2017

Monografía de Bixa Orellana L.

Universidad Nacional Mayor De San Marcos

Facultad de Farmacia y Bioquímica

Integrantes

Casabona Acevedo, Cesar Eladio

Herrera Yurivilca, Ulises Uriel
Machaca Antonio Leslye Gianelly

25-11-2017
2
 ÍNDICE

1. Introducción ................................................................................................................. 4

2. Objetivos ...................................................................................................................... 4

3. Origen Biológico: .......................................................................................................... 5

Nombre Científico: Bixa orellana L.......................................................................................... 5

4. Datos Etnobotánicos: ................................................................................................... 5

5. Distribución geográfica y hábitat ................................................................................... 7

5.1 Importancia económica y habitat ............................................................................................... 7

6. ESTUDIO BOTÁNICO ................................................................................................. 8

6.1. ESTUDIOS MORFOLÓGICOS. ...................................................................................................... 8
6.2. ANTECEDENTES FITOQUÍMICOS Y BROMATOLÓGICOS DE LA DROGA. .................................. 10

7. ESTUDIO FARMACOGNÓSTICO .............................................................................. 11

7.1. METODOLOGÍA ........................................................................................................................ 11
7.2 MÉTODO DE EXTRACCIÓN: .................................................................................................. 13
7.3 TAMIZAJE FITOQUIMICO: .................................................................................................... 13
7.4. ANALISIS CROMATOGRÁFICO .................................................................................................. 15

8. Resultados ................................................................................................................. 16

9. Componente Farmacológico: ..................................................................................... 21

10. Componente toxicológico: ........................................................................................ 21

10.1. Toxicidad aguda y DL50 ......................................................................................................... 21
10.2. Toxicidad a dosis repetidas.................................................................................................... 21
10.3. Genotoxicidad........................................................................................................................ 22

11. Innovación y desarrollo: ............................................................................................ 23

11.1. Formulación: Gel de extracto hidroalcólico de Bixa orellana “achiote” ........................ 23
11.1.1. Proceso ........................................................................................................................... 23
11.1.2. Dosis.................................................................................................................................... 25
11.1.3. Control de calidad............................................................................................................... 25
11.1.4. Estabilidad .......................................................................................................................... 26

12. Referencias bibliográficas......................................................................................... 26

13.ANEXOS ................................................................................................................... 28

3
1. Introducción
La Bixa orellana L. pertenece a la familia Bixaceae y se conoce comúnmente como
Achiote, raíz de azafrán, achote de monte.
Las principales referencias que se tienen de esta planta son de la parte sur de México
y, en especial de la Península de Yucatán, mencionando que el uso más frecuente se
indica para el sarampión.
Se emplea para tratar la lepra, disipela, el salpullido y en los nacidos. También para
evitar cicatrices y curar torceduras y heridas. En algunos de estos casos, se hace una
infusión ya sea con la hoja para aplicar baños, o con la semilla administrada vía oral
como té.
Es utilizada en algunas enfermedades digestivas como dolor estomacal, diarrea,
indigestión y como antidisentérica (V. disentería).
Asimismo, el agua de achiote se usa para calmar la fiebre y desaparecer tumores.
Mezclada con resina y untada, cura la sarna y las úlceras, fortalece el estómago y baja
la hinchazón externa e interna de la garganta.
En las hojas de B. orellana se han identificado los sesquiterpenos bixagaeno e
ishawarano y los flavonoides 7-bisulfatos de apigenina y luteolina, y 8-bisulfato de
hipolaetina, cosmosín, glucósido de luteolín e isoescutelareín.
En la semilla se encuentran los carotenos bixina, bixinato de sodio, metil bixina,
norbixina, beta-caroteno; laxantina, criptoxantina; leaxantina, luteína; los diterpenos
farnesil-acetona, geranil-geranilo, geranil-geranilformato, geranil-geraniloctadecanoato
y geranil-geraniol; y el triterpeno delta-tocotrienol.¹

En el presente proyecto de Elaboración de la Monografía de Achiote se mostrará el

estado del arte de este importante como recurso natural.
En la Monografía se considerarán algunos aspectos como su nomenclatura y
descripción botánica, los constituyentes químicos reportados a la fecha, metodologías
para su análisis físico y químico, los ensayos farmacológicos realizados, su uso
tradicional e industrial, principalmente.

2. Objetivos
 Comprender la importancia de Bixa Orellana L. como uso de medicina
tradicional y a nivel industrial.
 Reconocer la importancia de la actividad farmacológica de Bixa Orellana L.
 Realizar la metodología para sus análisis cuantitativos y cualitativos para
afirmar los constituyentes químicos de Bixa Orellana L.

4
3. Origen Biológico:
Su origen es América tropical donde hay precipitación pluvial superior a los 1800
mm/año. Su cultivo es ancestral (prehispánico) y se ha extendido a Asia y África. A sido
domesticado y cultivado en América central y la Amazonia, desde épocas prehispánicas.
Desde tiempos ancestrales eran utilizadas las semillas de los árboles de bija por los
indígenas para colorear sus pieles en ritos ceremoniales. Actualmente se cultiva en
todos los trópicos.

Nombre Científico: Bixa orellana L.

