UNIVERSIDAD PRIVADA FRANZ TAMAYO

FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD

CARRERA DE BIOQUÍMICA Y FARMACIA
ASIGNATURA BIOQUIMICA
GV. EA.D.08

1. OBJETIVOS.
 Conocer los cuadrantes de la Cámara de Neubauer para el recuento de leucocitos.
 Explicar las Morfología y funciones de cada uno de los Leucocitos.
 Conocer el Mecanismo de Acción de la solución de Turck.
 Conocer el mecanismo de acción de las Tinciones para Leucocitos.
 Dominio de los valores de referencia.
2. CONCLUSIONES.
Se concluye que para el recuento de leucocitos solo se pueden observar en los cuadrantes superior
izquierda y derecha y inferior izquierda y derecha (1,2,3,4) con gran cantidad de luz adecuada y un objetivo
de 10x.
Neutrofilos. De 3-5 lobulaciones, su vida es de 4-8 horas y su núcleo es fragmentado. su citoplasma rosado
claro, a veces vacuolado o con pequeños gránulos rosáceos y su función principal es fagocitar ya que son de
segunda línea.
Eosinofilos. Presenta de 2-3 lobulaciones cromatina poco compacta en el citoplasma granulos muy
acidofilos y a veces se produce desgranulacion, su tamaño es aproximado de 15 micro metros y su función
principal es antiparasitarios.
Basofilos. presenta gránulos con núcleo mas grueso (cubre todo el núcleo) sus gránulos son ácidos su
tamaño aproximado 15-18 micro metros su cromatina es poco compacta en el citoplasma sus gránulos son
muy basofilos de color azul violeta intenso su función es antialérgicos.
Linfocitos. Existe de tres tamaños (pequeño mediano y grande), no presenta granulaciones, células con
cromatina contiene condensadas, su tamaño aproximado es de 7-8 micro metros, puede tener
granulaciones escasas, núcleo redondo oval o ligeramente escotado, se tiñe de color violeta, su estructura
compacta y su función principal es de respuestas especificas.
Monocitos. Son células grandes mono nuclear en forma de (riñón o herradura), presenta vacuolas, su
citoplasma basofilo, tiene numerosas granulaciones pequeñas y distribuidas regularmente (no se ven con
aumentos bajos), color violeta claro no compacto, mide aproximadamente entre 15-20 micro metros y su
función principal es fagocitar ya que son de primera línea de defensa.
Es una solución acuosa de Ácido Acético AL 3%, con una cantidad de Azul de Metileno suficiente para dar un
color Azul pálido. La solución hipotónica de Ácido Acético destruye los eritrocitos. El colorante Azul de
Metileno permite observar mejor los glóbulos a los que tiñe ligeramente.
Esta solución tiene por objeto eliminar los hematíes por hemólisis y resaltar ligeramente el núcleo de los
leucocitos. La dilución de que habitualmente se realiza es de 1/20, empleándose normalmente 20 μL de
sangre en 0,38 mL de líquido de Turck.
La tinción de panóptico rápido es un método de tinción diferencial que permite la observación de las células
sanguíneas.
Debido a la interacción entre los colorantes se pueden diferenciar los núcleos y los gránulos de color violeta. Se
trata de una modificación de la tinción de Romanowsky, dando un procedimiento basado en inmersiones mucho
más rápido.
para su mecanismo de acción se debe seguir los siguientes pasos como alcohol por 2 minutos, eosina por 30
segundos, azul de metileno 20 segundos todo estos pasos se debe escurrir con papel toalla o papel filtrante y
posteriormente lavar con agua y dejar secar.
se pudo comprender que los dominios de valores de referencia son aproximados, ya que depende mucho
de la altura en la que la persona vive a nivel de La Paz los valores son diferentes a una persona que vive a
nivel del Mar (a mayor altura menor presión y a menor altura mayor presión)
3. PROCEDIMIENTO (FLUJOGRAMA)
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RECUENTO DE A este adicionar 20 uL de Con ayuda de la micropipeta

GLOBULOS muestra de sangre
anticoagulada
cargamos a la camara de
neubauer en ambos reticulos
BLANCOS
Extraer 2 ml de sangre y Llevamos este tubo al bortex
mezclar por inmercion durante aproximadamente 20 min. llevamos la camara al
fuertemente (o mas) a velocidad fuerte microscopio y enfocamos

Pipetear 2ml de solucion de Sacamos del bortex y verificamos realizamos el recuento con el
TURCK e introducir a un que la muestra se haya objetivo de 10X en los cuatro
tubo de hemolisis homogeneizado cuadrantes correspondientes

