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(
VERSANA sTs a yHCV
LiPA
Genotype ( )
SIEMENS
1
2
Ensaio HCV Genotype 2.0
(LiPA)
26381 Rev. 3. 2008-06
REF 06719382
I Aplicagao
® linha, para utilizagao em diagnostico
0 ensaio VERSANT HCV Genotype 2.0 (LiPA ) e um ensaio de sondas em
os genptipos 1 a 6 e os subtipos V ejt)” do genotipo 1 do vims da hepatite C ( VHC) em
in vitro que identifica .
adicional sobre
amostras de soro ou plasma humano com EDTA. Na maioria dos casos e disponibilizada informagao
os subtipos
em pessoas com infecgao
0 produto destina-se a ser utilizado como guia na selecgao do tipo e duragao do tratamento
VHC para as quais se esta a considerado um tratamento antiviral. Portanto, o kit destina-se a ser utilizado
cronica pelo
com amostras que tenham um resultado positive para o ARN do VHC .
teste de rastreio para o VHC
0 ensaio VERSANT HCV Genotype 2 0 (LiPA ) nao se destina a ser utilizado como um
nem como um teste de diagnostico para confirmar a presenga do VHC.
Para utilizagao em diagnostico in vitro

Resumo e explicagao qrupos de qendUpQS, ou clades ,

0 ggpoma do virus da hepatite C e altamente variavel e esta classificado em 6
sequenda genomica Estes grupos de genotipos diferem entre 31 e 34%
com base nas analises filogeneticas da .
dos
nudeotidos e cerca de 30 % nas posigoes das sequendas
nas posigoes das sequences dos seus
1 um ou mais subtipos ou variantes do VHC , tal como mostra a Figura 1.
#
aminoacidos Cada genotipo contem
1 4C
an
41 bt
,
2/ 1
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Figura 1 . ’ I WM f e . FM
nc c. htinrvc , . :
o pmnin a
- -b- e - c" > de um determinado genotipo de VHC diferem entre 20 e 23% ao mvel da
e o sUBflpo 3k (antenormente
os a outros membrosdo genotipo Uma excepgao
ccnhecic " ’

genotipo 3 Na actualidade Jaforam

:
.
a gue dre ^e 25 o ao nivel da sequenda
; de nudeotidos
dentificados mais de 70 genotipos do
emrelagao
VHC -
- 3 do V HC fa adaptada com permssSo do auto
a outros membros do

tikr m
 OA 25 12 16 AO _ 28 29 17
23 25 26 27
on 24 18
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. Asregioesdo nvolucrosaoasmais variaveis aTre9 6etcom ° ororau
^ do genotipo '
distribuIdas por sete pequenas regioes A

^nXSiSS?^ ^
variaveis que D o !
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' especHicas

^ ^ ^ ^^
'

para os genoUpos 5 e 6 . subbpos "a” eV

NolntankTd
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do gran 9
H subtipos "claj" ( anteriormente classificados
. istieS! °
como 7, 8 9 _ell i -naapodem se
exclusivamentepela anahse da regiao 5' UTR A exactidao da
'
E2-6 '
identificagao dos subtipoY Wl
peia anahse da 5 UTR . dependendo dos isolados especificos 95“/
que foram testados 5 Alem da regiao 5o nudelFoar
identificar os subtipos “c’a T do genotipo 6. Estas sequences repetidas sao
incluidas para melhorar a exactidao d:
identificagao dos sublipos 1a e 1b.
—
Nos ultimos anos. estabeleceu-se a a utilidade clinica da genotipagem do VHC. Estudos publicados6 8 *
e
recomendagoes de agendas nadonais conduiram que a determinagao exada do genotipo e importante no control
de doentes para os quais se esteja a considerar um tratamento anti-VHC . 0 painel do Instituto Nadonal de Saude
( National Institute of Health NIH) dos EUA de 20029 concluiu que a determinagao
do genotipo do VHC era
importante para a escolha da dose ideal de interferao e ribavirina e duragao do tratamento. Este painel recomendou
que doentes com o genotipo 1_ que nunca tivessem sido tratados fossem tratados durante 48 semanas, enquanto
doentes com os gendtipos 2 e 3 devenam ser tratados durante 24 semanas com doses de interferao e ribavirina mais
baixas Recentemente . a Associagao Amencana para o Estudoda Doenga Hepatica (American Association for the Study
of Liver Disease AASLD) publicou o documento "Practice Guidelines for the Diagnosis, Management, and Treatment of
i

