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Primeira aula

• Apresentação da Disciplina

• Características do sangue

• Coleta de sangue

• Extensão sanguínea e coloração

• Hemograma

Profa Elvira Shinohara


Características do sangue
• Tecido líquido e renovável
• Plasma

Células sanguíneas
• Eritrócitos
• Leucócitos
• Plaquetas

Tipos de leucócitos
• Neutrófilos
• Eosinófilos
• Basófilos
• Linfócitos
• Monócitos
Função do sangue

• Transporte (O2, CO2, nutrientes, metabólitos, etc)


• Defesa (fagocitose)
• Homeostase (temperatura, controle eletrolítico, etc)
Células sanguíneas

• Eritrócitos ou Hemácias ou Glóbulos vermelhos

• Leucócitos
Neutrófilos
Eosinofilos

integral 2012
Disciplina de Fisiologia do
Sistema Hematopoético,
Granulócitos

Basófilos
Linfocitos
Monócitos Agranulócitos

• Plaquetas
Como visualizamos estas células?

• Extensão sanguínea
• Coloração da extensão sanguínea
Células sanguíneas
Células sanguíneas
Hemácias

Eosinófilo Neutrófilo Segmentado Linfócito

Plaquetas
Células sanguíneas

Monócito Linfócito

Hemácias
Plaquetas
Células sanguíneas

Basófilos

Fonte: Hoffbrand & Pettit, 1991


Células sanguíneas
Células sanguíneas
Volume sanguíneo nas mulheres

Volume de sangue nas mulheres 61,9 mL/kg

Exemplo:
Mulher de 55 kg (peso corpóreo)

Logo:
• Volume de sangue 3.404 mL
• O volume total de eritrócitos corresponde a 24,8 ml/kg de peso, ou
1.362 mL
(usou o Ht=40% para este cálculo)
Volume sanguíneo nos homens

Volume de sangue nos homens = 62,4 mL/kg

Exemplo:
Homem de 75 kg (peso corpóreo)

Logo:
• Volume de sangue 4.680 mL
• O volume total de eritrócitos corresponde a 28,1 ml/kg de peso,
ou 2.106 mL
(usou o Ht=45% para este cálculo)
Coleta do sangue
Locais de coleta de sangue
Punção venosa
Tubos à vacuo para coleta

A cor da tampa indica qual anticoagulante está sendo utilizado


Cor roxa = EDTA
Cor cinza = fluoreto de sódio
Cor azul = citrato de sódio
Cor verde = heparina
Cor vermelha/marrom = sem anticoagulante
Anticoagulantes utilizados em hematologia

EDTA
• K3EDTA e K2EDTA são os anticoagulantes mais adequados para a
rotina hematológica (hemograma)
• EDTA quela o cálcio do sangue

• É utilizado na seguinte proporção: 10 µL de anticoagulante/1mL de


sangue.

Vantagens:
• não altera a morfologia das células (desde que a proporção
anticoagulante/sangue seja mantida)

• não dilui o sangue e impede a agregação plaquetária


Anticoagulantes utilizados em hematologia

CITRATO DE SÓDIO
• É o anticoagulante de escolha para os testes de coagulação e prova
de agregação plaquetária.
O citrato de sódio reage com o cálcio formando um composto
insolúvel.

• É utilizado na seguinte proporção:


1 mL de anticoagulante/ 9 mL de sangue.
ou
0,5 mL de anticoagulante/ 4,5 mL de sangue

• Desvantagem: altera a morfologia das células e dilui o sangue (uma


parte de anticoagulante para 9 partes de sangue).
Anticoagulantes utilizados em hematologia

HEPARINA
• A heparina age pela formação de um complexo com a
antitrombina III plasmática, que inibe a trombina e outros
estágios dos fatores de coagulação

Vantagens
• não altera a morfologia das células e não dilui o sangue

• Desvantagem: o preço do anticoagulante é maior do que o EDTA


EXTENSÃO SANGUÍNEA
análise da morfologia é essencial para o diagnóstico
Plasma

Células sanguíneas
Células sanguíneas
Extensão Sanguínea
COLORAÇÃO SANGUÍNEA
Corantes do Tipo Romanovsky

• São misturas que contem eosina e azul de metileno


dissolvidos em metanol

• Na solução envelhecida (após dias do preparo do


corante), o azul de metileno se oxida em gradações
diferentes, originando os azures de metileno
Coloração do tipo Romanowsky

