¿Por qué la mayor parte de protocolos para la extracción de enzimas sugiere realizarla a

bajas temperaturas?

Generalmente la extracción de enzimas se realiza en temperaturas inferiores a 4 0C, a esta

temperatura las enzimas se mantienen estables porque la mayor parte de estas, son termo-
lábiles, es decir, no toleran temperaturas muy altas porque tienden a perder estabilidad e
inactivarse.

¿Cuál es la importancia de utilizar detergentes y sustancias protectoras de enzimas ((cite

ejemplos) en el proceso de extracción?

En general, para la extracción de enzimas se utilizan detergentes, específicamente el Triton-x

con la finalidad de solubilizar membranas; muchos enzimas poseen enlaces disulfuro (S - S)
debido a la presencia de azufres en algunos aminoácidos, los mismos que tienden a oxidarse
durante la extracción lo que se ve traducido en la pérdida de la estructura y actividad de la
enzima de interés. Para sobrellevar este hecho se implementan tioles (e. g., mercaptoetanol o
aminoácidos como la cisteína); de igual forma, en ocasiones se suele colocar caseína o
albúmina sérica en el medio de extracción; estas proteínas protegen al enzima de la acción
hidrolítica de las proteasas endógenas que se producen durante la etapa de homogenización
del tejido del que se van a extraer las enzimas.