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La búsqueda alimentaria
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Revisión

Enzima extracción asistida de biomolecules como una aproximación a


tecnología de extracción novel: Una revisión
Shamraja S. Nadar, Priyanka Rao, Virendra K. Rathod⁎
Departamento de Ingeniería Química, Instituto de Tecnología Química, Matunga (E), Mumbai 400019, India

Un R T yo C L E yo N F O Un B S T R Un C T

Palabras clave: Un interés en el desarrollo de técnicas de extracción de biomolecules de varias fuentes naturales tiene en-
Biomolecules, extracción de arrugados en años recientes debido a sus aplicaciones potenciales particularmente para alimentarios y nutraceutical
Microonda de extracción de propósitos. La presencia de polisacáridos como hemicelluloses, almidón, pectina dentro de la pared de célula,
ultrasonido reduce la extracción efficiency de técnicas de extracción convencional. Técnicas convencionales también suffer de
Supercritical cosechas de extracción baja, tiempo inefficiency y calidad de extracto inferior debido a rastros de presente de
Inmovilización de
solventes orgánicos en ellos. De ahí, hay una necesidad de la extracción verde y novel métodos para recuperar
Enzima de la extracción
biomolecules. La revisión presente proporciona un holistic la idea a varios aspectos relacionó a enzima aided
extracción. Aplicaciones de enzimas en la recuperación de varios biomolecules como polyphenols, aceites,
polisacáridos, flavours y colorants ha sido destacado. Además, la ocupación de hyphenated tecnologías de
extracción pueden vencer algunos del sorteo importante- espaldas de enzima extracción basada como tiempo de
extracción más larga y uso desmesurado de solventes. Esta revisión también incluye hyphenated intensifitécnicas
de catión por coupling métodos convencionales con ultrasonido, mi- crowave, presión alta y supercritical dióxido
de carbono. La última sección da una idea encima aplicación de inmovilización de enzima como estrategia para
extracción de escala grande. Inmovilización de enzimas en magnéticos nano- las partículas pueden ser empleadas
para realzar el rendimiento operacional del sistema por uso múltiple de las enzimas caras que les hacen industrially
y económicamente factibles.

1. Introducción bacterial, antiviral, anti-enflammatory, anti-alérgico, antithrombotic, y


vasodilatory actividades junto con valores sensoriales y nutritivos
La fruta global e industria de procesamiento del vegetal está (Kris-Etherton et al., 2002). Phenolics Exhibe actividades
creciendo stea- dily debido al crecimiento de población, el adoptado antioxidantes debido a su libres radicales scavenging propiedades por
sano comiendo patrones por consumidores y los adelantos en suplentes cuando reduciendo agentes, donantes de hidrógeno, y singlet
administración de cadena del suministro y procesos de producción oxígeno quenchers (Alam et al., 2013; Gülçin et al., 2010). Terpenes Y
(Ignat et al., 2011; Santana-Mérida et al., 2012). Bioactive Los terpenoids como limonene, pinene, myrcene es presente de compuestos
compuestos en comidas están deviniendo populares debido a aromáticos en un número grande de especie de planta. Son
funcionalidad biológica especial y una concienciación aumentada de responsables para flavours y fragrances en plantas. Presente de
crecer preocupaciones de salud. Están producidos en las plantas pigmentos naturales en plantas es entre los productos más importantes
tampoco tan primarios o sec- ondary metabolitos qué está formado y poseer funciones biológicas diversas. Es sólo recientemente que una
como la planta crece. Los metabolitos primarios de las plantas concienciación de sus propiedades terapéuticas potenciales como
principalmente comprenden de lípidos, proteína y carbohy- drates. Los anticancer y anti-enflammatory los agentes están siendo descubrió.
metabolitos secundarios caen debajo tres grupos principales: phe- Además, bioactive los compuestos tienen gama ancha de aplicaciones
nolics, terpenoids y alcaloides (Oroian & Escriche, 2015). Entre el más endi fferent los sectores comerciales que incluyen farmacéuticos
deseable phytochemicals, los compuestos fenólicos están considerados (Agyei & Danquah, 2011; Kim & Mendis, 2006) e industrias
como una clase importante de biomolecules encontrado alimentarias (Dai & Mumper, 2010; Vieira da Silva et al., 2016).
abundantemente en plantas. Estos compuestos son responsables para Además polyphenolic compuestos, bioactive
multifarious biológicos effects incluyendo

Abreviaturas: RSM, metodología de superficie de la respuesta; AEE, extracción enzimática acuosa; UAEE, el ultrasonido asistió extracción enzimática; EUAE, enzymolysis–ultrasonido
extracción asistida; E-NCPE, la enzima asistió presión negativa cavitation extracción; HPE, extracción de presión alta; IL, líquidos iónicos; ILEAE, líquido iónico enzima basada
extracción asistida; MAE, microonda-extracción asistida; MAAEE, microonda-asistido extracción enzimática acuosa; SC-CO2, supercritical CO2; NMR, resonancia magnética nuclear;
NEPP, no-extractable poly- fenol; TPP, tres-fase partitioning; EATPP, la enzima asistió tres fase partitioning; HWE, extracción de agua caliente; SEM, escaneando microscopio de
electrón; MNP, magnético nanoparticle; FAE, ferulic ácido esterase

Autor correspondiente.
Dirección de email: vk.rathod@ictmumbai.edu.in (V.K. Rathod).

https://doi.org/10.1016/j.foodres.2018.03.006
Recibido 25 octubre 2017; Recibido en forma revisada 28 febrero 2018; Aceptado 4 Marcha 2018
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biomolecules como poly- saccharides, aceites, flavours y colorants de frutas,
Polisacáridos (dietéticos fibres) y péptidos (cryptides) muestra un im- vegetales y plantas junto a su bioactive propiedades. Más allá, esta revisión
pressive variedad de salud benefits y está utilizado como comida también destaca la integración de enzima extracción basada con ultrasonido,
funcional en- gredients (Hayes & Tiwari, 2015). Aun así, biomolecules microonda, super crítico fluid, tres extracción de fase y alto pres- seguro de
es disponible en plantas típicamente en concentraciones bajas. Métodos intensificar la extracción de industrially compuestos útiles
químicos de la síntesis de estos ingredientes está reclamando, laborioso
y cosecha baja presente (Wei et al., 2016). Para estas razones,
significant efforts ha sido hecho para extraerles de materiales de planta.
Varias estrategias de extracción han sido trabajadas a para
maximize extracción efficiency de bioactive macromoléculas de dif-
ferent partes de plantas. Una gama de solvente convencional métodos
de extracción basada predominantemente están siendo utilizados en el
sector alimentario para aislamiento de pharmaceutically compuestos
importantes. Aparte de soluble com- libras dentro de la pared de célula
de la planta, hay compuestos ató a la célula mura cuáles sondi fficulto
para lixiviar fuera utilizando métodos de extracción convencional por
solventes acuosos. La presencia de varios polisacáridos como
hemicelluloses, almidón, pectina en cantidades grandes dentro de la
pared de célula, reduce la extracción efficiency de técnicas de
extracción convencional (Acosta-Estrada et al., 2014; Ajila et al.,
2011). De ahí, técnicas de extracción convencional suffer de cosechas
de extracción baja, tiempo inefficiency y calidad de extracto inferior
debido a inevitable pre- sence de rastros de solventes orgánicos en
ellos. Por tanto, reclama la necesidad de la extracción más apropiada y
novel método para extraer el phytochemicals (Sasidharan et al., 2011).
Enzima extracción asistida de biomolecules de las plantas es una
alternativa potencial a métodos de extracción solventes
convencionales y está obteniendo más atención debido a ser un
efficient, benigno, sostenible y eco-tecnología de extracción amistosa.
Enzima-la extracción basada depende de la propiedad característica de
enzimas para llevar reacciones de delantero con cuidadosos specifi-
ciudad, región-selectividad y su capacidad de conducir reacciones bajo
condiciones suaves con la retención de su biológico potencies de
bioactive compuestos (Puri et al., 2012). El principio básico de enzima
la extracción asistida es la disrupción de pared de célula de la planta
por hydrolysing lo utilizando enzima como catalizador bajo
condiciones experimentales óptimas, para liberar los componentes
intracelulares. La pared de célula de la planta ata al sitio activo de la
enzima. Esto causa la enzima para cambiar su forma de modo que el
substrato fits a su sitio activo, por ello causando máximo en- teraction
entre el dos. Cambio en la forma de ventajas de enzima a breakage de
vínculos de la pared de célula, así liberando el activo con- stituents
fuera de él (Sheldon & furgoneta Pelt, 2013). Estos métodos de
extracción verdes no sólo reducen el requisito de solventes peligrosos
pero también requerir tiempo de extracción corta. Además, cuando esta
extracción está llevada a cabo temperatura controlada debajo
condición, es muy útil para ex- tracción de thermo-moléculas
sensibles como flavours, pigmentos, aceite, etc. Una gama ancha de
carbohidrato hydrolysing las enzimas es generalmente utilizadas
durante enzima extracción asistida. Cellulase Ha sido empleado para
extraer aceite de semilla de la uva de semilla de uva; pancreatin para
extraer lycopene de tomates (Dehghan-Shoar et al., 2011);
glucoamylase para extracción de proteína de alubias blancas (Bildstein
et al., 2008). Enzimas como xylanase, amilasa, papain, pectinase y
hemicellulase es también utilizado como pretreatment paso antes de
que extracción para maximize el extrac- tion cosecha (Sowbhagya &
Chitra, 2010). Condiciones operacionales como temperatura de
reacción, tiempo de extracción, pH de sistema, concentración de
enzima, y medida de partícula de substrato es crítica para el extrac-
tion proceso (M'hiri et al., 2014). También, enzima métodos de
extracción asistida han mostrado consumo de energía más baja, índice
de extracción más rápida, cosecha de extracción más alta y
recuperación más sencilla con uso solvente reducido cuando
comparado a métodos tradicionales (Puri et al., 2012).
La revisión presente proporciona una idea a las fuentes y technol-
ogies aquello ha sido desarrollado para mejorar la productividad
durante el aislamiento de biomolecules de las plantas que utilizan
enzimas. Este estudio pre- sents enzima extracción asistida de
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las proteínas son altamente insolubles en esta gama de pH, el
(Higo. 1). Presente de enzimas en el mercado es incapaz a biomolecule la liberación puede conseguir obstaculizada. Allí- fore,
completamente hy- drolyse los vínculos en pared de célula pH tiene que ser escogido de tal manera que no sólo obstaculice el
de la planta, por ello limitando la liberación de componentes funcionamiento de enzimas pero es también no en la gama del
activos de dentro lo. Ocupación del antedicho hy- phenated isoelectric punto de proteína (Nadar, Pawar & Rathod, 2017). Además
tecnologías de extracción vence algunos del drawbacks de pH, tem- perature es un parámetro que no puede ser desatendido
enzima extracción basada. La última sección trata la durante extracción. Operación en elevó las temperaturas causa una
ocupación de inmovilización de enzima cuando uno de las pérdida gradual en actividad de enzima junto con el inactivation de
estrategias en escala grande applica- tion de biomolecule proteínas y otro bioactives (Peterson et al., 2007). Operando la
extracción. reacción de extracción en temperaturas más bajas no expedite la
acción de enzimas posteriormente dirigiendo a menos extracción
2. Una visión general de enzimas y parámetros unffecting efficiency de biomolecules. Prolongando el remojando de las enzimas
extracción de biomolecules con extracto pueden mejorar el solubilisation de componentes de pared
de la célula. Aun así, en una escala grande setup incubación muy larga
Generalmente, biomolecules en los productos naturales el tiempo dirigiría a calidad de producto inferior y energía inefficiency
son presentes como insolubles o solubles conjugate (Babbar et al., 2016). En contraste, Zhang et al. Informado que aceite
(glycosides) formas. Para caso, la mayoría de el phenolics de colza.
(24% del contenido fenólico total) es presente en la forma de
acotado phenolics en las matrices alimentarias. La mayoría
del fenólico com- las libras son entrapped dentro a
polisacáridos de pared de la célula les gusta la celulosa,
hemicellulose y pectina qué está enlazado por hidrógeno e
interacciones hidrofóbicos vínculos. Otro éter de forma de
ácidos fenólico conexiones con lignina a través de su
hydroxyl grupos en el anillo aromático y conexiones de
éster con proteínas y carbohidratos estructurales a través de
su automovilísticos- boxylic grupos (Higo. 2). En el caso
de fl avonoids, son covalently enlazados por glycosidic
vínculo con azúcar moieties a través de un OH grupo (O-
glycosides) o a través de carbono–vínculos de carbono (C-
glycosides). Los taninos tienen la tendencia para formar
complejos fuertes con proteínas. Por ello en- zymes como
cellulase, hemicellulase, pectinase y protease está empleado
a solubilise la pared de célula de la planta así acelerando
el re- arrendamiento de intracelular biomolecules.
Hydrolases Como lipasas, función en la presencia de agua
dentro del sistema de reacción. Además, ellos también
función en la presencia de otros substratos como
alcoholes, aminas y oximes (Hari Krishna & Karanth,
2002). Durante el aislamiento de fl avonoids de Ginkgo
biloba, Penicillium decumbens cellulase, estuvo encontrado
a outperform Trichoderma reesei cellulase en la
presencia de maltosa como el glycosyl donante (Sharma et
al., 2016). Cellulases (Como endoglucanases,
cellobiohydrolases, β-glucosidases), hemicellulases (como
endoxylanases y β -xylosidases) y pectinases (como
pectintranseliminase, polygalacturonase, y pectinesterase)
puede ser empleado en el aislamiento de aceites y proteínas.
Estas enzimas aleatoriamente atacan los sitios internos de
la región amorfa de las cadenas de polisacárido. Estas
ventajas a la generación de oligosacáridos pequeños con
longitudes diversas qué facilitar liberación fácil de entrapped
moléculas (Fernandes & Carvalho, 2017). La cosecha de
extracción y la calidad de aceite puede ser mejorada
cuándo una mezcla de enzimas es sabiamente seleccionado,
en la cuenta de sinergia entre las enzimas. Por ejemplo,
cuándo una mezcla de acídico cellulase y alcalino protease
solió aceite de extracto de germen de maíz, 80–90%
extracción de aceite estuvo obtenida (Moreau et al., 2009).
Ele fficiency de la extracción depende de sistema solvente,
tempera- ture, modo de acción de la enzima, duración de
extracción, la enzima que carga, disponibilidad de substrato
y condición de pH. La estrategia de opti- mization de
enzima aided extracción para bioactives está mostrado en
Higo. 3.
El pH óptimo para hidrólisis enzimática es dff ifoerrevnetry enzima.
El pH óptimo de muchas enzimas es en la gama del
isoelectric pH de proteínas (Talley & Alexov, 2010). Desde
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Crudo
congelación/secada/ Fresca
material secó

Tratamiento de enzima

Ultrasonido Microonda-extracción Supercritical Extracción de Tres-fase


extracción asistida Extracción presión alta partitioning
asistida fluida

El valor añadió productos

Sabores y
Polisacáridos Polyphenols Ace Proteínas 69
ites pigmentos

Higo. 1. Un esquema general de enzima-métodos de extracción asistida para valor añadieron productos.

La cosecha reducida después de un seguro pretreatment tiempo. Esto


era porque las enzimas reaccionaron con casi todo de los substratos y
dejó poco sitio activo en substratos para reacción enzimática más
lejana. La enzima más alta que carga resultados en interacción mejor
de la enzima con substrato, por ello promoviendo pared de célula
solubilisation (Zhang et al., 2007). Aun así, esto puede contribuir a
amargura en el extracto, cuando informado por Jiang et al. A causa de
la extracción de componentes indeseables. El porcentaje en- zyme
cargando principalmente dependerá de el coste de las enzimas
utilizadas y la calidad de el biomolecules extraído (Jiang et al.,
2010).

