UNIVERSIDAD NACIONAL MAYOR DE SAN MARCOS

Universidad del Perú , DECANA DE AMÉRICA

FACULTAD DE FARMACIA Y BIOQUIMICA
Creada del 29 de Octubre de 1943
ESCUELA ACADÉMICO PROFESIONAL DE FARMACIA Y BIOQUÍMICA
DEPARTAMENTO ACADÉMICO DE QUÍMICA BÁSICA Y APLICADA

CURSO:

Química Analítica Instrumental
INTEGRANTES:

Ayala Centeno, Merly Liliana

Cadillo Barrueto, Kellet Shaked

Daza Galecio, Erick

Jugo Torres, Angie Roxana

Rodas Huamán, Milagros Angélica

Yupanqui Gallegos, Briggitte

PRÁCTICA: Miércoles 10 – 2pm

DOCENTE:

Dra. Norma Carlos Casas

2017
 23 de
agosto de
PRÁCTICA N°1 2017

OBJETIVOS

1. Conocer y manejar las diferentes funciones del

espectrofotómetro de absorción modelo GENESYS 10s marca
THERMO SCIENTIFIC.

2. Analizar y comprender correctamente las lecturas de los

espectros de absorción dadas por el espectrofotómetro.

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MARCO TEORICO

La espectrofotometría UV – VIS es una técnica analítica que permite determinar

la concentración de un compuesto en solución. Está basada en la medición de
absorción de radiación UV o visible de determinadas moléculas. La radiación
correspondiente a estas regiones del espectro electromagnético provoca
transiciones electrónicas a longitudes de ondas características de la estructura
2
molecular de un compuesto.

La mayoría de los instrumentos espectroscópicos en las regiones uv/visible están

conformados por cinco componentes:

1. Una fuente de energía radiante: lámpara de deuterio e hidrogeno.

2. Un monocromador para la selección de radiaciones de una determinada

longitud de onda: filtros, prismas, redes de difracción.

3. Un compartimento donde se aloja un recipiente transparente (cubetas o

tubos) que contenga la muestra. Pueden ser de vidrio, cuarzo o plástico
transparente. Para medir en UV se deben usar las de cuarzo o sílice fundido,
porque el vidrio no transmite la radiación UV.

4.Un detector de luz y un amplificador convertidor de las señales luminosas en

señales eléctricas.
5
5. Un registrador o sistema de lectura de datos.

Fig.1: Componentes del espectrofotómetro Uv-visible.

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TRANSMITANCIA

La transmitancia de una solución es la relación entre la cantidad de luz

transmitida (I) que llega al detector una vez que ha atravesada a la muestra y la
2
cantidad de luz que incidió sobre ella (I0).

Fig.2: Transmitancia.

El valor de la transmitancia óptica de un objeto se puede determinar según la

siguiente expresión:

Para expresar la transmitancia en porcentaje aplicamos la siguiente fórmula:

ABSORBANCIA

Cuando un haz de luz incide sobre un cuerpo traslúcido, una parte de esta luz es
absorbida por el cuerpo, y el haz de luz restante atraviesa dicho cuerpo. A mayor
cantidad de luz absorbida, mayor será la absorbancia del cuerpo, y menor
2
cantidad de luz será transmitida por dicho cuerpo.
La absorbancia se puede calcular mediante la siguiente formula:

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Dónde:

I es la intensidad de la luz que pasa por la muestra (luz transmitida)

I0 es la intensidad de la luz incidente.

LEY DE BEER-LAMBERT

La fracción de radiación absorbida al pasar a través de la materia está

determinada por dos leyes fundamentales:

Ley de Lambert: Se refiere al espesor de muestra y al efecto sobre la radiación

que se absorbe.

Ley de Beer: Está relacionada con el efecto de la concentración de la muestra

sobre la absorción.

