UNIVERSIDAD TÉCNICA DE AMBATO

FACULTAD DE CIENCIA E INGENIERÍA EN ALIMENTOS

INFORME DE PRÁCTICA DE LABORATORIO
CARRERA DE INGENIERÍA BIOQUÍMICA
CICLO ACADÉMICO: SEPTIEMBRE 2017 – FEBRERO 2018
BIOQUÍMICA II

DATOS INFORMATIVOS:
Estudiantes: Campaña J., Rodríguez A., Siza C.
Profesor: Lic. Danae Fernández Rivero Mg.
Auxiliar de Laboratorio: Ing. Cristina Bustos
Nivel: Sexto
Práctica de Laboratorio N°: 4
Fecha de Realización: 08 de diciembre de 2017
Fecha de Presentación: 15 de diciembre de 2017

TEMA:
“DETERMINACIÓN DE CUERPOS CETÓNICOS”
1. OBJETIVOS
Objetivo General:
 Determinar la presencia de cuerpos cetónicos en diferentes muestras de orina.
Objetivos específicos:

 Verificar la presencia de ácido acetoacético y ácido β – hidroxibutirico en distintas

muestras de orina.
 Determinar la razón de la coloración rojo-vino en las muestras con presencia de
cuerpos cetónicos en muestras de orina en personas con distintas condiciones
de salud
2. RESULTADOS Y DISCUSIÓN
RESULTADOS
Tabla N°1: Resultados obtenidos para la obtención de cuerpos cetónicos en
diferentes muestras.
Muestra 1 Muestra 2 Muestra 3 Muestra 4
Temáticas (Ejercicio (Normal) (Embarazo) (Ayuno
físico) prolongado)
Con
Cloruro
Férrico al
10%.

Presencia
Presencia Presencia Presencia Baja Presencia
/Ausencia
 Existe la Existe la Existe poca La presencia de
presencia de presencia de presencia de cuerpo
cuerpos cuerpos cuerpos cetónicos es
cetónicos cetónicos por la cetónicos es baja que en las
debido a la coloración que esta muestra. demás
coloración que presentó en la muestras ya
Descripción presentó en la muestra. que presentó
muestra una coloración
muy baja con
respecto a las
demás
muestras.

DISCUSIÓN
La oxidación de ácidos grasos en la mitocondria juega un papel importante en la
obtención de energía a partir de los lípidos. En la Tabla Nº1 se muestran los resultados
de la presencia de los cuerpos cetónicos en cada una de las muestras, en donde, una
persona que se encuentra en condiciones normales de salud los cuerpos cetónicos son
metabolizados completamente en el hígado específicamente en los hepatocitos, de tal
manera que estos llegan a presentarse en cantidades mínimas en la orina, lo cual no se
pudo observar en la muestra obtenida siendo un factor muy probable que la muestra
haya sido recolectada en la mañana y el individuo hubiese estado en ayuno dando
positivo la presencia de cuerpos cetónicos en la muestra. En el caso de la muestra de
la persona que tiene diabetes los cuerpos cetónicos son fácilmente detectados en la
orina. Cabe recalcar que la diabetes es un grupo de enfermedades caracterizadas por
un alto nivel de glucosa resultado de defectos en la capacidad del cuerpo para producir
insulina (ADA; 2013). Como es conocido, la insulina es importante para la regulación de
glucosa y para disminuir la liberación de ácidos grasos, por lo tanto, el aumento de
ácidos grasos aumenta la síntesis de cuerpos cetónicos ya que hay mayor disponibilidad
de acetil CoA. La falta o la inactivación de la insulina limita la utilización de la glucosa,
el proceso de glucólisis y la producción de ácido pirúvico. Hay una vinculación estrecha
entre los procesos enzimáticos del ciclo de Krebs y de la oxidación de las grasas. Se
admite que una de dichas enzimas del ciclo tricarboxílico sirva de detonador para iniciar
la oxidación de las moléculas grasas. El acetil coenzima A es transformada en ácido
diacético y betahidroxibutírico, en cantidades crecientes a medida que se intensifica la
inactivación de la insulina o su falta en el organismo. Parte de la acetilcoenzima A es
también transformada en colesterol (Isla; 2005).
En la muestra de la persona en períodos de ayuno, los ácidos grasos son usados para
la síntesis de cuerpos cetónicos y proveen la mayor parte de la energía requerida
(Stanley; 2000). Al no ingerir alimentos por un tiempo indefinido, el organismo deja
consumir glucosa y glucógeno que están almacenados en el hígado y músculos y optan
por consumir grasas ubicadas en tejidos subcutáneos, alrededor de los riñones. Durante
las primeras etapas del ayuno, hay una disminución en la producción de insulina, pero
aumenta la liberación de glucagón dando lugar a la glucogenólisis, que es la
estimulación de lipólisis, es decir, inhibición en la síntesis de triacilglicéridos y aumento
en la Beta-oxidación y producción de cuerpos cetónicos. Si el ayuno es prolongado se
presenta un desequilibrio entre el metabolismo de carbohidratos y lípidos, lo que
ocasiona que los niveles de cuerpos cetónicos se eleven en sangre y sean eliminados
por orina donde son detectados fácilmente (Cañas; 2016), por lo que se debe evidenciar
la presencia de cuerpos cetónicos, en este caso no fue de esta manera, lo cual se puede
deber a distintos factores que intervienen en el metabolismo de la persona de la cual se
tomó la muestra ya que no todos los organismo son iguales o reaccionan igual.
Para el caso de la persona que realizó ejercicio se observa la presencia de cuerpos
cetónicos debido a que el complejo enzimático AMPK es activada por adenosin
monofosfato, (AMP), un metabolito que aumenta en la medida que disminuye la carga
energética de la célula, se considera que esta enzima juega un papel principal en la
regulación de los flujos metabólicos dentro del músculo, actuando como un verdadero
sensor energético y activando la oxidación de ácidos grasos y carbohidratos. De esta
manera, la disminución de glicógeno intramuscular, propio de estados de ayuno, así
como de ejercicio de alta intensidad, provocaría la activación de la AMPK, favoreciendo
el switch metabólico que conduce a una mayor oxidación de ácidos grasos (Trujillo;
2015).
La coloración rojo-vino se debe al reaccionar los cuerpos cetónicos con el cloruro férrico
se obtuvo una coloración más intensa la cual indica que existe una cantidad enorme de
acetona y ácido acetil-acético acetona mientras que las que tienen una coloración tenue
contienen ácido β – hidroxibutirico en grandes cantidades (Silva C; 2006).

