UNIVERSIDAD DE LAS FUERZAS ARMADAS – ESPE

DEPARTAMENTO DE CIENCIAS DE LA VIDA

NOMBRE: Esparza Carlos, Leiva Luis NRC: 4335 Fecha: 08/08/2018

INFORME N.º 12

1. TÍTULO: Evaluación del control microbiano por agentes físicos en el laboratorio

interdisciplinario N.º 4 de la Universidad de las Fuerzas Armadas (ESPE)

2. PALABRAS CLAVES: Desecación, tiempo termal y filtración

3. RESUMEN

En esta práctica se realizó la evaluación de la eficacia que presentan los agentes físicos en el
control de Bacillus subtilis y Escherichia coli, se ejecutaron los siguientes: efectos letales de
la temperatura, filtración e incineración y se obtuvo que el caldo filtrado no presentó un
notable crecimiento bacteriano; no obstante en la incineración no hubo crecimiento alguno lo
que nos indicó que entre los agentes estudiados presenta la mayor eficiencia de control.

4. INTRODUCCIÓN

Antecedentes

Los microorganismos ofrecen diversos benecitos a la sociedad en diferentes normas. otro

aspecto son también los microorganismos un vehículo para la producción de en-enfermedades
( por la producción de toxinas propiamente dic1as

o metabolitos tóxicos. Además de datos en cultivos( descomposición de alimentos y

enfermedades en animales. /s por esto que el ser 1umano 1abuscado los procedimientos
necesarios para destruir o controlar el crecimiento de los microorganismos per5udiciales, por
ende [ CITATION Mar15 \l 12298 ] realizaron un estudio bibliográfico que permite
identificar la importancia del control y/o destrucción de bacterias potencialmente dañinas;
gracias a la utilización de diversas técnicas físicas como químicas.

Objetivos General
Evaluar el control microbiano por agentes físicos en el laboratorio interdisciplinario N.º 4 de
la Universidad de las Fuerzas Armadas (ESPE)

Objetivos Específicos
 Observar la turbidez de cada tubo de ensayo con solución salina y caldo
nutriente sometidos a variaciones de temperatura.

 Verificar el tiempo termal de muerte de Escherichia coli y Bacillus subtilis.

 Establecer si la temperatura afecta al crecimiento bacteriano.

Hipótesis

El objetivo del control microbiano es detener total o parcialmente la proliferación de

bacterias, hongos etc. Al nosotros utilizar 4 técnicas físicas para control microbiano se
observará que el crecimiento de Escherichia coli y Bacillus subtilis disminuirá a comparación
de un cultivo sembrado de forma normal.

Justificación

Los microorganismos ofrecen diversos beneficios a la sociedad en diferentes formas. En otro

aspecto son también los microorganismos un vehículo para la producción de enfermedades,
por la producción de toxinas propiamente dichas o metabolitos tóxicos. Además de daños en
cultivos, descomposición de alimentos y enfermedades en animales. Es por esto que el ser
humano ha buscado los procedimientos necesarios para destruir o controlar el crecimiento de
los microorganismos perjudiciales, por ende esta práctica se realizó con el fin de emplear
agentes físicos que podrían inhibir la proliferación y evaluar la eficacia de cada técnica
empleada.

Marco Teórico

Control microbiano

Existen diferentes tipos de control antimicrobiano que son Físicos y químicos; los
agentes físicos que se utiliza con frecuencia son: esterilización por calor, radiación y
filtración mientras que los químicos pueden escalonarse como antisépticos, desinfectantes y
esterilizantes[ CITATION Lañ05 \l 12298 ].
Controles físicos

Todo microorganismo presenta una temperatura máxima de crecimiento, por encima de la

cual muere. Desnaturalización Proceso por el cual las moléculas pierden su estructura y su
función; a mayor temperatura mayor rapidez de desnaturalización, menor tiempo. Por tanto si
se desea esterilizar una población microbiana, se tardará más a bajas temperaturas que a
temperaturas elevadas[ CITATION San10 \l 12298 ].

