UNIVERSIDAD AUTÓNOMA DE CHIAPAS

FACULTAD DE CIENCIAS QUÍMICAS

CAMPUS IV

BIOQUÍMICA CLÍNICA II

REPORTE PRÁCTICA 4:
ELECTROLITOS SÉRICOS: P, Mg Y Cl.

ALUMNA:

DE LEÓN GONZÁLEZ LENELY YUTZIRI.

CATEDRÁTICO:

MC. TERESA V. LAU HAM.

6° SEMESTRE “B”

TAPACHULA, CHIAPAS A 10 DE NOVIEMBRE DEL 2016.

 PRACTICA 4:
ELECTROLITOS SERICOS:

P (Fósforo)
SIGNIFICANCIA CLINICA

Más del 80% de fósforo corporal se encuentra en los huesos como fosfato de calcio. La
porción restante se encuentra en el intracelular como fosfatos orgánicos ó en el extracelular
como fósforo inorgánico. Hay una relación recíproca entre los niveles plasmáticos de Calcio
y Fósforo. Una elevación en dichos niveles se observa en casos de enfermedad renal,
hipoparatiroidismo, entre otros. La disminución se observa por ejemplo, en casos de
hiperparatiroidismo y coma diabético.

FUNDAMENTOS DEL METODO

La mayoría de los métodos para la determinación de fósforo inorgánico se basan en la

formación de fosfomolibdato de amonio, y en su posterior reducción a azul de molibdeno.
El método Valtek®, se basa en la proposición de Daly y Ertingshausen y la modificación de
Wang. La formación del complejo fosfomolíbdico no reducido se mide a 340 nm., y la
absorbancia obtenida es directamente proporcional a la concentración de fósforo inorgánico
presente en la muestra. Para la lectura bicromática, se recomienda utilizar como segunda
longitud de onda 376 nm.

MUESTRA

Utilizar suero o plasma libre de hemólisis. No utilizar anticoagulantes con fluoruro puesto
que se obtienen valores falsamente bajos. El fósforo inorgánico es estable por una semana
a temperatura ambiente y a lo menos 6 meses congelado. Para el análisis de la fosfaturia,
se recomienda trabajar con muestras de orina de 24 horas, colectadas en un receptáculo
provisto con 15 mL. de HCl concentrado. En caso de muestras no acidificadas, es
conveniente su acidificación y/o calentamiento a 56° C. por 15 minutos para la redisolución
de los fosfatos precipitados. (La muestra acidificada no es utilizable para la determinación
de uratos y creatinina). La muestra de orina se debe diluír 1:20 con agua destilada.

TÉCNICA

Blanco Calibrador Desconocido

Muestra (ml) --- --- 0.02

Calibrador (ml) --- 0.02 ---

 Reactivo (ml) 1.00 1.00 1.00

Mezclar e incubar 10 minutos a temperatura ambiente (sobre 20° C). Leer las absorbancias a
340 nm.

Para la lectura bicromática, se recomienda utilizar como segunda longitud de onda 376 nm.

PROCEDIMIENTO

En tres tubos marcados B (Blanco), C (Calibrador o Standard) y D (Desconocido),

colocar:

B C D

Muestra --- --- ---

Calibrador o standard --- 10µ𝑰 ---

Agua destilada 10ul --- ---

Reactivo A 1 ml 1 ml 1 mI

Mezclar e incubar 5 minutos a temperatura ambiente (15-25o C). Leer en

espectrofotómetro a 510 nm o en fotocolorímetro con filtro verde (490-530 nm) llevando
el aparato a cero con el Blanco.

RANGOS DE REFERENCIA

Cada laboratorio debe establecer sus propios rangos de referencia en función de la

población de pacientes. Los rangos de referencia que se enumeran a continuación están
tomados de la bibliografía existente.

