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Materiales:
Materiales:
42 tubos eppendorf
1 micropipeta de 100-1000 µl
Balón aforado de 50 ml
Espátula
Probeta
Caldo MRS
Caldo BHI
Penicilina
Amoxicilina
Beaker de 250 ml
Para la preparación delas diferentes concentraciones enzimáticas se prepara una solución madre
con la mayor concentración requerida ( 700 mg/ml) para posteriormente realizar las diferentes
diluciones.
1. Preparación de la solución madre: se toman 35 gramos los cuales van a ser diluidos en un
balón aforado de 50 ml hasta completar su volumen final.
2. Concentración (700 mg/ml): se toman 5 ml de la solución madre y se transfieren a un tubo
eppendorf
3. Concentración (350 mg/ml): se toman 2.5 ml de la solución madre y se transfiere a un
tubo eppendorf el cual contiene 2.5 ml del caldo según lo requiera (BHI – MRS)
4. Concentración (175 mg/ml): se toman 1.25 ml de la solución madre y se transfiere a un
tubo eppendorf el cual contiene 3.75 ml del caldo según lo requiera ( BHI – MRS)
5. Concentración ( 0mg / ml): se agregan 5 ml del caldo según lo requiera ( BHI – MRS)
CONTROL NEGATIVO
6. Control positivo para Streptococcus Mutans según la literatura la concentración mínima
inhibitoria del microorganismos con la penicilina es de 0,5 - 10 µg/ml [1] [2] y para la
amoxicilina 0.5-0.12 µg/ml [1]
7. Control positivo para Lactobacillus Casei según la literatura la concentración mínima
inhibitoria del microorganismos con la penicilina es de 10 µg/ml y para la amoxicilina 10
µg/ml [3]
Repetir este procedimiento para cada microorganismos y extracto (S.mutans y L.casei) con su
respectivo caldo de cultivo por duplicado.
Referencia:
[3]