Al juntar estas leyes se obtiene la ley fundamental que rige la absorción de

todos los tipos de radiación electromagnética, aplicable a disoluciones y
también a gases y sólidos. Nos dice que la absorbancia de radiación
electromagnética producida por una especie absorbente es directamente
proporcional a la trayectoria de la radiación a través de la disolución y a la
2
concentración en ésta de la sustancia que produce la absorción.
= × ×
=− () 0

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Dónde:

a=constante de proporcionalidad, absortividad, es una propiedad

intensiva de la materia y por tanto relacionada únicamente con la
naturaleza de la misma.
b=trayectoria de la radiación a través de la muestra (cm)
c=concentración ( ), entonces a tiene unidades de ×

La absortividad pasa a denominarse absortividad molar y se expresa con el

símbolo ε,
Cuando la concentración está en (moles/litro) y b en (cm), siendo sus
unidades ×

LIMITACIONES DE LA LEY DE BEER

Esta ley permite establecer una relación lineal entre absorbancia y

concentraciones de una especie absorbente a una temperatura dada. La
representación de absorbancia frente a concentración es una recta que pasa por
el origen. Sin embargo, se encuentran frecuentes desviaciones con relación a la
proporcionalidad directa entre absorbancias y concentraciones que limitan la
aplicación de la ley. Las principales causas son:

♦ La concentración: Sólo es aplicable a disoluciones diluidas (menor 10-2 M); en

disoluciones concentradas la distancia entre partículas absorbentes es tan
pequeña que se produce una modificación en la distribución de cargas de las
mismas, lo que se traduce en una alteración en la capacidad de absorción a una
longitud de onda determinada. Este efecto se puede eliminar mediante dilución.

♦ La interacción entre el soluto y la radiación debida a mecanismos diferentes a

la absorción pero que producen alteraciones en la intensidad de la luz, tales
como la dispersión, reflexión, la fluorescencia, etc.

♦ Utilización de radiación no monocromática, puesto que la ley está definida

para radiaciones con una sola longitud de onda. Sin embargo, si la calidad del
equipo no es buena, se obtienen bandas de radiaciones con un estrecho
intervalo de longitudes de onda.

PRÁCTICA N°1|LABORATORIO DÍA MIÉRCOLES 6

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PRÁCTICA N°1 2017

♦
Falta de uniformidad de la muestra o especie absorbente, o presencia de
impurezas.
♦ 2
Desviaciones químicas, debidas a reacciones del absorbente con el disolvente.

TEORIA DE ORBITALES MOLECULARES

Cuando dos átomos forman un enlace químico, los orbitales atómicos de cada
uno de ellos se combinan para formar dos orbitales moleculares, uno de baja
energía que es el orbital enlazante y otro de energía mayor, que es el orbital
antienlazante. Los enlaces covalentes que se originan entre los orbitales de dos
átomos que se enlazan químicamente pueden ser de dos tipos y se conocen
como enlaces σ y enlaces π.

Al efectuarse dicho enlace covalente se forman simultáneamente orbitales

antienlazantes: σ* en el caso de un orbital molecular enlazante σ y π* en el caso
de un orbital molecular enlazante π. Los electrones que no participan en la
formación de enlaces covalentes en la molécula, se denominan electrones n o
no enlazantes. En las moléculas orgánicas los electrones n están localizados
principalmente en los orbitales atómicos de átomos como: Nitrógeno, Oxígeno,
Azufre y del grupo de los halógenos.

La absorción de energía radiante en el Ultravioleta o Visible por los electrones n,

σ
ó π resulta de la excitación de éstos, los cuales pasan a ocupar alguno de los
orbitales antienlazantes. La absorción de radiación Ultravioleta o Visible es capaz
3
de efectuar dichas transiciones.

Fig.3: Diagrama de energía de los orbitales moleculares, De acuerdo a este diagrama el orden energético en estas transiciones el de mayor energía es σ→σ∗ y el de menor energía n →π∗

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LIMITACIONES DE LA LEY DE BEER

Esta ley permite establecer una relación lineal entre absorbancia y

concentraciones de una especie absorbente a una temperatura dada. La
representación de absorbancia frente a concentración es una recta que pasa por
el origen. Sin embargo, se encuentran frecuentes desviaciones con relación a la
proporcionalidad directa entre absorbancias y concentraciones que limitan la
aplicación de la ley. Las principales causas son:

♦
La concentración: Sólo es aplicable a disoluciones diluidas (menor 10-2 M); en
disoluciones concentradas la distancia entre partículas absorbentes es tan
pequeña que se produce una modificación en la distribución de cargas de las
mismas, lo que se traduce en una alteración en la capacidad de absorción a una
longitud de onda determinada. Este efecto se puede eliminar mediante dilución.