3. Extracción enzimática de biomolecules.

3.1. Polyphenols

Una variedad ancha de phenolics es presente abundantemente en


plantas qué poseer polyphenol estructura (i.e. varios hydroxyl grupos
en anillos aromáticos) y un anillo de fenol (como ácidos fenólicos y
fenólicos alco- hols) (Oroian & Escriche, 2015). La extracción de
compuestos fenólicos estuvo llevada a cabo tampoco
convencionalmente por emplear solventes mixtos (agua/de acetona,
dioxane/etanol, agua/de etanol y agua/de metanol) o con la ayuda de
métodos/acídicos alcalinos (Azmir et al., 2013). Entre el más deseable
bioactive moléculas, los antioxidantes son una clase importante de
compuestos fenólicos. Son de interés considerable y tener funciones
Higo. 2. Representación de el entrapped biomolecules entre estructura de biológicas diversas. Interfieren con oxidative ciclos para inhibir o
pared de célula primaria de material de planta. atrasar el oxidative daño de biomolecules. Las clases importantes de
(Copyright © 2014 Elsevier B.V. Todos los derechos reservaron, reprinted con los compuestos con actividad antioxidante son: vitaminas (C y E),
permiso de Acosta-Estrada et al., 2014). automovilísticos- otenoids (carotenes y xanthophylls), flavonoids
(flavonols, flavones, flavanones, flavanols, isoflavones, flavanonols, y
anthocyanidins), ácidos fenólicos (gallic, caffeic, ferulic, p-

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hydroxybenzoic, syringic ácidos, protocatechuic, vanillic, p- Fo
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coumaric y sinapic ácidos), taninos (con- densed taninos o
poliméricos flavonoids: gallic ácido) lignans y stil- benes
(Acosta-Estrada et al., 2014). Muchos estudios mostraron
que fruta

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extracción asistida.

Higo. 3. Gráfico de flujo de pasos en enzima estudios de

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Different Las estrategias están empleadas para utilizar agrícola en-
Piel, semillas, pomace y las hojas son una fuente dustry residuos como fuente sostenible de valor alto-añadido
excelente de polyphenolic compuestos (Bonilla (mayoritariamente polyphenolic compuestos) productos. La ocupación
et al., 2015). Debido a la toxicidad potencial de de enzimas pro- vide una alternativa para la producción de estos
algunos antioxidantes sintéticos (butylated bioactive compuestos de residuos agroindustriales. Enzima la
hydroxyanisole, butylated hydro- xytoluene, extracción asistida ha sido ap- plied para la extracción de los
propyl gallate, tert-butylhydroxyquinone, etc.) compuestos antioxidantes de varias fuentes incluyen bálsamo de limón
más efforts ha sido hecho por investigadores (Melissa officinalis) (Miron, Herrero, & Ibáñez, 2013), residuo de
para descubrir y utilizar naturalmente oc- algas rojas (Palmaria palmeado) (Wang et al., 2010), Agar- icus blazei
curring antioxidantes de residuos agrícolas (Puri Murrilli (Jia et al., 2013), arroz bran (Kim & Lim, 2016) y residuos de
et al., 2012). cáscara de la calabaza (Cucurbita moschata) (Wu et al., 2014).
Los pasos preliminares de extracción juegan Biochemically, paredes de célula de la planta son mayoritariamente
una función importante durante la extracción de compuestas de inter- conectando polisacáridos múltiples como
bioactives de frutas y vegetales. Entre estos almidón, celulosa, hemi- celulosa (xyloglucans) y pectina, los cuales
pasos, deshidratación (secando métodos) y forman una barrera para la liberación de sustancias intracelulares.
fresando (moliendo) es dos factores que Muchos fenólicos hydroxyl los grupos existen en flavonoids aquello es
predominantemente unffect la cosecha de entrapped dentro complejos de polisacárido por hy- drogen vinculación
extracción y transferencia de masa para extracto e interacciones hidrofóbicas (Acosta-Estrada et al., 2014). La mezcla
polyphenols. Generalmente, la deshidratación de carbohidrato hydrolysing enzimas como cel- lulase, hemicellulase,
implica la extracción de agua atada de la cáscara y pectinase podría proporcionar oportunidad mejor a adecuadamente
por creciente el porosity de la matriz celular así interrumpir la estructura de pared de la célula, rotura abajo materiales
facilitando diffusion índice y promoviendo el de almacenamiento de interior complejos, así facilitando la liberación
contacto con enzimas, consiguientemente, libre polyphenols. Algunos de polyphenols es siempre covalently
realzando la extracción de phe- nols. Londono- combinado con glucosa como glucosides con glucosidic conexiones.
Londono Et al., encontrado que el total β-Glucosidase Posee la capacidad de romper el β-1,4 glucosidic
phenolics extrajo de las cáscaras cítricas secas conexiones en glucosides. Celulosa, hemi- la celulosa y la pectina
era más altas (1.95 g Gallic Equivalente de pueden ser hydrolysed por utilizar cellulase, β-glucosi- dase, y
Ácido/100 g Peso Seco) que aquellos obtenidos pectinase enzimas (Hammed et al., 2013; Puri et al., 2012;
de cáscaras cítricas mojadas (1.1 g Gallic
Equivalente de Ácido/100 g Peso Seco)
(Londono-Londono et al., 2010). Qué- nunca,
algunos los informes anteriores mostraron los
resultados contradictorios que declaran que
secando podría degradar compuestos fenólicos
tampoco por oxígeno, temperatura alta o tiempo
de residencia alta (Madrau et al., 2009;
Blokhina et al., 2003). El decreased o cosecha
de extracción aumentada de polyphenols confía
en las características de compuestos fenólicos,
operando secando condiciones y secando tiempo
(M'hiri et al., 2014). La lista de enzima
extracción asistida de polyphenolics en los años
recientes está presentado en Mesa 1.
La industria cítrica produce cantidades
grandes (hasta 50% del peso de fruta total) de
cáscara y residuos de semilla, el cual podría ser
las fuentes importantes de compuestos fenólicos
en particular cáscaras (Lin et al., 2013; Sharma
et al., 2017). Considerando este hecho, Li et al.
Extraído contenidos fenólicos totales de fi ve
different cáscaras cítricas (mandarin, limón de
Ben del Yen, pomelo, naranja y limón de
Meyer) por utilizar grado alimentario en- zyme
cellulase (Li et al., 2006). De modo parecido, en
un intento a valorise residuos de fruta, Gomez-
Garcia et al. Llevado a cabo Celluclast®
(cellulase) asistió extracción de antioxidative
phenolics de uva (Vitis vinifera L.) re- sidues.
Enzima la extracción asistida no sólo libera
compuestos fenólicos más altos (O-coumaric el
ácido determinado por utilizar rendimiento alto
cromatografía líquida–electrospray–
espectrometría de masa) pero también mostrado
libre radical-scavenging actividad (Gómez-
García, Martínez- Ávila, & Aguilar, 2012).
Estos estudios revelan que el rendimiento de
extracción de phenolics por las enzimas es
mucho mejor que métodos convencionales.
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Wijesinghe & Jeon, 2012, Sojitra et al., 2016). Para facilitar cosecha
de tracción ex mejor de intra-contenidos celulares, Swer et al. Llevado

(Gómez-García et al., 2012)


(Fernández, Vega, & Aspé,
a cabo enzima tratamiento asistido coupled con extracción solvente.

(OszmiańEt al de esquí.,
(Zheng & Chung, 2013)
(Štambuk et al., 2016)
Los autores pre- tratados Prunus nepalensis L. Para extraer

(Huynh et al., 2014)


(Kim & Lim, 2016)

(Dal Magro Et al.,


anthocyanins con di fferent tipos de enzimas (cellulase, pectinase,

(Fu Et al., 2008)


protease y alfa-amilasa) siguió por extracción solvente. El máximo

(Zhou Et al.,
anthocyanin el contenido estuvo obtenido utilizando cellulase cuando
comparado a otras enzimas (Swer et al., 2016). Más allá, la extracción

2017)

2016)
2011)
2015)
Ref

es significantly unffected por la concentración de enzima deseada. En


concentración de enzima más baja menos cantidad de enzima
Tratamiento de enzima estuvo realzado la extracción por 13-pliegue que aquellos

interacciona con la pulpa/de cáscaras qué resultados en extracción

HPLC-La SEÑORA reveló el increment de actividad antioxidante qué está asociado


La producción de cloudy zumos de manzana por mejorar polyphenolic contenidos y

El cauliflower hojas incubated con las mezclas de enzima resultaron en cosecha de

Cosecha de extracción más alta y más grande en vitro la capacidad antioxidante


Enzima la extracción asistida es un más efficient método para la extracción de

reducida del deseado polyphenols. Mientras que, una concentración de


Encima 80% inhibición de angiotensin cuando comparado a extracción basada

Aumentado la cantidad de extractable ácidos fenólicos por 2.5–3.0 tiempo.

enzima más alta puede ex- tramo el deseado polyphenols efficiently.


Aun así en algunos casos, em- ploying cantidad más alta de las
enzimas para extracción pueden dirigir para acabar inhibición de

Veintitrés compuestos fenólicos eran identified HPLC-PAPÁ-Señora


Tratamiento de enzima cosecha mejorada por mediano de 240%.

producto (Nadar y Rathod, 2017un). Para evaluar ele ffect de


concentración de enzima, Ghosh y Biswar extrajo lycopene de tejidos
de calabaza por variables el cellulase concentración en la gama de 1–
comparada con ambos UAE y extracción convencional

10%. Los autores encontraron que cuando la concentración de enzima


estuvo aumentada, lycopene cede caja aumentada también 7% de
enzima concentra- tion. Al contrario, et alfi de Parcela. No find
extracción más alta de kaempferol-glucosides

cualquier significant reducción en la cosecha de extracción de


anthocyanin de saffron tépalos como con- centration de Pectinex
con la liberación de O-coumaric ácido.

aumentados de 1 a 10% (et alfi de Parcela., 2015). Aun así la selección


semilla de uva que UAE método.

de la enzima apropiada y su concentración depende de la composición


de el tratamiento de control.

de planta y célula de fruta paredes (Ghosh & Biswas, 2015).


El cooperativo effects de las enzimas múltiples pueden resultar en un
en- degradación arrugada de paredes de célula, resultando en cosechas de
cosechas de zumo

extracción más alta. La enzima múltiple blends es comercialmente


disponible cuál está listado en Mesa 2. Magro Et al. Determinado el
synergic effect de combinación de enzima de Pectinex Ultra Claro® y
solvente

Lallzyme Beta® para extracción de zumo de la uva de Vitis labrusca L.


Concordia de variedad. Encontraron que la mezcla de dos preparaciones
Coment

enzimáticas mejoró la cosecha de zumo así como liberación de bioactive


ario

compuestos cuando comparados con preparación de enzima individual


(Dal Magro et al., 2016). Mayoritariamente, las enzimas comercialmente
disponibles son blended con dos o más enzimas para conseguir cosecha de
extracción más alta. En uno de los estudios, llevados a cabo por Kim y
Lim, antioxidantes y componentes fenólicos estuvieron extraídos de arroz
0.268 y 0.132 mg/g
respectivamente

bran por utilizar comercialmente disponible carbohydrases; AMG®,


58.4 mg/100 g

Celluclast®, Bolígrafo- topan®, Viscozyme®, Termamyl®, y Ultra flo®.


18–20 mg/g

0.152 mg/g

16.04 mg/g

El phenolics liberated por todo carbohydrases mostró un significant


72.7%

86.6%

aumento (en la gama de 1.5–3.3 pliegues) en férricos reduciendo poder.


Cose
cha

Entre el encima mezclas de enzima, Pentopan® (mezcla de endo-1-4-β-


xylanase y feruloyl es- terase, caffeoyl esterase, y pectinase) cuál era


activo en pentosan la hidrólisis apareció para ser el más effective en
Pectinase, cellulase y tannase

creciente el anti- actividad de oxidante, mientras que Celluclast®,


Cellulase, β-glucosidase y

Viscozyme L® y Rapidase®

Cellulase, pectinase y β -

Ultraflo®, y Viscozyme® ap- peared más effective en creciente el


Cellulase Y pectinase

contenido fenólico total así como radical scavenging actividad que otras
enzimas (Kim & Lim, 2016). Comercial carboxylases exitosamente
Viscozyme L®

aumentó la cosecha de extracción de ácido fenólico, no sólo por la


glucosidase
Celluclast®
Pentopan®

Pectinex®
Pectinase

pectinase

hidrólisis enzimática de la célula-componentes de pared pero también por


Enzima extracción asistida de polyphenolic compuestos.

Enzima

la liberación de ácidos fenólicos libres. El proces- cantar y el


almacenamiento subsiguiente exhibe un effect en bioactive compuestos,
particularmente anthocyanins y otro polyphenols. Por ello necesita ser
Antioxidative phenolics

considerado mientras evaluando salud potencial benefits derivó de


Luteolin Y apigenin
Proanthocyanidins

comidas y beverages. Dinkova Et al. Extraído anthocyanins de piel de


antioxidantes

mirtilo que utiliza different enzimas comerciales y estudió la estabilidad


Polyphenols

Polyphenols

Polyphenols
Compuesto

Phenolics

Phenolics
Bioactive

en plazos de valores de vida media. Un aumentado valor de vida media


fenólicos

Fenoles
Ácidos

(de 12 a 64%) debido a enzima la extracción asistida estuvo observada.


Esto indicó estabilidad de pigmento alto debido a interacciones
electrostáticas entre anthocyanin y hydrolysed moléculas de pectina.
Además, otro polyphenols (parti- cularly flavonols y ácidos fenólicos)
Zumo de uva de la
Ulmus pumila L.

estuvo liberado durante la hidrólisis enzimática extensa de la pared de


Semillas de País

Apple pomace

célula de polisacáridos en piel de mirtilo. Estos polyphenols actuó tan co-


Residuos de
Cauliflower
Arroz bran

Pigeonpea
Manzanas

concordia
Uva marc

pigmentos para mejorar anthocyanin re- tention (Dinkova et al., 2014).


