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CRISTÓBAL DE HUAMANGA
Ayacucho - Perú
2019
i
A Joaquín quien es mi pilar
A mis padres por su amor incondicional
ii
AGRADECIMIENTO
A los directores y docentes del las Instituciones Educativas los cuales aceptaron
que este trabajo se realice en dichos centros educativos.
iii
ÍNDICE GENERAL
página
DEDICATORIA ii
AGRADECIMIENTO iii
ÍNDICE iv
RESUMEN Vii
I INTRODUCCIÓN 1
II MARCO TEÓRICO 2
2.1 Antecedentes 3
Definición de contaminación 4
Definición de aire 5
Contaminación del aire 5
Vigilancia de la contaminación 6
Aeromicología 6
Hongos 7
Características 7
Morfología 7
Hongos Unicelulares: Levaduras 7
Hongos pluricelulares: Mohos 8
Clasificación de los hongos 8
Toxicidad de los hongos 9
Síndrome del edificio enfermo (SEE) 9
Efectos sobre la salud relacionados al (SEE) 9
Riesgo de hongos para los niños 10
III MATERIALES Y MÉTODOS 11
3.1 Ubicación del lugar 11
3.2 Definición de la población y la muestra 11
3.2.1 Población 11
Criterios de inclusión 12
Criterios de exclusión 12
3.3 Selección del punto de muestreo 12
3.4 Hora de muestreo 12
3.6 Muestreo ambiental 12
3.7 Procedimiento del muestreo 12
3.8 Purificación de las colonias 13
3.9 Microcultivo (para la identificación de estructuras nicroscópicas) 13
3.10 coloración y montaje 14
3.11 Analisis estadistico 14
IV RESULTADOS 15
V DISCUSIÓN 23
VII CONCLUSIONES 26
VII RECOMENDACIONES 27
VIII REFERENCIAS BIBLIÓGRAFICAS 28
ANEXOS 32
iv
ÍNDICE DE TABLAS
Página
Tabla 01 Clasificación de los hongos. 8
v
ÍNDICE DE FIGURAS
Página
Fig.1 Promedio de carga fúngica por metro cúbico de aire de la 115
infraestructura interna de la institución educativa inicial El Retablito
en el mes de julio, Ayacucho 2018.
vi
RESUMEN
El presente trabajo tuvo como objetivo general, determinar la categoría de
contaminación fúngica de la infraestructura interna de dos Instituciones Educativas
de nivel Inicial. La investigación se desarrolló en las aulas de dos instituciones de
nivel inicial los cuales están ubicados en la ciudad de Huamanga en el distrito de
San Juan Bautista; esta investigación fue de tipo no experimental descriptivo, el
aislamiento de hongos ambientales fue realizado en los meses de julio y agosto
del 2018, con la técnica de Omeliamski (método de sedimentación) siguiendo un
modelo lineal (dos puntos de muestro), la identificación microscópica se realizó
haciendo microcultivos y coloreando con azul de lactofenol. los resultados fueron:
en los ambientes interiores de la Institución Educativa A en el mes de julio, el valor
máximo de carga fúngica fue de 527 UFC/m 3 (aula sin niños); seguido de 351
UFC/m3 (aula con niños); en el mes de agosto el valor máximo fue de 276UFC/m3(
aula con niños); seguido de 251 UFC/m 3 (aula Sin niños) ; mientras que en la
Institución Educativa B en el mes de julio el valor máximo fue de 477 UFC/m3 (aula
con niños); seguido de 351 UFC/m3 (aula sin niños); mientras que en el mes de
agosto el valor máximo fue de 3564 UFC/m3 ( aula con niños, arribando a la
conclusión que la contaminación por hongos basados en la cantidad de unidades
formadoras de colonias por metro cúbico de aire (UFC/m 3), se ubican en la
categoría de contaminación que vá desde intermedia , alta y muy alta. Los
géneros de hongos predominantes en ambas instituciones educativas fueron
penicilium, cladosporium, aspergillus y altermaria.
vii
I INTRODUCCIÓN
La calidad del aire interior afecta a la salud, ya sea de manera directa o indirecta.
