Análisis Clínico II

DETERMINACIÓN DE AC. URICO EN SANGRE

I.- INTRODUCCIÓN:

Es un químico creado cuando el cuerpo descompone sustancias llamadas purinas,

las cuales se encuentran en algunos alimentos y bebidas, como el hígado, las
anchoas, la caballa, las judías y arvejas secas, la cerveza y el vino.
La mayor parte del ácido úrico se disuelve en la sangre y viaja a los riñones, donde
sale a través de la orina. Si el cuerpo produce demasiado ácido úrico o no lo elimina
lo suficiente, la persona se puede enfermar. Los altos niveles de ácido úrico en el
cuerpo se denominan hiperuricemia.
Este examen se hace para ver qué tanto ácido úrico la persona tiene en la sangre.

II.- OBJETIVOS:

 Conocer el método a usarse en práctica para la determinación enzimática de

ácido úrico.
 Calcular el valor aproximado de ácido úrico en muestra de suero.

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III.- FUNDAMENTO TEÓRICO

El acido úrico es oxidado por la ureasa generando alaltoina y peróxido de hidrogeno

(H2O2), el cual en una reacción mediada por peroxidasa reacciona con el
diclorohidroxibencenosulfonico y la 4-amina antipirina produciendo un compuesto
coloreado con un máximo de absorción de 520nm en cantidad proporcional a la cantidad
de acido úrico de la muestra.

COMPUESTO COLOREADO

TÉCNICA UTILIZADA:
BLANCO STANDARD DESCONOCIDO
SUERO ---- ---- 25 ul
STANDARD ---- 25 ul ----
B.C.G. 1 ml 1ml 1 ml
INCUBAR POR 5 MIN A UNA T° AMBIENTE
AGUA 2ml 2ml 2ml
DESTILADA
LEER LAS ABSORVANCIAS A 520 nm

Valores de Referencia: H: 3,4 – 7,0 mg/dl

M: 2,4 – 5,7 mg/dl

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Los cálculos se realizan con la siguiente formula:

 Para calcular el factor:

(𝐶𝑂𝑁𝐶𝐸𝑁𝑇𝑅𝐴𝐶𝐼𝑂𝑁 𝐷𝐸𝐿 𝑆𝑇𝐴𝑁𝐷𝐴𝑅𝐷)
𝐹𝐴𝐶𝑇𝑂𝑅 =
𝐴𝐵𝑆𝑂𝑅𝐵𝐴𝑁𝐶𝐼𝐴 𝐷𝐸𝐿 𝑆𝑇𝐴𝑁𝐷𝐴𝑅𝐷

 Para calcular la cantidad de proteínas totales:

𝐴𝑐. ù𝑟𝑖𝑐𝑜 (𝑚 𝑔⁄𝑑𝑙) = 𝐹𝐴𝐶𝑇𝑂𝑅 𝑥 𝐴𝐵𝑆𝑂𝑅𝐵𝐴𝑁𝐶𝐼𝐴 𝐷𝐸𝐿 𝐷𝐸𝑆𝐶𝑂𝑁𝑂𝐶𝐼𝐷𝑂

IV.- PROCEDIMIENTO

1° Se extrae la muestra de sangre se deja reposar por unos 3 o 4 minutos, se

rompe el coagulo y luego se lleva a centrifugar para obtener el suero.

2° Se preparan los tubos blanco y estándar.

 El tubo blanco solo va a contener 1 ml de reactivo y 2 ml de agua

destilada

 El tubo estándar va a contener 25 ul de la solución estándar para

proteínas totales, 1 ml del reactivo. y 2 ml de agua destilada.

3° Se extrae el suero del tubo centrifugado, con una micropipeta, y se traspasa

a otro tubo para realizar el respectivo análisis siguiendo la técnica indicada.

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 Al nuevo tubo se le agrega 25 ul del suero a analizar y 1 ml de

reactivo.
 Se lo lleva a incubar a temperatura ambiente por 5 minutos.
 Al término de los 5 minutos, se le agrega 2 ml de agua destilada

4° Se calibra el espectrofotómetro con el blanco; después se procede leer la

solución estándar y por último se realiza la lectura de las soluciones
desconocidas.

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V.- RESULTADOS

Con los datos obtenidos en práctica a partir de una muestra de suero se remplaza en
la fórmula:

 Absorbancia del estándar: 0,098

 Absorbancia de la muestra a analizar: 0,051

En primer lugar se halla el factor:

10
𝐹𝐴𝐶𝑇𝑂𝑅 = = 102,04
0,098
En segundo lugar se halla la cantidad Ac. Úrico:

𝐴𝑐. ú𝑟𝑖𝑐𝑜 (𝑔⁄𝑑𝑙) = 102,04 𝑥 0,051 = 5,2 𝑚𝑔/𝑑𝑙

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VI.- CONCLUSIONES

 Se llevo a cabo correctamente el procedimiento para la práctica obteniendo

valores que se analizarán a continuación.
 Se determino que la concentración de Ac. Úrico en la muestra de suero es de
5,2(𝑚 𝑔⁄𝑑𝑙) .
 Tomando en cuenta los valores de referencia podemos deducir que el valor
obtenido esta dentro de los parámetros.

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