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La reacción de Gram no es infalible ni constante; puede variar con el tiempo del cultivo, cuanto más
antigua sea la muestra, más riesgo de que la pared bacteriana se encuentre dañada. El pH del medio
también influye en la tinción pues se requiere que las células mantengan su carga negativa para la
interacción correcta con los colorantes, esto sucede a pH neutro o cercano al neutro. (Ver foto)
A pesar de la gran utilidad de la tinción de Gram, este método debe ser valorado con precaución, ya
que la reacción puede variar según la edad de las células (cultivos viejos de bacterias grampositivas
pueden perder capas de peptidoglicanos y teñirse como gram negativos) y la técnica empleada (Al
decolorar por un tiempo muy prolongado se puede correr el riesgo que bacterias gram positivas se
tiñan como gram negativas).
Ninguna ya que cumpliría la misma función de incrementa la afinidad del colorante primario con la
célula, formando complejos insolubles con este. El complejo cristal violeta-yodo sirve para
intensificar el color del tenido, así que no se produciría un efecto si el lugol es reemplazado por otro
agente oxidante.
3. ¿Podría Ud. variar el colorante primario y el contraste obtenido los mismos resultados?
Si se puede variar el colorante primario mientras sea básico para que tiña las células, en cuanto al
colorante de contraste sirve para poner de manifiesto las células gram negativas. Habitualmente es
un colorante de color rojo, como la safranina o la fucsina; sin embargo no es crucial para la técnica.
Entonces si se lograría reconocer el grupo al que pertenecen las bacterias aunque se cambien los
colorantes.
4. ¿Cuál es la influencia del PH en la reacción de Gram?
Hay que tomar en cuenta que el agua usada en el frotis se encuentre en el rango de Ph 7-7.8 ya que:
Se requiere que las células mantengan su carga negativa para la interacción correcta con los
colorantes y se tiñan, esto sucede a pH neutro o cercano al neutro.
5. Liste cinco ejemplos de bacterias Gram positivas y cinco de Gram negativas, señalando su
importancia.
Gram negativas:
Neisseria gonorrhoeae: importancia en salud pública por ser el agente etiológico de
la gonorrea o blenorragia, padecimiento considerado como la segunda enfermedad
de transmisión sexual por su frecuencia.
Gram positivas: