UNIVERSIDAD DE LAS FUERZAS ARMADAS – ESPE

DEPARTAMENTO DE CIENCIAS DE LA VIDA Y LA

AGRICULTURA

INGENIERÍA EN BIOTECNOLOGÍA

GENÉTICA

Integrantes: Mishell Recalde; Camila Utreras; Jéssica Villafuerte

NRC: 3836
Fecha de entrega: 21 de enero de 2019

INFORME DE LABORATORIO # 3

TEMA:
Detección de grupos sanguíneos como evidencia de marcadores poblacionales.
OBJETIVOS:
Objetivo general
Identificar los grupos sanguíneos como evidencia de marcadores poblacionales
Objetivos específicos:
 Observar la presencia o ausencia de aglutinación en las pruebas de hemolisis.
 Evidenciar el equilibrio o desequilibrio en la población de estudiantes del curso

JUSTIFICACIÓN:

Esta práctica fue realizada con el objetivo de identificar los grupos sanguíneos, de los
estudiantes de genética del NRC 3830, como evidencia de marcadores poblacionales. El
procedimiento adecuado conllevó obtener muestras de sangre mediante la técnica de
punción con lanceta y obtener 3 gotas suficientes para aplicar los reactivos de
identificación que son: Anti A, Anti B, Anti D.

INTRODUCCIÓN:

La posibilidad de trasfundir sangre de un individuo a otro quizás filé seriamente discutida

por primera vez en la primera mitad del siglo XVII, aunque ya desde tiempo mas antiguo
se había pensado en los poderes vitales de la sangre y en su capacidad rejuvenecedora.
Dice la historia, por ejemplo, que los egipcios tomaban baños de sangre y algunas
enfermedades se trataban con la ingestión de sangre de animales. La era fisiológica de la
historia de la transfusión sanguínea comenzó con el descubrimiento de la circulación de
la sangre por Harvey en 1616. (Grispán, 2003)
Los primeros experimentos fueron hechos con transfusiones homologas entre animales y
en 1667 se efectuó la primera transfusión en un humano al cual se le inyectaron 9 onzas
de sangre de carnero. Después de los primeros accidentes y del descrédito del
procedimiento, hubo un receso de casi 150 años en que no hubo avance en la transfusión
de sangre. En 1818 James Blundell Obstetra y Fisiólogo Inglés hizo la primera transfusión
de hombre a hombre y para 1875 ya se habían hecho unas 350 transfusiones en humanos.
En 1899 Shattock informó sobre la aglutinación de eritrocitos de algunas personas con el
suero de otras e interpretó este fenómeno como anormal, fue Karl Landsteiner quién
descubrió las diferencias de la sangre entre grupos de personas y con su teoría sobre la
especificidad de las reacciones serológicas (1900) dio inicio a la era inmunológica de la
historia de la transfusión sanguínea Landsteiner dividió las personas, de las cuales estudió
su sangre, en tres personas, obviamente la palabra grupo se refería al grupo de personas
pero después el uso y la costumbre llevó a hablar de grupos sanguíneos:

GRUPO 1 GRUPO O
GRUPO 2 GRUPO A
GRUPO 3 GRUPO B

En 1902 Descastello y Sturdi descubrieron al grupo AB. La nomenclatura aceptada en

1928 por la Liga de las Naciones fue la de Jansky quién propuso cuatro grupos
sanguíneos: (A, B, O, AB). El descubrimiento de los grupos sanguíneos revolucionó la
práctica de la transfusión sanguínea puesto que ya con este hallazgo era posible
seleccionar los donantes mediante pruebas pretransfusiónales in vitro. (Mollison P.L,
1992)

ANTÍGENOS DE LOS GRUPOS SANGUÍNEOS:

Las membranas de las células del organismo humano incluyendo los eritrocitos están
formadas por varias capas de moléculas lipídicas, proteicas, y carbohidratos distribuidos
en tal forma que permiten una separación entre el medio intracelular y el medio
extracelular. (R, 1995)

Los genes que controlan la estructura de un antígeno en particular, ocupan un lugar

correspondiente (loci) en un par de cromosomas homólogos, en esta forma para todos los
genes que se encuentran en cromosomas autosómicos un individuo puede ser homocigoto
o heterocigoto. El único grupo sanguíneo que no es autosómico es el sistema XG cuyos
genes están en el cromosoma X. Estos antígenos pueden formar parte de la membrana del
glóbulo rojo como ser el antígeno Rh que es una lipoproteina o estar adherido a la
superficie de los glóbulos rojos, como los antígenos ABO que químicamente son
lipopolisacáridos. (B.A, 1994)