• O corante de Romanowsky (neutros) é uma solução


alcoólica de um complexo de eosinato de azul e azures
de metileno

• A diferença entre os vários corantes derivados do corante


primitivo de Romanowsky acha-se na proporção que se
emprega de azul-de-metileno e de eosina, ou no método
de tratamento do azul-de-metileno, antes de sua
combinação com a eosina
Princípio da coloração

• Os componentes Azures em sua forma de dímeros ligam-


se a moléculas aniônicas, exemplo os grupos fosfato do
DNA

• Os grupamentos ácidos dos ácidos nucleicos e proteínas


do núcleo celular e do citoplasma tem afinidade pelo
corante básico Azul- de -Metileno
Princípio da coloração

• A eosina na forma de monômero se liga aos sítios


catiônicos das proteínas

• A presença de grupamentos básicos na molécula de Hb


resulta na afinidade por corantes ácidos, corando-se
pela eosina
Principio da coloração

CORANTE CÉLULA

Azul de Metileno cora Núcleo (DNA)


(básico) (ácido)

Eosina cora Hb
(ácido) (básico)
Nomenclatura usual

• Coloração Ortocromática: a célula cora-se com a mesma


cor do corante

• Coloração Metacromática: a célula toma uma cor


diferente daquela do corante
Nomenclatura usual

• Estruturas celulares que se coram em pelo Azul de


Metileno são chamadas de basófilas (corando-se de azul)

• Estruturas celulares que se coram pela Eosina são


chamadas de acidófilas (corando-se em rosa)
Tipos de corantes de Romanovsky

• May-Grunwald ou Jenner,
• Giemsa
• Leishman
• Wright
(Podem ser encontrados, no comércio, na forma de reagentes
ou em soluções já preparadas pelo fornecedor)
Células sanguíneas
Contagem relativa dos leucócitos
• É realizada através da análise morfológica dos leucócitos, contando no
mínimo 100 leucócitos, diferenciando célula a célula.

Campo muito grosso Campo adequado Campo muito fino


Contagem relativa dos leucócitos
• É realizada através da análise morfológica dos leucócitos, contando no
mínimo 100 leucócitos, diferenciando célula a célula.

Campo muito Campo adequado Campo muito fino


grosso
Campos de leitura na extensão sanguínea

Corpo da extensão sanguínea


Região grossa da extensão (cabeça)

Não deve ser feito contagem das células


nesta região da extensão sanguínea
Região da cauda (muito fina)

Não deve ser feito contagem das células nesta região da extensão sanguínea
Campos que NÃO devem ser analisados na
extensão sanguínea

Região muito fina


Cauda da extensão

Região muito grossa


Cabeça da extensão sanguínea
Contagem relativa dos leucócitos
• É realizada através da análise morfológica dos leucócitos, contando no
mínimo 100 leucócitos, diferenciando célula a célula.

A – Cerca de 25 células
B- Cerca de 50 células
Contagem relativa dos leucócitos
As células não tem distribuição uniforme na extensão sanguínea

Cabeça Corpo Cauda

Os linfócitos predominam no meio da extensão

Neutrófilos e monócitos predominam nas margens e na cauda


Problemas na coloração

• Presença de precipitados do corante na extensão sanguínea


corada
• Uso de lâminas sujas com gordura
• Secagem durante o período de coloração
• Lavagem inadequada ao término da coloração
• Filtração inadequada dos corantes (vai aparecer os
precipitados de corante)
Precipitados de corante
Coloração inapropriada
HEMOGRAMA

Plasma

células
HEMOGRAMA

 Exame hematológico mais solicitado

 Consiste na análise qualitativa e quantitativa das


células sanguíneas

 Fornece parâmetros para controle e auxílio no


diagnóstico das anemias, de vários processos
infecciosos e de alterações no número das plaquetas
Hemograma

• Eritrograma (avalia série vermelha)


• Leucograma (avalia série branca)
• Contagem de plaquetas
Exemplo de um laudo de hemograma

eritrograma

leucograma

Contagem de
plaquetas
Bibliografia recomendada

. Dacie & Lewis. Practical Haematology. 8a Edition. Churchill


Livingstone.

• Stiene-Martin EA, Lotspeich-Steininger, Koepke JA – Clinical


Hematology- Principles, Procedures, Correlations. Editora
Lippincott, 2edição, 1998.

• Lorenzi TF, D’Amico E, Daniel MM, Silveira PAA, Buccheri V –


Manual de Hematologia – Propedêutica e Clínica. Editora Medsi 3
edição, 2003.