r
'
.
Hepatitis C (Normas Praticas para Diagnostico Controlo e Tratamento de Hepatite C).10 Estas normas recomendam
»
igualmente a determinagao da genotipagem do VHC em todos os individuos infectados pelo VHC antes do iniciQjjo
tr iaisecda As recomendagoes sobre a duragao do tratamento e a dose de ribavirina foram as mesmas que as
2 ^
recomendagoes feitas pelo painel do NIH em 2002, com a excepgao da sugestao de tratamento com PIFN+RBV para os
genotipos 2 e 3 Paineis de pentos em Franga11 e na Suecia12 fizeram as mesmas recomendagoes Aiem disso, estes
9 dois paineis propuseram tratamentos para doentes com gendtipos 6 e 7. (Os virus VHC do genotipo 7 estSo agora
classificados como genotipos 6 “ c" a T ) . Foram publicadas normas para tratamento de doentes com VHC
co - mfectados pelo VIH - 1 13 Actualmente , estao a decorrer estudos para avaliar a eficacia dos diferentes
regimes de tratamento em doentes com subtipos do genotipo 1 e gendtipos mais raros.14

Tabela 1 : Comparagao entre a nova e a antiga nomenclatura dos

genotipos do VHC
Genotipos do VHC Genotipos do VHC
Ulv ( classificapao actual) (classifica9ao anterior)
1 1

CO 2 2
3 3
3 subtipo k 10
;Par 4 4
Lour*
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< 6
°3.0' /
<3 ~
(3 - W/ .
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2 17 \
Portugues- 3

Tabela 1: Comparagao entre a nova e a antiga nomenclatura dos

genotipos do VHC
Genotipos do VHC Genotipos do VHC
(classificagao actual) (classificagao anterior)
5 5
6 subtipos a-b 6
6 subtipos c-f 7
6 subtipo g 11
6 subtipos h-j 9
6 subtipos k -l 8

Princlpios do ensaio
O
ensaio VERSANT HCV Genotype 2.0 (LiPA utiliza a ) hjbfidacao reversa ( figura 2). 0 produto de ADN btotinilacto'.

RTiPCR. e hibridado com sondas de ohqonucle6tk)os imobilizadas As sondas, qu<

nitrocelulose por uma extremidade poli( df)7sao especificas da regiao 5' UTR .
festao ligadas a uma lira de _

.
Apos a etapa da hibridagao o produto da PCR nao hibridado e removido da tira por Igyagem e a estreptavidina
m roadaxom fosfatase alcalina ( conjugado) liga- se ao hibrido bitotinilado. 0 cromogeneo BCIP / NBT
^
( substr lQ ) reage com o complexo de estreptavidina -fosfatase alcalina formando urn precipitado de cor purpura/
^
castanha , que produz urn padrao de bandas visivel na tira.
Knsaio de sondas eni linha ( LiPA )
I rinripio da hilirida in roersa
’ ^
( romugtaco I'rccipilado
( NBT W IPl purpura

. . -
\ il.il m aimIin J

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Vhn Jinphru jdo
5

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Sunda dt AON

Tim dc nifrocclultm

Figura 2 .
,
- o n ad: -
si
0 U VERSANT HCV Ampltobon 2.0 (UPA) (REF 06718688)
 Nas liras do ensaio
VERSANT HCV Genotype 2.0 (
9
1
1
^ gura 3) que
(CONJ CTRL) contem as sequencias especificas LiPA) existem 3 Imhas
momtonza a reac ao de para os
oenotioos 1 a 6 do VHC P ?2

—lirto;

—
\o \) contem
^ desenvolvimento A Unha uu controlp^
PTDI ** sondasunwersais OUP
CTRL 2),
genotipos do VHC sao dPtormi
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da cor Na linho
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— - (k5 v. v* \ Kl
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de interpretagao do
ensaio VERSANT HCV
Genotype 2.0 (LiPA).

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7
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28

Figura 3.

reagentes e materials su
0 kil conten execugoes mats pequenas
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maxno de cxtc

1
 AItGr
3
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BvTnc ypr^10 '^ . - 3

INNO-LiPA HBV Genotyping

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5 6 7 8 9 10
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