AGLUTINACIÓN
Aglutinación de eritrocitos es el fenómeno in vitro más comúnmente utilizado en
serología de Banco de Sangre. Existen dos fases: 1) Sensibilización: en la cual el
anticuerpo se adhiere físicamente al antígeno específico de la superficie de los glóbulos
rojos (con o sin fijación de complemento) y no es visible. 2) Aglutinación de eritrocitos,
visible in vitro, en el que se forman puentes o uniones entre eritrocitos sensibilizados. Si
los anticuerpos son IgM la aglutinación ocurre inmediatamente después de la
sensibilización. Para demostrar sensibilización por anticuerpos IgG es necesario utilizar
soluciones. (Grispán, 2003)

Los fenómenos de sensibilización y aglutinación están influenciados por varios factores:

temperatura (La temperatura para reacción óptima de anticuerpos varía: ej. IgG tiende a
reaccionar mejor a 37oC e IgM a temperatura ambiente o temperaturas frías), pH, tiempo
de incubación (necesario para que la reacción antígeno anticuerpo alcance un equilibrio)
fuerza iónica del medio, etc. (B.A, 1994)
HEMOLISIS:
Algunos anticuerpos cuando reaccionan contra antígenos o grupos sanguíneos específicos
producen por consiguiente lisas de los eritrocitos. Estos anticuerpos se llaman
hemolisinas, Ej: Anti A, antí B, anti AB, Lea, Leb, JKb, etc. Como se ha mencionado
anteriormente anticuerpos IgG e IgM pueden fijar complemento sin causar hemolisis. Las
enzimas (Ej. Papaina, bromelina, etc) remueven el ácido siálico de la membrana de los
eritrocitos y por lo tanto disminuye la carga negativa. (Grispán, 2003)

SISTEMA ABO
El sistema ABO fue el primer grupo sanguíneo descubierto. Landsteiner en 1900
descubrió que los glóbulos rojos pueden clasificarse en A, B y O, de acuerdo a la presencia
o ausencia de antígenos reactivos en la superficie de los glóbulos rojos.
Dichos antígenos son de mucha importancia en transfusión sanguínea, trasplante de
tejidos y enfermedad hemolítica del recién nacido. Compatibilidad de grupo ABO es
esencial en toda prueba serológica pre-transfusional. (Grispán, 2003)
Naturaleza de los antígenos A y B.
Los antígenos A y B son glicoproteínas, producidas por genes alélicos en un locus único,
localizados en la parte proximal del brazo corte del cromosoma 9. Los antígenos
correspondientes se encuentran aparentemente adheridos a la membrana de los glóbulos
rojos. La especificidad antigénica es conferida por el azúcar, terminal. (Grispán, 2003)

MATERIALES Y MÉTODOS:

Grupo sanguíneo y Rh
Se utilizaron 3 placas diferentes para cada prueba, en caso de tener solo una se habría
trazado tres círculos separados.
Se colocó una gota de sangre en cada placa, debidamente etiquetada para Anti A, B y D.
Se agregó una gota de reactivo distinto de anticuerpo Anti A, B, D inmediatamente tras
agregar la gota de sangre.
Se mezcló el contenido de cada círculo con aplicadores de madera distintos.
Finalmente se observó la presencia o ausencia de aglutinación y determinó el tipo de
sangre de cada estudiante.
La aglutinación indica la presencia de antígeno para el anticuerpo agregado.

RESULTADOS:

Nombre Anti A Anti B Anti G Grupo

Sanguíneo
Helen + - + A+
Mateo - + + B+
Pavel - - + O+
Karen - - + O+
Tamia + - + A+
Mirla + - + A+
Thelvia - - + O+
Mishell + - + A+
Camila - - + O+
 Jéssica - - + O+
María Fer. + - + A+
Fernando - - + O+
Jean - - + O+
Raquel - - + O+
Josseline - - + O+
Tabla 1: Grupos sanguíneos generales obtenidos de los estudiantes de Genética del
NRC:3830, obteniendo un porcentaje mayor de ORH+, según los resultados de
aglutinación con el kit sanguíneo.

Nombres Anti A Anti B Anti D

Jéssica
Villafuerte
 Camila Utreras

Misshell
Recalde

Tabla 2: Grupos sanguíneos del Grupo 5, dos estudiantes son ORH+ y uno ARH+, según
los resultados de aglutinación.
 Fig.1 Resultados de la prueba de aglutinación utilizando el Kit sanguíneo para Anti A,
B y D.