Por lo cual, los efectos sobre la salud por los contaminantes biológicos o no
biológicos emanados al aire interior han sido las fuentes de la creciente
preocupación dentro de la comunidad científica. En los últimos años se han
logrado alcanzar importantes observaciones en el estudio de los hongos en el aire
interior.3
1
años que son más vulnerables a la contaminación. Por otro lado, la información al
final de la presente servirá para aportar datos. En la actualidad no se muestra
importancia y preocupación al tipo de aire a la que se exponen los niños en sus
aulas. El propósito de este trabajo es dar solución a este tipo de problemas, se
debe hacer una inspección visual a los materiales con que trabajan los niños
(cartulinas, papeles, libros, entre otros), una inspección visual también debe incluir
las zonas ocultas del aula, se debe dar una limpieza adecuada con una solución
de jabón o detergente para eliminar esporas y fragmentos de hongos que puedan
haberse establecido y se debe utilizar el método más suave posible para no
generar polvo4. Por estas razones nos hemos trazados los siguientes objetivos.
OBJETIVOS:
OBJETIVO GENERAL
OBJETIVOS ESPECÍFICOS:
2
II MARCO TEÓRICO
2.1 ANTECEDENTES
3
María y según sus reportes, se encontraron gran variedad de esporas donde los
más comunes son cladosporium sp y penicilium sp.
López, B. (2014)10 en Perú menciona que las condiciones que presentan las
instituciones de la Universidad Nacional Agraria de la selva (UNAS) muestreados
en su aire interior favorecen el desarrollo de los hongos, presentándose incluso
géneros que podrían proceder de las áreas del exterior con vegetación o de
residuos orgánicos, menciona también que las condiciones ambientales
climatológicas de la zona donde se ubica la UNAS manifiesta las condiciones
ideales de temperatura y humedad relativa que condicionan favorablemente la
presencia de estos organismos en el aire.
Definición de contaminación
Algunos organismos transportados por el aire, como pueden ser los mohos u
hongos, ocasionan infecciones de los párpados, así como de los ojos, también
causar daños a las vías respiratorias. La exposición a hongos puede provocar
patología por varios mecanismos: inmunológico (alergias) infección y efectos
irritantes producidos por la exposición a varios componentes volátiles
(micotoxinas, 1,3- βd glucano). Entre los más comunes se encuentran Penicilium
sp, Cladospurium Ps, Apergillus sp y Eurotium sp, entre otros. La humedad y el
4
calor favorecen su crecimiento y pueden encontrarse en duchas o sótanos con
altos niveles de humedad.11
No hay cierto nivel de hongos ambientales que pueden ser considerados como
seguro. Esto depende de la concentración fúngica de los ambientes externos y de
los tipos de esporas presentes en el ambiente interno. Generalmente, la
concentración fúngica de los ambientes internos es menor que la presente en los
externos.13 Por estas razones el aire interior de las aulas de estas instituciones
educativas se vueden ver contaminnados ya que en dichas aulas se encuentran
sustratos necesarios para el desarrollo de los hongos, ya que la mayor parte de
los hongos interiores son saprófitos.