♦
La interacción entre el soluto y la radiación debida a mecanismos diferentes a
la absorción pero que producen alteraciones en la intensidad de la luz, tales
como la dispersión, reflexión, la fluorescencia, etc.

♦
Utilización de radiación no monocromática, puesto que la ley está definida
para radiaciones con una sola longitud de onda. Sin embargo, si la calidad del
equipo no es buena, se obtienen bandas de radiaciones con un estrecho
intervalo de longitudes de onda.

♦
Falta de uniformidad de la muestra o especie absorbente, o presencia de
impurezas.
♦ 3
Desviaciones químicas, debidas a reacciones del absorbente con el disolvente.


ESPECTRÓMETRO GENESYS 10S UV-VIS

El espectrómetro GENESYS 10S UV-Vis está desarrollado sobre la base de más de

17.000 instrumentos de la serie Thermo Scientific GENESYS 10. Este equipo tiene
aplicaciones en la investigación, docencia, industrias o análisis rutinarios debido
a que proporciona resultados exactos y fiables.

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Características
Velocidades de barrido hasta 3,600 nm/minuto
Óptica doble-haz para exactitud fotométrica superior
Adquiere datos desde UV hasta cercano-IR
Pequeñas dimensiones para fácil transporte
Rendimiento aumentado con el cambiador de 6 celdas integrado
Opciones de termostatización con enfriamiento Peltier y baño de
circulación
Medición de muestras inusuales con una variedad de soportes opcionales
para tubos de ensayos, celdas de gran paso óptico y filtros.

Ventajas

Este equipo permite:

Adquirir los datos en el laboratorio
Guardarlos en un dispositivo de memoria
Utilizar otro PC para analizarlos y redactar informes de laboratorio

Además, el software de las aplicaciones con control del instrumento desde el PC

amplía el abanico de tipos de experimentos que se pueden realizar en el
laboratorio y permite realizar análisis más sofisticados. Este software de control
de instrumentos VISIONlite ofrece una interfaz intuitiva para el barrido de
longitudes de onda, análisis de longitud de onda fija, cinética uni y multiceldas y
análisis cuantitativo.

El espectrómetro GENESYS 10S UV-Vis dispone de una lámpara de xenón de alta

intensidad y de una geometría óptica de doble haz que lo capacitan para
suministrar una calidad de datos inmejorable en toda la zona ultravioleta/visible.
Impulsos de encendido de luz sólo cuando el instrumento está midiendo. La
lámpara de xenón proporciona una fuerte iluminación desde la zona del
4
ultravioleta hasta el IR cercano del espectro.

PRÁCTICA N°1|LABORATORIO DÍA MIÉRCOLES 9

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Fig.4: Partes del espectrofotómetro GENESYS 10S UV-Vis

PRÁCTICA N°1|LABORATORIO DÍA MIÉRCOLES 10

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DESARROLLO DE LA PRÁCTICA

1.- Se comenzó describiendo y

detallando las características de los
espectrofotómetros que se
encontraban en el laboratorio de
prácticas, dando a conocer la
importancia y el uso adecuado de
estos.

Fig.5: Espectrofotómetro de absorción

UV – visible, modelo GENESYS 10S,
marca THERMO SCIENTIFIC

Diagrama instructivo de “MANEJO DEL ESPECTOFOTOMETRO

Asegúrese que el estabilizador Encender el

esté conectado e indique 220V espectrofotómetro antes de
realizar la prueba
Conecte el equipo, presione el El equipo emitirá algunos
interruptor principal “ON”. sonidos normales.

B (Blanco): Se coloca el solvente, en este

caso el solvente fue agua destilada.

1: Se coloca la muestra, en este caso la

azosulfamida.