La palabra achiote es una castellanización del náhuatl achiotl. La etimología del nombre
binomial corresponde a bixa, latinización del portugués bixa; orellana, dedicado al
explorador español Francisco de Orellana (1490-1546). Bija era el nombre dado al tinte
vino tinto obtenido de esta planta, en las comunidades Pijaos de Colombia.
Nombres comunes: achiote, acote, achihuete (viene del quechua); achote, annato
(viene de la voz inglesa), Aroto, Atase (v. Shipibo), Attalo, Axuty, Bijo, Bija (Cuba), Bixa,
Bayo-Bosa, Blanco, Carayurú, Changarica, Dee-tane (v.Ticuna), Colorado, Ejuselma (v.
Karijona), Gapýru (v. Piro, Yine), Huantura, Ipak (v. Awajun), Ipiácu (v. Jibaro), Joshin
Mashe (v. Shipibo-Conibo).
Familia: Bixáceas

4. Datos Etnobotánicos:
Parte utilizada: Las partes utilizadas son: las hojas y semillas de la Bixa orellana L.
Usos tradicionales: Las hojas se aplicaban como cataplasma para aliviar el dolor de
cabeza y la decocción en gárgaras para los males de garganta. Tradicionalmente la
pulpa se aplica sobre las quemaduras, para impedir la formación de ampollas y llagas.
También se utiliza la semilla como antídoto para el envenenamiento por Manihot
esculenta (yuca o yuca brava o yuca amarga o yucca agria). Existen referencias de que
se usó para evitar las cicatrices que deja la viruela en la epidermis, con magnífico
resultado (1908-1910 en Guatemala). Los curanderos de la Amazonía y las
comunidades indígenas lo utilizan en prácticas culturales, la pintura obtenida de las
semillas la aplican en la fontanela de los lactantes, mezclada con la resina de “caucho-
masha” (Sapium marmieri) para protegerlos contra el susto y los espíritus del bosque y
de los ríos. Los Matsigenka y los Shipibo-Conibo hacen baños con el “Achiote” para
evitar que los deudos de un pariente fallecido “sean cutipados” por los aires del occiso.
Algunos curanderos de la Amazonía peruana colocan el jugo de las hojas frescas
exprimidas del Achiote en los ojos, para la inflamación e infección; para la epilepsia, el
jugo es utilizado en combinación con doce frutas y tomado dos veces diariamente por
cinco días. El achiote es usado por los curanderos como un antídoto para las
mordeduras de serpientes y se cree que las semillas son un expectorante, mientras se
piensa que las raíces ayudan en la digestión y suprimen la tos. Asimismo, el Achiote
tradicionalmente ha sido utilizado para desórdenes de la próstata e inflamaciones
internas, hipertensión arterial, colesterol elevado, cisititis, obesidad, insuficiencia renal y
para eliminar ácido úrico.² Los Cojedes (Venezuela) usan la infusión de las flores para

5
estimular los intestinos, así como también para evitar la flema en los recién nacidos. De
acuerdo a un estudio basado en entrevistas etnobotánicas llevadas a cabo desde 1996-
2000 en Trinidad y Tobago, se halló que la Bixa orellana es utilizada para la Diabetes
mellitus y la ictericia.Se podrían mencionar otros usos del Achiote como: astringente,
febrífugo, antidisentérico, diurético, afrodisiaco y para el tratamiento de enfermedades
venéreas, erisipelas, fiebres intermitentes y otras afecciones. Estas evidencias de uso
tradicional han sido un paso preliminar para garantizar la efectividad y la seguridad del
Achiote, así como servir de sustento para los ensayos clínicos y como información de
sus propiedades terapéuticas. En la actualidad, dentro de los usos medicinales de la
Bixa orellana podemos mencionar su uso como antídoto contra la Manihot esculenta
(yuca o yuca brava o yuca amarga): se come el fruto o toma la infusión de fruto y
semillas; como antiemético (contra los vómitos de sangre), se recomienda tomar el
líquido de las hojas machacadas; como antidiarréico: se toma este líquido o la infusión
de las hojas o semillas; como hemostático, contra la hemorroides, contra la angina,
contra los abscesos y como cefalálgico se aplica la pasta de las hojas machacadas en
la frente y sienes; malestares de la garganta, afecciones respiratorias (tos, bronquitis):
se toma la infusión de las hojas y semillas; malestares del hígado: se usan las semillas
y el colorante, se sugiere tomar el cocimiento de los cogollos; dolores renales: cocción
de las hojas; inflamaciones dérmicas y vaginales: aplicar la maceración acuosa de las
hojas; contra la malaria: tomar el cocimiento de la raíz. Asimismo, la B. orelllana se usa
como: cicatrizante, antihipertensivo, cardiotónico, diurético, repelente de insectos,
antipirético, depurativo, digestivo, expectorante, sedante, antiséptico vaginal, y para la
lepra, hepatitis, quemaduras, acarosis (caracha) y amigdalitis, entre otros. El Achiote,
también es conocido por sus usos como: alimento y condimento; colorante de alimentos,
de cosméticos, pinturas, ceras y para trabajos de artesanía; como madera, en algunos
trabajos de carpintería; para confeccionar la punta de las flechas (Amahuacas).

Uno de los estudios etnobotánicos más relevantes del achiote en la medicina tradicional
ha atraído la atención de los especialistas hacia el laboratorio.
La presencia de esteroides en las hojas del achiote sugiere que son los responsables
de las propiedades anti-inflamatorias que la medicina popular le atribuye para usarla
como antirreumático y para las inflamaciones de la próstata. Asimismo debido a la
presencia de flavonoides, se utiliza como efectivo diurético actuando sobre el sistema
urogenital y regulando la función renal.

Los resultados de estudios farmacológicos han comprobado sus acciones terapéuticas,

diuréticas, antigonorréicas y antibacterianas, que refuerzan la acción benéfica del
achiote sobre la próstata y las vías genitourinarias, teniendo en consideración que la
prostatitis es una inflamación generalmente de origen infeccioso y cuyo tratamiento
requiere de productos antibacterianos y diuréticos.3

6
5. Distribución geográfica y hábitat
Esta familia habita en regiones tropicales de América y Antillas, parte de África, India y
Australia. Se extiende desde México hasta Brasil y Argentina y en el Caribe.
Actualmente se distribuye en los países tropicales del nuevo y viejo mundo.
Bixa es exclusivamente americana.

