PRACTICA Nº 4

ESTERILIZACIÓN Y DESINFECCIÓN
PREPARACIÓN DE MEDIOS DE CULTIVO

I. INTRODUCCION

Se han desarrollado y aplicado diversos procesos de desinfección y esterilización para limitar o

eliminar a los microrganismo, con el fin de tener medios libres de los mismos. La esterilización es
un método de eliminación total de todo tipo de organismo y que asegura la ausencia absoluta
de cualquier forma viviente, mientras que la desinfección es un proceso que solamente elimina
formas vegetativas de los microorganismos.
En un medio de cultivo se ofrecen un conjunto de nutrientes, factores de crecimiento y otros
componentes, preparados en el laboratorio, que suministran los compuestos necesarios para el
desarrollo de los microorganismos. Algunas bacterias pueden crecer satisfactoriamente en casi
cualquier medio de cultivo, otras bacterias necesitan medios especiales y existen algunas que no
pueden crecer en ninguno de los medios desarrollados hasta ahora. Los distintos tipos de medios
de cultivo varían según las necesidades de los microorganismos objeto de estudio, pero todos
han de cumplir los siguientes requisitos:
Existe una gran variedad de medios para el cultivo de los microorganismos en el laboratorio, la
mayoría de ellos pueden adquirirse ya elaborados, necesitando algunos sólo la adición de agua
o la esterilización. Los medios de cultivo pueden clasificarse:

a) POR SU CONSISTENCIA:
1. Medios Líquidos o Caldos.
2. Medios Sólidos:
3. Medios Semisólidos.
b) POR SU ORIGEN

1. Medios naturales.

2. Medios sintéticos.

3. Medios semisintéticos:

c) POR SU COMPOSICIÓN:

1. Medios Enriquecidos.

2. Medios de Enriquecimiento.
 3. Medios Selectivos.

4. Medios Diferenciales:

II. OBJETIVOS
 Conocer los distintos procesos de esterilización y desinfección.
 Comprender la utilidad de la esterilización y desinfección, en la preparación de medios de
cultivo.
 Preparar medios de cultivo líquidos y sólidos.
 Determinar el uso de esos medios para aislar e identificar a los microorganismos.
 PRACTICA Nº 5

SIEMBRA , AISLAMIENTO Y CARACTERÍSTICAS CULTURALES DE LA

COLONIAS PARA SU IDENTIFICACIÓN

I. INTRODUCCION
Sembrar es inocular los microorganismos en medios de cultivo apropiados para que se
desarrollen o reproduzcan en condiciones óptimas. Tiene por finalidad conservar la vitalidad
del germen para posteriormente determinar sus propiedades bioquímicas.
Para realizar la siembra es necesaria una amplia superficie de medio nutritivo, éste se logra en
las placas petri, para que los microorganismos formen colonias aisladas y en menor medida
en el agar inclinado en tubos.

II. OBJETIVO.
 Determinar el uso de los medios para aislar e identificar a los microorganismos.
 Realizar toma de muestra y siembra en medios de cultivo.
 Efectuar extendido y coloración de Gram de muestra biológica.
 Correlacionar los resultados obtenidos con la coloración de Gram y la siembra en los
medios de cultivo.
 Evaluar las características Culturles de las Colonias para su identificación.
 PRACTICA Nº6

STAPHYLOCOCCUS

I. INTRODUCCION
Estos microrganismos se caracterizan por su morfología particular, de cocos agrupados a
manera de racimos, teniendo comportamiento tintorial Gram positivo. Dentro de las pruebas
que se usan para su identificación están la catalasa y la coagulasa, que permitirán su
identificación y diferenciación con otros géneros y especies. Así mismo radica su importancia,
por el desarrollo de microrganismos multidrogoresistente.
II. OBJETIVOS
 Determinar la importancia clínica de este género y de las especies más prevalentes.
 Reconocer los distintos métodos de identificación.
 Observar y diferenciar en los preparados, las características propias de cada especie.
 Reconocer la resistencia y sensibilidad a los antibióticos.

III. MARCO TEÓRICO

Familia micrococcaceae
Morfología:
 Cocos
 Gram +

Características
 Inmóviles
 Anaeróbicos facultativos, pueden crecer en presencia o ausencia de oxígeno
 Fermentadores de glucosa
 Catalasa (+) positiva, prueba importante
 Desarrollo: medios con NACl 10%
 Temperatura: 18 – 40°C , promedio 37°

IMPORTANCIA CLÍNICA

Staphylococcus Aureus COAGULASA (+)

Staphylococcus Epidermidis COAGULASA (-)

 Staphylococcus Saprophyticus COAGULASA (-)

Cuadro Clínico
 Síndrome de piel escaldada
 Foliculitis
 Neumonía
 Ántrax
 Osteomielitis
 Meningitis
 Sepsis

CULTIVO

AGAR SANGRE
o 37°
o Beta hemólisis
o Staphylococcus Aureus. Amarillo
o Staphylococcus Epidermidis: Sin pigmentación gris o blanquecina
 AISLAMIENTO

AGAR MANITOL AGAR

(SALADO)
SANGRE

Colonias
convexas, lisas,
reddondas,
brillantes,
blancas o
amarillas 2-3 mm

PRUEBAS DIFERENCIALES

Fermentacion
Caalasa DNA -asa manitol Hemolsis Coagulasa
Agar manitol salado

(+) Grumos
(+) Staphococcus
POSITIVA COAGULASA
Aureus
Fermentación del
(-) Coagulasa tubo
manitol
Staphylococcus (-) Staphylococcus
NEGATIVA
No aureus No Aureus
 DIFERENCIACIÓN ANTIBIÓTICA
ANTIBIÓTICO RESISTENCIA SENSIBILIDAD
Bacitracina Staphylococcus SBHA Micrococcus
Neomicina SBH Staphylococcus
NOVOBIOCINA Staphylococcus Saprophyticus Staphylococcus Epidermidis
 Identificado
presuntivamente en el
laboratorio por su
resistencia a la
Novobiocina de 5 mcg
y usualmente es
sensible a la mayoría
de antibióticos
urinarios a excepción
del ácido nalidiico
El Ssa se encuentra
dentro de los El Ssa se adhiere mejor
estafilococos coagulasa a las células
negativo las colonias uroepiteliales que el S.
tienen una aureus y el S.
pigmentación amarilla epidermidis
y no son hemolíticas

Staphylococcus
Saprophyticus
como
patógeno
Se realizaron pruebas de
urinario coagulasa, producción de
hemólisis en agar sangre
(5% sangre de carnero),
sensibilidad al disco de
El segundo aegnte novobiocina 85ug) y la
más frecuene de confirmación por la
cistitis producción de ácidos a
partir de xilosa, manosa,
araabinosa y sacarosa. Se
determinó sensibilidad a
penicilina, oxacilina,
Agente causal de nitrofurantoina
infecciones agudas
del tracto urinario
en muejres
ambulatorias en
edad sexual activa