Cortezas
semillas
Fuente
Mesa 1

verdes
uvas

uva

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Enzimas hidrolíticas (carbohydrase) puede convertir agua-pared de célula
insoluble y materiales de membrana de la célula a agua-materiales
solubles (fragmento corto de polisacáridos) y de ahí, different bioactive las
propiedades serán observadas. Para identificar condiciones óptimas para
mejorar cosecha de extracción, la sustancia química

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Mesa 2
Las enzimas comerciales utilizaron para enzima extracción asistida.
Mezcla de Enzima de nombre comercial Micro-Proveedores de organismo Ref

Viscozyme L® Arabanase, cellulase, β-glucanase, hemicellulase, y Aspergillus aculeatus Novozymes® (Zheng & Chung, 2013)
xylanase
Rapidase® Pectinase Y hemicellulase Aspergillus niger y Trichoderma Oenobrands® (Huynh Et al., 2014)
longibrachiatum
Termamyl 120L® Calor-Bacilo de amilasa estable licheniformis Novozymes® (Paolucci-Jeanjean et al., 2000)
Celluclast 1.5 L® Cellulase Trichoderma reesei Novozymes® (Gómez-García et al., 2012)
AMG 300 L® Exo-1,4-α-D-glucosidase Aspergillus niger Novozymes® (Lee et al., 2006)
Ultraflo L® establo de Calor multi-activo β-glucanase y feruloyl esterase Humicola insolens Novozymes® (Pérez-López et al., 2016)
Pentopan 500 BG® Endo-1-4-β-xylanase, feruloyl esterase, caffeoyl esterase y Thermomyces lanuginosus Novozymes® (Kim & Lim, 2016)
pectinase
Pectinex® Cellulase, hemicellulase, y pectinase Aspergillus acueatus Novozymes® (Oszmiańet al de esquí.,
2011) Lallzyme Beta® Pectinase y β -glucosidase – Lallemand® (Dal Magro

et al., 2016)

recibido interés creciente debido a su único physicochemical y propiedades


Composición, morfología estructural y physiochemical las propiedades
biológicas y su aplicación ancha en comida funcional e industrias farmacéuticas.
de residuos solubles e insolubles es muy importantes.
Charoensiddhi Et al. Llevado a cabo enzima extracción asistida de

3.2. Polisacáridos

Los polisacáridos son el más grupo estudiado ampliamente de


metabolitos aparte de polyphenols. Agua-peso molecular alto soluble
poly- saccharides puede modular rheological características de
comidas, y es normalmente utilizado en varias aplicaciones
alimentarias como espesantes alimentarios, tex- ture modifier,
estabilizadores y emulsifiers para different aplicaciones (Pilnik &
Rombouts, 1985). Además, estudios numerosos haber recientemente
informó que dietético fibres tener una variedad extensa de bio-las
características funcionales que incluyen immunomodulatory,
hematopoiesis-pro- moting, antioxidante, antimicrobial y anticancer
actividades (Giavasis, 2014; Xie et al., 2016; Samuelsen et al., 2011;
Sáyago-Ayerdi et al., 2007). Convencional calentado reflux la
extracción es el método más común para extraer polisacáridos.
Generalmente, la cosecha de este método en gran parte depende de
tiempo de extracción y temperatura. Aun así, operación en elevó las
temperaturas y el tiempo más largo pueden causar dete- rioration de
polisacáridos por ello unffecting su actividad biológica (Wang, Qi, Su,
& Él, 2015). hay ample la búsqueda conducida en extracción
enzimática de bioactive biopolímeros qué está listado en Mesa 3.
Hay dos aproximaciones posibles a la enzima asistió extrac- tion de
polisacáridos: i. Uso de enzimas qué es capaz de de- structing barreras
biológicas i.e. pared de célula y membranas para promover aislamiento
de polisacárido deseable. ii. Uso de enzimas que parcialmente degradar
polisacáridos deseables a fragmentos pequeños para extracción de
facilidad. Blanco-Pascual et al. Extraído carrageenan de Masto- carpo
stellatus utilizando Alcalase® (un tipo de protease). El extrajo los
polisacáridos mostraron propiedades de gelificación excelente. El
proceso de extracción dirigió a una extracción simultánea de valioso
phytochemicals como polyphenols, así añadiendo valor al extracto
(Blanco- Pascual et al., 2014). Por ello pueda ser concluido que las
enzimas pueden ser empleadas a selectively aísla bioactive
polisacáridos y puede dejar producción apuntada de specific gelation
propiedades y propiedades físicas deseables. En otro estudio, Rostami
et al. Llevado a cabo cellu- lase-proceso de extracción asistida del
agua-Malva soluble sylvestris polisacáridos (MSP) utilizando
metodología de superficie de la respuesta (RSM). La cosecha más alta
(10.40%) de MSPs estuvo conseguido en 5.64% cellulase,
55.65 °C temperatura, 3.4 h tiempo, y 5.22 pH. Más allá, estos homo-
geneous fracciones de polisacárido eran purified por cromatografía.
Las fracciones mostraron significantly aumentó antioxidante,
antitumor (probado encima líneas de célula de HepG2 y Un549) y
antimicrobial actividades en una dosis-patrón dependiente (Rostami &
Gharibzahedi, 2017). De ahí empleando las enzimas mejoran no sólo la
cosecha de extracción pero también el pharmacological propiedades de
polisacáridos. Alga (algal) oligo- saccharides y los polisacáridos han

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Carbohidratos del alga marrón Ecklonia radiate. Los autores 3
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em- ployed seis enzima comercial mezclas como Viscozyme
L®, Cellu- clast 1.5 L®, Ultraflo L®Unl ununncd alase 2.4 L FG
®, Neutrase
0.8 L® y Flavourzyme1000 L® para extracción. Encontraron
que cosecha de azúcar total era independiente en el tipo de
enzima y pH. Aun así peso molecular del extrajo los
polisacáridos está controlado por el encima mencionó
parámetros. Concentraciones altas de bu ffer las sales
estuvieron encontradas para obstaculizar extracción de
polisacárido (Charoensiddhi et al., 2016). Por ello buffers no
tiene que ser empleado en enzima aided extracción de algal
carbohidratos, para extracción realzada efficiency.
Ha sido ampliamente reconoció que bioactivities y otro
med- icinal las propiedades de polisacáridos pueden serun
ffected por sus componentes químicos, estructura masa
molecular y conformation (Adetunji et al., 2017; Deng et
al., 2014; Xie et al., 2016). Extracción de agua caliente
estuvo optimizada para separar polisacáridos de Epimediuma
cuminatum. Aun así, a técnicas de extracción convencional
les gusta no-enzimáticos ex- tracción y calentando la
extracción resultada en cosecha inferior de poly- saccharides
(30.2%) comparó a enzima aided extracción de agua
(82.4%). Además, extracción de agua enzimática mejoró el
tiempo efficiency, redujo el consumo solvente y operado en
temperatura de extracción más baja a diferencia de los otros
métodos. Resultados de escanear electrón micrographs reveló
que las paredes de célula devenían delgadas y disorganized
después de que enzima aided extracción qué facilitado la
transferencia de masa entre polisacáridos y solvente,
dirigiendo a su im- cosecha probada (Cheng et al., 2013).
Durante el crudo pectic extracción de residuos
agroindustriales, Babbar et al. Examinado ele ffect de dif-
ferent estrategias de extracción en la composición de ambos
neutro y acídico pectic polisacáridos. La extracción acídica
es el más ampliamente utilizado para liberating pectina de
materiales de planta. Los estudios anteriores tienen en-
dicated que el proceso de extracción puede causar un grado
alto de degradación de pectina, resultando en cosecha baja y
una pérdida de su propiedad de gelificación. También, para
reducir los costes de producción, están utilizados en forma
cruda más que purified pectina. Cuatro different los residuos
estuvieron utilizados tan sub- strates, concretamente baya
pomace, cebolla hulk, azúcar y calabaza pulsados pulpa de
remolacha, y ele ffect de different métodos de extracción
(ácidos, en- zymes, y chelators), estuvo analizado en la
recuperación y composición de crudo pectic polisacáridos.
La hidrólisis enzimática llevó a cabo utilizar Celluclast®,
conteniendo cellulases (endoglucanase) estuvo encontrado
para ser ef- fective en extraer pectina de pared de célula de la
planta. Dependiendo de la estructura de recuperación de
pectic azúcares después de extracción enzimática, pulpa de
remolacha del azúcar y cebolla hulk estuvo encontrado para
ser substratos adecuados para purificatión de la pectina y la
producción de pectina basaron productos. También las
condiciones de incubación de los varios substratos con
enzimas estuvieron encontrados para ser mucho más suaves
y tiempo efficient cuando comparado a extracción con ácidos
y chelators (Babbar et al., 2016).
Tecnología de extracción de la enzima ha probado para
tener un borde sobre técnicas convencionales en extracción
sostenible de polisacáridos con mejorados pharmacological
actividad del extracto. Complejo en- zymes es también visto
para tener un positivo effect en la cosecha de polisacárido y
cantidad de extracto. Otra ventaja de enzima asistió

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Mesa 3
Enzima extracción asistida de polisacáridos.

Enzima de Polisacárido de la fuente Bioactive Comentario de propiedades Ref

Malva sylvestris Malva sylvestris Cellulase Antioxidante, antitumor y antimicrobial había un significant índice inhibitorio de antitumor actividad contra (Rostami & Gharibzahedi,
Polisacáridos actividad HepG2 y Unas549 líneas de célula. 2017)
Lentinus edodes L. edodes Polisacáridos Cellulase, papain y pectinase Anti-proliferative actividad exhibieron inhibición de proliferación de célula en HCT-116 y (Zhao, et al de Canción.,
HeLa. 2016)
Células en vitro
Panax ginseng Ginseng Polisacáridos α-Amilasa Immuno-modulación, anti-tumor, anti- La 9.0% cosecha de fracción de polisacárido estuvo obtenida de (Et al de sol., 2015)
Adhesivo y anti-oxidante. agua caliente-extracción (HWE) siguió por tratamiento de enzima
Polygonatum odoratum Polygonatum odoratum Cellulase Anti-diabetic, hypoimmunity y rheumatic Tratamiento de enzima significantly promueve la proliferación y (Liu Et al., 2015)
Polisacárido enfermedad de corazón neutro rojo phagocytosis de CRUDO 264.7 macrophage células en
vitro
Liparis tessellatus Huevos
Liparis tessellatus Protamex® Anticoagulante La cosecha de extracto máxima de polisacáridos de L. tessellatus (Ticar Et al., 2015)
3

Polisacárido Los huevos con enzima era 2.10% (w/w).


15

Dendrobium chrysotoxum Dendrobium chrysotoxum Cellulase Immuno-modulatory Actividad El polisacárido extraído mostró índice de proliferación de célula (Cacerola, Wang, Ye, Zha,
Polisacárido más alto & Luo, 2015)
Mientras DCP-H con actividad de estabilización de espuma mejor
Cornus officinalis Cornus officinalis Pectinase Anti-Microbiano, anti-oxidante, anti- La cosecha de enzima la extracción asistida era más alta que que de (Tú, Yin, & Zhao, 2013)
Polisacárido envejeciendo, e inmune-actividades UAE y HWE.
T. mongolicum Imai T. mongolicum Imai reguladoras Este bioactive los polisacáridos poseyeron actividad antioxidante (Zhao, Wang et al., 2016)
Polisacárido Cellulase Antioxidante, antitumor, inmunológico y en una dosis-manera dependiente
Fructus mori Fructus mori anti-proliferative El antioxidante y aldehído dehydrogenase en vitro de CFMPS (eD
t eunnl.G, 2014 )
Polisacáridos Glucosa oxidase (GOx) Anti-envejeciendo propiedad-realzar obtenido por GOx la extracción aumentó significantly
inmunidad y
anti-Enflammatory
Astragalus Astragalus membranaceus Amyloglucosidase, cellulase, GOx Anti-Enflammatory, anti-virus, anti-tumor, La enzima la extracción asistida tuvo una actividad (Chen, Zhou, & Zhang,
membranaceus Polisacárido y amilasa. y antioxidante antioxidante mejor (aproximadamente 2 tiempo más alto) que 2014)
ninguno la enzima trató unos
Tricholoma matsutake Tricholoma matsutake Papain Y cellulase Immuno-stimulatory actividades, La cosecha de polisacáridos era 7.53% cuál era mucho más alto que (Wang, Zhao, Li, Wang, &

3
F
Polisacárido bioactivities, métodos convencionales Shen, 2015)

3
o
o
0
anti-Oxidación y anti-mutagenic

dR
Hericium erinaceus Hericium erinaceus La caracterización preliminar mostró que los grupos funcionales de (Zhu Et al., 2014)
Cellulase, pectinase y trypsin Antimicrobial effects, anti-oxidante y

eseU
Polisacárido polisacáridos extrajeron por HWE y enzima la extracción asistida era
antitumor Actividades fundamentalmente idéntica.

n
rchyon
Polisacáridos de Alfalfa de la alfalfa Cellulase, papain y pectinase Immunostimulatory actividad, anti- Scavenging Actividad de polisacáridos de alfalfa en vitro sugirió que (Wang, Dong, & Tong,
tumor, los polisacáridos tuvieron antioxidante bueno effect. 2013)
Lípido-lowing y anti-oxidación

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Mesa 4
Enzima extracción asistida de aceites.

La fuente Experimental Enzima Cosecha de componentes Prominentes Ref.


Condiciones

Moringa oleifera PH: 4.5, Temp: 40 Neutrase 0.8L® y – 70% (Latif, Anwar, Hussain, &
°C Enzima: Celluclast 1.5L® Shahid, 2011)
substrato: 8 (w/w)
Tiempo: 1 h
Hojas de bahía (Laurus PH: 4.5, Temp: 40 °C Cellulase, hemicellulose y 1,8-Cineole, α-terpinyl acetato, metilo eugenol, 92.5% (Boulila et al., 2015)
nobilis Enzima: substrato: 8 xylanase linalool, α-pinene, sabinene y β -pinene
L.) (w/w)
Tiempo: 1 h
Mostaza amarilla flnuestro pH: 4.5, Temp: Protex 6 L® Fosfolípido–oleosin 91% (Tabtabaei & Diosady,
50–60 °C 2013)
Enzima: Substrato: 3
(w/w)
Tiempo: 3 h
PH de semillas de la borraja: –, Celluloblast® Borago officinalis Aceite 42.5 kg/de g (Soto et al., 2008)
Temp: 45 °C
Enzima: substrato: 1
(w/w)
Tiempo: 9 h Alcalase 2.4L® – 91.98% (Jiang et al., 2010)
PH de cacahuete: –,
Temp: 45 °C
Enzima: substrato: 1
(w/w)
Tiempo: 9 h
Irvingia gabonensis PH: 3.5–5.5, Temp: Viscozyme L® – 68% (Womeni et al., 2008)
Semilla kernels 55 °C
Dosis de enzima:2%
Tiempo: 18 h
Tomillo (Thymus PH: –, Temp: 40 °C Cellulase Y hemicellulase 1,8-Cineole 38% (Hosni et al., 2013)
capitatus Dosis de enzima:10
L.) mg Tiempo:1 h
PH: -, Temp: 40 °C Cellulase Y hemicellulase 1,8-Cineole 20% (Hosni et al., 2013)
Rosemary (Rosmarinus
fficinalis .)
oL Dosis de enzima:10
mg Tiempo: 1 h
Pino kernel pH: 8.4, Temp: 51 °C Alcalase endo-protease® Palmitic Ácido, oleic ácido, linoleic ácido, 89.12% (Li et al., 2011)
Enzima: substrato: 1.5 linolenic
Tiempo: 3 h Ácido y stearic
ácido
PH de calabaza: 7.4, Rohapect UF®, Rohament Luteína, β-apo-8′-carotenal, α-carotene, β-carotene, 72.64% (Konopka et al., 2016)
Temp: 54 °C Enzima CL® y Colorase® 9-cis-β-carotene
dosis: 2% Tiempo:
15.4 h
Bayberry (Myrica rubra) PH: –, Temp: 51.6 °C Celulosa y neutro 9-Octadecenoic ácido y 9,12-octadecadienoic ácido 31.15% (Zhang et al., 2012)
kernels Enzima: substrato: protease
3.17
Tiempo: 4 h
PH de semillas de la sandía: 7.89, Protex 6L® Palmitic ácido, oleic ácido, linoleic ácido, 97.92% (Sui, Jiang, Li, & Liu,
Temp: linolenic ácido y stearic ácido 2011)
47.13 °C
Dosis de enzima:
2.63% Tiempo: 7.8 h
Fruta de palma PH: 4.0, Temp: 50 °C Cellulase y pectinase C12–C20 conteniendo aceite de palma 90–93% (Teixeira et al., 2013)
(Elaeis Dosis de enzima:
guineensis) 4% Tiempo: 30
min

salud, seguridad y preocupaciones de entorno. Los investigadores están buscando


La extracción es el requisito de menos cantidad de alcohol para el pre-
posibles reemplazar- ments a hexane sin compromising la cosecha y calidad del
cipitation de deseó polisacáridos de mezcla de reacción que hace el
aceite. De ahí, la ocupación de solventes verdes puede ser una sustituta potencial
proceso más verde.
para extracción de aceite (Konopka et al., 2016; Kumar et al., 2017; Mate
Yusoff, Gordon, & Niranjan, 2015).
3.3. Aceites
Extracción enzimática acuosa (AEE) es una técnica favorable para