RECUENTO TINCION el aceite tiene que estar

una vez ya seca la antes de ver la placa le
DIFERENCIA muetra procedemos PANOPTICO añadimos una gota de aceite entre la cola y el cuerpo
del extendido
a la tincion RAPIDO de inmercion
L

con la misma muestra de Colocamos la muestra en

una vez ya seca la muestra enfocamos con el
sangre con anticoagulante Dejamos secar el frotis alcohol por 1 min. y dejamos
escurrir llevamos al microscopio objetivo de inmercion

Con la ayuda de un capilar cuidando que se puedan

tomamos una gota de diferenciar la cabeza, el colocamos en eosina por dejamos secar en forma Realizamos la identificacion
sangre cuerpo y la cola 40 seg y dejamos escurrir vertical y el recuento de leuccitos

Depositamos una gota de con la ayuda de otro

seguidamente colocamos en y labamos en agua anotamos los resultados de
sangre a un porta objetos portaobjetos (nuevo)
azul de metileno por 30 seg. corriente las dos practicas
hacemos el extendido

4. CALCULOS Y RESULTADOS.
(PACIENTE HOMBRE EDAD 20 AÑOS)

 METODO MICROHEMATOCRITO.
Las dos muestras de capilares con la lectura de regla fueron entre 52 y el otro 52

Valor referido es =52 %

 METODO CIANMETAHEMOGLOBINA.
Hb total = concentración de Hb (gr/ml) x volumen sanguíneo (ml).
HB = (0.543/0.540)*15 =15.083 g/dL
HB = 15083.3 mg/dL

 RECUENTO DE ERITROCITOS.
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Dilucion= Vol. total /vol muestra

5 ml-- 5000micro litros

(5020uL/20 uL)=251 ---------------------- una dilución es 1/251

Fd.=(dilución* volumen)
volumen es = 0.02 mm3
Fd = (1/251)*0.02
Fd = 251/0.02
Factor de dilución = 12550
Total conteo 104+107+102+96+118=527
527*12550=6613850 Cel/mm3
6613850 Cel/L