3. ACTIVIDADES POR DESARROLLAR:

¿Cuáles son los cuerpos cetónicos? Esquematiza la ruta metabólica para

obtenerlos
Los cuerpos cetónicos son:
 Acetona
 Acetoacetato
 D- beta-hidroxibutirato

Gráfica N°1: Formación de grupos cetónicos

 (Suarez, 2015).
¿En qué condiciones metabólicas se producen cuerpos cetónicos?

La síntesis de cuerpos cetónicos ocurre en respuesta a bajos niveles de glucosa y

después del agotamiento de las reservas celulares de glucógeno, donde el hígado
empieza a producir cuerpos cetónicos para hacer disponible la energía que es guardada
como ácidos grasos; los cuales son enzimáticamente descompuestos en la β-
oxidación para formar acetil-CoA. Bajo condiciones normales, la oxidación del acetil-
CoA se produce en el ciclo de Krebs y su energía se transfiere como electrones
a NADH, FADH2, y GTP. Sin embargo, si la cantidad de acetil-CoA generada en el
proceso de oxidación de los ácidos grasos es superior a la capacidad de procesamiento
del ciclo de Krebs, o si la actividad en este proceso es baja dada la poca cantidad de
elementos intermedios como el oxaloacetato, el acetil-CoA se usa para la biosíntesis de
los cuerpos cetónicos vía acetil-CoA y β-hidroxi-β-metilglutaril-CoA (HMG-CoA) (Berg,
2008).

¿A partir de qué macro moléculas es posible sintetizar cuerpos cetónicos?

En los seres humanos y en la mayoría de los otros mamíferos, la acetil-CoA formada en
el hígado durante la oxidación de ácidos grasos puede entrar en el ciclo de ácido cítrico
o sufrir conversión a los "cuerpos cetónicos", acetona, y D-β-hidroxibutirato, para su
exportación a otros tejidos. (El término "cuerpos" es un artefacto histórico, el término se
aplica ocasionalmente a las partículas insolubles, pero estos compuestos son bastante
solubles en la sangre y la orina.) La acetona, producida en cantidades más pequeñas
que los otros cuerpos cetónicos, es exhalada. (Lehninger N & Cox M.)

¿Qué nombre recibe la presencia de cuerpos cetónicos en sangre y orina cuando

se encuentran en cantidades más altas que las normales?