Fig.6: Espectrofotómetro de absorción

UV – visible, modelo GENESYS 10S,
marca THERMO SCIENTIFIC

PRÁCTICA N°1|LABORATORIO DÍA MIÉRCOLES 11

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PRÁCTICA N°1 2017

2.- Colocamos el blanco (agua

destilada) y la muestra de
azosulfamida en sus celdas
respectivas, abrimos el
compartimiento del instrumento y
colocamos cuidadosamente las
celdas en el porta celdas.
Fig.7: El blanco (agua destilada) en su
celda correspondiente.

3.- Luego se comenzó a efectuar

las mediciones de espectros. Se
tuvo en cuenta que se calibró con
una sustancia blanca, las celdas
estén limpias y secas, se utilizó
como muestra a analizar la
azosulfamida, que tiene un color
característico en forma líquida.

Fig.8: Azosulfamida

4.- Primero se realizó

mediciones manuales hallando
el porcentaje de transmitancia
de 450 nm a 600 nm, teniendo
en cuenta que se calibra con la
muestra en blanco.
Fig.9: Calibración de la muestra en blanco

PRÁCTICA N°1|LABORATORIO DÍA MIÉRCOLES 12

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5 .- Luego utilizando el método de barrido se hallaron los picos y los valles de la

muestra. Se procedió a seleccionar en el espectrofotómetro la longitud de onda, el
modo de medición (ya sea transmitancia o absorbancia) y el intervalo

Fig.10: Espectro de azosulfamida, la Fig.11: Espectro de azosulfamida, la

gráfica (transmitancia vs Long. de Onda) gráfica (absorbancia vs Long. de Onda)
muestra el valle con la longitud de onda muestra el pico con la longitud de onda
optima que es de 525 nm con una optima que es de 525 nm con una
transmitancia de 17.559 %. absorbancia de 0.756 A.

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ESQUEMA DEL MÉTODO DE BARRIDO

Test

Buscar con la Opción Opción Corrección de

Tecla Modo de L.O de ref.
Transmitancia
Opción /Barrido medición

Enter Enter Enter

Buscar intervalo Colocar 450nm

de 5 en 5 Colocar Buscar de L.O
600nm de L.f opción de L.F

Buscar
Presionar Editar grafica
opción Medir Medir Matemática - valles
Correr análisis línea base muestra Picos y valles Encender

Presionar
Scap

Se observa
la siguiente
grafica

Fig.12: Espectro de azosulfamida, la gráfica

(transmitancia vs Long. de Onda) muestra
el valle con la longitud de onda optima que
es de 525 nm con una transmitancia de
17.559 %.

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Para observar la
gráfica en
absorbancia

Buscar
Opción Correr
modo de Enter
Enter Absorbancia análisis
medición

Se observa la
siguiente
grafica

Fig.13: Espectro de azosulfamida, la

gráfica (absorbancia vs Long. de Onda)
muestra el pico con la longitud de onda
optima que es de 525 nm con una
absorbancia de 0.756 A.

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RESULTADOS
1.- Muestra analizada: azosulfamida

Fig.14: Azosulfamida
 Pico que presenta la máxima Absorbancia: no existen picos secundarios

525 nm 0.756 A Relación: Menor % de transmitancia,

525 nm 17.559 % T mayor probabilidad de ser absorbido.
 Picos secundarios de Transmitancia:

ABSORBANCIA vs LONGITUD DE ONDA

% transmitancia (T) Longitud de onda (nm)

54.10% 450
49.10% 460
41.80% 470
34.20% 480
28.00% 490
23.20% 500
19.90% 510
18.10% 520
17.70% 530
19.20% 540
22.90% 550
29.50% 560
38.90% 570
50.00% 580
60.80% 590
69.70% 600

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Longitud de onda (nm) Absorbancia (A)

450 0.2668
460 0.3089
470 0.3788
480 0.4685
490 0.5528
500 0.6345
510 0.7011
520 0.7423
530 0.7520
540 0.7166
550 0.6401
560 0.5301
570 0.4100
580 0.3010
590 0.2160
600 0.1567

0.79
0.74
0.69
0.64
0.59
Absorcion

0.54
0.49
0.44
0.39
0.34
0.29
0.24
0.19
0.14
400 450 500 550 600 650

Longitud de onda (nm)

Fig.15: Espectro de absorción ultravioleta, absorbancia vs longitud de onda de azosulfamida,

obtenido mediante un espectrofotómetro UV/VIS GENESYS 10S Thermo SCIENTIFIC

Según la gráfica observamos que presenta un pico máximo a 530nm. Las formas de la
curva difieren según el solvente utilizado,sin embargo, los picos y crestas se mantienen
constantes, ya que, ese es el parametro que caracteriza al grupo funcional de las
sulfamidas. Si variamos la concentracion, el pH, la temperatura o cualquier otro
parametro fisicoquimico, esta nos dará una curva diferente, pero el pico siempre
coincidirá.