DISCUSIÓN:
La determinación de los grupos sanguíneos ABO se realiza mediante una prueba sencilla
de aglutinación. Donde una gota de sangre del paciente es expuesta a tres diferentes
reactivos anti-A, anti-B y anti-D. Si la sangre se aglutina al colocar el anti-A significa
que la sangre contiene el antígeno A y que la persona pertenece al grupo sanguíneo A. Si
la sangre se aglutina al colocar el anti-B significa que la sangre contiene el antígeno B y
que la persona pertenece al grupo sanguíneo B. Si se aglutina frente al anti-A y el anti-B
la persona pertenece al grupo AB. Si no hay aglutinación para ninguno de los dos la
persona pertenece al grupo O. Por último, si existe aglutinación de la sangre frente al anti-
D esto quiere decir que la persona tiene presente el factor Rh+ y sin aglutinación se tiene
el factor Rh- (Dueñas, 2003).
De acuerdo a los resultados obtenidos se tiene que alrededor del 60% de personas
evaluadas tienen un tipo de sangre ORh+, un 33,33% pertenecen al grupo A+, 6,67%
pertenecen al grupo B+, 0% al grupo AB+ y nadie presento el factor Rh-. Concordando
con los resultados estimados de la población ecuatoriana de un 75% del tipo ORh+, el
14% perteneciendo al grupo A+, el 7% al grupo B+, el 0,5% al grupo AB+ y el 3,5%
todos los negativos (Cruz Roja Ecuatoriana , 2014).
CONCLUSIONES:
 En el sistema ABO el tipo de sangre más común entre la población del curso fue
el tipo O, mientras que en el sistema Rh, el factor Rh que más se repitió fue el
positivo (+), siendo de esa manera el tipo de sangre O Rℎ+ la más frecuente en
esta población.
 Las pruebas de hemólisis por aglutinación, permite identificar la reacción que
ocurre entre el antígeno y el anticuerpo, en grupos O la aglutinación es nula
debido a que sus eritrocitos carecen de algún antígeno y en el grupo Rh muestra
aglutinación porque responde a la reacción de antígeno D con el anti cuerpo D.

ANEXOS

Problema:
Si en las pruebas de aglutinación los resultados de dos estudiantes fueron A+ y O+
determinar los posibles genotipos y fenotipos de los padres de cada estudiante
respectivamente.
Ejercicio:
Grupos Número
A 5
B 1
AB 0
O 9
Total 15

Rh Número
14
+

1
-

Total 18

 Cálculo de frecuencia fenotípica, frecuencia genotípica y frecuencia génica.

o Sistema ABO

Fenotipos Frecuencia
fenotípica
A 5/15*100 = 33.33%
B 1/15*100=6.67%
 AB 0%
O 9/15*100 = 60%
Total 99.97%

Frecuencia
génica
Ap= 0.196
Bq=0.034
Or=0.77

Genotipos Frecuencia
genotípica
AA 0.0384= 3.84%
AO 0.3018=30.184%
BB 0.001156= 0.1156%
BO 0.05236 =5.236%
AB 0.006664 =0.6664%
OO 0.60 =60%
Total 100 %
Cálculos
Teniendo como: p=A, q=B y r=O.
𝑝+𝑞+𝑟 =1
Se toma la relación de la frecuencia fenotípica del homocigoto recesivo igualando a r.
𝑟 2 = 0.6
𝑟 = 0.77
Se realiza el análisis de p y r.
(𝑝 + 𝑟)2 = 𝑝2 + 2𝑝𝑟 + 𝑟 2
Donde 𝑝2 + 2𝑝𝑟 = 0.28
(𝑝 + 𝑟)2 = 0.33 + 0.6

√(𝑝 + 𝑟)2 = √0.933

𝑝 + 𝑟 = 0.966
𝑝 = 0.966 − 0.77 = 0.196
De 𝑝 + 𝑞 + 𝑟 = 1
𝑝+𝑞+𝑟 =1
𝑞 =1−𝑝−𝑟
 𝑞 = 1 − 0.196 − 0.77
𝑞 = 0.034
o Factor Rh

Fenotipos Frecuencia Frecuencia

fenotípica génica
Rh + 14/15*100 = 93.33% p= 0.741
Rh - 1/15*100=6.66 % q=0.258
Total 99.9967 %