Técnicas convencionales como prensado hidráulico, expeller


pulsando y la extracción solvente está utilizada en extracción de aceite
de semillas. En algunos casos, el aceite está extraído directamente de
frutas por emplear una prensa mecánica sencilla y está utilizado
directamente sin cualquier clase de pro- cessing, p. ej. aceite de oliva
virgen. Hexane Es ampliamente utilizado para extracción de aceite
debido a recuperación de aceite fácil, angosta hervir punto (63–69 °C)
y ex- cellent solubilising capacidad. Desafortunadamente en proceso
de extracción, hexane no es un solvente popular a causa de aspectos de

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El aislamiento de aceites de semillas de aceite. Esta técnica 3
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tiene operación sencilla y fácil, consumo de energía más baja
y es económicamente viable (Mate Yusoff, Gordon, Ezeh, &
Niranjan, 2016). Generalmente, gotitas de aceite están
rodeadas con proteína como elector importante de pared de
célula. En sojas y semillas de colza, las proteínas y la pectina
formaron el componente importante de sus paredes de
célula. De ahí, degradación de este componente por utilizar
pro- tease, cellulase, pectinase, y otras mezclas de enzimas
resultaron en en- hancement de cosecha de aceite (Mate
Yusoff et al., 2016; Tabtabaei & Diosady, 2013; Womeni et
al., 2008). La selección de enzimas tiene que ser basada en
la composición química, anatomía de pared de célula así
como ubicación de gotita de aceite dentro de semillas.
También, durante optimización de extracción del aceite
experi- ments, aceite para abrevar la proporción tendría que
ser considerada aparte de parámetros generales como pH,
temperatura, medida de partícula, enzima y su
concentración. Las enzimas necesitan moisture contenido
para su funcionalidad y presencia de bajo moisture contenido
en oilseeds ventajas a la formación de suspensión gruesa qué
resultados en inhibición de enzima (De Faveri et al., 2008;
Zhang et al., 2011).
Hay ejemplos diversos en literatura donde una mezcla de
enzima está mostrada para trabajar synergistically para
realzar la extracción effi- ciency (Womeni et al., 2008; Hosni
et al., 2013; Tabtabaei & Diosady,

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Dentro de la estructura celular y la naturaleza química de los compuestos
2013). Boulila Et al. Aceites esenciales extraídos y phenolics de hojas
alrededor lo. La consideración simultánea de ambos estos factores juega una
de bahía (Laurus nobilis L.). La mezcla de enzima de cellulase, hemi-
función importante en identificar la mezcla de enzima correcta para un aceite
cellulase, xylanase probó para ser útil de mejorar la extracción effi-
dado que aguanta substrato. A pesar de varias ventajas, el uso de AEE es todavía
ciency de biomolecules de matriz de planta por pared de célula de
obstaculizado debido a tiempo de procesamiento largo y complicó secar proceso
planta degradante. Cuándo el substrato era pretreated con cellulase,
después de en- zymatic tratamiento. Un significant la cantidad de enzima está
hemicellulase, xyla- nase por separado y su mezcla ternaria, cosecha
requerida (ni- mally > 1% del peso del oilseed tomado) cuál atribuye a coste
de extracción de aceites esenciales aumentó por 243, 227, 240.54 y
alto. Más allá, el no-disponibilidad de las enzimas en una escala comercial ha
248%, respectivamente. El análisis más lejano reveló que enzima
limitado el desarrollo de tales procesos. Un problema añadido con AEE.
pretreated los substratos mostraron realzar- ment en actividad
Es que es muy difficulto para evitar emulsificatión de el aceite extraído,
antioxidante debido a aceites esenciales. Tratamiento de enzima causó
notable differences en la proporción de individual compo- nents y
realzó las cantidades de oxygenated monoterpenes. Esto dirigió a la
actividad antioxidante mejor de los aceites esenciales derivó de la
enzima trató muestras (Boulila et al., 2015). De modo parecido,
Womeni et al. Ex- tracted aceite de kernel flnuestro de mango de
arbusto por tratarles con comercialmente mezcla de enzimas
disponibles como Alcalase®, Pectinex® y Viscozyme® para
conseguir cosecha de aceite de 35, 42.2 y 68.0%, respectivamente
(Womeni et al., 2008). Además de cosecha de extracción más alta de
aceite, el proceso enzimático simultáneamente mejoró la calidad de
muestras de aceite por crecientes el contenido de bioactive compuestos
(como carotenoids y otro phenolics) así como su antimicrobial
actividad. El uso de tannase dirigió a un aumento en compuestos
fenólicos totales en el lipophilic y fracciones hidrofílicas, resultando en
una capacidad antioxidante más alta del aceite. Propiedades
antioxidantes realzadas y antimicrobial la actividad de los aceites
esenciales aguanta un potencial bueno para uso en alimentario y
pharma- ceutical industrias (Hosni et al., 2013; Teixeira et al., 2013).
El im- cosechas de aceite probado encima enzima pretreatment
informó antiguamente es summarized en Mesa 4. En unos cuantos
casos, esté visto que enzimático pretreatment significantly bajó la
cosecha de aceite residual en la comida de avellanas chilenas (Soto et
al., 2008).
El aceite esencial de clove controles una posición importante entre
es- sential aceites. Recientemente, los estudios han centrado en
pretreatment de enzimas como pectinase, amilasa, lignocellulase y
cellulase en el polvo de clove buds, antes de que extracción (Wenqiang
et al., 2007; Amudan et al., 2011). El método tradicional de proceso de
destilación del vapor para el ex- tracción de clove el aceite proporciona
10.1% cosecha. En estudios actuales, enzimas specific para la acción
en la pared de célula ha sido utilizada en el pretreatment con
anterioridad a extracción, para realzar la calidad y cosecha del phyto-
las sustancias químicas extrajeron. Los resultados indicaron que
todas las enzimas dieron > 50% cosecha más alta que muestra de
control en plazos de peso de aceite esencial extraído (Li et al., 2011).
Talekar Et al., informó el ex- tracción de aceite de semillas de granada
de los residuos por protease (de Tan- pergillus oryzae) tratamiento.
Para entender la extracción me- chanism, SEM imágenes de semillas
de granada de los residuos estuvo capturado antes de que (Higo. 4un–b)
y después de que (Higo. 4c–d) protease tratamiento. El SEM micro-
graphs mostró que después de protease tratamiento, la pared de la
célula es daño debido a tratamiento enzimático que marcas la
superficie de las semillas altamente porosas aquello realzó la
extracción de físicamente entrapped aceite. También, el protease el
aceite derivado generó 1.4 tiempo más alto contenido fenólico total y
4% actividad antioxidante más alta que el hexane-aceite extraído
(Talekar et al., 2018). El encima el ejemplo infiere que enzima pre- el
tratamiento con anterioridad a extracción de aceite puede mejorar la
cosecha de extracción de aceites. La ocupación de enzimático
pretreatment con anterioridad a solvente ex- tracción y prensado
mecánico loosens arriba de la pared de célula y promueve extracción
de aceite. En esta aproximación, hay menos posibilidad de la
formación de aceite en emulsión de agua después de que extracción.
(Hosni Et al., 2013).
Los criterios de selección de enzima dependen de la posición de
el aceite

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fruta cáscaras naranjas por utilizar cellulase y pectinase (Çinar, 2004).
Cuál requiere extracción de correo de-emulsifipaso de catión
Enzima extracción de pigmento asistido ha sido llevada a cabo para
para recuperar y realzar cosecha de aceite (Mate Yusoff,
chlorophyll de espinaca (Özkan & Ersus Bilek, 2015), carotenoids de
Gordon, & Niranjan, 2015; Raghavendra & Raghavarao,
capsicum (Nath et al., 2016), anthocyanin de uvas (Tomaz et al., 2016)
2010). A destabilize el aceite en emulsiones de agua con objeto
y lycopene de tomates (Papaioannou & Karabelas, 2012). Ample La
de recuperar aceite libre con anterioridad a utilización
literatura demuestra la función de dietético carotenoids en antioxidante,
industrial, emulsión enzimática acuosa de-emulsifitécnica de
anti-cáncer y anti-en flammatory actividades (Ciccone et al., 2013;
catión estuvo utilizada por Tabtabaei y Dio- sady. En su
Griffiths et al., 2016; Bolhassani et al., 2014). Licuefacción enzimática
trabajo, los autores emplearon enzimáticos demulsifitratamiento
(EL) es una técnica verde reciente cuál ha sido empleado en obtener
de catión pordi fferent proteases y phospholipases para su
acuoso carotenoid extracto rico de rojo capsicum. Tres carbohydrases
capacidad de liberar aceite libre por hydrolysing el apuntado
emulsifiers. El protease tratamiento con Protex 6 L® y enzimas concretamente Viscozyme L®, pectinase y cellulase estuvo
phospholipase los tratamientos erane ffective en recuperar empleado para el mismo propósito. EL Asegura más rápido, mejorado
encima 91% del aceite en las emulsiones (Tabtabaei & carotenoid cosecha considerablemente y sólidos solubles totales por
Diosady, 2013). tres pliegue cuando

3.4. Sabores y pigmentos.

Colores y fl avours refine la calidad de un producto


alimentario por un ffecting el aspecto visual y gusto del final
producto. Hay un requisito nunca creciente de natural
flavours y colorant en la industria alimentaria. Los tintes
sintéticos están sospechados para liberar sustancias químicas
nocivas qué altamente está contaminando, alérgico,
carcinogenic y detrimental a humanos (Khan & Malik,
2014). Considerando la salud y environ- los asuntos
mentales relacionaron a tintes químicos sintéticos, los
investigadores cambiaron su foco de artificial (sintético)
colorants a excitación de natural colorants de fuentes de
planta. El importante colorants en las plantas son antho-
cyanins, betalins, chalcones, chlorophyll, carotenoid, y fl
avones cuáles están extraídos de raíces, corteza, follaje,
frutos secos, bayas y fl owers (Swer et al., 2016; Wissgott &
Bortlik, 1996). Las técnicas convencionales de extracción de
tinte natural incluyen acuosas y alkali extracción, fer-
mentation y extracción solvente (Giusti & Wrolstad, 2003).
Enzima tecnología de extracción asistida offers promesa
grande en aislamiento de cerdo- ments, si la selección de las
enzimas y las condiciones operativas optimizadas son
apropiadas. Comercialmente enzimas disponibles como
cellulase, amilasa y pectinase ha sido explorado
antiguamente, a solubilise la pared de célula, dirigiendo a la
extracción de pigmentos y fl avours cuál está mencionado
en T h
unb islete5c.hnique Puede acelerar la liberación de
pigmentos de planta dura y compacta materiales como
cortezas y raíces (Sowbhagya & Chitra, 2010). Aparte de ser
el tiempo que consume y energía inefficient, los métodos
tradicionales de extracción de tinte natural causan el co-
extracción de sustancias indeseables como chlorophyll y
ceras (Arvayo-Enríquez, Mondaca-Fernández, Gortárez-
Moroyoqui, López-Cervantes, & Rodríguez-Ramírez, 2013).
Natural lycopene está obtenido después de que
aislamiento y concentración de frutas de tomate entero. Aun
así, el lycopene disponible en el mercado es muy caro y en
demanda enorme. Esto animó los investigadores para
desarrollar alternan tecnologías para lycopene recuperación
(Strati & Oreopoulou, 2016). Zuorro Et al. Enzima estudiada
extracción asistida de lycopene de la fracción de cáscara de
residuos de procesamiento del tomate. El tratamiento con
enzimas dirigió a 8 a aumento de 18 pliegues en lycopene
contenido cuando comparado al untreated substrato (Zuorro
et al., 2011). El obtuvo los resultados recomiendan utilizar
pared de célula enzima degradante como un effective
significa para recuperar lycopene de residuos de tomate.
Aparte de col- ouring propiedades, carotenoids ha sido
fuertemente defendido para su beneficial effects incluyendo
reducción en riesgo de cáncer y desorden cardiovasculares.
En otro estudio, carotenoids ha sido extraído de residuos de

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Higo. 4. Escaneando imágenes de microscopia del electrón de polvo de semilla de granada crudo en (un –b) y protease trató polvo de semilla de
la granada (c–d). (Copyright © 2018 Elsevier B.V. Todos los derechos reservaron, reprinted con permiso de Talekar et al., 2018).

Comparado al unliquefied extracto. Multi-Preparación enzimática de carotenoid Extracción de marigold flowers, el tratamiento enzimático
Viscozyme® y pectinase estuvo visto para exhibir recuperación más concurrente y la extracción solvente estuvo empleado. Esta técnica
alta de automovilístico- otenoids que cellulases (Nath et al., 2016). En utilizó fresca flowers como materiales crudos. De este modo, el inepto
otro caso de silage y acuoso.

Mesa 5
Enzima extracción asistida de fl avours y colorants.
La fuente Sazona/colorant Extracción de Enzima Ref

Capsicum annuum Carotenoid Viscozyme L®, pectinase y 41.72–279.83 mg/100 g (Nath et al., 2016)
cellulase.
Tomate Lycopene Citrozym Ultra L® 440 mg/100 g (Ranveer, Patil, & Sahoo, 2013)
Calabaza Carotenoids Pectinex Ultra SP® 2 mg/100 g (Dinkova et al., 2014)
Prunus nepalensis L. Anthocyanins α-Amilasa, cellulase, 984.4 mg (Swer et al., 2016)
pectinase y protease.
Crocos sativus Anthocyanins Pectinex® 6.7 mg/g (Parcelafi, Kalbasi-Ashtari,
Hamedi, & Ghorbani, 2015)
Ginkgo biloba Deja Flavonoides Cellulase 28.3 mg/g (Chen, Xing, Huang, & Xu, 2011)
Cardamomo y pimienta negros β-Caryophyllene Cellulase, β-glucanase, 48.6% (Chandran et al., 2012)
pectinase, y xylanase.
Elettaria cardamomum 1,8-Cineol y terpinyl acetato Celluclast 1.5 L® 7.23–7.83% (Baby & Ranganathan, 2016un)
matonseed
Foeniculum vulgare Aceite de hinojo Celluclast®, Pectinex®, 11–22.5% (Baby & Ranganathan, 2016b)
Viscozyme® y protease.
Semillas de apio β-Selinene, butilo phthalide y sedanolide Viscozyme L® 16–17% (Sowbhagya, Srinivas, &
Krishnamurthy, 2010)
Comino (Cuminum cyminum Cuminaldehyde Cellulase, pectinase, protease y 3.2–3.3% (Sowbhagya, Srinivas, Purnima, &
L.) Semillas Viscozyme L® Krishnamurthy, 2011)
Ajo Di-2-propenyl trisulfide, metilo 2-propenyl Cellulase, pectinase, protease y 0.39–0.51% (Sowbhagya et al., 2009)
v ul fidditeh,iins y dithianes.
triinsy Viscozyme L®

