
podría indicar entonces que representa a un contenedor estéril para la sangre.

COLOR : ROJO (ISO 6710)

ACCION: Permitir la formación del coagulo de manera natural en 1 hora


aproximadamente o en tubos con sustancia activadora conseguirlo
entre 10-15 minutos.

Figura 12: Presentación de tubos sin anticoagulantes según ISO 6710

USOS : Usado para la determinación de todos los parámetros bioquímicos y endocrinos, tomando
los resguardos necesarios de acuerdo a la biodisponilidad del analito en la sangre, por ejemplo:
glicemia, insulina entre otros.

Exámenes asociados:
 Perfil Bioquímico: corresponde a la determinación de entre 13 y 16 parámetros de forma
simultánea en un individuo, que permite evaluar varios sistemas fisiológicos: glicemia, ácido
úrico, albúmina, globulinas, bilirrubina total, BUN, urea, fosfatasas alcalinas, fósforo, calcio,
colesterol, proteínas totales, transaminasas (GOT( aspartato aminotransferasa) y LDH
(deshidrogenasa láctica)
 Electrolitos plasmáticos
 Glicemia y Test de sobrecarga de glucosa * (tubo de preferencia a usar el GRIS)
 Perfil Lipídico: determinación simultanea de 4 parámetros sanguíneos relacionados con el
metabolismo de colesterol del individuo: Colesterol total, triglicéridos, col HDL, col LDL
 Perfil Hepático: determinación de entre 9 parámetros de forma simultánea en un individuo,
que permite evaluar la función hepática del paciente; GOT, GPT, GGT, Bilirrubina total e
indirecta, LDH, Fosfatasa alcalina + Protrombina (tubo celeste)
 Hormonas: TSH, T3, T4, estradiol, FSH, Insulina*(tubo LILA preferencia), BHCG, entre otras
 Niveles de Drogas
 Determinación de anticuerpos y niveles de complemento.

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3.2 TAPA AMARILLA
Este contenedor se usa también para el estudio de determinaciones en suero, al igual que el tubo
rojo este tipo de tubo no lleva ningún anticoagulante, sin embargo presenta en el fondo una
gelatina (gel separador) el cual tiene doble función:

a) Acelerador de la formación del coagulo, en 5-10 minutos, la cual ocurre de manera natural en 1 hora
aproximadamente.
b) Post centrifugación el del se interpone entre el suero y el coagulo, creando una barrera física de
separación entre ambos, ideal para realizar transporte de muestras al laboratorio, cuando existe más
de 1 hora de distancia entre un lugar y otro

En algunas ocasiones podemos encontrar su pared interna recubierta también con una sustancia
activadora del coágulo que facilita y acelera el proceso de retracción del coágulo.

COLOR : AMARILLO (ISO 6710)

Figura 13: Presentación de tubos con gel según ISO 6710

USOS : Usado para la determinación de todos los parámetros bioquímicos y endocrinos al igual que el tubo
rojo, pero su uso principal está relacionado con el gel separador en su interior, ya que este otorga una
separación física en el interior del tubo entre la masa globular y el suero del paciente, lo que asegura un
correcto transporte para las muestras de sangre al laboratorio, cuando este último se encuentra a más de
una hora desde el lugar donde se extrajo la sangre.

Exámenes asociados:
Corresponden a los mismos descritos para el tubo son anticoagulante, pero con la salvedad que este tubo es
ideal que se utilice cuando se requiere transportar las muestras, en ocasiones en que el laboratorio y el
punto de toma de muestra quedan en dos lugares físicos diferentes y distanciados.

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BIBLIGRAFíA

- Henry, R., Clinical Chemistry. Principles and Technics (1964), IÓVINE Enrique; SELVA
Alejandro: El laboratorio en la clínica. Tercera edición. Buenos Aires: Panamericana, 1985.
- Manual de Toma de Muestras Laboratorio Clínico. Hospital Puerto Montt. 2010-2014
- Sistemas pre-analíticos, catálogo de productos para extracción de sangre y otros fluidos
empresa BD

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