Prospera en climas diversos, preferentemente en los de tipo cálido-húmedos,

semicálidos y templados, con temperaturas que varían entre 20 y 30 °C y precipitaciones
anuales mayores a 1000 m. Las condiciones óptimas para cultivar achiote las reúnen
aquellas regiones entre 100 y 800 m de altitud, con temperaturas medias entre 20 y 26
°C y un máximo de 3 meses de época seca. Se puede adaptar a una gran variedad de
suelos, ya que se encuentra creciendo desde suelos franco-arenosos hasta arcillosos.
Aunque crece en suelos de escasa fertilidad natural, los mejores rendimientos se han
obtenido en suelos aluviales, bien drenados y con altos contenidos de materia orgánica.

Familia Bixaceae
La familia está constituida por 4 géneros y 21 especies (Stevens, 2009). En Argentina
vive 1
género con una especie (Zuloaga y Morrone, 1999)

Distribución Nombre vulgar

Especies nativas
Bixa orellana Chaco, corrientes, formosa bixa
y Salta
Especies exóticas
Amoruexia palmatifida México
Cochlospermum Java, India
religiosum
Diegodendron humebrtii Madagascar

5.1 Importancia económica y habitat

Leña,carbón,colorante(Colorantes ,semilla,aceite, arilo). De la porción carnosa (arilo
rojo-naranja) que envuelve a la semilla se extrae un colorante apreciado industrialmente
para dar color a productos alimenticios (queso, mantequilla), aceites, ceras, barnices,
pinturas, cosméticos y fibras textiles (de seda y algodón). Para obtener el colorante
("oriana") se pone las semillas en agua caliente. Se deja en reposo unos días y luego
se cuela el líquido, siendo el asiento el colorante. Otra forma es prolongar la ebullición
hasta que se produzca una pasta. El colorante no es muy estable a la
luz.Condimento,implementos de trabajos,medicinal(Medicinal [hoja, semilla, fruto, raíz,
vástago]. Propiedades y acciones: astringente, antiséptico, emoliente, antibacterial,
antioxidante, expectorante, cicatrizante, febrífugo, estomáquico y antidisentérico. Hoja:
propiedades diuréticas y antigonorréicas, eritema, erisipela, estomacal, vómito de
sangre, hemorroides, dolor de cabeza y garganta, purgante, desinflamatoria,
hipoglicemiante. La utilización de la semilla y el fruto se consideran un antídoto eficaz
contra envenenamiento por Jatropha curcas (dolores abdominales, diarrea, vómito,

7
irritación de garganta, gastroenteritis) y Manihot esculenta (manifestaciones disneicas y
hasta la muerte del sujeto). Semilla (molida): sarampión, viruela, estomáquico,
enfermedades del riñón, disentería y febrífugo, astringente y ligero purgante. El aceite
de las semillas puede usarse con buen éxito contra la lepra. Pulpa: quemaduras y
ampollas. Raíz: digestiva y antitusiva. El té hecho con pequeños vástagos y hojas es
usado como antidisentérico, afrodisiaco, astringente y para tratar infecciones de la piel,
fiebres y hepatitis. Los extractos en alcohol etílico de frutos y hojas han mostrado tener
in vitro actividad en contra de Escherichia coli y Staphylococcus aureus). ¹

6. ESTUDIO BOTÁNICO
6.1. ESTUDIOS MORFOLÓGICOS.
Familia Bixaceae
Familia de 3 géneros (Amoreuxia, Bixa y Cochlospermum) y 24 especies de distribución
tropical.
Árboles, arbustos o hierbas, con savia generalmente rojiza o a veces más clara. Hojas
alternas, deciduladas, pecioladas, estipuladas, simples, palmatifídicas, palmatipartidas
o raramente subenteras. Inflorescencias en cimas, racimos o panículas terminales.
Flores grandes y llamativas, perfectas, actinomorfas o zigomorfas; sépalos 5, libres,
imbricados o contortos en botón; pétalos 5, contortos en botón; estambres numerosos,
libres, uniformemente distribuidos o arreglados en 2 o 5 fascículos; anteras bitecas,
poricidas, rectas o en forma de herradura, uniformes o dimorfas; ovario súpero, 3 a 5
carpelos, 1 o 3 lóculos imperfectos; placentación central en la base del ovario y parietal
en la parte superior o axial; óvulos numerosos; estilo simple estigma cortamente
bilobado o denticulado. Frutos capsulares, 2 a 5 valvados, lisos o cubiertos con espinas.
Semillas cocleadas a ovoides, reniformes o subglobosas, glabras o cubiertas con
tricomas largos o equinados, algunas veces arilladas; endospermo abundante.4

Genero Bixa
Arbustos o árboles con savia roja o amarilla. Hojas simples, enteras, palmadamente
nervadas; estípulas deciduas. Inflorescencias en panículas terminales, pedicelos con
glándulas en la base del cáliz. Flores actinomorfas; sépalos 5, imbricados, deciduos;
pétalos 5, blancos rosados, deciduos; estambres numerosos; anteras oblongas, en
forma de herradura, apicalmente dehiscentes por cortas aberturas; ovario de cavidad
con 2 placentas, óvulos numerosos, estilo alargado, estigma cortamente bilobado.
Frutos capsulares, bivalvados, densamente cubiertos por espinas alargadas
frecuentemente no armados. Semillas numerosas, obovoides, ariladas.4