PRÁCTICA N°1|LABORATORIO DÍA MIÉRCOLES 17

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%TRANSMITANCIA vs LONGITUD DE ONDA

Longitud de onda (nm) % transmitancia

450 54.1%
460 49.10%
470 41.80%
480 34.20%
490 28%
500 23.20%
510 19.90%
520 18.10%
530 17.70%
540 19.20%
550 22.90%
560 29.50%
570 38.90%
580 50%
590 60.80%
600 69.70%

Fig.16: Espectro de absorción ultravioleta, %Transmitancia vs longitud de onda de

azosulfamida, obtenido mediante un espectrofotómetro UV/VIS GENESYS 10S Thermo

En esta gráfica observamos un decaimiento y un ascenso en el % de

transmitancia, obteniendo así un punto mínimo que correspondería a la máxima
absorbancia.

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PRÁCTICA N°1 2017

DISCUSIÓN
Según el libro “Introducción al análisis instrumental” de Hernández L. y Gonzáles
C., se menciona lo siguiente:

“La proporcionalidad entre la absorbancia y la concentración únicamente se

cumple para disoluciones muy diluidas, observándose desviaciones más o
menos acusadas al aumentar la concentración. Las desviaciones de la ley de
Lambert pueden clasificarse en: reales, instrumentales, químicas y personales.”

Tomando en cuenta lo antes mencionado se puede destacar las desviaciones

químicas y personales, las cuales influyeron en mayor proporción.

“La presencia de impurezas en los reactivos, los cuales originan errores

considerables; debido a ello, en la práctica analítica ordinaria, las medidas
espectrofotométricas se llevan a cabo frente a un blanco constituido por la
propia célula, el disolvente y los reactivos. En ese sentido interesa que la
absorbancia del blanco sea pequeña, pues si es grande, un pequeño error en su
7
medida puede implicar un gran error relativo en el resultado final .”

Pero el error más considerable a destacar sería a causa de las desviaciones

personales, en ese sentido, resaltaríamos el uso inadecuado de las cubetas.

En la práctica (espectrofotometría UV) se utilizaron celdas de plástico, las cuales

abarcan un rango de transmisión de 380 a 780 nm, las cuales debieron ser de
cuarzo (menores de 350nm). Las de plástico son usadas para espectrofotometría
visible.

“Es necesario que las cubetas estén perfectamente limpias, exentas de huellas o
adherencia en las paredes por las que ha de pasar la radiación; las cubetas de
cuarzo y vidrio pueden limpiarse con ácido nítrico o con agua regia en frío, pero
i
no con mezcla crómica ”

También corroboraremos los resultados citando el libro “Análisis químico

cuantitativo” de Daniel C. Harris, el cual refiere lo siguiente:

“Pequeñas diferencias entre las cubetas de muestra y referencia, imposibles de

controlar, conducen a errores sistemáticos en espectrofotometría. Si se quieren

PRÁCTICA N°1|LABORATORIO DÍA MIÉRCOLES 19

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PRÁCTICA N°1 2017

hacer medidas precisas es importante reproducir todo lo posible la posición de la

cubeta en el espectrofotómetro. Variaciones fortuitas de absorbancia pueden
deberse a pequeños desplazamientos de la cubeta en el portacubetas, o por giro de
1
180° de una cubeta de paredes planas, o por rotación de una cubeta circular ”

La transmitancia de una solución esta dada por la fracción de la luz incidente

6
que pasa a través de la solución y para calibrar el espectrofotómetro se
requiere usar agua destilada, ya que esta es incolora y quimicamente pura, es
1
decir, posee una absorbancia de 0 y una transmitancia de 100% al momento de
calibrar el espectrofotómetro de marca Thermo Scientific (modelo Genesys 10S
UV-Vis). La transmitancia no salió 100% sino aproximadamente 99.03%, es decir
que algo se absorbió. Se sugiere que probablemente no se mantuvo cubierto los
6
recipientes para evitar que entre sustancias que podrían absorber la luz .
Tambien pudo deberse a un error fotométrico del equipo usado.