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Bolhassani et al., 2014).
effluents Produjo después de métodos de extracción convencional eran
abol- ished. Recuperación de carotenoids por este método era hasta
3.5. Proteínas
97% (Barzana et al., 2002). Además la extracción efficiency, color de
pigmento apropiado- los lazos y su estabilidad son factores
Las proteínas son un suplemento nutritivo y dietético importante y puede ser
importantes. En uno de los estudios, mezcla de enzima comercial para
obtenido de plantar así como fuentes animales. hay
extraer anthocyanins de mirtilo (Vaccinium myrtillus L.) El zumo
estuvo explorado. Los investigadores encontraron que en- zyme aided
extracción no sólo realzado bioactive cosecha de compuestos pero
también balda microbiológica extendida-vida del zumo (Dinkova et al.,
2014).
Los sabores son un factor importante en gobernar la selección de
alimentario. Entre los materiales de planta, las especias están
consideradas como fuente rica de flun- vours debido a la presencia de
esencial (volátil) aceites y fl avour en- hancing componentes. Las
técnicas de extracción comprometieron para fra- grances/el aroma de
materiales de planta es extracción solvente, hydro- destilación,
destilación de vapor, super extracción de dióxido de carbono crítico y
sonication. Sabores de especias como jengibre, mostaza, vainilla, la
pimienta está extraída por los métodos antedichos (Wang & Weller,
2006). El aceite de ajo es uno del flavours mayoritariamente utilizado
en aplicaciones farmacéuticas cuando está informado para poseer
actividades biológicas diversas, pero principalmente acción de
anticoagulante, por inhibición de agregación de plaqueta en diabetes
mellitus. Sowbhagya Et al. Mezcla empleada de cellulase, pectinase,
protease y Viscozyme® para realzar la cosecha de aceite volátil de ajo.
La enzima la extracción asistida aumentó la cosecha de fl un- vour
sinun ffecting su físico y químico propitiates (Laaksonen et al., 2012;
Sowbhagya et al., 2009). Chandran Et al. re- ported effect De
Lumicellulase® (una mezcla de cellulase, β-glucanase, pectinase, y
xylanase) asistió extracción encima calidad y cosecha de aceite volátil
de cardamomo y pimienta negros. El GC y GC–SEÑORA evaluación
del aceite esencial mostró que los componentes activos importantes en
especias, como, β-caryophyllene en pimienta negra y α -terpenyl
acetato en cardamomo, markedly aumentó de 15.03 a 25.58 y
38.91 a 48.6%, respectivamente, encima tratamiento de enzima cuando
comparado con el untreated control. Una mejora en la cosecha y los
componentes importantes de aceite esencial estuvo atribuido a la
destrucción de la estructura de pared de la célula por las enzimas
pretreatment cuál era substantiated con electrón microscopically
utilizando SEM (Baby & Ranganathan, 2016un; Chandran et al., 2012).
Vanillin, un primario flavour presente en alubias de vainilla, es uno
del más caro flavour compuestos. El método tradicional de curar para
vanillin la extracción es inefficient en plazos de la cantidad de vanillin
extraído (Ruiz-Terán et al., 2001). Considerando este, enzima
extracción asistida de la vainilla de alubias de vainilla ha sido
estudiada para extracción mejorada. Soxhlet Extracción de vanillin
presentes cosechas más bajas com- pared a la enzima tratamiento
asistido. Así, alubias de vainilla estuvieron tratadas con enzimas para
asistir desintegración de pared de la célula y glucovanillin hidrólisis
donde la conversión simultánea de glu- covanillin a vanillin ocurre.
Alubias de vainilla estuvieron sometidas a un dos-dar un paso el
tratamiento enzimático que utiliza una mezcla de enzima comercial
prepara- tion (Viscozyme® seguido por Celluclastc®o)ntaining
pectinase y cellulase, en etanol acuoso en 70 °C para 8 h. Esta técnica
estuvo encontrada para extraer tres tiempo más vanillin que
convencional soxhlet extrac- tion. Cuatro variables principales, i.e. la
enzima que carga, temperatura de extracción, tiempo de extracción y
pH, estuvo encontrado para ser significant para vanillin contenido
(Waliszewski et al., 2007). Los ejemplos antedichos transportan que
las enzimas tienen alcance futuro en flavour y extracción de color de
materiales de planta. Enzima aided pretreatment ha mostrado no sólo
cosecha más alta pero también calidad mejor de recuperación de aroma
en comparación a otro con- ventional técnicas de extracción. También,
no implica calor, por ello thermo-compuestos sensibles
(mayoritariamente pigmentos y fl avours) puede ser extraído sin
degradación (Antoniotti, 2014; Baby y Ranganathan, 2016b;

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extraer proteínas de Ulva pertusa, Laminaria japonica y Callymenia .
Evidencia considerable qué sugiere que proteína y péptido
Los autores encontrados significant differences en proteína com-
frag- ments puede ejercer actividad biológica y fisiológica
posición para todo el trató algas. Más allá, demostraron el uso de una
en ambos en vivo y en vitro condiciones. Varios métodos
mezcla enzimática, incluyendo enzimas digestivas para mejorar la
para extracción de proteínas de plantas puede ser empleada,
accesibilidad de proteína (Amano & Noda, 1992). De modo parecido,
pero la elección de método adecuado depende de factores
Fleurence et al. Aplicado algal pared de célula que digiere
como solubilidad, hydrophobicity, peso molecular, e
polisacáridos (κ-carrageenase, β-agarase, xylanase, cellulase)
isoelectric punto (pI) de proteínas (Nadar, Pawar y Rathod,
simultáneamente en Chondrus crispus (alga roja) para realzar
2017). La presencia de actos de pared de célula rígidos
extracción efficiency de las proteínas upto 10-pliegues. Más allá, los
como barrera en liberar las proteínas celulares. De ahí,
autores demostraron que uso combinado de cellulase así como agarase
completo solubilisation y la extracción de proteínas depende
en otra alga roja Gracilaria verrucosa, dirigido a un aumento de 3
de célula dis- ruption. Disrupción de célula puede ser
pliegues en cosecha de proteína. Al final, los autores concluyeron que
actuada por métodos químicos por utilizar una variedad de
el dif- ference en la cosecha de extracción se debió a different
solventes o por métodos físicos como sonication. El cuidado
estructural compo- sition de pared de célula de algas (Fleurence et
tiene que ser tomado que estos métodos tienen que no
al., 1995).
denature el pro- teins. Tejidos de planta contienen niveles
Proteases Ha solido proteínas de extracto de oilseed comidas como
altos de proteases cuáles pueden obstaculizar la extracción
semilla de colza, sojas, y microalgae comidas. Cinco different pro-
de proteína y purificatión. También la presencia de seguro
tease mezclas de enzima-Protex 40XL®, Protex P®, Protex 5L®,
con- taminating los compuestos pueden resultar en
Protex 50FP®, y Protex 26L® estuvo utilizado para extracción. Más
degradación de proteína que dirige a una pérdida en su
proteína estuvo extraída en condiciones alcalinas, comparados a
actividad (Wijesinghe & Jeon, 2012).
condiciones acídicas. En
Proteína producida comercialmente concentra normalmente constar
de
Proteínas en solución acuosa, por ello haciendo agua como
solvente de elección para extracción. La cosecha de
extracción de las proteínas más allá pueden ser aumentadas
por utilizar la enzima asistió extracción acuosa de proteínas.
Different carbohydrases Y proteases puede soler proteínas de
liberación de substratos de planta. Jung Et al. Utilizado
pectinase para mejorar el extractability de proteína de soja
sin degradación de proteína, en laboratorio y escala piloto.
La recuperación de proteína estuvo aumentada por 50%
cuando comparado para controlar con una estabilidad de
espuma mejorada. Cóctel de enzima de pectinase y cellulase
no podría aumentar la cosecha de proteína comparó al uso de
enzimas solas (Jung et al., 2006). Más allá, Hanmoungjai y
collea- gues exploró ele ffect de Celluclast®, hemicellulase,
Pectinex ultra SP®, Viscozyme®, Alcalase® y papain
encima aceite y extracción de proteína de arroz bran.
Alcalase® Estuvo encontrado para ser el más effective en
en- arrugando extracción de proteína. También aumentando
el bran para abrevar proporción ligeramente decreased la
cosecha de proteína debido a accesibilidad más alta de en-
zymes a la pared de célula en proporciones más bajas
(Hanmoungjai et al., 2002). La cosecha de proteína mejor
puede ser obtenida de las hojas inicialmente presentes en
condiciones buenas. Prudente y limpio cortando de las hojas
asegurarán que no se deterioran deprisa y por ello una
cosecha de proteína buena puede ser ob- tained. Congelando
las hojas pueden mejorar proteína extractability upto 30%
(Ghaly y Alkoaik, 2010). Mesa 6 exposiciones ejemplos
recientes de enzima extracción asistida de proteínas de
plantas, especificando la fuente de proteína, la enzima
utilizada y cosecha de proteína obtenida después de que
extracción.
Recientemente biológicamente los péptidos marinos
activos y las proteínas han abierto una perspectiva nueva
para desarrollos farmacéuticos qué está derivado de algas y
animales marinos. Different Las proteínas y los péptidos
tienen funcionalidades biológicas importantes (como
anticancer, antihypertensive, anti-enflammatory,
antioxidante y antiobesity ef- fects), nutraceuticals y
potencialidades farmacéuticas (Wijesinghe & Jeon, 2012).
Algún rojo o especie de alga verde contienen
considerablemente cantidad alta de proteínas. Por tanto, para
evaluar el contenido de proteína endi fferent algal especie,
Amano y Noda utilizó enzima tecnología asistida- nique para

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Mesa 6
Enzima extracción asistida de proteínas.
Fuente y proteína Cosecha de Enzima de condiciones Experimental Ref

Semilla de colza, soja, y microalgae PH: 12, Temp: 40 °C Protex 40XL®, Protex P®, y Protex 5L® 15–30% (Sari et al., 2013)
comidas Dosis de enzima: 5%
Tiempo: 24 h
Pinto Alubia α-amilasa PH: 7.5, Temp: 50 °C Protamex® 57.5% (Ngoh & Gan, 2016)
inhibitor péptidos Substrato: enzima: 10 (w/
w)
Tiempo: 30 pH
Lunasin Y Bowman-Birk protease de min.: 9.0, Temp: 50 °C Protease 89–96% (De Moura et al., 2011)
inhibitor Substrato: enzima: 6 (w/w)
Tiempo: 1 h
Proteína de soja PH: 9.0, Temp: 50 °C Protease 97% (De Almeida, De Moura Bell, & Johnson,
Substrato: enzima: 6 (w/w) 2014)
Tiempo: 1 h
Proteína de sojas PH: 9.0, Temp: 50 °C Protease 87.6% (De Moura, Campbell, De Almeida, Glatz, &
Substrato: enzima: 6 (w/w) Johnson, 2011)
Tiempo: 1 h
Proteína de cacahuete PH: 9.5, Temp: 60 °C Alcalase 2.4L® 88.21% (Jiang Et al., 2010)
Substrato: enzima: 5 (w/w)
Tiempo: 90 Semilla de colza
de min. pastel PH: 9.0, Temp: 60 °C Viscozyme L® y Alcalase 2.4L® 96.6% (Niu Et al., 2012)
Substrato: enzima: 1 (w/w)
Tiempo: 80 min
Moringa oleifera semilla PH: 9.0, Temp: 45 °C Protex 7L®, Multifect CX 13L®, Viscozyme L®, 75.4% (Latif Et al., 2011)
Substrato: enzima: 8 (w/w) Kemzyme® Y Natuzyme®
Tiempo: 120 Semilla de colza
de min. proteína PH: 10.0, Temp: 48 °C Pectinase, cellulase, y β -glucanase 80–83% (Zhang Et al., 2007)
Substrato: enzima: 4 (w/w)
Tiempo: 4 h
Arroz bran proteína PH: 10.0, Temp: 55 °C Phytase Y xylanase 74.6% (Wang, Hettiarachchy, Qi, Burks, &
Substrato: enzima: 7.5 (w/ Siebenmorgen, 1999)
w)
Tiempo: 2 h

aislando proteína con objeto de preservar su composición, conformation


PH alcalino, 80% proteínas de comida de soja y 15–30% proteína de
funcionalidad y propiedades biológicas (Nadar, Muley, Ladole, & Joshi, 2016;
ra- peseed y microalgae las comidas estuvo extraída sin adición de
Zhang, Wang, Xu, & Gao, 2009).
enzima. Encima adición de enzima, cosecha de extracción de la
proteína aumentó a 90% para comida de soja y 50–80% para semilla
de colza y microalgae comidas. De modo parecido, Zhang et al.
Utilizado Alcalase® siguió por carbohydrase tratar- ment
(combinación de cellulase, β-glucanase y pectinase) de violación-
semillas (Cruciferae familiares) para acelerar hidrólisis de proteína
para romper la emulsión y simultáneamente conseguir cosechas más
altas de aceite libre (73–76%) y proteína hydrolysates (80–83%) en el
sistema de extracción enzimático acuoso (Zhang et al., 2007).
Extracción de proteína era mayoritariamente enfluenced por
parámetros de sistema como pH, el tipo de biomasa, y la adición de
enzima..
En otro ejemplo de protease extracción asistida, antioxidante y α -
amilasa inhibitor los péptidos estuvieron extraídos de Pinto alubia
(Phaseolus vulgaris cv. Pinto) La proteína aísla (PBPI) utilizando
Protamex®. Más allá, sea fractioned utilizando membrana
ultrafiltration con corte de peso molecular offs para conseguir fracción
de péptido de 3 < kDa, el cual exhibió las actividades antioxidantes
más altas i.e. FRAP (0.81 mM), ABTS (42.2%) y α -amy- lase
actividad inhibitoria (62.1%). De modo parecido angiotensin yo-
convirtiendo en- zyme (AS) inhibitorio y antihypertensive propiedades
de patata y proteína de semilla de colza-derivó péptidos por Alcalase®
estuvo investigado (Sari, Bruins, & Sanders, 2013). Del por encima de
ejemplos pueda ser inferido que enzima la extracción basada podría
ser empleada no sólo para aislar las proteínas que poseen propiedades
biológicas pero también para mejorar su ac- tivity (Ngoh & Gan,
2016).
El uso de proteínas y péptidos como ingrediente alimentario mucho
de- pends en las propiedades funcionales (como gelation,
emulsificatión, espumando, solubilidad y sorption) cuáles están
relacionados a intrínsecos physic- propiedades químicas. De ahí, es
necesario de utilizar condiciones de procesamiento suave mientras

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4. Hyphenated Técnicas de extracción 3
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Con la importancia de aumentar de enzima extracción


asistida de bioac- tives de plantas, los investigadores son
ahora atraídos hacia el benefits de hyphenated técnicas de
enzima extracción asistida y otra extracción no convencional
técnicas para bioactives. Técnicas noveles como tres-fase
partitioning, microonda-extracción asistida, ultra- sonido-
extracción asistida, supercritical fluid extracción y alto pres-
la extracción segura ya ha sido explorada antiguamente. La
sinergia de enzima la extracción asistida con estas técnicas
puede soler encima- venir el drawbacks de tecnología de
enzima como consumo solvente más alto y tiempo de
extracción más larga. También, estos verde y eco- las
técnicas amistosas extraen el deseó moléculas en forma pura
con cosecha más alta.

