GRADO EN CIENCIA Y TECNOLOGÍA DE ALIMENTOS

ASIGNATURA: Biología General

NOMBRE DEL ALUMNO: Paloma Leiro Escribano

PRÁCTICA Nº1: DETERMINACIÓN DE AZÚCARES REDUCTORES.

MÉTODO DE SOMOGYI-NELSON

Resultados

1. Realiza la curva de calibrado, obteniendo la recta de regresión, la ecuación de dicha

recta y el valor del coeficiente de determinación (𝑹𝑹𝟐𝟐 )

Curva de Calibrado
1,316
1,4
1,2 y = 0,0438x + 0,1227
R² = 0,8781 0,896
1
Absorbancia

0,712
0,8 0,596
0,6 0,498

0,4
0,2 0
0
0 5 10 15 20 25 30
Concentración de glucosa (µg/mL)

2. Calcula la cantidad de azúcares reductores presente en las tres muestras problema,

expresado como cantidad de glucosa equivalente.

A partir de la ecuación de la recta: 𝑦𝑦 = 0,0438𝑥𝑥 + 0,1227 que fue proporcionada por

la curva de calibrado, predecimos los valores de concentración.
Donde 𝑦𝑦 es la absorbancia, 0,0438 es la pendiente de la recta, 𝑥𝑥 es nuestra incógnita,
es decir, la concentración de glucosa y 0,1227 es el coeficiente de posición, lo cual
indica que la recta interceptará al eje 𝑦𝑦 en el punto (0; 0,1227).
Luego sustituimos 𝑦𝑦 por los valores de absorbancia, que fueron calculados
previamente por el espectrofotómetro en la práctica de laboratorio y los
multiplicamos por el volumen final de la muestra (10 𝑚𝑚𝑚𝑚) partido el volumen de cada
muestra (2𝑚𝑚𝑚𝑚)
Al realizar estos cálculos nos queda que, en la muestra 1.1 con una absorbancia de
1,477 tenemos una concentración de glucosa igual a 154,6 µg/mL; en la muestra 1.2
con una absorbancia de 1,471 la concentración de glucosa nos da 153,9 µg/mL; la
muestra 2.1 tiene una absorbancia de 0,165, por lo tanto su concentración de glucosa
es 4,85 µg/mL ; en la muestra 2.2 tenemos 0,176 de absorbancia con lo que nos da 6,1
µg/mL de concentración; la muestra 3.1 tiene una absorbancia de 0,799 y así su
concentración es de 77,2 µg/mL; y finalmente en la muestra 3.2 nos dio una
absorbancia de 0,791 y con esta calculamos su concentración de glucosa que sería 76,3
µg/mL.
 Al calcular las concentraciones de glucosa de las muestras por duplicado, se saca la
media de cada muestra, y con esto nos queda que:
• En la muestra 1 tenemos 154,25 µg/mL de concentración de glucosa.
• En la muestra 2 tenemos 5,475 µg/mL de concentración de glucosa.
• En la muestra 3 tenemos 76,75 µg/mL de concentración de glucosa.

3. Interpreta los resultados obtenidos

En esta Práctica Nº1 de biología, debimos determinar la cantidad de azúcares reductores

de las muestras problemas, a partir del método de Somogyi-Nelson.

Para poder calcular nuestra cuestión, fue necesario seguir una serie de pasos y protocolos.

Lo primero que hicimos fue mezclar, por duplicado, 2 mL de muestra problema con 2 mL
de reactivo de Somogyi (R.1) en tubos de tapa roscada. Estos tubos, una vez tapados y
agitados, fueron incubados en un baño de agua hirviendo durante 15 minutos.
Transcurrido este tiempo, los hemos enfriado con ayuda de agua de grifo, y les hemos
añadido 2 mL de reactivo de Nelson (R.2) y 4 mL de agua destilada. Por último, tras
agitación, hemos evaluado la absorbancia de cada muestra en un espectrofotómetro a una
longitud de onda de 540 nm.

A la par que íbamos preparando estas muestras, también hemos ido preparando una
solución de glucosa de 500 ppm (Sol. A) y a partir de ella hemos preparado las siguientes
disoluciones:

Sol. A (mL) 𝑯𝑯𝟐𝟐 𝑶𝑶 (𝒎𝒎𝒎𝒎) Glucosa (µg/mL)

0,0 2,0 0
0,1 1,9 5
0,2 1,8 10
0,3 1,7 15
0,4 1,6 20
0,5 1,5 25
Donde se podía observar que, a mayor cantidad de glucosa el color de la disolución era
más obscura, tirando a un violeta azulado, mientras que a menor cantidad de glucosa la
disolución era más clara, con un color verde amarillento.

Estas disoluciones fueron necesarias para poder cuantificar el contenido en azúcar de cada
muestra problema realizando, a partir de ellas, una curva de calibrado.

En mi curva de calibrado se puede observar que las concentraciones de glucosa obtenidas

oscilan entre 0 y 25 (µ𝑔𝑔/𝑚𝑚𝑚𝑚), y que lo más probable es que al hacer el pipeteo de la
disoluciones en el laboratorio, lo hayamos hecho mal, ya que la curva de calibrado debería
de mantener una relación lineal progresiva entre la absorbancia y la concentración de la
glucosa, sin embargo en mi curva de calibrado la recta no queda progresiva, sino que en
algunos puntos la recta crece, decrece y luego vuelve a crecer.

De las concentraciones de glucosa de las muestras podemos decir que la muestra 1 es la

de mayor concentración, la muestra 3 es la segunda muestra más concentrada y que la
muestra 2 es la menos concentrada en glucosa.