Utilización de TLC para el análisis de extracto de

canela e identificación de compuestos muy polares

Karoll Juliette Rey Martínez, Mariana Buitrago Oliveros
Universidad de los Andes, Departamento de química.

ABSTRACT: Los aceites esenciales se encuentran presentes en muchas plantas

de diferentes especies, además contienen diversos compuestos con diferentes
estructuras químicas. Estos compuestos son capaces de inhibir y catalizar algunas
reacciones favorables para los seres humanos. El objetivo de este trabajo es
comprender a través del empleo de algunos métodos de extracción y de
separación cuál es la mejor forma de estudiar compuestos provenientes de
muestras vegetales. Para esto, se aplicó la TLC para identificar compuestos
presentes en extracto de canela por medio de ultrasonido y arrastre por vapor. Se
concluyó que, en efecto, hay presencia en ambas muestras de compuestos
polares. Posiblemente, cinamaldehído (según la literatura, es el principal
constituyente de la canela). También se estableció, como era de esperarse, que
los métodos tradicionales de extracción constituyen procesos demasiado largos y
poco eficientes, en comparación a las nuevas tecnologías como la extracción
asistida por ultrasonido, que permite una extracción óptima y segura de
compuestos contenidos en muestras vegetales.
2 Karoll Rey, Mariana Buitrago / Utilización de TLC para el análisis de extracto de canela e identificación de comp|uestos muy polares

INTRODUCCIÓN con agua y vapor, la maceración y

el enfleurage. Sin embargo, estos
La canela (Cinnamomun verum o
tienen un rendimiento
cinnamomun zeylanicu) es una
extremadamente bajo: resultan
especia que proviene de Sri Lanka. Se
costosos y los procedimientos son
extrae de la corteza de un árbol de 10
relativamente largos. Hoy en día
o 15m. Su aceite esencial ha sido
existen métodos que cumplen esa
ampliamente utilizado en la historia de
misma función de extracción de
la humanidad para distintos fines
manera más eficiente y efectiva como
tanto médicos, como cosméticos y
lo es el método de ultrasonido,
alimenticios. Su aroma se debe al
utilizado comúnmente para aislar
aceite esencial aromático que
sustancias bioactivas de material
constituye un 0,5-2,5% de su
vegetal mediante la cavitación a la
composición. El componente
que se someten las muestras, en
mayoritario de la canela es el aldehído
donde se alcanzan fuerzas suficientes
cinámico el eugenol y el alcohol
para producir sonolisis, rompiendo las
cinámico.
paredes celulares y extrayendo el
material intracelular de manera que se
A lo largo de la historia, la canela se
puedan controlar variables como la
ha utilizado para inducir el sueño,
temperatura y la presión para evitar
provocar la menstruación y cicatrizar
que mezclas volátiles o termolábiles
algunas heridas. Sin embargo, gracias
sufran daños en su estructura,
al desarrollo tecnológico, esos
generando así un mayor rendimiento
extractos han sido profundamente
en un menor tiempo que los métodos
estudiados para sacar el máximo
tradicionales.
provecho de las características y
utilidades que tienen ciertas
Para fines educativos y de
moléculas que los componen. Pero, la
comparación se decidieron hacer 2
información disponible sobre el
procesos distintos de extracción y 1
comportamiento de los componentes
mismo de separación, en donde se
volátiles en la canela es
escogió el método asistido por
limitada. Tradicionalmente
ultrasonido como mecanismo moderno
se emplean métodos como la
y el de arrastre por vapor como
destilación con agua, la destilación
3 Karoll Rey, Mariana Buitrago / Utilización de TLC para el análisis de extracto de canela e identificación de comp|uestos muy polares

tradicional, donde se identificaron Figura 1. Molécula cinamaldehído

numerosas diferencias evidenciadas
en los resultados cuantitativos de La TLC (por sus siglas en