4.1. El ultrasonido asistió extracción enzimática (UAEE)

Considerando el alto efficiency de enzima aided reacción y


sim- plificatión de operación experimental, la irradiación
ultrasónica solió acelera enzimático pretreatment. La enzima
asistió extracciones com- bined con el ultrasonido ha sido
desarrollado como métodos nuevos para la extracción de
bioactive moléculas. Cuándo pase de olas del ultrasonido a
través de medio solvente, acústico cavitation está seguido qué
resultados en im- cosecha de extracción probada. La exposición
de olas de ultrasonido al sol- medio de ventilación produce
vapor pequeño fi bullbeb
dles. Este fenómeno es sabido como
cavitation. Cuándo estas burbujas crecen allende una medida
segura, dirige a su explosión que resulta en localized presiones
altas y tem- peratures (Arvayo-Enríquez et al., 2013; Nadar &
Rathod, 2016b). Cuándo estas burbujas colapsan cercanas a la
superficie de pared de la célula, la presión alta liberada y la
temperatura generan jets líquidos y shear las fuerzas están
dirigidas hacia la superficie de pared de la célula. Estos jets
líquidos y shear las fuerzas implicaron en esta causa de proceso
daño físico a la integridad de la pared de célula o membrana
de célula. El ultrasonido aumenta la pared de célula

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Permeabilidad, dejando penetración más grande de solvente a la pared


de célula, lixiviando fuera de biomolecules a la fase líquida (Rao &

(Goula, Papatheodorou, Karasavva, & Kaderides,


Rathod, 2015un). También, el tratamiento ultrasónico debajo optimizó
condiciones (intensidad y frecuencias apropiadas niveles) puede dirigir
a actividad de enzima realzada. Esto se debe a favorable
conformational cambios y estructurales en- tegrity cuáles mejoran el

(Chen, Li, Liu, Yang, & Li, 2012)


(Xu, Zhang, Yang, Canción, & Yu,
proceso de extracción de biomolecules (Nadar & Rathod, 2017b).

2015) (Zhang, Guo, Wang, & Él,


(Seguidor, Hu, Fu, & Zhang, UAEE Es una extracción sencilla y rápida técnica qué expedites la
cosecha de extracción aparte de mejorar el pharmacological activ- ities

2015) (Liao et al., 2015)


de los extractos de productos naturales. Extracción de ultrasonido

(Tchabo Et al., 2015)


(et al Largo., 2011)
(Wu Et al., 2014)
puede ser actuada en un baño de ultrasonido (indirecto sonication) o un
2015) (Ke, 2015)
2016) (Pu et al.,

(Li et al., 2014).


(Zhang Et al.,

cuerno de ultrasonido (directo sonication). En el UAEE de


biomolecules, la cosecha de extracción está asociada con parámetros
como concentración de enzimas, poder de ultrasonido, solvente a
2015)

2016)
Ref.

proporción sólida, frecuencia de ultrasonido, ciclo de deber y tiempo


de extracción (Bansode & Rathod, 2017). Esta técnica puede salvar
403.1 mg/100 g tiempo de operación, consumo solvente y puede ser reproducido en
una Mesa de escala comercial 7 exposiciones los ejemplos recientes de
70.13%

62.5%
UAEE. Presenta la fuente de biomolecule extracción, varios
59.9%
29.7%
14.3%
14.5%

36.8%
5.98%
50.2%

15.8%

4.33%
7.1%
Cose
cha

parámetros af- fecting extracción de ultrasonido como poder de


ultrasonido, frecuencia, ir- tiempo de radiación y la cosecha de
90.5 min
36.8 min

25.6 min

42.3 min

extracción. Enun e ffort para extraer poly- saccharides de seda de maíz,


120 min
120 min

40 min

20 min

30 min
30 min
14 min

32 min

30 min
Tiem

los investigadores emplearon enzymolysis–ultrasonido extracción


po

asistida (EUAE) proceso a seda de maíz. Los autores concluyeron que


tratamiento ultrasónico no sólo resultado en un cambio en la
57.99
Temp

46.8

51.5
(°C)

composición química y características morfológicas de polisacáridos de


65

52
40
40
50
65

50

55

35
45
Ultrasonido condiciones

seda del maíz, pero también decreased su peso molecular dis- tribution.
Power

225.2

Bajo las condiciones de extracción óptimas, la cosecha de poly-


(W)

250

340

300
311
250

440

250
60

saccharides aumentado de 4.56% a 7.10%. También polisacáridos ob-




experimentales

tained por EUAE mostró los cambios morfológicos en célula amurallan


Frecuencia

33.5 kHz

adición a mejorado antioxidante y anticancer las actividades


20 kHz

compararon con los polisacáridos obtuvieron por extracción de agua


caliente (Chen, Chen et al., 2014). De modo parecido, carotenoids ha








sido extraído de la zanahoria pela utilizar el ultrasonido combinado


Cellulase, Viscozyme L®, Alcalase 2.4L®, Protex 6L® y Protex 7L®

con tratamiento de enzima vía radiación intermitente. Este tratamiento


realza la cosecha sin térmico de- gradación de carotenoids (Arvayo-
Enríquez et al., 2013).
Aparte de colores, polisacáridos y compuestos fenólicos, aceites
También puede ser extraído por UAEE. Anteriormente prensa
mecánica y o- ganic los solventes solieron aceite de extracto de perilla
semillas. La cosecha de aceite por extracción de prensa mecánica es
Papain, pectase, cellulase y α -amilasa

Immobilized cellulase, pectinase y hemicellulase

abajo, y la extracción solvente orgánica está considerada unsafe debido


Celulosa, pectinase y trypsin Papain

a salud y asuntos medioambientales. Ele ffect de ultrasónico


pretreatment en enzima extracción asistida de aceite de perilla las
Celulosa, pectinase y trypsin

semillas estuvo investigada por Li et al. El perilla las semillas eran


Cellulase Y Peclyve®

inicialmente tratadas con ultrasonido. Más allá, five different tipos de


Pectinase Y papain

enzimas, cel- lulase, Viscozyme L®, Alcalase 2.4L®, Protex 6L®, y


Protex 7L®, estuvo explorado para liberar aceite de perilla semillas. La
cosecha de aceite más alta de 81.74% estuvo observado en perilla las
Cellulase
Cellulase
Cellulase

semillas trataron con cellulase. A pesar de que ningún significant


cambios en las propiedades físicas de aceite como refractive índice,
Pectinex UF®

unsaponifiasunto capaz, saponifivalor de catión y valor de ácido


estuvieron observados después de tratamiento enzimático (Li et al.,
2014).
Carbohydratase Es ampliamente utilizado en industria de
Cellulase
Enzima

procesamiento del zumo a tan- lubilise las paredes de célula para


trucaje en cosecha de zumo. A pesar de que, em- ploying enzima la
extracción asistida es sabida de causar una mejora en phytochemical
extracción compuesta, es generalmente cronometra consumir y
lisacáridos de Lentinus edodes Polisacáridos

eite de perilla (Perilla frutescens L.) Semillas

finalmente puede aumentar el coste de procesamiento (Maier et al.,


Polisacáridos de grosella negra de Ginkgo

vonoides de mulberry (Morus nigra) Aceite


minea Polisacáridos de Epimedium hojas

mosto de fl hacha (Linum usitatissimum L.)


lisacáridos de Atratylodes macrocephala

2008). Por ello tecnología de ultrasonido puede ser empleada para


oba Polisacárido de hojas de Corbicula
lisacárido de Momordica charabtia L.

reducir el macera- tion tiempo mientras cosecha creciente de


lisacáridos de calabaza (Cucurbita
ima extracción de ultrasonido

lisacáridos de Cistanche tubulosa

extracción. UAEE De phytochemical compuestos de mulberry (Morus


nigra) el mosto estuvo estudiado por re- buscadores. Ultrasonido-la
extracción enzimática asistida estuvo encontrada a de- pend encima
frecuencia de ultrasonido, la enzima que carga y tiempo de
omolecule Y fuente

eite de semillas de

moschata)

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tido.
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maceración. También UAEE tuvo considerable effect en la ligereza y
el browning índice de mulberry mosto. El estudio concluyó que UAEE
realza la calidad de mulberry mosto y reduce el tiempo durante el
proceso de maceración de zumo (Tchabo et al., 2015).
En un ejemplo interesante, Luo et al. La enzima optimizada asistió
Presión negativa cavitation extracción (E-NCPE) de fi ve indole alka-
loids de Catharanthus roseus hojas y desarrolló el método para
aplicación de escala piloto. Enzima o enzima individuales
mezcla

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Conteniendo cellulase, pectinase, y β -glucosidase estuvo empleado para Mejora en el liberation de productos intracelulares, dejando la
el propósito. En optimal condiciones de E-NPCE, las cosechas de penetración de solventes a las células. El uso de carbohydrases com-
extracción de indole los alcaloides representaron una cosecha aumentada bined con pressurized los líquidos mejoraron los antioxidantes en el
de 58.3% comparado a NPCE. El E-NPCE el método podría ser utilizado extracto compararon a el uso de HPE sólo. De modo parecido, la
para la extracción de escala grande económica de productos naturales, enzima asistió HPE estuvo llevado a cabo para la extracción de
porque E-NPCE el método tiene méritos de sencillos setup, siendo carotenoids de residuos de tomate (Strati, Gogou, & Oreopoulou,
económicos, proporcionando más altos efficiency y eco- amabilidad (Luo 2015), aceite esencial de fruto seco de tigre (Cyperus es- culentus)
et al., 2014). (Ezeh, Gordon, & Niranjan, 2016), polisacáridos de longan pulpa (Bai
et al., 2017) y Okara de soja (Pérez-López et al., 2016). Ele
ffectiveness de la extracción es dependiente en el componente
4.2. La enzima asistió extracción de presión alta
estructural y morfológico de material de planta. Por ello un estudio
más detallado de la estructura de polisacárido de substrato de planta y
El proceso de extracción de presión alta (HPE) implica tratar el
el uso de specific las enzimas está necesitada para hidrólisis mejor, a
material de planta con solvente, tratando esta mezcla con isostatic ultra
lib- erate máximo bioactive moléculas de las células de planta.
presión hidráulica alta, y fi ltering la mezcla para eliminar el tan-
HPE Proporciona una plataforma para la extracción efficiency para
párpados. El extracto obtuvo es más allá concentrado, secado, o
ser mucho aumentado, con recuperación rápida y alta de
purified para conseguir el biomolecule de interés. Causas de
biomolecules. Cuando está llevado a cabo en un entorno cerrado, no
tratamiento de presión altas struc- tural cambios en plantas, por daño
hay ninguna volatilización de solvente, pre- descargando
físico a las membranas de célula, por ello aumentando la permeabilidad
contaminación medioambiental. HPE Por tanto puede ser desarrollado
de pared de la célula y metabolito secundario diffu- sion a los
como una extensión de una producción de laboratorio a un nivel de
solventes. Estas ventajas a índice de extracción mejor y e fficiency
escala industrial para generar comidas seguras y sanas para los
(Corrales et al., 2008). La extracción de calentar los compuestos
consumidores.
sensibles pueden ser fácilmente conseguidos a través de HPE a
diferencia de extracción convencional. Los compuestos volátiles
pueden ser fácilmente y rápidamente extraídos con esta técnica sin 4.3. La enzima asistió extracción líquida iónica
degradación. La solubilidad de más natural biomolecules im- prueba
bajo presión alta. La gama de presión empleada para HPE es 100–1000 Líquidos iónicos (ILs) está compuesto de cationes orgánicos
MPa. HPE Está operado en la presión más alta comparó a otras voluminosos y en- aniones orgánicos u orgánicos y es líquido en
tecnologías de extraer y por ello pueda extraer más phytocon- stituents temperatura de habitación. Recientemente han sido reuniendo
(Prasad et al., 2009; Shouqin, Jun, & Changzheng, 2005). Los importancia endi fferent fields debido a sus propiedades excepcionales
investigadores han combinado las ventajas de extracción enzimática en de presión de vapor bajo, facilidad de reciclar, mis- cibility con agua y
presiones altas para explorar la extracción de phytochemicals de solventes orgánicos, sustancia química y térmico stabi- lities, así como
fuentes naturales qué es enlisted en Mesa 8. solubilidad buena y extractability en compuestos orgánicos
Para mejorar la cosecha de extracción de biomolecules de cactos, (Oppermann et al., 2011). Debido a la necesidad alarmante para
un estudio exploró ele ffect de una mezcla de enzima de Rapidase® y protección medioambiental, los líquidos iónicos están considerados
Viscozyme® bajo presión hidrostática alta. El polyphenol el contenido para ser opciones más seguras a solventes tradicionales en la extracción
de extracto de cactos estuvo encontrado para ser inversely relacionado biomolecules de plantas. Bioactive com- Libras como alcaloides,
a presión irrespective del tratamiento de enzima. Enzima extracción lignans, y polyphenols ha sido recuperado antiguamente utilizando ILs
asistida en- riched el polyphenol contenido del extracto y mejoró su (Bogdanov, 2014). Viscosidad de ILs también juega una función
peso seco. Enzima la extracción asistida que utiliza la presión alta importante en su aplicación de separación de bioactive compuestos de
mostró un mejorado anti-actividad complementaria polyphenolics plantas. La viscosidad de ILs reduce en elevó temperaturas (et al de
cuándo comparado a polyphenolics extracción por tratamiento de Bronceado., 2015). ILs Puede interaccionar junto con ambos polar así
calor. También, esta técnica estuvo encontrada a significantly reducir como nonpolar moléculas, y es útil cuándo combinado con una
la viscosidad y mejorar la cantidad de componentes activos y radicales variedad de técnicas de extracción. Los parámetros importantes gauged
scavenging actividad del extracto (Kim et al., 2014). Investigadores durante la extracción con ILs es estructura química, concentración,
haber también exploró la posibilidad de com- bining extracción moisture nivel, concentración de enzima, pH, temperatura de
enzimática con pressurized líquidos. Enzima la extracción asistida que extracción, enzima a proporción de substrato. IL-la extracción
utiliza líquidos de presión alta ha sido combinados para probar la enzimática asistida ha sido exitosamente aplicada para extraer variedad
extracción de phlorotannins del alga Sargassum muticum. Ele ffect de de clases de compuestos como curcumins y fenólicos com- libras (Dai
tratamiento enzimático de algas con proteases y carbo- hydrases ha et al., 2013). Está documentado que ILs tiene más viscosidad que
sido estudiado por investigadores (Sánchez-Camargo et al., 2016). La solventes orgánicos convencionales. La viscosidad de ILs tiene un en
extracción aumentada efficiency de materiales de planta era fluence en la estabilidad de enzima y actividad. Recientemente,
principalmente debido a disrupción de pared de la célula por cambios Rantwijk y Sheldon confirmed que el cambio de enzima conformation
de presión rápida dentro de tiempo a escaso, junto con hidrólisis es lento en altamente viscoso IL solventes. Esto es mantiene la
enzimática. Estas ventajas a un actividad y estabilidad de en- zymes para periodos de tiempo largo
(Rantwijk y Sheldon, 2007). Generalmente, las viscosidades altas de
solventes pueden ser traducidas a estabilización buena para

Mesa 8
La enzima asistió extracción de presión alta.
Biomolecule Y Enzima de fuente Cosecha de condiciones de presión Alta Ref.