Tiempo de muerte térmica

Tiempo que se necesita para matar todas las células a una temperatura
determinada. El tiempo de muerte depende del tamaño de la población ensayada,
para poblaciones grandes de microorganismos se requiere mayor tiempo que para
una población pequeña.

Esterilización por filtración

La filtración es utilizada para esterilizar líquidos termosensibles o gases. Filtro

Dispositivo con poros pequeños como para que no pase un microorganismo, pero
lo suficientemente grande como para permitir el pasaje de un líquido o un gas. Las
células bacterianas miden entre 0,3 µm a 10 µm de diámetro[ CITATION Roj11 \l
12298 ].

Condiciones que influyen en la eficacia de un antimicrobiano:

La destrucción de los microorganismos y la inhibición del crecimiento no es un

proceso simple, debido a que la eficacia de un agente antimicrobiano es afectada
por 6 factores:

1. Tamaño de la población
 Debido a que la muerte es exponencial, una población muy grande requiere de
mayor tiempo[ CITATION San10 \l 12298 ].

2. Composición de la población

La eficiencia del antimicrobiano varía considerablemente con respecto a la

naturaleza de los organismos que son tratados porque su susceptibilidad es
distinta[ CITATION Lañ05 \l 12298 ].

3. Concentración o intensidad del agente antimicrobiano

A menudo, pero no siempre, entre mayor sea la concentración del agente

químico o más intenso agente físico, más rápidamente se destruyen los
microorganismos[ CITATION Lañ05 \l 12298 ].

4. Tiempo de exposición

Cuanto más tiempo se exponga una población a un determinado agente, más

organismos se destruirán [ CITATION Roj11 \l 12298 ].

5. Temperatura

A menudo, un aumento en la temperatura aumenta la actividad de un agente

químico [ CITATION Lañ05 \l 12298 ].

6. Entorno

La población que se quiere destruir no se encuentra aislada, está rodeada de

diversos factores ambientales que pueden protegerla o facilitar su destrucción
[ CITATION Roj11 \l 12298 ].

5. MATERIALES Y MÉTODOS

La práctica se dividió en 4 ejercicios:

En el primer ejercicio se evaluó los efectos de la temperatura en el crecimiento
bacteriano, se marcó cada tubo de caldo nutritivo y solución salina con las siguientes
temperaturas: 4º, RT (Room Temperatura 21ºC), 35º y 50º, se inoculó cada tubo con el
microorganismo, utilice el asa, posteriormente se colocó cada tubo en un vaso de
precipitación rotulado con cada temperatura e incubarlo a la temperatura pertinente
[ CITATION Mar15 \l 12298 ].
En el ejercicio 2 se observó los efectos letales de la temperatura, cada grupo trabajó a
50ºC, 60ºC, 70oC, 80oC y a temperatura de ebullición, se calentó agua a 60ºC y se lo
verificó con un termómetro se marcó cada caja con agar nutritivo con el nombre del
organismo y los siguientes tiempos: control, 10 min, 20 min, 30 min, 40 min; se agitó el
cultivo y se transfirió 100 uL a la caja marcada control. Se colocaron los cultivos
bacterianos y el caldo nutritivo en el baño de agua, apenas el cultivo llegó a la
temperatura indicada, se dejó pasar 10 min y posterior a ello se incubó a 37ºC por 24
horas [ CITATION Mar15 \l 12298 ].
Para el ejercicio 3 se filtró 1mL de cultivo líquido de Escherichia coli mediante un filtro
milipore acoplado a una jeringuilla, recogiendo el filtrado en un tubo de ensayo estéril.
Se sembró la mitad de una caja Petri con agar EMB antes y después de la filtración. Y se
Incubó a 37ºC por 24 h.
Para el ejercicio 4 se dividió una caja Petri con agar EMB en dos mitades, Se sembró una
mitad con el cultivo de Escherichia coli siguiendo el procedimiento rutinario, mientras
que la otra mitad con el asa incinerada se sembró de forma regular, y se procedió a
incubar las cajas a 37ºC por 24 h.