Introducción Frotis

Un frotis bacteriano consiste en la extensión de una muestra de bacterias sobre un portaobjetos,

que se deja secar y finalmente se fija calentando a la llama, ya que de esta manera se coagulan
proteínas y se adhiere el material a la placa (Rodríguez , Gamboa, Hernández , & García , 2005),
es decir, se inmovilizan las células bacterianas para evitar que sean arrastradas durante el
proceso de tinción y lavado (Gamazo , López Goñi, & Díaz , 2005). La aplicación de calor sirve
para fijar, siempre y cuando no se exceda el calor para evitar que las bacterias se deformen o se
lisen (Gamazo , López Goñi, & Díaz , 2005).

La mayoría de microorganismos, especialmente las bacterias, son transparentes, por lo que

resulta conveniente teñirlas antes de observarlas al microscopio, para aumenta de manera
artificial el contraste que existe entre las células bacterianas y el medio que las rodea (Rodríguez
, Gamboa, Hernández , & García , 2005). Para las tinciones bacterianas se utilizan diferentes
colorantes, los cuales son sales que poseen iones con color denominados cromóforos, que se
unen a un componen celular para producir la tinción (Rodríguez , Gamboa, Hernández , & García
, 2005).

Existen varios tipos de tinciones, en esta práctica se usó la técnica de tinción simple que requiere
la intervención de un solo colorante de carácter ácido o básico, algunos ejemplos son: azul de
metileno, verde malaquita, rojo fenol, verde Janus, violeta de genciana, etc (Negroni, 2009). La
ventaja de esta técnica de tinción es la sencillez con la que se realiza, que permite que en pocos
minutos se pueda distinguir al microscopio morfología, tamaño y agrupaciones bacterianas; su
desventaja es que no permite diferenciar si existen microorganismos con diferente composición
química (Negroni, 2009)

Discusión:

No en todos los casos el frotis realizado fue correcto, y esto se pudo evidenciar al momento de
observar al microscopio puesto que no en todas las placas se encontró muestra. Entre las
razones por las que pudo haber sucedido encontramos: no haber tomado suficientemente al
realizar el frotis, o por haber pasado demasiadas veces las placas sobre el fuego al momento de
fijar, ya que como mencionaban (Gamazo , López Goñi, & Díaz , 2005), con esta mala práctica,
las bacterias se deforman o se lisan y por lo tanto se echa a perder la muestra.

Con la aplicación de la técnica de tinción simple utilizando como colorante violeta de genciana,
en los casos en que el frotis se realizó correctamente, si se pudieron observar agrupaciones de
bacterias, tal es el caso de lo que se observa en las figuras 1 y 3, correspondientes a muestras
de cultivo en agar inclinado de Staphyloccoccus epidermis, donde efectivamente existen
agrupaciones grandes de cocos con un aspecto comparable al de racimos de uvas, denominados
estafilococos (Negroni, 2009). De igual manera en la figura 2, correspondientes a muestras de
cultivo en agar inclinado de Bacillus subtilis, se pueden observar bacilos aislados y otros
formando cadenas, estreptobacilos (Negroni, 2009).

Bibliografía
Gamazo , C., López Goñi, I., & Díaz , R. (2005). Manual Práctico de Microbiología. Tercera
edición. Barcelona: MASSON.

Negroni, M. (2009). Microbiología Estomatológica, Fundamentos y guía práctica. Buenos Aires:

MÉDICA PANAMERICANA.
Rodríguez , E., Gamboa, M., Hernández , F., & García , J. (2005). Bacteriología General.
Principios y prácticas de laboratorio. Costa Rica: UCR.