Solvente:Presión sólida Temp Tiempo


(MPa) (°C)

Carotenoids De residuos de tomate Pectinase y cellulase 10:1 700 25 30 min 160 mg/kg (Strati et al., 2015)
Aceite de fruto seco de tigre (Cyperus esculentus) Protease, α- Viscozyme L®
amilasa y

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5:1Nadar Et al. 50 40 10 min 90% (Ezeh et al., 2016) Fo
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Polisacárido de Longan (Dimocarpus Cellulase 100:1 407 6 min
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0 (Bai et al., 2017)
longan Lour.)
Polyphenols De cactos Rapidase® Y Viscozyme® 50:1 300 40 60 min 12.2 mg/g (Kim et al., 2014)
Aceite de Moringa oleifera semilla Cellulase 6:1 50 60 35 min 73% (Mate Yusoff, Gordon, Ezeh, &
Niranjan, 2017)
Tricin De arroz hull Celluloblast® 5:100 500 20 6 min 32.9 mg/kg (Parque, Kim, Lee, Parque, & Imm,
2016)
Okara De leche de soja Ultraflo L® 1:40 600 30 120 min 15.6% (Pérez-López et al., 2016)

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Mesa 9
Enzima extracción de microonda asistida.
Biomolecule Y Microonda de Enzima de la fuente Cosecha de condiciones experimentales Ref

Frecuencia Power Temp Tiempo


(W) (°C)

Aceite esencial de Fructus forsythia Cellulase, hemicellulase y β -glucosidase 2450 Hz 1000 100 5 min 45.3% (Jiao Et al., 2012)
Polyphenols De Pectina de aceite de la oliva lyase y polygalacturonase. – 400 60 30 min 29.52 mg/g (Chanioti Et al., 2016)
Phenolics De alga marrón Viscozyme® – – 50 180 min 52% (Charoensiddhi Et al.,
Ecklonia radiata 2014)
Aceite de semillas de calabaza Cellulase, hemicellulase, pectinase, β- – 419 44 66 min 64.7% (Jiao Et al., 2014)
glucosidase Y neutro proteinase
Corilagin Y geraniin de Geranio Cellulase – 500 33 9 min 64.1 y (Yang et al., 2010)
sibiricum Linne 72.9%
Polyphenols De conchas de cacahuete Cellulase – – 66 120 min 1.75% (Zhang et al., 2013)
Polisacáridos de la fruta de Cellulase, papain y pectinase – – 47.5 10 min 7.38% (Cheng et al., 2015)
Schisandra chinensis Baill

Enzimas. La estabilidad excelente de enzimas a elevó temperaturas en


viscosos ILs ha abierto arriba de la posibilidad de extracción de 4.4. Enzima extracción de microonda asistida
biomolecules de plantas. La estabilidad de una gama ancha de enzimas
como thermo- lysin (Erbeldinger et al., 2000), lysozyme (Mann et al., A pesar de de ventajas múltiples de enzima tecnología de extracción asistida-
2009) y chymotrypsin (Diego, Lozano, Gmouh, Vaultier, & Iborra, nique, más bajo efficiency y tiempo de extracción alta es limitación importante .
2004) estuvo encontrado para aumentar significantly comparó a
aquello en solventes orgánicos tradicionales. De una vista crítica lo
señala puede dicho que en muchos casos, en- zymes el espectáculo
bueno estabilidad operacional y térmica en ILs.
Recientemente líquido iónico enzima basada extracción asistida
(ILEAE) de chlorogenic ácido (CGA) de Eucommia ulmoide estuvo
informado para el first tiempo, donde cellulase pretreatment estuvo
utilizado con anterioridad a extracción con IL medios de comunicación
acuosos. Ocho 1-alkyl-3-methylimidazolium los líquidos iónicos eran
screened para extracción. Comparado a técnicas de extracción
convencional, el ILEAE el método proporcionó cosecha de extracción
alta de chlorgenic ácido en un tiempo efficient manera. Escaneando
electrónico micro- scopy los resultados de muestras de planta
revelaron que la planta tratada con un com- bination de enzima y
líquidos iónicos, producidos efficient extracción por reducir barrera de
transferencia de la masa. Esto dirigió a una penetración mejor de
líquidos iónicos en la pared de célula de la planta y extracción más alta
efficiency (Liu et al., 2016).
Carbamate ILs Ha obtenido atención considerable debido a su su-
perior propiedades como volatilidad insignificante, toxicidad baja y fl
amm- capacidad y actividades biológicas como antimicrobial y
propiedades analgésicas. N,N-dimethyl amonio, N,N-
dimethylcarbamate la familia ha sido utilizada para extracción de
aceite, celulosa y hydrolysable bronceado- nins de productos naturales
como catechu (Acacia catechu) y myr- obolan (Terminalia chebula)
(Passos et al., 2014). Sahne Et al. synthe- sized Y utilizado N,N-
dipropyl amonio, N,N-dipropylcarbamate (DPCARB) como un
solvente de extracción para extracción rápida de curcumin de cúrcuma.
Un enzimático pretreatment paso (amilasa de alfa y amyloglucosidase)
estuvo empleado con anterioridad a la extracción para degradar la
estructura de cúrcuma y mejorar la extracción efficiency. El cur-
cosecha de extracción del comino de la cúrcuma que utiliza el
synthesized DPCARB era 3.58% en 25 °C en 2 h. En enzimático
pretreatment de cúrcuma, la cosecha sensiblemente mejorada a 5.73%.
También, los investigadores observaron que en las mismas condiciones
de extracción, el curcumin cosecha de extracción que utiliza la acetona
como solvente de extracción orgánico convencional era sólo 3.11%.
Los resultados también mostraron que DPCARB podría ser reciclado sin
significant pérdida con resultados de extracción similar como frescos
DPCARB. Esto reduce el proceso costado a una extensión grande
(Sahne et al., 2017). La recuperación de biomolecules es un hallmark
de ILs como estos sistemas de extracción pueden ser personalizados
por estructurales modificationes del IL para extraer specific
biomolecules.

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Esto puede ser vencido por coupling algunos enzima 3
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acelerada catalyse tecnologías de reacción. La combinación
de enzima microonda y extracción asistidas extracción
asistida (MAE) ha sido aceptado como técnica potente en la
extracción de bioactive componentes de plantas. Esto es
debido a varias ventajas como medioambientales com-
patibility, extracción alta efficiency, tiempo efficient
extracción y re- duced consumo solvente (Calinescu et al.,
2014). MAE es un pre- valently utilizado tecnología novel y
verde para extracción de producto natural. El principal de
MAE depende de la absorción de micro- energía ondulatoria
por solventes polares como agua, metanol, acetona, etc.
Cuándo pase de microondas a través de medio solvente, las
moléculas solventes absorben y convertirles a energía de
calor, así asegurando homo- geneous calefacción de la
muestra entera. Dipolo y conducción iónicos ro- tation de las
moléculas solventes polares causan su super hirviendo
cuándo expuestos a radiaciones de microonda (Chanioti et
al., 2016; Charoensiddhi et al., 2014). Más allá, esto causa
una elevación en la temperatura de medio de reacción que
dirige a superheating y moisture vaporización dentro de las
células de planta, resultando en disrupción de pared de la
célula. Como consecuencia, pene- tration de extraer el
solvente a los tejidos de planta es mucho facilitado
(Saifuddin et al., 2014; Yang et al., 2010). Los parámetros
adicionales que tiene que ser considerado en MAE es tiempo
de irradiación de la microonda , elección de solvente y poder
de microonda. No los solventes polares son trans- padre a
radiaciones de microonda y es inadecuado para la microonda
ex- tracción. Los solventes polares como agua tienen la
microonda decente que absorbe capacidad y calor arriba de
más rápidos así realzando el proceso de extracción (Rao y
Rathod, 2017; Cheng et al., 2015; Jiao et al., 2012). Los
aceites esenciales extrajeron de las plantas han sido
extensamente utilizadas tan pharmaceu- ticals, medicinas
naturales, preservación alimentaria, y terapias naturales.
Algunos de estos ejemplos son summarized en Mesa 9.
Recientemente, MAE está utilizada como técnica verde para
extracción de aceite esencial. Jiao Et al. Ex- tracted aceite
esencial de Fructus forsythia con mezcla de enzimas
(cellulase, hemicellulase y β -glucosidase) debajo microonda
condi- tions para conseguir cosecha de extracción máxima
(3.27%) del aceite esencial, el cual era más alto por 45.33%
y 39.15% que aquellos de tradicionales hydro-destilación
(HD) y microonda normal hydro-destilación (MHD),
respectivamente (Jiao et al., 2012).
Microonda-asistido extracción enzimática acuosa (MAAEE) de
Aceite de semilla de la calabaza estuvo actuado en un
estudio por Jiao et al. Una mezcla de enzima de cellulase,
pectinase y proteinase era el más effective en recuperación
de aceite. La recuperación de aceite más alta de 64.17%
estuvo conseguido utilizando parámetros óptimos como
concentración de enzima (1.4%, w/w), re- temperatura de
acción (44 °C), tiempo de extracción (66 min) y poder de
microonda (419 W). Además, MAAEE el aceite exhibió
oxidación mejor sta- bility que el aceite extraído por Soxhlet
extracción. Además extracto de MAAEE mostró contenido
más alto de linoleic ácido y superior anti- actividad de
oxidante cuando comparado al Soxhlet extracto (Jiao et al.,
2014). Otra ventaja importante de emplear la microonda es
la reducción drástica en tiempo de extracción de
phytochemicals. Zhang Et al. Estudiado el

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Ocupación de microondas en la extracción enzimática de polyphenols Tiempo) y estabilidad de almacenamiento mejor (2.4 tiempo más alto
de conchas de cacahuete de los residuos. Esté observado que el tiempo en 4 °C y 7.8 tiempo más alto en 70 °C) comparó al nano-liposomas,
de extracción de polyphenols requirió drásticamente reducido a único formulados con puros piperine. En otro ejemplo, la enzima asistió SC-
2.6 min encima empleando microondas. La recuperación de total CO2 ex- tracción de pimienta negra oleoresin estuvo llevado a cabo por
polyphenols era 1.75%, y esto era más alto que otras técnicas de emplear α- amilasa. Optimización de los parámetros de extracción
extracción emplearon como calor-re- fluxing extracción, ultrasónico- como tempera- ture y la presión estuvo conducida en ambos lote así
enzima y extracción asistidas extracción asistida sólo. Para añadir al como modos continuos de SC-CO2. El modo de lote proporcionó
encima benefits, el polyphenol el extracto exhibió superior conducive condiciones para extracción y cosecha máxima producida
antibacterial y actividades antioxidantes. De modo parecido este (53%) de piperine por este método. El equilibration tiempo durante
hyphenated la técnica ha probado para ser beneficial en extraer aceites modo de lote posiblemente servido tan incubación para la extracción
de Lavandula angustifolia Molinero e Isatis indigotica semillas y poly- enzimática que dirige a cosecha realzada de pi- perine contenido.
saccharides de Euryale ferox y Pleurotus eryngii stalk residuo (Zhang et Curiosamente, la actividad de la amilasa aumentada por 2.13 tiempo en
al., 2013). Empleando la microonda ha ahora devenir uno de el el modo continuo cuando comparado a modo de lote (1.25 tiempo).
popular y coste-effective métodos de extracción y varios avances en el NMR El análisis reveló que había una alteración en las enzimas
en- strumentation y las metodologías en extracción de microonda conformational arreglo en su sitio activo, el cual resultó en en- hanced
tienen ser- venir disponible (Chan et al., 2011). specific actividad de la enzima (Dutta & Bhattacharjee, 2015; Wimmer
& Zarevecka, 2010).
4.5. La enzima asistió supercritical fluid extracción Una porción predominante de plantar compuestos fenólicos, i.e. no-ex-
tractable polyphenols (NEPPs), es glycosidically enlazado con
La extracción que utiliza supercritical fluid ha atraído un interés cellulosic y hemicellulosic microfibrils y no lixivia durante extracción
importante en los años recientes, debido a su propiedad extraordinaria solvente sencilla o en hervir agua. Varias clases de pretreatments como
de ambiental cri- tical temperatura (310 °C) aquello deja materiales ul- trasound, microonda, y el ácido o la hidrólisis alcalina han sido
biológicos para ser ex- tracted en temperaturas más altas (350 °C) sug- gested para poner libre estos ataron phenolics. Pero las
(Nerome et al., 2016). La densidad de el supercritical CO2 (SC-CO2) y preocupaciones han sido con- veyed con respecto a la calidad
su solvation la característica es similar a hexane; así, actúa como antioxidante y nutritiva de lixiviado polyphenols. SC-CO2 tecnología
solvente no polar (Bhusnure et al., 2015). La ventaja importante es que basada tiene atrajo investigadores para su capacidad de extraer los
cuando hay modificationes en supercritical condiciones como compuestos prone a oxidación y deterioro térmicos debido a su
reducción pequeña en temperatura o presión, resulte en casi el soluto temperatura operacional suave. NEPPs De sobra de té negro (BTLO),
entero que precipita fuera (Shitu, Izhar, & Tahir, 2015). Supercritical estuvo extraído utilizando SC-CO2 asistió extracción enzimática por
fluids Es solventes seguros cuando generan productos sin residuos Mushtaq et al. BTLO Era hydrolysed con varias formulaciones de
solventes (Jabari, 1993; Da Silva, Rocha-Santos, y Duarte, 2016). Los enzima y estuvo extraído utilizando supercritical dióxido de carbono
ejemplos de enzima asistieron super- críticos fluid la extracción está con etanol como co-solvente. Una extracción solvente convencional
dada Mesa 10. La mesa presenta una variedad de enzimas empleó, estuvo actuada utilizando etanol y agua (80:20, v/v) para propósitos de
biomolecules y fuentes de planta utilizaron en SC-CO2 extracción, comparación. Los resultados revelaron que hidrólisis de BTLO con
condiciones experimentales como, temperatura, presión, sólido a la Kemzyme® (α-amilasa) mejoró el liberation de NEPPs offering 5-
proporción solvente y la cosecha de extracción obtuvieron. Las plegar cosecha de extracto más alto cuando comparado con no-tratado
características solventes de supercritical fluid puede ser modified por BTLO. El polyphenol los extractos obtuvieron por SC-CO2 extracción
la adición de un co-solvente, como etanol. Desafortunadamente, estuvo encontrada para ser más limpio y más rico en polyphenols
algunos los residuos solventes pueden quedar en el extracto, por ello cuando comparado a extracción solvente (Mushtaq et al., 2017). De
neutralizando las ventajas del residuo extracción libre (Basegmez et modo parecido, en otro trabajo, Mushtaq y los colegas utilizaron
al., 2017; Mushtaq et al., 2015). estrategias de extracción misma para la extracción de antioxidantes
Supercritical fluid-Técnicas de extracción basada están fenólicos de cáscara de residuos de la fruta de granada. Los autores
consideradas ex- pensive debido a cosecha de extracción baja cuándo encontraron que la enzima asistió supercritical fluid la extracción
aplicada a la extracción de la matriz biológica compleja. Pretreatment mostró no recuperación realzada sólo de extractable bioactive
Con pared de célula hy- drolase enzima antes de SC-CO2 extracción componentes pero también significantly mejoró los niveles de ex-
compensará para el ca- pital costado porque pueda mejorar tracted totales phenolics, (libres radicales scavengers) actividades
transferencia de masa, aumento el área de contacto y realzar antioxidantes y otras propiedades biológicas en comparación con el
distribución solvente (Wang et al., 2014). Ha probado paraser e control (Mushtaq et al., 2015).
ffective en realzar el índice de extracción y calidad de bioactive La detección de enzimas que puede retener su biocatalytic la
productos. El almacenamiento alimentario apropiado es una manera actividad bajo presiones altas ha animado su uso bajo supercritical
crítica de proteger la comida de degradación. En esta vista, piperine- condiciones. En la presencia de cantidad apropiada de abrevar aquello
extracto de pimienta negro rico era ex- tracted por α-amilasa-asistido es ne- cessary para actividad de enzima, SC-CO2 puede ser utilizado
supercritical extracción de dióxido de carbono (en 300 barra, 60 °C, como el medio de reacción. La estabilidad de enzima y actividad, en la
135 min tiempo de extracción total y un flow índice de gaseoso CO 2 en presencia de dióxido de carbono bajo presión alta, depender de la
2 L/min). Sea encapsulated tan nano-liposomas para estabilidad de especie de enzima, contenido de agua en la solución y en la presión y
almacenamiento realzado y para dejar liberación sostenida de piperine. la temperatura del sistema de extracción. Incluso aunque supercritical
Estos nano-los liposomas poseyeron antioxidante más alto potency fluid extracción
(1.10