Los cuerpos cetónicos en la sangre y en la orina de los diabéticos no tratados pueden

alcanzar niveles extraordinarios: una concentración sanguínea de 90 mg / 100 ml (en
comparación con un nivel normal de 3 mg / 100 ml) y una excreción urinaria de 5.000
mg / 24 hr Tasa normal de 125 mg / 24 h). Esta condición se llama cetosis (Mejía, 2013).

4. CONCLUSIONES Y RECOMENDACIONES:

Conclusiones:

Se determino la presencia de cuerpos cetónicos en las muestras de orina de

diferentes individuos en diferentes estados siendo la mayoría positivos de acuerdo
con los resultados que se obtuvieron, siendo la muestra de orina de un individuo que
ha hecho ejercicio la que mas denoto la presencia junto con la muestra normal
tomando en cuenta que la recolección de la muestra de orina normal tuvo un error y
por ello no fue lo que se esperaba.

Se verifico la presencia en las distintas muestras utilizadas en la práctica, en donde

la aparición de cuerpos cetónicos fue en la persona con diabetes, con actividad de
ejercicio, una persona denominada normal (sin perturbaciones), observando el
cambio de coloración en la muestra de orina con diabetes presentando una cantidad
de acetona y ácido acetil-acético acetona y en la persona con ayuno prolongado su
coloración tenue que denota ácido β-hidroxibutírico.

Se determino la razón de la coloración rojo-vino debido a que al reaccionar los

cuerpos cetónicos con el cloruro férrico se obtiene una coloración más intensa la
cual indica que existe una cantidad enorme de acetona y ácido acetil-acético
acetona mientras que las que tienen una coloración tenue contienen ácido β –
hidroxibutirico en grandes cantidades.

Recomendaciones:

 Usar la indumentaria respectiva para comenzar a trabajar con las muestras

de orina debido a que contiene sustancias tóxicas que pueden afectar a la
salud.
 Tener muestras de orina diferentes (persona en estado de gestación,
persona normal, persona en actividad física, persona en ayuno prolongado y
diabetes) necesarias disponibles para el desarrollo de la experimentación.

 Seguir el protocolo de recolección de muestras de orinas para obtener

resultados esperados y asi concluir una práctica exitosa.
5. BIBLIOGRAFÍA:

Berg, A. (2008). “Bioquímica”. Actividad Catalítica. Sexta Edición. Editorial Reverté

SA. México. Pp- 282-298.

Mejía, I. (2013). Cuerpos Cetonicos. Recuperado de:

https://es.slideshare.net/ingridjohanasierramejia/practica-
cuerpos-cetnicos-9 el 10-12-2017

Suarez, A. (2015). Identificación de cuerpos cetonicos en orina. Recuperado de:

http://documents.mx/documents/cuerpos-cetonicos-
lab.html el 10-12-2017

ADA. (2013). Asociación Americana de Diabetes. Obtenido de Información básica de la

Diabetes: http://www.diabetes.org/es/informacion-basica-
de-la-diabetes/

Cañas, A. (2016). Determinación de cuerpos cetónicos. Disponible en:

https://anacanas.wordpress.com/laboratorio/practica-9-
determinacion-de-cuerpos-cetonicos/

Devlin, T. M. (2004). “Bioquímica” 4ª edición. Reverté, Barcelona. ISBN 84-291-7208-4

Disponible en: https://diabetesmadrid.org/conoces-que-
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como-actuar-cuando-aparece/

Graff. (2007). Análisis de orina: atlas color. Buenos Aires: Medica Panamericana.
Disponible en:
http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/10634967

Isla Pilar. (2005). Cetósis diabética. (disponible en)

http://diposit.ub.edu/dspace/bitstream/2445/97194/1/0689
07.pdf

Lehninger N & Cox M. Cuarta edición. Principles of Biochemistry. Catabolismo de ácidos

grasos. Capítulo 17. Pág. 632-650

Medical Chemistry. Actualizado. “Lípidos”. Obtenido en:

https://themedicalbiochemistrypage.org/es/fatty-acid-
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Stanley, C. (2000). Disorders of fatty acid oxidation, Inborn Metabolic Diseases, editores
Fernandes J, SaudubrayJ.-M,, van den Berghe G. editorial
Springer-Verlag, Berlín y Heidelberg, pp 139-150.

Trujillo Luz. (2015). Beneficios metabólicos de realizar ejercicio en estado de ayuno.

(disponible en)
http://www.scielo.cl/pdf/rchnut/v42n2/art05.pdf