Definición de aire
La contaminación del aire es causada por toda sustancia no deseada que ingresa
a la atmósfera, en si es una mezcla de partículas sólidas y gases en el aire. Las
emisiones de los automóviles, los compuestos químicos de las fábricas, el polvo,
el polen y las esporas de moho pueden estar suspendidas como partículas;
Algunos contaminantes del aire son tóxicos. Su inhalación puede aumentar las
5
posibilidades de tener problemas de salud. Las personas con enfermedades del
corazón o de pulmón, los adultos de más edad y los niños tienen mayor riesgo de
tener problemas por la contaminación del aire. La polución del aire no ocurre
solamente en el exterior: el aire en el interior de los edificios también puede estar
contaminado y afectar su salud.16
Vigilancia de la contaminación
Aeromicología
El aire no posee microorganismos propios, pero se conoce que éstos son capaces
de crear estructuras especializadas que les ha permitido resistir y sobrevivir en
este medio. Son capaces de dispersarse en ambientes exteriores e interiores
gracias a las corrientes de aire, las cuales se encargan de recoger los
microorganismos presentes en otros ambientes naturales como el suelo, el agua,
las plantas y la microbiota del ser humano. Además, algunas actividades
industriales, comerciales, sociales y de movilidad vial han contribuido a la
producción de desechos biológicos, físicos y químicos, emitiendo material
particulado los cuales ayudan al camuflaje de los microorganismos y a la
dispersión de éstos.15
6
Hongos
Características
Todos los hongos son eucariotas, por lo tanto, poseen al menos un núcleo,
membrana celular, retículo endoplasmático, mitocondrias y aparato secretor. Se
reconocen tres grandes grupos de hongos: los mohos, las setas y levaduras.21
Morfología
Los hongos crecen en dos formas básicas levaduras (unicelulares) y mohos que
son filamentosos (pluricelulares).21
7
Hongos pluricelulares: mohos
8
Toxicidad por los hongos
“El síndrome del edificio enfermo”, es un termino acuñado pon la OMS para referir
el conjunto de molestias, síntomas clínicos y enfermedades que sufre un colectivo
de personas, que tienen su origen en las condiciones físicas y ambientales de un
edificio, como consecuencia de un aumento de contaminantes en el interior de
dicho espacio con una mala calidad del aire interior, combiene por lo tanto hacer
un recorrido por los posibles efectos que sobre la salud puede originar una mala
calidad del aire interior.23
9
pulmonías, pneumonías que afectan especialmente las vías respiratorias y otras
patologías como infecciones cutáneas. En las plantas, se han reportado
microorganismos que producen toxinas, las cuales generan efectos biológicos y
patológicos en los diferentes cultivos. Algunos microorganismos son capaces de
corroer monumentos y edificios, además de provocar el deterioro de las fachadas,
estructuras y archivos11
Los niños son generalmente más vulnerables ante tales exposiciones y la carga
de enfermedad pesa desproporcionadamente sobre los niños de países en
desarrollo y de bajos ingresos. Los niños menores de 5 años de edad son
especialmente vulnerables: hasta un 56% de todas las muertes atribuibles a
contaminación doméstica corresponden a niños de este grupo etáreo.25
Los niños presentan además un estado anabólico activo lo que significa que
respiran más aire, beben más agua e ingieren más comida por unidad corporal
que los adultos, lo que significa una mayor dosis ante una exposición ambiental
dada. El comportamiento infantil de llevarse constantemente sus manos a la boca
conduce a exposición de contaminantes sedimentados a través del contacto con
superficies contaminadas y transferencia de los contaminantes a la boca por las
manos, juguetes y objetos domésticos. El impacto de una exposición en particular
dependerá, en parte, de la etapa del desarrollo del niño en que ocurre la
exposición y su susceptibilidad individual.26
10
III MATERIALES Y METODOS
Tipo de investigación
No experimental
Diseño de investigación
Descriptivo transversal
Unidad de análisis
3.2.1 Población
Censal
Criterios de inclusión:
11
Criterio de exclusion
Los muestreos se realizaron cuándo los salones estaban vacíos a las 7:30 am
(antes de la entrada de los niños y profesores) y el segundo muestreo cuándo los
salones estaban en plena clase a las 11:00 am.
Las placas Petri conteniedo agar saboraud, se transportaron hasta las dos
Instituciones Educativas de nivel inicial.
Una vez arribado al lugar de muestreo, se colocaron las placas Petri
conteniedo agar saboraud en cada una de las aulas de las Instituciones
Educativas, relizandose dos repeticiones en cada punto de muestro a una
altura de 1.5 m del piso.28,29
Se abrió las tapas de las placas Petri y se dejaron expuestas por un tiempo
de treinta minutos por cada punto de muestreo.