8
Especie Bixa Orellana L. (Achiote)
Sinónimo: Orellana (L.) Kuntze.
Nombres comunes: Achiote, raíz de azafrán, bija, onoto (Chocó); achote de monte
(Bolíar); nebae (etnia Miraña); tukda-ra (Norte de Santander); tsanda kiña (etnia Kofán);
achote, achiote (Robyns,1967).
Descripción:
Bixa es un árbol de 2-10 m de altura, con copa piramidal, redondeada o irregular y
ramificación dicotómica. La corteza del tallo es lisa o poco fisurada, de color pardo-rojizo,
pardo-oscuro, pardo-verdoso o pardo-grisáceo, con pocas o muchas lenticelas de color
pardo claro o amarillento. Las hojas son simples, dorsiventrales, alternas, de textura
cartácea, forma deltoide, cordiforme o lanceolada, lámina simétrica o asimétrica y
pubescentes.5
Las flores se producen en panículas terminales de 10-25 cm de longitud, con 5-60
primordios florales, la mayoría de los cuales no alcanza la madurez (Fig. 1).
La producción y maduración de las inflorescencias ocurre en forma basípeta (Fig. 1).
Las flores son bisexuales y la antesis floral, a lo largo de la inflorescencia, ocurre en
sentido acrópeta; maduran 1-2 flores al mismo tiempo (Figs. 2 y 3).
Todas las yemas vegetativas se convierten en yemas florales durante la época
reproductiva (Fig. 1); se observan, simultáneamente, primordios florales, flores y frutos
en varias etapas de maduración. Las flores son pentámeras (Fig. 3), dialipétalas,
dialisépalas, de perianto caedizo. Los pétalos son imbricados y su color varía de blanco
a rosado intenso; los sépalos son cóncavos, de color pardo-rojizo o pardo-verdoso, con
5 glándulas basales persistentes aún en el fruto maduro. Los estambres son numerosos
(Fig. 3), con anteras de color blanco o amarillo y se curvan en la temprana ontogenia
adoptando forma de herradura; los filamentos son delgados, blancos. amarillos o violeta
en su porción proximal y amarillo en la distal. La dehiscencia de la antera se efectúa por
pequeñas hendiduras laterales; al estar la antera doblada semejan poros de forma
biconvexa. El ovario es ínfero, pero durante la ontogenia es elevado por un ginóforo y
adopta la apariencia de un ovario súpero. Es bicarpelar (en ocasiones tricarpelar),
unilocular, de placentación parietal, con pocos o numerosos rudimentos seminales.6

9
fig. 1. Arbol de Bixa orellana (achiote). Se observa el patrón de ramificación basal y la
floración basípetamente escalonada.

fig. 2.(izquierda) y figura.3. (derecha). En la figura 2 se observa la inflorescencia que

muestra la maduración de las flores; nótese que en este caso solo madura dos flores.
Figura 3. Flor pentámera de B. orellana; pueden observarse los numerosos estambres
y el estigma prominente.

6.2. ANTECEDENTES FITOQUÍMICOS Y BROMATOLÓGICOS DE LA DROGA.

Estudios anteriores informan la presencia de leucocyanidina, ácido elágico, apogenina,
luteolina y bisulfatos flavonoides7, mientras que Lawrence y Hogg 8 informaron la
presencia de ishwarane y bixaghanen en el aceite de hoja de B. orellana.
La acción farmacológica del extracto de las hojas de Bixa orellana L. incluye efectos
anticonvulsivos, analgésicos, antidiarreicos 9, antimicrobianos10, antileishmaniales y
antifúngicos 11.

10
En un estudio previo, Siti Erli Fazira et al. 12 mostraron que B. orellana juega un papel
importante en las respuestas antiinflamatorias inducidas por carragenos. También es
capaz de neutralizar los efectos del edema que provoca el veneno de Bothrops asper
venom.
Por otro lado, el achiote es utilizado como condimento en la gastronomía de muchos
países.13

7. ESTUDIO FARMACOGNÓSTICO
7.1. METODOLOGÍA

A. MATERIALES

Material Biológico:

Las muestras de hojas de Bixa orellana conocida como “Achiote” la

cuales fueron adquiridas en el Centro de Abasto “La Parada”,
departamento de Lima – Perú.

Equipo:

 Refractómetro
 Estufa, hornilla eléctrica
“Proporcionado por el laboratorio de farmacognosia”.
 Cámara fotográfica (Marca Panasonic, modelo DMC-S2.

Otros materiales:

 Etanol 98°
 Embace color ámbar
 Capilares para siembra
 Cromatofolios para cromatografía
 Cuba para cromatografía
 Tubos de ensayo
 Tijeras, lápiz de grafito,
“Adquiridos en su mayoría en tiendas de la Av. Emancipación”.
Reactivos:
 Antrona
 Fehling
 FeCl3
 Gelatina
 Shinoda

11
  Rosenheim
 Borntranger
 Ninhidrina
 Dragendorff
 Mayer
 Bertrand
 Sonnenschein
 Hidroxilamina
 Tollens
 Fenilhidrazina
 Pozzi – Scott
 Herail
 Benedict

“Proporcionados por el laboratorio de Farmacognosia”.

B. MÉTODOS

1. IDENTIFICACIÓN:

a. ENSAYOS BOTÁNICOS:
Método organoléptico o descriptivo: Constituye un examen
preliminar de la droga, basado en la valoración por los sentidos. En
caso de las drogas pulverizadas estas observaciones son solo de
orientación. Realizar en la muestra de la planta (hojas de achiote
“BIxa orellana”).
 Olor: Se colocó una pequeña cantidad de hoja de Bixa orellana
en la palma de la mano y se inhaló el aire que se encontraba
sobre el material.
 Color: El color de la superficie y de la parte interior de las hojas
de Bixa orellana, se observó a la luz del día.
 Sabor: Se colocó una pequeña cantidad de hoja de Bixa
orellana, en la punta de la lengua y se masticó para sentir el
sabor.
Método macroscópico o morfológico: Las características
morfológicas se determinan para cada órgano y se reconocen
examinando sus características típicas. Otra manera de saber
sobre las características macroscópicas es consultando en libros
de información botánica.
b. ENSAYO FISICOQUÍMICO:
Coloración

12
 Se colocó V gotas del extracto de “BIxa orellana” en dos tubos de
ensayo y se añadió en el primero FeCl3, y en el segundo KOH.
Coloración verde con el FeCl3 indica la presencia de compuestos
fenólicos, coloración rojiza con KOH indica presencia de
compuestos antraquinónicos.
Índice de refracción
Se colocó I gota de extracto de hojas de “BIxa orellana” en el lente
del refractómetro y se observó.

7.2 MÉTODO DE EXTRACCIÓN:

Maceración: Se pesó 107.58g hojas molidas de BIxa orellana y se
depositó en un envase color ámbar, posteriormente se añadió 700 ml
de etanol de 98° y se dejó reposar durante 5 días con una agitación
cada 3 horas.

7.3 TAMIZAJE FITOQUIMICO:

 Prueba de Molish: Se agregó 0.5ml de extracto de hojas de “BIxa

orellana” + V gotas de reactivo Molish “A” (alfa-naftol) +X gotas de
reactivo Molish “B” (H2SO4) (reacción positiva: anillo violeta en la
interface, presencia de carbohidratos)

 Prueba de antrona: Se agregó 0.5ml de extracto de hojas de

“BIxa orellana” + X gotas de reactivo antrona (reacción positiva:
anillo verde azulado en la interface, presencia de carbohidratos)

 Prueba Fehling: Se agregó 0.5ml de extracto de hojas de “BIxa

orellana” + V gotas de reactivo Fehling ”A” + V gotas de Fehling
“B” y se colocó en baño maría por 10 minutos (reacción positiva:
precipitado rojo ladrillo, presencia de azucares reductores)

 Prueba de FeCl3: Se agregó 0.5ml de extracto de hojas de “BIxa

orellana” + III gotas de reactivo FeCl3 (reacción positiva coloración
verde es predominio en flavonoides; coloración azul es predominio
de taninos)

 Prueba de Gelatina: Se agregó 0.5ml de extracto de hojas de

“BIxa orellana” + III gotas de reactivo gelatina (reacción positiva:
precipitado blanco lechoso, presencia de taninos)

 Prueba de Shinoda: Se agregó 0.5ml de extracto de hojas de

“BIxa orellana” + mg de magnesio metálico + III gotas de HClcc
(reacción positiva: coloración rojo salmón)

 Prueba de Rosenheim: Se agregó 0.5ml de extracto de hojas de

“BIxa orellana” + III gotas de reactivo Rosenheim (reacción

13
 positiva: precipitado rojo pardo, presencia de flavonoides catéticos
y antocianinas)

 Prueba Borntranger: Se agregó 0.5ml de extracto de hojas de

“BIxa orellana” + III gotas de reactivo Borntranger: (reacción
positiva: coloración rojiza, presencia de antraquinonas)

 Prueba de Ninhidrina: Se agregó 0.5ml de extracto de hojas de

“BIxa orellana” + III gotas de reactivo Ninhidrina (reacción
positiva: coloración violeta)

 Prueba de Dragendorff: Se agregó 0.5ml de extracto de hojas de

“BIxa orellana” + V gotas de HCl 10% + III gotas de reactivo de
Dragendorff (reacción positiva: precipitado naranja)

 Prueba de Mayer: Se agregó 0.5ml de extracto de hojas de “BIxa

orellana” + V gotas de HCl 10% + III gotas de reactivo Mayer
(reacción positiva: precipitado blanco)

 Prueba de Bertrand: Se agregó 0.5ml de extracto de hojas de

“BIxa orellana” + V gotas de HCl 10% + III gotas de reactivo
Bertrand (reacción positiva: precipitado blanco lechoso)

 Prueba Sonnenschein: Se agregó 0.5ml de extracto de hojas de

“BIxa orellana” + V gotas de HCl 10% + III gotas de reactivo
Sonnenschein (reacción positiva: precipitado verde azulado)

 Prueba Hidroxilamina: Se agregó 0.5ml de extracto de hojas de

“BIxa orellana” + III gotas de reactivo Hidroxilamina (reacción
positiva: precipitado rojizo)

 Prueba de Saponinas: Se agregó 0.5ml de extracto de hojas de

“BIxa orellana” + X gotas de agua destilada, agitar vigorosamente
el tubo por 15 segundos y dejar en reposo por 1 minuto (reacción
positiva: formación de espuma por más de 1 cm y sea persistente)

 Prueba Benedict: Se agregó 0.5ml de extracto de hojas de “BIxa

orellana” + V gotas de reactivo Benedict y se colocó en baño maría
por 10 minutos (reacción positiva: precipitado rojo ladrillo,
presencia de azucares reductores)

 Prueba Tollens: Se agregó 0.5ml de extracto de hojas de “BIxa

orellana” + V gotas de reactivo Tollens + V gotas de NH4OH y se
colocó en baño maría por 10 minutos (reacción positiva: formación
de espejo de plata, presencia de azucares reductores)

14
  Prueba Selivanoff: Se agregó 0.5ml de extracto de hojas de “BIxa
orellana” + V gotas de reactivo Selivanoff y se colocó en baño
maría por 10 minutos (reacción positiva: precipitado rojo,
diferenciar si es cetosa)

 Prueba Herail: Se agregó 0.5ml de extracto de hojas de “BIxa

orellana” + V gotas de reactivo Herail (reacción positiva: coloración
violeta – azulado, presencia de sacarosa)

 Prueba Pozzi – Scott: Se agregó 0.5ml de extracto de hojas de

“BIxa orellana” + V gotas de reactivo Pozzi – Scott + H2SO4 en
zona (reacción positiva: formación de anillo azul, presencia de
sacarosa)

 Prueba de Fenilhidrazina: Se agregó 0.5ml de extracto de hojas

de “BIxa orellana” + V gotas de reactivo Fenilhidrazina y se colocó
en baño maría por 10 minutos (reacción positiva: Formación de
cristales de osazonas, cristales de color amarillo)