 Suero adulto: 2.5 a 4.5 mg/dL

 Suero niño: 3.0 a 6.0 mg/dL
 ELECTROLITOS SERICOS:

Mg (Magnesio)
SIGNIFICANCIA CLINICA

El magnesio (Mg) es uno de los iones más abundantes del organismo. El 60% del Mg del
organismo se encuentra en los huesos y el resto está repartido entre músculos y otros
tejidos blandos. El Mg cumple un rol muy importante en la fisiología humana. Participa en
el metabolismo energético a través de la activación del ATP, en la transferencia de fosfatos
de alta energía y es el ion activador de muchas enzimas involucradas en el metabolismo de
lípidos, carbohidratos y proteínas. El Mg es un mediador en mecanismos de conducción y
transporte a través de membranas. Es esencial en la preservación de estructuras
macromoleculares de DNA, RNA y ribosomas y en la formación del hueso y el
mantenimiento de la presión osmótica. La hipomagnesemia está muy asociada a la
deficiencia de otros iones como el P, K y Ca. Las causas de hipomagnesemia son múltiples:
diarreas crónicas y agudas, síndromes de mala absorción, succión nasogástrica prolongada
y vómitos, fístulas intestinales y biliares, deterioro de la conservación renal, diabetes
mellitus, hipertiroidismo, hiperaldosteronismo primario, alcoholismo crónico. El exceso de
Mg puede darse por incorporación o administración excesiva de sales de Mg y en general
se asocia a falla renal. Otras patologías asociadas a hipermagnesemia son: hipercalcemia
hipocalciúrica, hipotiroidismo, deficiencia de mineralocorticoides, etc.

FUNDAMENTOS DEL METODO

El magnesio, en medio alcalino, reacciona con el xylidyl blue formando un complejo de color
púrpura cuya intensidad es proporcional a la concentración de Mg presente en la muestra.
La incorporación del complejante EGTA al reactivo elimina la interferencia de los iones
calcio.

MUESTRA

Suero, plasma heparinizado u orina

a) Recolección:

- Suero o plasma: obtener de la manera habitual.

- Orina: puede contener precipitado de magnesio que debe disolverse por acidificación
antes del ensayo. Acidificar la orina con unas gotas de HCl concentrado hasta alcanzar un
pH entre 3 y 4 que debe verificarse con tiras reactivas. Diluir una parte de la orina acidificada
con 4 partes de agua destiliada (dilución 1:5).

b) Aditivos: en caso de utilizar plasma se debe usar únicamente heparina como

anticoagulante.
c) Sustancias interferentes conocidas: los anticoagulantes tales como EDTA, citrato u
oxalato forman complejos con el magnesio, provocando resultados erróneos. No deben
usarse muestras hemolizadas debido a la gran concentración de magnesio presente en los
glóbulos rojos. No interfieren: bilirrubina hasta 200 mg/l (20 mg/dl), calcio hasta16 mg/dl,
hemoglobina hasta 3,5 g/l (350 mg/dl), ni triglicéridos hasta 6 g/l (600 mg/dl) equivalente a
lipemia ligera o moderada. Referirse a la bibliografía de Young para los efectos de las
drogas en el presente método.

d) Estabilidad e instrucciones de almacenamiento: la muestra debe ser preferentemente

fresca. Puede conservarse 2 semanas en refrigerador (2-10o C) o más de 1 mes congelada
(-20o C) sin agregado de conservadores.

TÉCNICA

CONDICIONES DE REACCION

 Longitud de onda: 510 nm en espectrofotómetro o (490-530 nm) en fotocolorímetro

con filtro verde.
 Temperatura de reacción: temperatura ambiente (15-25o C)
 Tiempo de reacción: 5 minutos - Volumen de Muestra: 10 ul
 Volumen final de reacción: 1,01 ml
Los volúmenes de muestra y reactivo pueden variarse proporcionalmente (ej.: 20 ul muestra
+ 2 ml Reactivo A o 50 ul + 5 ml).

PROCEDIMIENTO

En tres tubos marcados B (Blanco), C (Calibrador o Standard) y D (Desconocido),

colocar:

B C D

Muestra --- --- ---

Calibrador o standard --- 10µ𝑰 ---

Agua destilada 10ul --- ---

Reactivo A 1 ml 1 ml 1 mI

Mezclar e incubar 5 minutos a temperatura ambiente (15-25o C). Leer en

espectrofotómetro a 510 nm o en fotocolorímetro con filtro verde (490-530 nm) llevando
el aparato a cero con el Blanco.
RANGOS DE REFERENCIA:

Suero o plasma: 1,7 a 2,5 mg/dl (0,70 a 1,05 mmol/l)

Orina: 60 a 210 mg/24hs

2,5 a 8,5 mmol/24 hs

4,10 a 13,80 mg/dl*

*Considerando un volumen de orina de 1,5 L/24 hs

En la literatura (Tietz, N.W.) se menciona el siguiente rango de referencia:

Suero o plasma: 1,6 a 2,6 mg/dl (0,66 a 1,07 mmol/l) Orina: 3,0 a 5,0 mmol/24 hs

Cada laboratorio debe establecer sus propios valores de referencia. Los resultados
obtenidos deberán ser evaluados en conjunto con la historia clínica del paciente, el examen
médico y otros hallazgos de laboratorio.