Transcurrido el tiempo, se tapó las placas Petri, se cubrieron y
transportaron al laboratorio de microbiología ambiental.
Se incubó las placas a 25 °C por cinco días.30
12
Una vez transcurrido el tiempo de incubación, se realizó los contajes de las
colonias por metro cúbico de aire (UFC/ Cm3) de acuerdo a la fórmula:31
𝑈𝐹𝐶 10000 𝑎
=
𝑚3 0,2 𝑝𝑡
Dónde:
13
Con ayuda de asa de kolle en aro o la hoja de bisturí se colocó un
cuadradito en el portaobjetos que está en la placa con el equipo de
microcultivo en condiciones de esterilidad.
Se sembró a partir de la colonia de interés (hongo) con asa de kolle en
gancho en las cuatro esquinas del bloque de agar.
Luego se colocó el cubreobjetos sobre el bloque de agar Sabouraud.
Se vertió aproximadamente 5 mL de agua destilada estéril a la placa, para
crear adecuada humedad y evitando que se deseque el bloque de agar
sabouraud.
Se incubó a 25 °C por siete días.30
14
IV RESULTADOS
600
527 521
500
de carga fúngica (UFC/m3)
400 351
301
300
200 151
100 75
0
Aulas para niños de 3 años de Aulas para niños de 4 años de Aulas para niños de 5 años de
edad edad edad
Aula vacía Aula con niños
15
600
promedio de carga fúngica (UFC/m3)
500 477
400 351
326
300
225
200 150 150
100
0
Aulas para niños de 3 años Aulas para niños de 4 años Aulas para niños de 5 años
de edad de edad de edad
Aula vacía Aula con niños
16
300 276
251 251
de carga fúngica ( UFC/m3)
250
200
151 151
150 126
100
50
0
Aulas para niños de 3 años Aulas para niños de 4 años Aulas para niños de 5 años
de edad de edad de edad
17
4000
3564
3500
de carga fúngica (UFC/m3)
3000
2500
2000
1500
1000
18
Tabla. 3 Porcentaje de géneros fúngicos aislados por aulas de la Institución
Educativa Inicial A en el mes de julio, Ayacucho 2018.
Asignación
de aulas Frecuencia de géneros fúngicos
para niños
según Aulas sin niños Aulas con niños
edad Géneros fúngicos fi % Géneros fúngicos fi %
Aspergillus sp. 2,44 Mucor sp. 7,41
Penicillium sp. 17,07 Chaetomium sp. 7,41
3 años de Cephalosporium sp. 2,44 Aspergillus sp. 3,70
edad Rhodotorula sp. 24.39 Penicillium sp. 33,33
Alternaria sp. 2,44 Rhizopus sp. 3,70
Cladosporium sp. 29,27 Fusarium sp. 7,41
Levaduras 21,95 Rhodotorula sp. 25,93
Levaduras 11,11
Mucor sp. 4,35 Mucor sp. 30,00
4 años de Chaetomium sp. 13,04 Aspergillus sp. 30,00
edad Aspergillus sp. 8,10 Penicillium sp. 10,00
Penicillium sp. 34,78 Alternaria sp. 30,00
Cladosporium sp. 34,78
Levaduras 4,35
Mucor sp. 5,00 Penicillium sp. 58,33
5 años de Penicillium sp. 65,00 Rhodotorula sp. 16,67
edad Fusarium sp. 10,00 Levaduras 16,67
Cladosporium sp. 20,00 Colonias no 8,33
identificadas
Levaduras
19
Tabla. 4 Porcentaje de géneros fúngicos aislados por aula de la Institución
Educativa Inicial B en el mes de julio, Ayacucho 2018
Asignación
de aulas Frecuencia de géneros fúngicos
para niños
según Aulas sin niños Aulas con niños
