UNIVERSIDAD DE CUENCA

TÉCNICAS DE OBSERVACIÓN EN MICROSCOPÍA

INFORME DE BIOLOGÍA # 1
TRABAJO GRUPAL

INTEGRANTES:

 Lisseth Baiza
 Verónica Coraisaca
 Dianna Loor

Dra. Denisse Soliz

Fecha de Entrega: 20/10/2017

2017-2018
 Introducción

El microscopio cuenta con diversas técnicas de observación, con los cuales se logra mejorar
la observación; debido a la falta de contraste presente en las células, dificulta la apreciación
de las estructuras por lo que se emplean los colorantes.
A continuación se detallará las diferentes técnicas de observación, los tipos de colorantes,
tinciones y las técnicas utilizadas en las muestras tanto combinadas como especiales.

Obtención de la muestra: puede ser por biopsia o necropsia.

Frotis: Método de exploración microscópica de un fragmento de tejido o secreción que
consiste en realizar una extensión sobre un portaobjetos y examinarla con el microscopio.

Técnicas de observación.
 Técnicas de observación en fresco: Consiste en observar los microorganismos vivos
que puede haber en el producto examinado, sin fijación ni tinción.
 Técnicas por fijación: En este paso el tejido obtenido se coloca en una sustancia
fijadora, para evitar los cambios post-mortem y para lograr conservar la forma original del
tejido. Se utilizan métodos de fijación físicos, químicos y mecánicos.
 Técnicas por tinción: Las células, por sí mismas, no poseen coloración. Para poder
observar la morfología tisular deben "teñirse". Existen muchos tipos de tinciones para
diferenciar las distintas estructuras o sustancias en los tejidos. Para que un colorante
sea útil debe ser capaz de unirse fuertemente a la fibra y por lavado no debe perder su
color.

Tipos de colorante según el pH:

 Colorantes ácidos: Como por ejemplo la eosina, colorante cargado en forma negativa,
se une a componentes celulares cargados positivamente.
 Colorantes básicos: Como por ejemplo el azul de metileno, colorante cargado
positivamente, se une a componentes celulares cargados negativamente.
 Colorantes neutros: Son colorantes en los que la porción ácida y la básica colorean.

Clasificación de las tinciones

 Simple: Utiliza solo un colorante.
 Combinada: 2 o más reactivos o tintes, clasifican bacterias según características
especiales.

Técnicas combinadas
 Tinción de Gram: El fundamento de esta tinción se basa en la incapacidad de las
bacterias Gram negativas para retener el complejo cristal violeta - lugol cuando son
decoloradas por una mezcla de alcohol y acetona. Las bacterias Gram positivas, que no
son decoloradas por el alcohol acetona, retienen el colorante inicial (cristal violeta) y
mostrarán esa coloración al final de la técnica. Las bacterias Gram negativas cogerán el
segundo colorante (safranina) y se mostrarán como bacterias de color rojo.
 Tinción de ZiehlNeelsen: Se utiliza para objetivar la presencia de bacilos ácido-alcohol
resistentes en una muestra o preparación. El método utiliza un procedimiento similar al
de la tinción de Gram, es decir: coloración inicial, decoloración y adición de un
contracolorante o colorante de contraste.
 Tinción de Papanicolau: La tinción de Papanicolaou es un método de tinción
policrómico que consta de una tinción nuclear y un contraste citoplásmicos.

Técnicas Especiales
La inclusión: Es el método más común de endurecer el tejido y consiste en infiltrar la
muestra con sustancias líquidas que tras un proceso de polimerización o enfriamiento se
solidifican, sin afectar a las características del tejido.
TÉCNICAS DE OBSERVACIÓN EN MICROSCOPÍA

Técnica: En fresco

Muestra: Insecto

Objetivo: 10x

Coordenadas: x( 10,20); y(10,147)

Técnica: Por fijación PARED

Muestra: pétalos de geranio CELULAR

Objetivo: 40x

Coordenadas: x( 10,12) ; y( 10,155)

Técnica: Frotis

Muestra: sangre

Objetivo: 40x

Coordenadas: x( 10,21); y(10- 129)

Técnica: Tinción simple

Muestra: Mucosa Bucal

Objetivo: 4x

Coordenadas: x(10,24); y( 10,133)

Técnica: Tinción simple

Muestra: Mucosa Bucal

Objetivo: 40x

Coordenadas: x(10,24); y( 10,133)

Técnica:Tinción Gram

Muestra:Bacilos negativos

Objetivo:100x

Coordenadas:x(10,23) ; y(10,155)

Técnica:Tinción Gram

Muestra:Cocos positivo

Objetivo: 100x

Coordenadas: x(10,18) ; y(10,138)

Técnica:Tinción Gram

Muestra:Bacilos negativos

Objetivo:100x

Coordenadas: 10x , 120y

Técnica:Tinción Gram

Muestra:Cocos negativos

Objetivo:100x

Coordenadas:12x - 142y
Técnica: Tinción Gram

Muestra: Cocos negativos y Bacilos positivos

Objetivo: 100x

Coordenadas:x( 0,15) ; y(10,145)

Técnica: Tinción de ZiehlNeelsen

Muestra: Bacilo Tuberculosis

Objetivo: 100x

Coordenadas: 14x -132y

Técnica: Tinción de Papanicolaou

Muestra:

Objetivo: 100x

Coordenadas:x(10,27); y(10,160)