ELECTROLITOS SERICOS:
Cl (Cloro)

SIGNIFICANCIA CLINICA

El anión cloruro (Cl-).es el más importante en la mantención del balance iónico entre los
líquidos intra y extra celulares, siendo por lo tanto un electrolito fundamental para el control
de una hidratación adecuada. Se encuentran valores bajos en casos de vómitos
abundantes, obstrucción intestinal, nefritis, acidosis metabólica, etc; y valores elevados en
casos de deshidratación, hiperventilación, y algunos casos de obstrucción del tracto
urinario, entre otros.

FUNDAMENTOS DEL METODO

El cloruro en presencia de tiocianato mercúrico no disociado, se combina con el mercurio,

generándose cloruro mercúrico.

Hg(SCN)2 + 2Cl- → HgCl2 + 2SCN

El tiocianato liberado se combina con los iones férricos presentes en el reactivo,

formándose un compuesto altamente coloreado que absorbe a 480 nm.

3SCN- + Fe3 → Fe(SCN)3

La intensidad del color obtenido, es directamente proporcional a la concentración de cloruro

en la muestra.
MUESTRA

La muestra a utilizar puede ser tanto suero, plasma, orina y otros fluidos biológicos. El
cloruro es estable por una semana refrigerada, y seis meses en congelador.

TÉCNICA

Blanco Calibrador Muestra

Muestra(ml) --- --- 0.01

Calibrador(ml) --- 0.01 ---

Reactivo(ml) 1.00 1.00 1.00

Mezclar e incubar 5 minutos a temperatura ambiente (sobre 20° C). Leer las absorbancias a
480 nm. (rango 460 a 550 nm.).

𝐂𝐨𝐧𝐜𝐞𝐧𝐭𝐫𝐚𝐜𝐢ó𝐧 𝐂𝐚𝐥𝐢𝐛𝐫𝐚𝐝𝐨𝐫
Factor =
𝐀𝐛𝐬. 𝐂𝐚𝐥𝐢𝐛𝐫𝐚𝐝𝐨𝐫

Cloruros (mEq/L) = FACTOR x Absorbancia Desconocido

O bien

𝟏𝟎𝟎
Factor = 𝐀𝐛𝐬. 𝐬𝐭𝐫𝐚𝐧𝐝𝐚𝐫

Cloruros (mEq/L) = FACTOR x Absorbancia Desconocido

PROCEDIMIENTO

En tres tubos marcados B (Blanco), C (Calibrador o Standard) y D (Desconocido),

colocar:

B C D

Muestra --- --- ---

Calibrador o standard --- 10µ𝑰 ---

Agua destilada 10ul --- ---

 Reactivo A 1 ml 1 ml 1 mI

Mezclar e incubar 5 minutos a temperatura ambiente (15-25o C). Leer en

espectrofotómetro a 510 nm o en fotocolorímetro con filtro verde (490-530 nm) llevando
el aparato a cero con el Blanco.

RANGOS DE REFERENCIA

Cada laboratorio debe establecer sus propios rangos de referencia en función de la

población de pacientes. Los rangos de referencia que se enumeran a continuación están
tomados de la bibliografía existente.

Suero o plasma 96 - 112 mEq/L

Orina 110 - 250 mEq/24 h.

L.C.R. 114 - 131 mEq/L

RESULTADOS

 FOSFORO

Absorbancia

Estándar 0.424

Muestra problema 0.355

5
ΔA x = (0.355)(11.79) = 4.18 mg/dl
ΔASt
Fosforo= 4.18 mg/dl

 CLORO

Absorbancia

Estándar 0.113

Muestra problema 0.522

100
ΔA x = (0.522)(884.95) = 461.94 meq/dl
ΔASt
Cloro= 461.94 mg/dl

 MAGNESIO

Absorbancia

Estándar 0.309

Muestra problema 0.186

3
ΔA x = (0.186)(9.708) = 1.80 mg/dl
ΔASt
Magnesio= 1.80 mg/dl