extracto obtenido al final de un mismo inglés, thin layer cromatography) es

componente de la muestra. un método cromatográfico que

permite separar los
El cinamaldehído es el componente compuestos presentes en una muestra
mayoritario presente en el extracto de de acuerdo a características
la canela con un aproximado de 60- químicas comunes en cada uno. El
75% junto a un rango de 4-10% de fundamento de la técnica fue
fenoles, cierta parte de eugenol y una desarrollado por Merck KGaA en
mínima parte de hidrocarburos. Su Alemania, la empresa que lleva su
estructura presenta un anillo nombre incubó las ideas de su
aromático unido a una cadena de 2 fundador desde 1900. En 1938 se
carbonos enlazados por un enlace realizó la primera cromatografía de
doble y finalmente el grupo funcional capa delgada a manos
(aldehído) en un extremo. Dada la de N.A. Izmailov and M.S. Schreiber En
estructura se establece que este es Rusia. Durante el proceso, la fase
un compuesto bastante polar dada la móvil arrastra la muestra por acción
presencia del grupo carbonilo, por de la capilaridad a través de la fase
ende, se asume que tendrá una estacionaria y los que tengan mayor
afinidad mayor con compuestos afinidad con esta última tardarán un
apolares que le permitirán separarse poco más en ser eluidos, mientras que
de manera óptima durante la TLC, que aquellos que sean más afines con la
resulta bastante efectiva en la fase móvil saldrán en un tiempo
separación de compuestos con dichas menor, a su misma velocidad. Cabe
características. aclarar que ambas fases jamás
interactúan químicamente entre sí.
Cuando todos los compuestos llegan al
final de la placa y se pueden observar
distintas marcas en la placa, se puede
decir que ocurrió una separación
eficiente de los componentes. Este
4 Karoll Rey, Mariana Buitrago / Utilización de TLC para el análisis de extracto de canela e identificación de comp|uestos muy polares

sistema de separación consta de  Condensador

partes sencillas que son las placas
cromatográficas que contienen la fase  Termómetro

estacionaria (sílica, como lo fue en

 Frasco recolector
este caso) y una cámara de TLC, en
donde se sitúa la fase móvil y
 Hexano
posteriormente se ubicará la placa que
tiene la muestra.  Hexanol

PROCEDIMIENTO EXPERIMENTAL  Metanol

Materiales:
 Etanol
 Muestra vegetal de canela

 Pentanol
 Molino

 Acetil acetona
 Mortero y pistilo

 Éter etílico
 Frasco plástico grande

 Cámara de cromatografía de
 1,5g de Ninhidrina
capa delgada

 100mL de Etanol Absoluto

 Secador

 3mL de ácido acético glacial

En primer lugar, se eliminaron las
impurezas de la canela seleccionando
 Yodo
trozos con apariencia uniforme, es

 3 soportes universales decir, se retiraron los trozos de

madera de coloración distinta a la
 2 planchas de calentamiento coloración tradicional de la canela.
Posteriormente, se agregó la canela a
 1 matraz generador de vapor un mortero para realizar una pre-
molienda con el fin de evitar
 1 matraz con tres entradas
complicaciones en el molino.
5 Karoll Rey, Mariana Buitrago / Utilización de TLC para el análisis de extracto de canela e identificación de comp|uestos muy polares