7.4. ANALISIS CROMATOGRÁFICO

 Se trazó suavemente con lápiz sobre el borde inferior (1cm) una

línea y se colocó dos puntos equidistantes.
 Se sembró la muestra, y evaporo el solvente (40 veces el extracto
de hojas de “Bixa orellana” y 5 veces el estándar)
 Se colocó el solvente en el fondo de la cuba y se introdujo el
cromatograma, se cubrió herméticamente y se evitó movimientos
bruscos del sistema.
 Se sacó el cromatograma, y se marcó el frente de solvente, se secó
y reveló.
 se observó las manchas (color, tamaño, forma y distancia de
corrida) y se determinó su Rf.

i. PARA FLAVONOIDES

 Muestra:

 Extracto de hojas de “BIxa orellana”

 Soporte: Sílica Gel

 Estándar: Rutina, quercetina
 Sistema de solvente: Acetato de etilo: metanol: agua
(100:13.5:10)
 Revelador: Solución etanólica de cloruro férrico

15
 ii. PARA TANINOS

 Muestra:

 Extracto de hojas de “BIxa orellana”

 Soporte: Sílica Gel

 Estándar: ácido gálico
 Sistema de solvente: acetato de etilo: etanol (1:3)
 Revelador: Solución etanólica de cloruro férrico

8. Resultados

IDENTIFICACIÓN:

Tabla 1 Análisis organoléptico de Hojas de Bixa orellana

Bixa orellana
Olor Aromático
Color Verde oscuro
Sabor Astringente

Tabla 2 Descripción macroscópica o morfológica de Bixa orellana

Hojas Perennes, alternas, simples,

enteras, ovaladas, base
cortada, ápice agudo, peciolo
largo.
Flores Vistosas, cada flor con 5
sépalos y 5 pétalos rosados.
Semillas Ovoides o cónicas.

16
Tabla 3 Reacciones de coloración del extracto de hojas de Bixa
orellana usando FeCl3 Y KOH

Bixa orellana
FeCl3 +++
KOH +++
Mayor presencia: +++ Presencia moderada: ++
Presencia leve: + Ausencia: -

Tabla 4 Análisis fisicoquímico de extracto de Hojas de Bixa orellana

PH 5 (ácido)

Índice de refracción 1,367 con 22° Brix

Tabla 5 Reacciones de coloración e identificación de compuestos

secundarios en extracto de Hojas de Bixa orellana

Reactivo Resultado
Molish +++
Antrona +++
Fehling +
FeCl3 +++
Gelatina +
Shinoda +++
Rosenheim ++
Borntranger ++
Ninhidrina -
Dragendorff +
Mayer -
Bertrand +
Sonnenschein ++
Hidroxilamina +
Prueba de Saponinas -
Mayor presencia: +++ Presencia moderada: ++
Presencia leve: + Ausencia: -

17
 Tabla 6 Reacciones de coloración e identificación de Carbohidratos en
extracto de Hojas de Bixa Orellana

Reactivo Resultado

Molish +++
Antrona +++

Fehling +

Benedict +++

Tollens +++
Selivanoff +++
Herail -

Pozzi – Scott -

Fenilhidrazina ++

Tabla 7 Análisis Cromatográfico para flavonoides en extracto de Hojas de

Bixa orellana

M.P: Extracto de hojas de “BIxa M.P: Extracto de hojas de “BIxa

orellana” orellana”
Estándar: Rutina Estándar: Quercetina

18
Distancia Recorrida Distancia Recorrida

Estándar: 2,5 Estándar: 5,7

M.P: 2,5 M.P: 6,1
Solvente: 5,7 Solvente: 6,5
Rf: 0,438 Rf: 0.938
Revelador: Solución etanólica de Revelador: Solución etanólica de
cloruro férrico cloruro férrico

Forma de la mancha: Igual Forma de la mancha: Diferente

Color de la mancha: Igual Color de la mancha: Diferente
Tamaño de la mancha: Igual Tamaño de la mancha: Igual
La M.P presenta Rutina La M.P no presenta Quercetina

19
Tabla 8 Análisis Cromatográfico para taninos en extracto de Hojas de Bixa
Orellana

M.P: Extracto de hojas de “BIxa

orellana”
Estándar: Ácido gálico

Distancia Recorrida

Estándar: 5,1
M.P: 5,1
Solvente: 5,8
Rf: 0.879
Revelador: Solución etanólica de
cloruro férrico

Forma de la mancha: Diferente

Color de la mancha: Diferente
Tamaño de la mancha: Diferente
La M.P no presenta Ácido gálico

20
9. Componente Farmacológico:
- Semillas: los extractos de la semilla han mostrado actividad diurética e hipoglicemiante,
así como su capacidad de disminuir la actividad motora.
-Hojas: Hipoglucemiante, antídoto antiofídico, antibacteriano, antimalárico y antifúngico.
En relación con la actividad hipoglicemiante, se ha demostrado las capacidades un
extracto acuoso de inhibir la aldosa reductasa, con un IC50. De 0,0000033 g/mL, acción
atribuida a la presencia de isoscutelareina.
La actividad antibacteriana y antifúngica ha sido demostrada para distintos tipos de
extractos frente a Neisseria gonorrhoeae, Trichomona vaginales, Bacillus subtilis,
Stafilococcus aureus, Streptococcus faecalis, Cladosporium cladosporiodes,
Microsporum gypseum y Tricopyon metagrophytes.
El extracto hidroalcohólico ha demostrado actividad antimalárica in vitro en el 95 % en
el test HPIA en dosis de 2,5 m/g, e in vitro frente a cepas sensibles y resistente a
cloroquina de P. facilparum con un IC50 de 28 33 μg/mL, respectivamente.
El extracto etanólico de hojas ha inhibido al 100 % los efectos del envenenamiento por
mordedura de serpiente en ratones.
Por último, el extracto hidroalcohólico ha demostrado inhibir la enzima prostaglandina
sintetiza a concentraciones de 750 μg/mL.1
En nuestro proyecto se eligió hacer gel debido a su actividad cicatrizante la cual fue
demostrada por Li F. en su tesis de maestría. Esta tesis comprobó las propiedades
cicatrizante y antiinflamatoria del extracto acuoso atomizado de hojas Bixa orellana, por
aplicación local en animales de experimentación, lo que indicaría que en su composición
química posee metabolitos secundarios a los que se les atribuyen dichas propiedades
regenerativas de tejidos, metabolitos que serían los que nosotros hemos encontrado en
el extracto.2