Genotipos Frecuencia
genotípica
DD 0.549= 54.91%
Dd 0.382=38.24%
dd 0.0665= 6.66%
Total 98.80 %

Teniendo que p= D; q=d

Se toma la relación de la frecuencia fenotípica del homocigoto recesivo igualando a r.
𝑞 2 = 0.067
𝑞 = 0.258
Se realiza el análisis de p y q.
(𝑝 + 𝑞)2 = 𝑝2 + 2𝑝𝑞 + 𝑞 2
De 𝑝 + 𝑞 = 1
𝑝+𝑞 = 1
𝑝 = 1 − 0.333 = 0.741

Ejercicio 2:
Tabla 1. Resultados del tipo de sangre de 15 personas.

Grupo A B AB O
Rh + 5 1 0 9
Rh - - - - -
Total 5 1 0 9 15

Cálculo de frecuencia fenotípica, frecuencia genotípica y frecuencia génica

Sistema ABO
 Fenotipos Frecuencia fenotípica
A 5/15*100 = 33,33%
B 1/15*100= 6,67%
AB 0/15*100 = 0%
O 9/15*100 = 60%
Total 100 %

Genotipos Frecuencia genotípica

AA p2 = 0.0361 = 3.61%
AO 2pr = 0.2926 = 24.6%
BB q2 = 0.0016 = 0.16%
BO 2qr = 0.0616 = 6.16%
AB 2pq = 0.152 = 1.52%
OO r2 = 0.60 = 60%
Total 100 %

Siendo:

p=A, q=B y r=O

𝑝+𝑞+𝑟 =1

Se toma la relación de la frecuencia fenotípica del homocigoto recesivo igualando a r.

𝑟 2 = 0.60
𝑟 = 0.77
Se realiza el análisis de p y r.

(𝑝 + 𝑟)2 = 𝑝2 + 2𝑝𝑟 + 𝑟 2

Donde 𝑝2 + 2𝑝𝑟 = 0.3333

(𝑝 + 𝑟)2 = 0.33 + 0.60

√(𝑝 + 𝑟)2 = √0.93

𝑝 + 𝑟 = 0.96
𝑝 = 0.96 − 0.77 = 0.19
De 𝑝 + 𝑞 + 𝑟 = 1

𝑝+𝑞+𝑟 =1
𝑞 = 1−𝑝−𝑟
𝑞 = 1 − 0.19 − 0.77
𝑞 = 0.04
Ejercicio 3:

Se realizan estudios para determinar el tipo de sangre de 40 personas de latino américa y se

determinan los siguientes datos mostrados en la tabla:

Grupo A B AB O
Rh + 14 5 2 12
Rh - 2 - - 5
Total 16 5 2 17 40

 Calcular la frecuencia fenotípica, frecuencia genotípica y frecuencia génica del grupo

Fenotipos Frecuencia Fenotípica

A 16/40*100 = 40%
B 5/40*100= 12.5%
AB 2/40*100 = 5%
O 17/40*100 = 42.5%
Total 100 %

Siendo:

p = A, q = B y r = O

𝑝+𝑞+𝑟 = 1
𝑟 2 = 0.425
𝑟 = 0.652
(𝑝 + 𝑟)2 = 𝑝2 + 2𝑝𝑟 + 𝑟 2

Donde [(𝐴𝐴 = 𝑝2 ) + (𝐴𝑂 = 2𝑝𝑟)] = 0.40

(𝑝 + 𝑟)2 = 0.40 + 0.425

√(𝑝 + 𝑟)2 = √0.825

𝑝 + 𝑟 = 0.908
𝑝 = 0.908 − 0.652 = 0.256
De 𝑝 + 𝑞 + 𝑟 = 1

𝑞 =1−𝑝−𝑟
𝑞 = 1 − 0.256 − 0.652 = 0.092

Fenotipos Frecuencia Génica

A p = 0.256
B q = 0.092
O r = 0.652
Total 1
 Genotipos Frecuencia Genotípica
AA p2 = 0.0655 = 6.55%
AO 2pr = 0.334= 33.4%
2
BB q = 0.00846 = 0.846%
BO 2qr = 0.0616 = 6.16%
AB 2pq = 0.12 = 12%
OO r2 = 0.425 = 42.5%
Total 100 %

Bibliografía
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(2016). Análisis comparativo de diferentes métodos de extracción DNA y si eficiencia de
genotipificación en pl. Mexico D.F: Universidad Juarez de Durango.

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