Mesa 10
La enzima asistió supercritical extracción.
Biomolecule Y Enzima de fuente Supercritical Cosecha de condiciones de la extracción Ref

Solvente:sólid Presión Temp Tiempo


o
MPa °C

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Lipophilic De Grosella negra Viscozyme L® 5% (v/w) 45 60 120 min 3
314.6%
0 (Basegmez Et al., 2017)
pomace
Lycopene De tomate Celluclast® y Viscozyme ® 1:1 50 86 270 min 75% (Lenucci Et al., 2015)
Phenolics De cáscara de granada Pectinase, protease, cellulase, Alcalase® y – 0.3 50 120 min 161 μg/de g (Mushtaq Et al., 2015)
Viscozyme®
Oleoresin De pimienta negra α-Amilasa 1:5000 0.3 60 135 min 3.9 g/100 g (Dutta & Bhattacharjee,
2015)

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La tecnología tiene una mano superior sobre técnicas convencionales, Inicial enzymolysis estuvo hecho dónde el flaxseeds era pretreated con
el coste de equipamiento puede ser un hindrance a escala industrial enzimas para flaxseed hidrólisis. TPP Era entonces llevado a cabo por
commercializa- tion de supercritical proceso. Un riesgo en seguridad añadir sal y t-butanol al crudo flaxseed slurry, resultando en el separa-
debido a la operación bajo presión alta es una preocupación importante tion de fl axseed aceite a la fase orgánica (et al de Bronceado., 2016).
con esta técnica. El proceso de extracción puede ser hecho El con- centration de t-butanol, sal de porcentaje que carga, y la
económicamente viable por someter el material de tracción ex crudo a reacción tem- perature estuvo optimizado para recuperación máxima.
temperaturas y presiones más altas y empleando co-solventes (etanol) Bajo las condiciones de extracción ideales cuando 49.29% t-butanol
para extraer el deseado biomolecules, y entonces segregate el extracto concentración, 30.4% soy- monium concentración de sulfato, y 35 °C
para obtener varias fracciones de valor altas. extracción temperatura, una cosecha de extracción máxima de 71.68%
estuvo producido. Así, enzima tan- sisted tres fase partitioning
(EATPP) promesas para ser un effective y método rápido para separar
4.6. La enzima asistió tres fase partitioning
aceites, junto con cosechas de extracción superior y calidad de aceite.
Esta técnica puede ser scaled arriba para aceite de escala grande
Tres-fase partitioning (TPP) es una técnica reciente basada en par-
produc- tion.
titioning de elector hidrofílico, elector hidrofóbico y pro- tein dentro
Jengibre oleoresin ha sido extraído vía soxhlet extracción y
tres fase que comprende t-butanol (fase superior), proteína (fase
técnicas de percolación fría cuando informados en la literatura. El
media) y sulfato de amonio (fase más baja). Esta técnica era
importante dis- las ventajas de estas técnicas convencionales son
inicialmente utilizada para separación de proteínas, enzimas y lípidos,
extracción alta tem- perature, tiempo de extracción larga
pero ahora está siendo utilizado en extracción de bioactives como
(mayoritariamente > 10 h) y requerir enorme ha- zardous solventes.
aceites, oleoresins y polisacáridos de fuentes de planta (Nadar, Pawar,
Empleando la enzima asistió TPP como un efficient técnica para el
Rathod, 2017; Yan et al., 2017). TPP Básicamente implica
aislamiento de oleoresin de polvo de rizoma de jengibre secado estuvo
precipitación de proteínas como un interfacial capa entre fases acuosas
actuado por Varakumar et al. Stargen® (Amilasa) y Accellerase®
y orgánicas, cuándo el extracto acuoso crudo añadió a cantidades
(cellulase) estuvo escogido para enzimático pretreatment. El uso de
adecuadas de sulfato de amonio y t-butanol. El biomolecule del interés
Stargen resultado en significant aumento en gingerols y oleor- esins
separa fuera en uno de las tres fases (Harde & Singhal, 2012; Rao &
dentro 4 h, a diferencia de soxhlet extracción y prensado frío, el cual
Rathod, 2015un). El principio de TPP está gobernado por una
requirió 12 h para extracción. Soxhlet, percolación fría y tradicional
combinación de muchos factores en- cluding salazón fuera, isotonic
TPP los métodos no alteraron la superficie y la morfología que muestra
precipitación, co-precipitación solvente, os- molytic y kosmotropic
com- pacto cellulosic mura gránulos encima SEM estudios. Enzimático
effect, proteína hydration cambios y electro- fuerzas estáticas. TPP
pretreatment de polvo de jengibre alteró la organización en
offers Varias ventajas sobre métodos de extracción de proteína
microestructura de gránulos de almidón y celulosa fibrils (Varakumar
convencionales, el cual incluye el uso de suave operacional condi-
et al., 2017). Aparte de en- arrugando la cosecha de extracción y e
tions y proceso scalability. Además, pueda ser utilizado directamente
fficiency, esta técnica también resultada en parcial purificatión de
en materiales de planta cruda, por ello reduciendo el coste de proceso.
bioactives cuál reduce el coste de proceso. Estudios más lejanos
El uso de sustancias químicas económicas como t-butanol y sulfato de
encima escala-arriba está requerido antes de esta técnica está explotada
amonio también hace el proceso económico (Rao & Rathod, 2015b;
comercialmente.
Vidhate & Singhal, 2013). El tratamiento enzimático puede hydrolyse
pared de célula y membrana de célula poly- saccharides así como la
proteína asociada con deseable bioactives cuáles ayudan para aliviar de 5. Inmovilización de enzima como estrategia en aplicación de escala
liberación de bioactives. La enzima asistió ex- la tracción seguida por grande
TPP ayudas para separar contamina (no-desir- capaces) y concentrar el
deseable bioactive moléculas en uno de las fases. Varios informes en la A pesar de las ventajas de tecnología de enzima, su escala grande
enzima asistieron tres fase partitioning con sus condiciones ap- plication es siempre obstaculizado debido a pocos mayorías cortas
experimentales están presentadas en Mesa 11. como estabilidad de plazo largo más baja bajo condiciones
En la enzima asistió TPP, el proceso habitual está seguido después operacionales (temperatura alta y pH extremo), diffirecuperación de
de tratar. culto de mezcla de reacción y enzima reusability (Sheldon & furgoneta
El material de planta con una enzima o una combinación de enzimas. Pelt, 2013). La inmovilización de enzimas puede ser utilizada como
TPP Ha sido utilizado en extracción de aceite de tres substratos: estrategia para realzar el rendimiento operacional de en- zymes para
mango kernel, soja y arroz bran por Gaur et al. Enzima pretreatment scalability. Inmovilización de enzima mejora la enzima propiedades
con una preparación de enzima comercial (Protizym®) siguió por TPP catalíticas con respetar a (gama ancha de) pH y tolerancia y estabilidad
re- sulted en 98, 86 y 79% (w/w) cosechas de aceite para soja, arroz térmicas contra solventes orgánicos. También, emplea mul- tiple usos
bran y mango kernel, respectivamente. Enzima la extracción asistida de las enzimas caras que les hacen industriales y econom- ically
tiene un borde sobre extracción solvente debido a ser tiempo efficient. factibles (Nadar & Rathod, 2016un; Talekar et al., 2012).
También, empleando t-butanol como solvente es mucho más seguro Una gama ancha de soportes/inorgánicos orgánicos ha sido
que n-hexane cuál suele aceites de extracto convencionalmente (Gaur synthesized (como alúmina, sílice, zeolitas y mesoporous sílice) y
et al., 2007). TPP Cuál es un verde bioseparation la técnica puede ser utilizado como plataforma para la inmovilización de enzimas (Wang,
utilizada para recuperación de aceite de fl axseed. Qi, Su, & Él, 2015; Zhou & Hartmann, 2012). Varias lata de
materiales polimérica sintética

Mesa 11
La enzima asistió tres fase partitioning.

Biomolecule Y fuente Enzima TPP Cosecha Ref


Condiciones experimentales

Componente de conformación de la Temp PH Tiem


fase po
°C

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Oleoresin De jengibre (Zingiber officinale) Stargen 002®, Accellerase® y β - Sulfato de amonio (10%) y t- 30 °C 5 3
301h 87.8% (Varakumar Et al., 2017)
rizoma glucosidase butanol
Aceite de fl axseed (Linum usitatissimum L.) Pectinase Y proteinase Sulfato de amonio (30.4%) y 40 °C – 12 h 71.68% (Et al de bronceado.,
t-butanol 2016)
Forskolin De Coleus forskohlii raíces Stargen 002® y Accellerase® Sulfato de amonio (30%) y t- 30 °C 7 1h 30.83% (Harde & Singhal, 2012)
butanol
Aceite de arroz bran Proteases Y Protizyme® Sulfato de amonio (30%) y t- 50 °C 4 – 79% (Gaur Et al., 2007)
butanol

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65% después de que 4 h en el caso de proceso enzimático convencional
También ser utilizado tan soporte debido a facilidad en
(Gadalkar & Rathod, 2017).
functionalization/modificatión junto con estabilidad mecánica y
Aplicación exitosa de MNPs en varios fields depende de medida de partícula,
térmica buena (Nadar & Rathod, 2017b; Talekar et al., 2013).
área de superficie y morfología, su momento magnético intrínseco y magneto
Nanoparticles Probó para ser más efficient materiales cargadores para
características de anisotropía cristalina. El punto de vista de MNPs para el uso en
inmovilización de enzima cuando poseen alto spe- cific área de
industria alimentaria es muy prometedor.
superficie, accesibilidad fácil a substrato y la enzima más grande que
carga. Aun así, nanoparticles esdi fficulto para sacar del re- solución de
acción. Para dirigir este asunto, los investigadores han investigado el
uso de magnético nanoparticles que sería fácilmente recuperado y se-
parated por aplicar externo magnético field. Magnético nanoparticles
(MNPs) está considerado como transportista potencial para
inmovilización de enzima debido a propiedades como su tailored
química de superficie, biodegrad- capacidad, biocompatibility,
toxicidad baja, abajo costado y su selectivo se- paration propiedad de
immobilized enzimas de la mezcla de reacción (Talekar et al., 2017).
En años recientes, debido al aumento global en consumo de zumo de
fruta natural, los zumos han devenido importantes de un punto de vista
de consumo. Aun así, los zumos crudos son viscosos y turbid en
aspecto debido a pectina y otros carbohidratos qué es presente en la
forma de pared de célula de fruta interrumpida y materiales de célula.
También, el almidón es otro colaborador importante al haziness de
zumo aparte de causar difficulty en filtration. Convencionalmente,
microfiltration/ultrafiltration está utilizado para concentración de zumo
y clari fiproceso de catión, estos días. Esta membrana basó las
tecnologías están limitadas por problemas que está visto durante la
extracción de partículas de pulpa suspendida que ventaja a la
membrana que ensucia y posteriormente más corto lifespan de
membrana. En un intento de zumo de fruta clarificatión por utilizar
carbohidrato hydrolysing enzima, Shahrestania y los colegas utilizaron
xylanase immobilized a 1,3,5- triazine-functionalized sílice coated
MNPs para zumo de fruta clarificatión (Shahrestani, Taheri-Kafrani,
Soozanipour, & Tavakoli, 2016). Simi- larly, Mosafa et al. Informado
la preparación de papain magnético nano- la partícula soportada
biocatalyst para el clarificatión de zumo de granada. Los resultados
sugirieron que enzima immobilized a MNPs podría ser una alternativa
potencial para procesamiento de zumo de fruta convencional y clar-
ificatión en industrias (Mosafa, Moghadam, & Shahedi, 2013). Más
recientemente, Sojitra et al. Preparado un multi-la enzima magnética
nanobioca- talyst por simultáneamente co-immobilizing tres different
enzimas (α- amilasa, cellulase y pectinase) a amino-functionalized
MNPs por glutaraldehyde como cruz-linker. El preparado multi-la
enzima magnética nanobiocatalyst estuvo empleado para clarificatión
de manzana, uvas y zumos de piña qué mostrados 41, 46 y 53%
reducción respectiva en turbidity caja 150 min de tratamiento. Más
allá, después de que ocho ciclos consecutivos de reutilización, esté
visto que el immobilized las enzimas retuvieron hasta 75% de actividad
residual (Sojitra, Nadar, & Rathod, 2016). Considerando la aplicación
basada alimentaria, Sojitra et al. Desarrollado no-peligroso,
biocompatible estrategia de inmovilización de la enzima. Ellos
synthesized MNPs en la presencia de chitosan biopolímero qué no
estabilidad proporcionada sólo y grupo amino a MNPs pero también
les hizo altamente bio- compatible. Más allá, dextran polyaldehyde
estuvo preparado vía controló periodate oxidación inducida qué estuvo
utilizado como no-tóxico para la inmovilización de pectinase cuál era
más allá utilizado para zumo de manzana clarificatión (Nadar et al.,
2016;& NRaadtahrod, 2016un ; Sojitra,
Nadar, & Rathod, 2017).
En otro ejemplo de MNPs utilización, Gadalkar y Rathod re- ported
un fácil y efficient método de ferulic extracción de ácido de defatted
arroz bran. Ferulic Extracción de ácido esdi fficulto debido a su
conexión con el hemicellulose, el cual esdi fficulto para romper. De ahí
defatted arroz bran (DFRB) era pretreated utilizando ferulic ácido
esterase (FAE) im- mobilized en MNPs en la presencia de ultrasonido.
Uso de MNPs para la inmovilización aumentó el reusability de enzima
con retenido ac- tivity hasta 82% después de que 5 ciclos. También,
UAEE mostró alrededor 77% cosecha en 1 h en contraste a alrededor

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enzima apropiada. Coste de enzima es uno de el importante acídicos)
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enzima. Tecnología de enzima puede ser coste hecho
effective por reducir el coste de producción de enzima, por
realzar el rendimiento de enzima por genético modificatión o
por uti- lizing las enzimas tiempo múltiple a través de
técnicas de inmovilización. Recientemente microemulsion la
extracción basada ha probado para servir como
aproximación novel en sistema de extracción del aceite. A
pesar de que necesita en-estudio de profundidad, esta técnica
proporciona un sistema prometedor para mejorar solubilidad,
bioa- vailability y funcionalidad de compuestos
hidrofóbicos. Otra aproximación novel está expresando
enzimas en plantas cuál podría ser directamente ex- tracted y
aplicado después de que pretreating la biomasa extraída.
Hoy en día, hyphenated técnicas de extracción están
obteniendo atención, porque asisten en conseguir extracción
buena efficiency y selectividad requerida de biomolecules al
mismo tiempo. La combinación de enzimas con tecnologías
modernas (ultrasonido, microonda, supercritical, iónico li-
quids) puede ser desarrollado para explotar las ventajas de
ambos el techni- ques en extracción de biomolecules. La
aplicación hyphenated técnicas de tracción ex pueden
reducir el tiempo de extracción y dar incluso cosechas
mejores, así haciendo el proceso más verde. Estas técnicas
pueden ser más allá exploradas y tiene alcance enorme para
trabajo futuro. Uso de enzimas en alimentarios e industria de
biotecnología para extracción es econom- ically efficient y
representa un avance en procesos tecnológicos modernos.

Acknowledgements

A Los autores les gustaría reconocer la Comisión de


Subvenciones Universitaria (UGC) de India para financial
asistencia en el trabajo de búsqueda.

Contribuciones de autor

Todos los autores han participado igualmente en


redactar y revisando el manuscrito.

Referencias

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