10. Componente toxicológico:

10.1. Toxicidad aguda y DL50

La Dosis Letal 50 (DL50) se determinó con el extracto liofilizado de hojas de “Achiote” (Bixa
orellana L) inoculado vía intraperitoneal y vía oral a ratones albinos hembras Mus musculus cepa
Balb/c según el método de Bliss o de los Probits. La DL50 determinada para el extracto liofilizado
de hojas de Achiote fue de 0,3933326 g/kg de peso del animal a las 72 horas, vía intraperitoneal.
Por vía oral resultó 14,5816 g/kg de peso del animal a las 72 horas.1

10.2. Toxicidad a dosis repetidas

Al administrarse el extracto liofilizado de hojas de Achiote (Bixa orellana L.) a dosis de 20 g/kg
de peso corporal de ratón durante 30 días, no se observaron cambios en la conducta, apetito,
sed y sueño de los animales y los estudios anatomopatológicos no revelaron anormalidades
histopatológicas.1

En un estudio, evaluar la toxicidad del extracto de Achiote (conteniendo 50% de norbixina) en

ratones y ratas después de 21 días de ingestión, se observó que había un efecto marcado de la
norbixina sobre la glicemia en ambas especies de roedores. En ratas, la norbixina indujo

21
hiperglicemia en un rango de 26,9% a 52,6% ((8,5 y 74 mg/kg norbixina, respectivamente) por
encima de los niveles de control. En ratones, la norbixina indujo hipoglicemia en el rango de
14,4% a 21,5% (0,8 y 66 mg/kg norbixina, respectivamente) sobre los niveles de control. Ratas y
ratones tratados con Achiote mostraron hiperinsulinemia e hipoinsulinemia, respectivamente,
indicando que las células beta pancreáticas fueron funcionales. Sin embargo, deberían realizarse
otros estudios para entender la transformación biológica de la norbixina en dos especies
similares de roedores.2

10.3. Genotoxicidad
Según varios estudios realizados en ratas, los resultados inducen a predecir que el extracto de
Achiote conteniendo norbixina no es genotóxico ni carcinogénico. A continuación, se describen
algunos de estos estudios realizados.

En el extracto de Achiote (conteniendo 50% de norbixina) se evaluó la toxicidad de la norbixina;

ésta fue investigada en ratones y ratas después de 21 días de ingestión. Los ratones fueron
expuestos a dosis de 56 y 351 mg/kg (extracto de Achiote) y 0,8; 7,6; 66 y 274 mg/kg (norbixina),
y las ratas fueron expuestas a dosis de 0,8; 7,5 y 68 mg/kg (extracto de Achiote) y 0,8; 8,5 y 74
mg/kg (norbixina). En ratas, no se detectó ninguna toxicidad en plasma, y en ratones, la
norbixina indujo un incremento de la actividad de alanin- aminotransferasa en plasma (ALT)
mientras que la norbixina y el extracto de Achiote indujeron a una disminución de proteína total
y globulinas en plasma. Sin embargo, ningún signo de toxicidad fue detectado en el análisis
histopatológico de hígado, ni se detectó ningún daño en el DNA de hígado y riñón de ratones
tratados con pigmentos de Achiote, evaluados a través del ensayo cometa.2

Del mismo modo, los efectos tóxicos del polvo de Achiote (bixina 27%) han sido evaluados a
través de un régimen sub-agudo (4 semanas, 20 dosis) en ratas machos y hembras Wistar. En
este estudio, el Achiote se administró a dosis de 2 000 mg/kg/día, disminuyó el peso corporal
ganado por los machos, pero no tuvo efecto sobre ningún alimento ingerido o la conversión
eficiente del mismo. Al examen bioquímico hematológico y del plasma así como a la necropsia,
al final de la administración (29º día) y a la observación (43º día) no se revelaron alteraciones
relacionadas con la administración del Achiote. Estos hallazgos sugieren que el Achiote no fue
tóxico para las ratas.3

22
11. Innovación y desarrollo:

11.1. Formulación: Gel de extracto hidroalcólico de Bixa orellana “achiote”

11.1.1. Proceso

1. Se pesó 41.5 g de agua purificada y 1g de carbómero 940.

Tabla 9. Fórmula cuali-cuantitativa.

COMPONENTE CANTIDAD UNIDADES PORCENTAJE FUNCIÓN

Carbómero 940 1.0 g 2.0% Agente

gelificante

Extracto 7.5 g 15.0% Principio

hidroalcohólico activo

Agua purificada 41.5 g 83.0% Vehículo

Trietanolamina csp. g - Regulador de

pH
pH = 7

TOTAL 50.0 g 100.0%

Fig. 4. Pesado del agua purificada y Pesado del carbómero

940

23
 2. En un beacker se mezclaron los reactivos pesados, con la finalidad de
hidratar el carbómero 940.

Fig. 6. Hidratación del carbómero 940

3. Se neutralizó la mezcla anterior para la obtención del gel.

4. Se incorporaró el principio activo (extracto hidroalcohólico de Bixa

orellana) y agitó hasta observar la homogenización del gel.

Fig. 7. Incorporación del extracto

hidroalcohólico de Bixa orellana

5. Se procedió a envasar el gel.

24
 Fig. 8. Envasado del gel

NOTA: Todo el proceso se realizó a temperatura ambiente.

11.1.2. Dosis

Una aplicación cada 24 horas preferentemente por la noche.