Cuando analizamos a diferentes longitudes de onda en los diferentes

espectrofotómetros notamos la diferencia de los resultados en los valores de
absorbancia y porcentaje de tranmitancia de nuestra muestra (azosulfamida).
Esto se debe a la intensidad de la radiación emitida por las lámparas y también
por el déficit del porcentaje de transmitancia en la prueba en blanco, donde
debe ser 100% y en algunos casos fue menos, esto ocurrió en el
espectrofotómetro modelo Genesys 10S UV-Vis.

El espectro obtenido en la gráfica es un espectro de bandas y no de líneas

agudas como si ocurre en un átomo, esto se debe a las transiciones electrónicas
provocados por sistemas conjugados.

Según la concentración de la muestra y otros factores, los picos de absorción

pueden diferir en intensidad; sin embargo, se ubican a una longitud de onda
característica.

PRÁCTICA N°1|LABORATORIO DÍA MIÉRCOLES 20

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PRÁCTICA N°1 2017

CONCLUSIONES
1. Se conoció y se manejó las diferentes funciones que posee el
espectrofotómetro de modelo GENESYS 10S UV-Vis teniendo en cuenta
las precauciones al usarlo.
2. Se analizó y comprendió adecuadamente las lecturas de espectros de
absorción dadas por el espectrofotómetro, tales como picos y valles.

REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS
1. Harris. Análisis Químico Cuantitativo. 3ra ed. Ed. Barcelona: Reverté;
2007. P.415

2. SKOOG, D.A.; Leary J.J., Holler F. J. Principios de análisis instrumental.

5°ed. McGraw-Hill; 1998. p.353-367.
3. SKOOG, D.A.; West D.M.; Holler F.J.; Crouch, S.R. Fundamentos de
química analítica.9° ed. México: CENGAGE Learning .p. 723-743.
4. Thermo Scientific (INTERNET). Espectroscopia Molecular:
Espectrofotómetros UV-Visible Thermo Scientific Serie GENESYS 10S
(citado 18 de agosto del 2017). Disponible en:
http://www.equipar.com.mx/web2012/wpcontent/uploads/2012/info_c
at/spectronic/GENESYS10S_Brochure_sp.pdf
5. Valladares S. Espectrofotometría de absorción molecular ultravioleta
visible. Control de calidad de insumos y dietas acuícolas (DOCUMENTO
DE CAMPO EN INTERNET). Santiago de Chile: FAO-Proyecto Aquila II, 1993
(citado 18 de agosto del 2017). Disponible en:
http://www.fao.org/docrep/field/003/ab482s/AB482S03.htm
6. Walton H. Analisis Químico e instrumental moderno. España: Reverté;
2005

7. Hernández L, González C. Introducción al análisis instrumental. 1ra

Edición. España, Barcelona: Editorial Ariel S.A.; 2002

PRÁCTICA N°1|LABORATORIO DÍA MIÉRCOLES 21

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CUESTIONARIO
1. Indicar las equivalencias en metros de las siguientes unidades:
−6
a) Micrómetros:
−9
1 um= 10 m
b) Nanómetro: 1 nm= 10 m
−10
c) Angstrom: 1 Aᵒ= 10

2. Un determinado antibiótico disuelto en un solvente fuertemente polar muestra un

máximo de absorbancia de energía radiante a 425nm.

¿Cuáles son los valores de número de ondas y de su frecuencia correspondiente a

dicha longitud de onda?