 VELOCIDAD DE ERITROSEDIMENTACION.
mm/hora

5. CUESTIONARIO.
5.1. Esquematice las etapas de maduración del neutrofilo, a partir de la Célula Madre Pluripotencial.

5.2. Explique el mecanismo de acción de la solución de TURCK

Esta solución tiene por objeto eliminar los hematíes por hemólisis y resaltar ligeramente el núcleo de los leucocitos. La dilución
de que habitualmente se realiza es de 1/20, empleándose normalmente 20 μL de sangre en 0,38 mL de líquido de Turck.
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Es una solución acuosa de Ácido Acético AL 3%, con una cantidad de Azul de Metileno suficiente para dar un color Azul
pálido. La solución hipotónica de Ácido Acético destruye los eritrocitos. El colorante Azul de Metileno permite observar
mejor los glóbulos a los que tiñe ligeramente.
5.3. Describa la morfología de los leucocitos maduros. (N,E,B,L y M)
Neutrófilos.- Los neutrófilos defienden al organismo contra infecciones bacterianas o por hongos. Usualmente son los
primeros en responder a una infección microbiana; su actividad y muerte en gran número forman el pus. Tienen un
núcleo multilobulado que puede asemejar múltiples núcleos, de ahí se deriva el nombre leucocito polimorfonuclear. El
citoplasma puede parecer transparente debido a los gránulos que se tiñen color lila pálido. Los neutrófilos se encargan
de fagocitar bacterias y están presentes en grandes cantidades en el pus. Los neutrófilos son el tipo celular más
encontrado en las fases tempranas de la inflamación aguda. Conforman del 60 al 70% de los leucocitos totales en la
sangre del ser humano. La vida media de un neutrófilo circulante es de aproximadamente 5.4 día.
Eosinófilos.- Los eosinófilos ante todo lidian con las infecciones parasitarias. También son las células inflamatorias
predominantes durante una reacción alérgica. Las causas más importantes de eosinofilia incluyen alergias como: asma,
rinitis alérgica y urticaria; así como infecciones parasitarias. En general, su núcleo es bi-lobulado. El citoplasma está
lleno de gránulos que con tinción de eosina asumen un color rosáceo-anaranjado característico.
Basófilos.- Los Basófilos son principalmente responsables de las respuestas alérgicas ya que liberan histamina
provocando vasodilatación. Su núcleo es bi- o tri-lobulado, pero es difícil de detectar ya que se oculta por el gran
número de gránulos gruesos estos gránulos son característicamente azules bajo la tinción.
Linfocitos.- Los linfocitos son más comunes en el sistema linfático que en el torrente sanguíneo. Se distinguen por un
núcleo que se tiñe fuertemente y cuya locación puede o no ser excéntrica y por tener poco citoplasma. Los linfocitos
incluyen:
Células B que producen anticuerpos capaces de unir, bloquear y promover la destrucción de patógenos así como de
activar complemento.
Células T: poseen un receptor de células T alternativo. Se encuentran más comúnmente en tejidos que en sangre.
Célula Natural Killer: célula capaz de matar células del organismo, se puede llevar a cabo cuando células del organismo
están infectadas por un virus o son cancerosas.
Monocitos.- Los monocitos comparten la función de fagocitosis con los neutrófilos son más longevos y además, una
función extra: presentar partes de patógenos a linfocitos T para que éstos puedan ser reconocidos de nuevo y ser
eliminados. Los monocitos abandonan el torrente sanguíneo para convertirse en macrófagos de tejido, que se
encargan de remover restos de células muertas y de atacar microorganismos. A diferencia de los neutrófilos, los
monocitos son capaces de reemplazar su contenido lisosomal y se cree que su vida activa es mucho más larga. Su
núcleo tiene forma de riñón y no tienen gránulos y contienen abundante citoplasma.
Leucocitos fijos
Algunos leucocitos migran a los tejidos del organismo para residir ahí permanentemente y no en la circulación
sanguínea. A menudo, estas células tienen nombres específicos dependiendo de en qué tejido se instalen; un ejemplo
son los macrófagos fijos de hígado, conocidos como células de Kupffer. Estas células siguen jugando un papel
importante en el sistema inmune.
Cayado.- Es el granulocito en banda. Mide de 10m a 14m, núcleo condensado que puede presentar una ó dos
constricciones, pero no tiene puente de cromatina. El citoplasma presenta gránulos específicos e inespecíficos,
membrana celular lisa, citoplasma de color ligeramente rosado dependiendo de la coloración.
5.4. Explique el mecanismo de acción de 3 factores estimulantes, del proceso de la Leucopoyesis.
GM-CSF.- El factor estimulante de colonias de granulocitos y monocitos es la principal citoquina que regula la
granulopoyesis, proceso que permite la generación de neutrófilos por la presencia de gránulos con tinción
característica con colorantes. Dentro de los granulocitos la población mayoritaria son los neutrófilos, linaje celular
esencial para el sistema inmune innato, cuya principal función es el despliegue de una defensa multifacética para
combatir los microbios a través de la liberación de proteasas y especies reactivas del oxígeno
IL-1.- La interleuquina 1 es una citoquina inflamatoria clave, dado que ejerce importantes acciones en casi todos los
órganos. Además, activa rápidamente los mecanismos de inmunidad innata y es un estimulante potente de la
hematopoyesis y del sistema inmune adaptativo. También tiene una función muy amplia aunque algo más limitada.
Se trata de un potente inductor de la síntesis de interferón gamma que a la vez aumenta la actividad citolítica de los
linfocitos citotóxicos y de las células naturalmente asesinas. Además, regula el desarrollo y diferenciación de linfocitos
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T, habitualmente a un patrón colaborador tipo 1. Probablemente participe en la fisiopatología de las enfermedades

inflamatorias crónicas.
IL-6.- La interleuquina 6 es producida por diversos tipos celulares: monocitos, macrófagos, linfocitos T y B, etc. Los
principales estímulos para su síntesis y liberación son las infecciones por ciertos microorganismos, particularmente
virus, bacterias, la acción de otras citocinas, y el factor de crecimiento derivado de las plaquetas. La IL-6 y el TNF-α
actúan sobre cascadas inflamatorias y sobre la inmunidad innata. Su bloqueo inhibe cascadas inflamatorias y
mecanismos de respuesta innata inespecíficos.
La IL-6 también actúa sobre la inmunidad adaptativa, donde resulta esencial para la diferenciación de los linfocitos
Th17. Su bloqueo inhibe la diferenciación celular Th17, células clave en la patología de la AR.
5.5. Hallar los valores absolutos del recuento deferencial que realizo en la practica.

6. BIBLIOGRAFIA.

fundamento de serie roja. (internet).2014 (citado el 10/04/2018). Recuperado a partir de:

http://deliamm96cuadernopracticashema14.blogspot.com/2015/02/practica-calculo-de-los-indices.html
determinación de los valores de la serie roja (globulos rojos hemoglobina y hematocritos). (internet).2014
(citado el 10/04/2018). Recuperado a partir de:
http://repositorio.umsa.bo/bitstream/handle/123456789/558/TN993.pdf?sequence=1&isAllowed=y
determinación de hemoglobina. 2014 (citado el 10/04/2018). Recuperado a partir de:
http://jennynerigom.blogspot.com/2014/03/hemoglobina.html
conteo de eritrocitos y su fundamento. (internet).2014 (citado el 10/04/2018). Recuperado a partir de:
healthlibrary.uchospitals.edu/Spanish/DiseasesConditions/Pediatric/Blood/90,P05425