Universidad Nacional Autónoma de México

Facultad de Estudios Superiores Zaragoza

Química Farmacéutico Biológica
Laboratorio de microbiología general I

Práctica N. 8. Aislamiento y cuantificación de micro

organismos.

Equipo: 11 Grupo: 1652

Integrantes:
Arrollo Priscila
Mayoral Delgado Miguel Ángel
Sánchez Godínez Xochitl Yadira
Villegas de la Cruz Ana María
Asesor: QFB Georgina Bermejo Torres

Fecha de entrega: 7 de Septiembre de 2016.

Objetivo:

Al finalizar esta práctica los alumnos serán capaces de: dominar las técnicas más u
tilizadas en el aislamiento de microorganismos de diferentes fuentes.
Explicar el fundamento de la técnicas más utilizadas en el recuento microbiano: tur
bidimétrico, microscópico, dilución y vaciado en placa, filtración.

Procedimiento:

Resultados:

Cuadro 1. Muestra de jugo de naranja natural cultivado

en agar nutritivo y cuantificado por vertido en placa.
# de colonias cont
Dilución Número de bacterias
abilizadas

10-2 2 No se contabiliza

10-3 2 No se contabiliza

10-4 2 No se contabiliza
10-5 2 No se contabiliza
 Cuadro 2. Cuantificación bacteriana por método de asa
calibrada de muestra de jugo de naranja natural.
# de colonias cont
Agar Número de bacterias
abilizadas
EMB 88 88,000 UFC/µL

Calibre de asa empleada: 1 µL

88 UFC/µL (1000µL / 1mL)= 88,000 UFC/mL

Análisis de resultados:

Durante el desarrollo de esta práctica se cuantifico el número de microorganismos

presentes en una muestra de jugo de naranja natural para lo cual se utilizó el méto
do dilución y vaciado en placa así como el de asa calibrada.

En el anexo uno se pude observar las fotografías correspondientes a las dilucione

s realizadas.

Hubo un crecimiento bacteriano en las palcas, se observaron colonias pequeñas d

e color blanco, las cuales se sembraron con la muestra de jugo de naranja en 5 di
ferentes diluciones (10-2, 10 -3, 10-4,10-5 ) datos que se observan en el cuadro 1; la
formación las colonias en la parte inferior de la placa da indicios que se trata de b
acterias anaerobias poco exigentes nutricionalmente.

No fue posible hacer la dilucion de 10-6 ya que uno de los tubos que nos dieron es
taba vacío.

No fue posible cuantificar el número de microorganismos presentes, ya que este

método requiere un conteo de colonias entre 30-300, este intervalo ofrece una bue
na relación entre la rapidez del recuento y la precisión del resultado obtenido, por l
o que al ser un número menor de colonias contabilizadas no se puede conocer la c
oncentración de microorganismos presentes en cada dilución.

En cambio en la cuantificación bacteriana por método de asa calibrada de la muest

ra de jugo de naranja natural, se observó un excelente crecimiento en agar EMB c
omo se muestra en el cuadro 2, apreciándose colonias pequeñas de color morado,
dando un resultado de lactosa (+), ya que es un medio diferencial y selectivo, la fo
rmación de colonias hace referencia a bacterias Gram (-), se puede inferir que se t
rate de alguna enterobacteria ya que son bacterias Gram negativasno son exigent
es de fácil cultivo, anaeróbicos facultativos y fermentadores de carbohidratos en co
ndiciones anaeróbicas con o sin la producción de gas (en especial glucosa y lactos
a), y oxidadores de una amplia gama de substratos en condiciones aeróbicas, no s
e podría afirmar que especie en particular ya que se requeriría hacer otras prueba
s o alguna tinción para conocer con exactitud de que bacteria se trata.

Fue posible contabilizar por este método de asa calibrada ya que no se tiene una
un rango como referencia, como en la técnica de dilución y vaciado en placa.

Conclusiones:

Entre los dos métodos de cuantificación utilizados, el de asa calibrada fue mucho
más rápido y se pudo contabilizar el número de microorganismos ya que no hay re
stricción en el conteo.

Bibliografía:

1.-Delaat, A. Microbiología. 2 ed. México: Interamericana; 1985

2.-Bailey y Scott. Diagnostico microbiológico. 12 ed. Buenos aires; Médica p
anamericana; 2009

3.-Igraham J. Introducción a la Microbiología. Editorial Reverte; Barcelona: 1

998.

4. Stainer R. Igraham J. Wheelis, (et.al) Microbilogia. 2ª edición, Editorial

Reverte; Barcelona:1996.