ʎ= 425nm
=ʎ
3x108m/s
= = 7,0588 1014
425 10−9
1 1
6 −1
ú = ʎ = 425 10−9 = 2,3529 10

3. Transforma a su correspondiente número de onda y su frecuencia de las siguientes

longitudes de onda e indicar que región del espectro electromagnético pertenecen:

ʎ= 3400 Aᵒ

1 1
6 −1

°= ʎ
= 3400 10 −10
= 2,9411 10

= = = 8,8235 1014
3 108 / ʎ 3400 10−10

PRÁCTICA N°1|LABORATORIO DÍA MIÉRCOLES 22

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−9
ʎ = 295 nm = 295x10

1 1
6 −1

°= ʎ
= 295 10−9
= 3,3898 10

= = = 1,0169 1015
3 108 / ʎ 295 10−9
−6
ʎ = 12 um = 12x10
1 1
4 −1
8,33 10
°= ʎ
= 12 10−6
=

= = = 2,5 1013
3 108 / ʎ 12 10−6

4. Determinar la energía de las siguientes radiaciones:

−9
ʎ = 400 nm = 400x10

−34 8
ℎ 6,6260 10 . 3 10 /
−19
= = = 4,9695 10

ʎ 400 10−9

ʎ = 490nm = 490x10
−9

−34 8
ℎ 6,6260 10 . 3 10 /
−19
= = = 4,0567 10

ʎ 490 10−9

ʎ = 560nm = 560x10
−9

−34 8
ℎ 6,6260 10 . 3 10 /
−19
= = = 3,5496 10

ʎ 560 10−9

PRÁCTICA N°1|LABORATORIO DÍA MIÉRCOLES 23

 23 de
agosto de
PRÁCTICA N°1 2017
ʎ = 650nm = 650x10
−9

−34 8
ℎ 6,6260 10 . 3 10 /
−19
= = = 3,0581 10

ʎ −9
650 10

5. Una radiación de una determinada longitud de onda presenta una intensidad de 91,3
(Iᵒ=91,3). Al atravesar esta radiación por una cubeta de 5cm de espesor mostró una
intensidad de 25,4. ¿Cuál es la absortividad molar si la cubeta se encuentra una solución
-3
10 M?
=
− log ( ) =
25,4
−3
− log (91,3) = 5 10

0,5556 = 5 10−3
= 111,12 /

6. Al atravesar una radiación de 620nm una solución cuyo coeficiente de absortividad

molar es 3520, contenida en una cubeta de 1cm de espesor, presenta una intensidad
de 27, la lectura del blanco fue de 89. Calcular la concentración de la solución.
E=3520 =27 =89 =1
− log ( ) =

27
− log (89) = 3520 1

= 1,4715 10−4M

PRÁCTICA N°1|LABORATORIO DÍA MIÉRCOLES 24

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agosto de
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7.Cual es el porcentaje de transmitancia de una solución en una cubeta de 1cm de

espesor, la misma que presenta una absorbancia de 0.390 en una cubeta de 2cm de
espesor.
1=1 2=2 = 0,390
2− % = 1
0,390 = 2
0,195 =
2 − % = 0,195
2 − 0,195 = %
1,805 = %
% = 63,8263

8.Determine el %T de una solución contenida en una cubeta de 1cm de espesor, que

mostró una absorbancia de 0,374.
=2− % 0,374 = 2 − %
1,626 = %
% = 42,2668

9.Calcular el peso molecular de una sustancia cuya absortividad molar es 3x10 3, en una
cubeta de 1cm de espesor y a 271 bnm, si la solución es preparada pesando 0,015g y
diluyendo a 50,0 mL con H2O mostró un %T de 25.

3
= 3 10 =

=1 2− % =

3 103 1 0,015
= 0,015 2 − 25 =

0,05

900
= 50,0 = 0,05 2 − 1,3979 =

% = 25 0,6021 = 900

= 1494,7683

PRÁCTICA N°1|LABORATORIO DÍA MIÉRCOLES 25

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10.El %T de una solución de azul de bromofenol a 440nm es de 82. El cuádruple de

concentración presentó un %T de 45,3. Determine el %T del doble de concentración.

% = 82 =

% = 45,3 4 =

% = ? 2 =

= 2 − log 82 = 2 − log 45.3 = 2 − log

4 2

2 − log 45.3 = 2 − log

4 2

2 − log 45.3 = 4 − 2 log

log = 1.8280
% = = 67.2976

PRÁCTICA N°1|LABORATORIO DÍA MIÉRCOLES 26