Seguidamente, se limpió el molino con disuelve por completo, se aplastaron

etanol verificando que el molino cuidadosamente los restos con una
estuviese completamente libre de espátula y con ayuda de un agitador,
impurezas que pudiesen dejar se mezcló, se traspasó a un frasco de
residuos u olores provenientes de vidrio ámbar previamente marcado y
otras muestras procesadas allí se llevó a la cabina de extracción. Por
anteriormente. Se realizó este otro lado, se dispuso el yodo en un
procedimiento con el equipo recipiente plástico debidamente
desconectado para evitar accidentes. tapado y se dejó en la cabina de
Se procedió a moler la canela en extracción.
pequeñas cantidades. Se sacó la
Para la extracción en arrastre por
canela del molino y se cubrió para
vapor, se armó el montaje el montaje
evitar la llegada de impurezas. Luego,
de la (Figura 1). Durante este
se limpió cuidadosamente el
procedimiento se colocó la muestra de
molino para
canela molida en el matraz de tres
evitar dejar muestra atascada en el
entradas, llenando una tercera parte
molino. Se pesó y se almacenó en un
de su contenido, mientras que el
pequeño frasco marcado con el
matraz generador de vapor fue
nombre de los responsables y de la
llenado hasta la mitad. En el
muestra para su posterior análisis.
condensador fueron conectadas dos
A continuación, se prepararon las mangueras largas con un flujo
soluciones reveladoras para constante de agua ayudando al
posteriormente comprobar cuál era la enfriamiento del vapor, que es el
más adecuada para el experimento. producto final. Ambos matraces se
En la práctica se prepararon y calentaron, el generador fue llevado
utilizaron los siguientes reveladores: gradualmente hasta una temperatura
ninhidrina y yodo. Para la ninhidrina, de 325°C aproximadamente, para
se pesaron 1,5g de ninhidrina en un acelerar un poco el proceso. Mientras
vaso de 250mL. Luego, se disolvió en que, el que contenía la muestra se
100mL de etanol absoluto y se mantuvo a una temperatura de 60°C.
añadieron 3mL de ácido acético Posterior a la estabilización del
glacial. Como la ninhidrinda no se sistema, se esperó a que comenzara el
6 Karoll Rey, Mariana Buitrago / Utilización de TLC para el análisis de extracto de canela e identificación de comp|uestos muy polares

flujo de vapor a pasar por la muestra. observarlas en detalle después bajo la

Transcurrieron alrededor de 3 horas luz UV.
cuando se dio por finalizada la
extracción. Se procedió a almacenar el Para la extracción asistida por

extracto en un frasco color ámbar de ultrasonido se empleó un beaker de

250 mL previamente marcado con el 100mL. En él se colocaron 5g exactos

nombre de las muestras y de los de la muestra de canela molida.

responsables. Posteriormente, se agregaron 10mL de

metanol y se ubicó el sistema en el
Posteriormente, se prepararon placas aparato ultrasonido. Se hicieron 3
de sílice para realizar las pruebas con intervalos de extracción de 5 minutos
los reveladores. Para esto, se cortaron cada uno, realizando TLC cada que
las placas con las siguientes medidas: uno empleando la ninhidrina y el yodo
2,5cm ancho y 3,5 de largo. Se como reveladores.
trazaron dos líneas delgadas a los
laterales. Luego, con ayuda de un Seguidamente, se realizó

capilar, se realizó el siguiente la rotaevaporación de las muestras.

procedimiento para cada uno de los Para esto, se pesó la muestra, se

solventes disponibles: Se colocó una traspasó a un balón y este se conectó

gota de la muestra de canela en uno al rotaevaporador. Se moderó la

de los lados y se sumergió el lado presión hasta alcanzar la ideal para el

donde se puso la gota. Se esperó a agua, el solvente utilizado para el

que el líquido ascendiera por toda la arrastre por vapor. Posteriormente, se

placa. Seguidamente, se aplicó esperó a que se completara y se pesó

ninhidrina. Se llevó la placa al secador el balón nuevamente para conocer

hasta que se estuviese opaca. cuánta agua se había eliminado de la

Posteriormente, se observó la placa muestra. Se realizó este

bajo luz UV. Se realizó el mismo procedimiento para la canela extraída

procedimiento para el revelador de por los dos métodos: ultrasonido y

yodo. Sin embargo, se dejaban las arrastre por vapor.

placas dentro de los frascos que

Por último, se realizó la cromatografía
contenían yodo sólido por 30s para
de capa delgada (TLC). Para esto, se
tomaron las
7 Karoll Rey, Mariana Buitrago / Utilización de TLC para el análisis de extracto de canela e identificación de comp|uestos muy polares

muestras rotaevaporadas previamente En la segunda parte del

para el posterior análisis. En primer procedimiento, se seleccionaron los
lugar, se recortaron placas de sílice de mejores resultados del proceso
las mismas dimensiones que las anterior y se replicaron en placas
placas anteriores. Se utilizó acetato de cuadradas de 3,5cm de ancho por
etilo y ciclohexano como solventes 3,5cm de largo. Sin embargo, después
para poner en las cámaras. Se de que el solvente llegase a un
prepararon soluciones con diferentes extremo, se giró 90° la placa para que
proporciones: 8:2, 6:4, 4:6 y 2:8 de los corriera verticalmente.
disolventes. Se agregaron 2mL de Posteriormente, se observó la
cada solución en diferentes cámaras trayectoria de los puntos de muestra
respectivamente. Allí se sumergieron bajo luz UV. Se anotaron los resultados
diferentes placas de sílice con una y se almacenaron las placas.
pequeña gota de cada muestra en un
extremo, puesta con un capilar ANÁLISIS Y DISCUSIÓN

