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PRÁCTICA 4 EQUIPO

LÓPEZ TRUJILLO RUBÍ CONSUELO


|LABORATORIO DE EXPERIMENTACIÓN GREY SUÁREZ JUAN EMMANUEL
BIOQUÍMICA- BIOLÓGICA| MACÍAS FLORES SAUL JOSUÉ
|UNIVERIDAD AUTÓNOMA DE QUERÉTARO|
|FACULTAD DE QUÍMICA| PROFESOR
DRA. ESCOBAR CABRERA JESICA
Organelos Celulares y Demostración de Fosfatasa ácida

Laboratorio de Experimentación Bioquímica- Biológica / Facultad de Química


Universidad Autónoma de Querétaro, México.

6/Febrero/2018
Resumen.

Se realizaron varios cortes de vegetales con el fin de observar y caracterizar a los plastos, se utilizó, jitomate, papa y algas
de acuario para observar los plastos de las células. Además, se realizó la disección de un ratón de laboratorio con el
objetivo de extraer los testículos y posteriormente con ellos realizar la observación de los lisosomas, a esta muestra se le
aplicaron las condiciones necesarias como B- fosfatasa, luego un tratamiento con para precipitar con fosfato de plomo.

PALABRAS CLAVE: Lisosomas, plastos, organelos celulares, enzimas.

Introducción. Para identificar a los lisosomas se hace por un método


citoquímico, el cual consiste en la tinción positiva de la
Existe una gran diversidad de células eucariotas, pero fosfatasa ácida (la enzima más común en los lisosomas
muchos rasgos entre estas son comunes. Por ejemplo, y usada para liberar grupos fosfatos adheridos a otras
los plastos, que son encontrados en la mayoría de las moléculas).
células vegetales. Los plastos son pequeños cuerpos
involucrados en la síntesis o almacenamiento de los El lisosoma es una vesícula membranosa que contiene
productos alimenticios en las plantas. Hay tres tipos enzimas hidrolíticas que permiten la digestión intracelular
básicos: de macromoléculas.
Leucoplasto que carece de color y permite la conversión En este método, la enzima fosfatasa ácida hidroliza el β-
de la glucosa en azucares complejos, grasas o proteínas. glicerofosfato. Al tener plomo como medio de reacción, el
Cromoplasto que alacena los pigmentos de la célula fosfato liberado, es precipitado como fosfato de plomo, el
vegetal, como el caroteno, que le da color a las cual es de color blanco o transparente. Debido a su
zanahorias. complicada distinción, es transformado a sulfuro de
Cloroplasto, los plastos más importantes, pues contienen plomo, el cual tiene una coloración café o negra
clorofila, el pigmento que produce la fotosíntesis. característica. (J, 2009)
Por otra parte, en las células animales podemos
encontrar lisosomas en el citoplasma. Se originan en el
aparato de Golgi, éste consta de una estructura
membranosa que poseen alrededor de 40 hidrolasas
distintas capaces de hidrolizar constituyentes
macromoleculares de la célula, proteínas, polisacáridos y
ácidos nucleicos.
Como todos los demás orgánulos intracelulares los
lisosomas no contienen únicamente colección de
Figura 1. Las vesículas brotan de
enzimas, sino que también poseen una única membrana. una membrana y se fusionan con
Esta membrana posee proteínas de trasporte que permite otras; trasportan los componentes de
que los productos finales de la digestión de las la membrana y la proteína solubles
entre los compartimientos celulares
macromoléculas como los aminoácidos, los azucares y
los nucleótidos son trasferidos hacia el citosol, desde
donde la célula puede excretarlos o utilizarlos. La
membrana contiene también una bomba de H+impulsada
por ATP, que como la ATPasa e la membrana Hipótesis
endosomica bombea protones hacia el lisosoma y de esta
Las células vegetales contienen distintos orgánulos por lo
manera mantiene su contenido de un pH acido.
cual al observar un corte de tejidos de zanahoria y
La mayoría de las proteínas de la membrana del lisosoma jitomate (cromoplastos), papa (leucoplastos) y algas
están altamente glucosiladas de manera inusual; los (cromoplastos) se podrá identificar la forma y
azucares que cubren gran parte de la superficie de la característica distintiva de estos plastos.
proteína que enfrentan a la luz, las protegen de la
Los lisosomas, se pueden identificar con técnicas que
digestión por las proteasas lisosómicas.
incluyen en trabajo sobre la fosfatasa acida una de las
enzimas encontrada en este orgánulo y bajo tratamiento Medio-reacción
con B-glicerofosfato, y precipitando con sulfato de plomo
para que se observe el color marrón bajo el microscopio.

