Centro de Ciencias Básicas.

Laboratorio de Análisis Instrumental de Fármacos.

Práctica #1.
“Determinación de nitritos por espectrofotometría visible.”

Nombre de las integrantes: Fernanda Gabriela Esparza Salazar.

Samara del Carmen Lozano Saldaña

Lic. Químico Farmacéutico Biólogo.

4° semestre.

Profesora: M.C.Q. Janett Cecilia Sánchez Arana.

Aguascalientes, Ags. 18 de febrero del 2019.

RESULTADOS.

Imagen1: Comparación visual de la coloración de los tubos, se observa que a mayor

concentración en ppm de N, mayor intensidad en el color rosa. (De derecha a izquierda).

Imagen 2: La gráfica de barrido generada muestra que, en el punto más alto de la gráfica se obtuvo una
absorbancia de 520nm aproximadamente. La muestra blanco contenía 0 mL de solución estándar de 1 ppm,
10 mL de agua, 1 mL de ácido sulfanílico y 1 mL de α-naftilamina.
 En la tabla que aparece a continuación (Tabla 1) están los datos obtenidos de la
absorbancia, así como lo que se le fue agregando a cada tubo, el tiempo que se reposó y
las concentraciones.
Tabla 1.
Tubo Tubo Tubo Tubo Tubo Tubo Tubo Tubo Tubo Tubo Tubo Muestra
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11
mL de solución 0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 
estándar de 1
ppm
mL de H2O 10 9 8 7 6 5 4 3 2 1 0 
mL de muestra            10
problema
mL de ácido 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1
sulfanílico
Agitar y reposar 2-3 2-3 2-3 2-3 2-3 2-3 2-3 2-3 2-3 2-3 2-3 2-3 min
min min min min min min min min min min min
mLde α- 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1
naftilamina
Agitar y reposar 10 10 10 10 10 10 10 10 10 10 10 10 min
min min min min min min min min min min min
Concentración 0 0.04 0.07 0.21 0.32 0.45 0.57 0.66 0.80 0.88 1.0 0
ppm de N
Absorbancia 0 0.061 0.128 0.365 0.548 0.772 0.981 1.144 1.392 1.515 1.731 -0.020
(nm)

Con los datos recabados en la tabla anterior se graficó absorbancia vs concentración:

Absorbancia vs Concentración
2
1.731
1.8
1.515
1.6
1.392
1.4
Absorbancia

1.144
1.2
0.981
1
0.772
0.8
0.548
0.6
0.365
0.4
0.128
0.2 0.061
0
0
0 0.2 0.4 0.6 0.8 1 1.2
Concentración
ANALISIS DE RESULTADOS.
Debido a la intensidad del color rojo que generan los nitritos al reaccionar con el ácido
sulfanílico y el α-naftilamina, se pudo comprobar de manera visual que los tubos contenían
de manera gradual mayor cantidad de nitritos. Es decir, la solución preparada con menor
cantidad de solución estándar (1 mL de agua de la llave) presentó una coloración casi
transparente, de esa manera, conforme aumentaba la cantidad de solución estándar por
tubo, comenzaba a notarse tenuemente cloración rosa hasta llegar a los últimos tubos en
los cuales el color era rojo intenso.
La reacción que se da consiste en una diazotación que ocurre de dos pasos. Primero los
nitritos acidificados producen un agente nitrósido que reacciona con ácido sulfanílico para
producir el ion diazonio. Este ion se aparea con el α-naftilamina para formar el cromóforo
azo derivado que absorbe a 540nm.
Como se estudió, la espectroscopía es una técnica analítica que mide la absorción de la
luz, dependiente de las longitudes de onda, en la región visible o ultravioleta. Es muy útil
para la caracterización de una variedad de materiales, como por ejemplo la identificación
de nitritos que hay en una muestra problema.
Cada muestra en solución es irradiada en el rango del UV-Visible y ciertas longitudes de
onda son selectivamente absorbidas por la muestra produciendo un patrón espectral
característico, se colocó inicialmente la muestra blanco que sirvió para ajustar el
instrumento para leer transmitancia del 100 % o, en este caso 0% de absorbancia.
Posteriormente cada una de las soluciones preparadas pasaron por las celdas del
espectrofotómetro obteniendo así los valores de concentración de cada uno, interpretando
los datos se puede observar que la absorbancia es directamente proporcional a la
concentración porque conforme se avanzaba con las muestras, las cuales fueron
colocadas de menor a mayor concentración, el nivel de absorbancia también aumentaba.
La curva de calibración es un método muy utilizado en química analítica, y resulta un apoyo
importante para este caso en específico ya que se necesita que la concentración sea
proporcional a la propiedad analítica analizada (absorbancia), determina la concentración
de una sustancia (analito) en una muestra desconocida, sobre todo en disoluciones.
Otro método utilizado en el análisis de las muestras fue la colorimetría. “Es un método
óptico que permite la determinación de la concentración de una sustancia que esté
presente en una muestra, pero con un mayor porcentaje de error a diferencia de la
espectrofotometría. La sustancia por determinar debe ser susceptible a generar una
especie con color a partir de la adición de unos reactivos conocidos como reactivos
cromogénicos. La intensidad de la coloración debe estar relacionada linealmente con la
concentración del analito dentro de un intervalo determinado” Khan Academy, 2016).
En esta práctica se utilizaron los dos métodos para identificar la concentración de nitritos
en las muestras problemas, sin embargo, se obtuvo mayor precisión con el
espectrofotómetro, además de que este nos brinda una gráfica, lo cual hace más fácil la
interpretación de los datos en un todo.

CONCLUSIÓN.
El objetivo de la práctica se cumplió satisfactoriamente ya que sí se logró determinar
mediante colorimetría visual y por espectrometría.
Se estudió y, sobre todo comprobó experimentalmente a través de una gráfica resultante
del espectrofotómetro la relación directa que existe entre la concentración y la
absorbancia, y de forma análoga la manera en que se modifica una en relación a la otra al
ser términos relacionados.
Algo importante que resaltar es que se aprendió a utilizar el espectrofotómetro UV-visible,
ya que este es un instrumento que se estará manejando con frecuencia a lo largo de este
laboratorio y en nuestra vida laboral.
Las técnicas utilizadas nos permiten determinar la concentración de una sustancia en una
muestra, no obstante, el espectrofotómetro es mucho más preciso, se necesita una mínima
muestra para poder obtener una lectura, tiene una alta sensibilidad, es fácil de usar y su
análisis es rápido, mientras que la colorimetría visual no es tan preciso, además de que
es subjetivo puesto que depende de cada persona.

BIBLIOGRAFÍA.

 Redalyc. (2010). CUANTIFICACIÓN ESPECTROFOTOMÉTRICA DE NITRITOS.

Revista Cubana de Química, 99-102.
 Khan Academy. (2016). Espectroscopía: la interacción de la luz y la materia. 16 de
febrero del 2019, de Khan Academy Sitio web:
https://es.khanacademy.org/science/chemistry/electronic-structure-of-atoms/bohr-
model-hydrogen/a/spectroscopy-interaction-of-light-and-matter