cuidadosamente. Se realizó este

La caracterización cualitativa exacta
procedimiento para las muestras
del extracto de la canela no pudo ser
provenientes de
realizada por falta de tiempo. Sin
la rotaevaporación del extracto de
embargo, con el extracto obtenido
canela por ultrasonido y por arrastre
para cada método, se realizó un
por vapor. A su vez, se realizó el
análisis cromatográfico exhaustivo
mismo procedimiento para el sistema
utilizando pruebas de TLC a diferentes
de solventes acetato de etilo-pentano.
condiciones, buscando optimizar el
Seguidamente, se sumergieron las
sistema de revelador y solvente, en
placas en yodo y se dejaron revelar
donde se encontró mayor eficiencia
por un minuto aproximadamente,
utilizando el sistema de acetato de
manteniendo el yodo dentro de la
etilo y pentanol en una proporción
cabina de extracción debido a su alta
de 6:4 para el extracto asistido por
toxicidad, para después observar las
ultrasonido y el sistema DCM y
placas bajo luz UV. Se procedió a
ciclohexano en una proporción
almacenar las placas.
de 4:6 para el extracto obtenido en el
arrastre por vapor. Con lo anterior se
concluyó que en la muestra de
8 Karoll Rey, Mariana Buitrago / Utilización de TLC para el análisis de extracto de canela e identificación de comp|uestos muy polares

ultrasonido se encuentra una mayor muestras (la presión a la que se

cantidad de solventes fuertemente evaporó el agua fue de 32 milibares),
polares, pues se requirió de una fase lo que pudo causar una pérdida en
altamente apolar para mostrar uno de los dos extractos de
distintas señales o puntos en la compuestos presentes en la solución,
placa. Mientras, en el caso de arrastre por lo que se vieron afectados los
por vapor, a pesar de ser un sistema resultados de las placas
apolar el escogido, tiene una parte cromatográficas.
que aumenta un poco su polaridad y
CONCLUSIONES
sólo en este lograron verse (y de
manera muy leve) los puntos propios Los procesos de extracción
de esta cromatografía. Esto que quiere tradicionales, aunque funcionan y
decir que, los analitos contenidos en la cumple con su principal tarea, lo
muestra presentan una polaridad hacen de una manera que no es muy
menor a la de los de la muestra que eficaz ni efectiva cuando se tienen
fue sonicada. Ambas respondieron métodos modernos con tecnología de
favorablemente en mayor medida al punta que permiten obtener lo mismo
usar yodo como revelador en lugar de en un tiempo muchísimo menor y con
la ninhidrina. Escoger el sistema mayor eficiencia, como se evidenció
adecuado requirió de un gran número durante la práctica al observar que
de intentos debido a la interferencia para el método de arrastre por
de los demás compuestos polares vapor, el cual tardó alrededor de 3
presentes en el extracto de canela. horas en práctica, fueron muy
Esta diferencia en el sistema de reducidos y poco concluyentes los
separación puede presentarse por la resultados de la TLC incluso después
diferencia entre solvente en que se de todos los sistemas probados,
encontraba inicialmente el extracto, mientras que para el ultrasonido, para
siendo agua para el de arrastre por el cual se hicieron 3 intervalos de
vapor y metanol para el de únicamente 5 minutos, se obtuvo un
ultrasonido, pues aunque ambos resultado más contundente que
fueron sometidos a un proceso mostraba, efectivamente distintos
de rotaevaporación, las condiciones compuestos separados entre sí en la
para este fueron distintas en ambas placa.
9 Karoll Rey, Mariana Buitrago / Utilización de TLC para el análisis de extracto de canela e identificación de comp|uestos muy polares

BIBLIOGRAFÍA