Objetivos

General. Observar y conocer la función de los plastos y


lisosomas en células vegetales y animales. Así como
conocer el manejo de animales de laboratorio.

Específicos Resultados
 Distinguir entre cloroplasto, cromoplasto y Observación de los plastos en las muestras de
leucoplastos. vegetales.
 Observar e identificar características específicas
de cada tipo de plasto en las células vegetales.
 Reconocer la estructura y coloración de los
plastos en una vista de células vegetales bajo el
microscopio óptico
 Observar la estructura del lisosoma, bajo el
microscopio óptico, para su caracterización.
 Aprender las técnicas adecuadas para la correcta
identificación de lisosomas, orgánulos
encargados de la digestión intracelular. Figura 2. Observación de
 Aprender el adecuado manejo de animales de leucoplastos en la papa.
Figura 3. Observación de
cromoplastos en jitomate.
experimentación.

Procedimiento para organelos.

Figura 4. Observación Figura 5. Observación


de cromoplastos en de cloroplastos en
zanahoria. alga.

Procedimiento para fosfatasa ácida.

Figura 6. Observación
de pigmentación de
sulfato de plomo en
testículos de ratón.
Discusión Jimenez. (2003). Biologia Celular Y Molecular. México: Pearson
Educación.
La célula vegetal o animal que posee o no plastos, los
cuales son organelos distintivos entre estos tipos Rodríguez-Fuentes, N. (2012). Portal academico IEMS.
celulares. Los plastos son organelos típicos de la Obtenido de Estructura y función de los plastos:
arquitectura de la célula vegetal, que surgen a partir de http://academicos.iems.edu.mx/cired/docs/es/bl/fu
los proplastos de las células embrionarias, dando origen ncion_de_los_plastos/observacion_e_identificacion_
a tres tipos de plastos, rodeados por una membrana de_plastos.pdf
doble y con funciones metabólicas propias del mundo
vegetal. Las funciones y características de los plastos se
encuentran compartimentalizado, dando lugar a
microambientes metabólicos delimitados por una
membrana. (Rodríguez-Fuentes, 2012). Es por eso por lo
que en cada muestra vegetal se observaron diferentes
plastos; en la papa leucoplastos, zanahoria y jitomate
cromoplastos y cloroplastos en el alga, estos fueron
apreciados gracias al microscopio. Además, fue posible
distinguir su pared celular de las células vegetales de la
papa y del alga.

En tanto los lisosomas, fue posible demostrar su


presencia en el tejido testicular del ratón; debido a la
reacción de la fosfatasa ácida con el medio de reacción,
dando un color café, característico del sulfuro de plomo.
sin embargo, tuvo muy poca pigmentación café del
sulfuro de plomo. esto se debe a que el pH en el medio
de reacción no era de pH de 5, o al menos eso se intuye.
Los lisosomas reconocidos como vesículas que
contienen enzimas hidrolíticas cuyo pH óptimo es ácido
(4.8 a 5.2), (Jimenez, 2003). Ya que el medio de reacción
no tenía el pH optimo por tal la fosfatasa ácida no
hidrolizó de manera adecuada al substrato B-
glicerofosfato. Esto provoca que el fosfato no se haya
liberado de manera adecuada y se precipite como fosfato
de plomo, mediante la presencia de plomo en el medio-
reacción. En consecuencia, al exponerlo a la solución de
sulfuro, la reacción fue ineficiente y no se apreció la
coloración café del sulfuro de plomo en grandes
cantidades como se esperaba.

Conclusiones.

 Los plastos de las células tienen diferentes


coloraciones y funciones debido al ambiente en el
que son expuestos, de ahí su clasificación en
leucoplastos, cloroplastos y cromoplastos.
 Los lisosomas contienen distintas enzimas con
funciones específicas cada una. Estos deben de
estar en un medio de reacción adecuado para que
realicen sus funciones y reacciones
correspondientes, esto con el fin de hidrolizar
moléculas que ayuden al metabolismo de la célula.

Bibliografía
J, M. T. (2009). Bioquímica, las bases moleculares de la vida.
México: McGraw Hill.