11.1.3. Control de calidad

Tabla 10. Análisis organoléptico de hojas de Bixa orellana

Bixa orellana
Olor Aromático
Color Verde oscuro

Sabor Astringente

pH 5 (ácido)

Índice de refracción 1,367 con 22° Brix

Tabla 11. Análisis fisicoquímico de extracto de hojas de

Bixa orellana

25
11.1.4. Estabilidad
Consérvese a temperatura ambiente a no más de 30° C en lugar seco y
bien tapado.

12. Referencias bibliográficas

1. Arboretum Alain Meyrat - Universidad Nacional Agraria, Nicaragua [Internet].
Redbio.una.edu.ni. 2017 [citado el 4 Julio 2017]. Disponible en :
http://redbio.una.edu.ni/arboretum/fichas.php?cod=133

2. Silva H, Alvarado R, Hidalgo J, Cerruti T, Dávila W, Mestanza M, et al; Instituto

de Medicina Tradicional (IMET)-Instituto Peruano de Seguridad Social (IPSS).
Bixa orellana L. Monografías de Plantas Medicinales Nº 02. Iquitos: IMET-
IPSS; 2008. p. 12-20.

3. Molina Y. Estudio etnobotánica y etnofarmacológico de plantas medicinales de

Tambopata, Madre de Dios, Perú: Escuela Académico-Profesional de Farmacia
y Bioquímica de la UAP, Filial Puerto Maldonado; 2006. [Citado el 4 de julio del
2017].
4. Lozada L. Flora de Guerrero: No16 Bixa. México: Facultad de ciencias UNALM;
2003.

5. Blair S, Madrigal B. Plantas antimaláricas de Tumaco. Medellín: Editorial

Universidad de Antioquia; 2005.

6. Rivera E, Florez M. Morfología floral del achiote, Bixa Orellana L. (Bixaceae)*.

Rev. Biol.Trop. 1988;36 (2B): 499-509.

7. Harbone J: Flavonoid bisulphates and their co-occurrences with ellagic acid in

the Bixaceae, Frankeniaceae and related families. Phytochemistry. 1975;
(14):1331–1337.

8. Lawrence B, Hogg J: Ishwarane in Bixa orellana leaf oil. Phytochemistry. 1973;

(12): 2995.

9. Shilpi, J, Taufiq-Ur-Rahman M, Uddin S, Alam M, Sadhu S, Seidel V:

Preliminary pharmacological screening of Bixa Orellana L. leaves. J
Ethnopharmacol 2006; (108): 264–271.

10. Fleischer T, Ameade E, Mensah MLK, Sawer IK: Antimicrobial activity of the
leaves and seeds from Bixa orellana . Fitoterapia 2002; (74): 136–138.

26
11. Braga F, Bouzada M, Fabri R, Matos M, Moreira F, Scio E, Coimbra E.
Antileishmanial and antifungal activity of plants used in traditional medicine in
Brazil. J Ethnopharmacol. 2007; (111): 396–402.

12. Siti E, Zuraini A, Shiran M: Effect of Bixa orellana on carragenan induced

inflammation rat. Proc 6th Nat Symp Health Science. 2006:18.

13. Gómez L, Arango J U, Siniguí B, Domicó M, Bailarín O, Estudio etnobotánico y

nutricional de las principales especies vegetales de uso alimentario en
territorios de las comunidades Embera de selva de Pavarandó y Chuscal-
Tuguridó (Dabeiba Occidente de Antioquia). Gestión y Ambiente 2006949-64.
Disponible en: http://www.redalyc.org/articulo.oa?id=169421183004. Fecha de
consulta: 10 de julio de 2017.

27
13.ANEXOS
CONSTANCIA TAXONÓMICA

28
  IMÁGENES

Ilustración 1 Centro de Abasto “La Parada”, Ilustración 2 Planta de Bixa

departamento de Lima – Perú donde se orellana
compraron las muestras de hojas de Bixa
orellana

Ilustración 4 Extracto de
Ilustración 3 Hojas secas de Bixa orellana para Hojas de Bixa orellana
el de análisis organoléptico y descripción por método de
macroscópica maceración alcohólica
[0,15368]

29
 B

A C

Ilustración 5 A. Refractómetro para medir el índice de refracción del

extracto de Hojas de Bixa orellana el cual fue de 1,367 con 22° Brix B. Vista
interior de Refractómetro C. Medición del PH del extracto de Hojas de Bixa
orellana el cual fue de 5 (ácido)

Ilustración 6 Reacciones de coloración e identificación de compuestos

secundarios en extracto de Hojas de Bixa orellana

30
 A

Ilustración 8 Reacciones Molish (A) y

Ilustración 7 Reacciones Antrona (B) para la identificación de
Shinoda, FeCl3 y Gelatina para Carbohidratos en extracto de Hojas de
la identificación de Bixa orellana
compuestos secundarios en
extracto de Hojas de Bixa
orellana

A C
B

Ilustración 9 Reacciones Benedict (A), Tollens (B) y Fehling para

la identificación de azucares reductores en extracto de Hojas de
Bixa orellana

31
Ilustración 10 Ilustración 11 Reacción Ilustración 12
Reacción Selivanoff Pozzi – Scott para la Reacción de
para la identificación de Fenilhidrazina para la
identificación de sacarosa en extracto de identificación de
cetosas en extracto Hojas de Bixa orellana cristales de osazonas
de Hojas de Bixa en extracto de Hojas
orellana de Bixa orellana

B
Ilustración 13 Sistema de solvente para Análisis cromatográfico de
flavonoides con Estándares de Rutina (A) y Quercetina (B) en extracto
de Hojas de Bixa Orellana

32
 A

Ilustración 14 Sistema de solvente para Análisis cromatográfico de

taninos con Estándares de Ácido Gálico (A) en extracto de Hojas
de Bixa orellana

33