edad Géneros fúngicos fi % Géneros fúngicos fi %
Aspergillus sp. 18,18 Aspergillus sp. 5,41
3 años de Penicillium sp. 36,36 Penicillium sp. 27,03
edad Rhizopus sp. 9,09 Fusarium sp. 5,41
Cladosporium sp. 18,18 Rhizopus sp. 2,70
Levaduras 18,18 Alternaria sp. 2,70
Cladosporium sp. 16,22
Levaduras 40,54
Penicillium sp. 41,67 Aspergillus sp. 16,00
4 años de Rhizopus sp. 8,33 Penicillium sp. 56,00
edad Rhodotorula sp. 8,33 Rhizopus sp. 4,00
Cladosporium sp. 33,33 Alternaria sp. 8,00
Levaduras 8,33 Cladosporium sp. 12,00
Levaduras 4.00
Aspergillus sp. 11,76 Mucor sp. 10,71
5 años de Penicillium sp 41,18 Aspergillus sp. 3,57
edad Rhizopus sp. 5,88 Penicillium sp. 28,57
Alternaria sp. 5,88 Rhizopus sp. 3,57
Cladosporium sp. 29,41 Alternaria sp. 7,14
Levaduras 5,88 Cladosporium sp. 42,86
Levaduras 3,57
20
Tabla. 5 Porcentaje de géneros fúngicos aislados por aula de la Institución
Educativa inicial A en el mes de agosto, Ayacucho 2018
Asignación
de aulas Frecuencia de géneros fúngicos
para niños
según Aulas sin niños Aulas con niños
edad Géneros fúngicos fi % Géneros fúngicos fi %
Aspergillus sp. 10,00 Penicillium sp. 20,00
Penicillium sp. 25,00 Alternaria sp. 10,00
Alternaria sp. 5,00 Cladosporium sp. 40,00
3 años de Cladosporium sp. 40,00 Levaduras 30,00
edad Rhizopus sp. 10,00
Levaduras 5,00
Colonias no 5,00
identificadas
Penicillium sp. 18,18 Penicillium sp. 27,27
4 años de Alternaria sp. 27,27 Alternaria sp. 9,09
edad Cladosporium sp. 27,27 Cladosporium sp. 9,09
Levaduras 27,27 Levaduras 54,55
Mucor sp. 5,26 Penicillium sp. 9,52
Aspergillus sp. 5,26 Fusarium sp. 19,05
Alternaria sp. 26,32 Alternaria sp. 14,29
5 años de Cladosporium sp. 10,53 Bipolaris sp. 4,76
edad Bipolaris sp. 36,84 Levaduras 52,38
Levaduras 5,26
Colonias no 5,26
identificadas
21
Tabla. 6 Porcentaje de géneros fúngicos aislados por aula de la Institución
Educativa inicial B en el mes de agosto, Ayacucho 2018
Asignación
de aulas Frecuencia de géneros fúngicos
para niños
según Aulas sin niños Aulas con niños
edad Géneros fúngicos fi % Géneros fúngicos fi %
Mucor sp. 10,00 Penicillium sp. 100,00
3 años de Penicillium sp. 30,00
edad Alternaria sp. 10,00
Cladosporium sp. 20,00
Fusarium sp. 10,00
Colonias no 20,00
identificadas
Penicillium sp. 15,38 Penicillium sp. 25,00
4 años de Alternaria sp. 6,67 Aspergillus sp. 6,25
edad Cladosporium sp. 15,38 Alternaria sp 6,25
Levaduras 61,54 Cladosporium sp. 12,50
Levaduras 37,20
Colonias no 12,50
identificadas
Penicillium sp. 20,00 Penicillium sp. 22,22
Alternaria sp. 26,67 Alternaria sp. 22,22
5 años de Cladosporium sp. 40,00 Cladosporium sp. 11,11
edad Rhizopus sp. 6,67 Levaduras 33,33
Colonias no 6,67 Colonias no 11,11
identificadas identificadas
22
V DISCUSIÓN
23
fúngica detectada en un depósito de libros osciló entre 287 y 494 UFC/m3 de aire,
lo que permitió clasificar a dicho lugar en la categoría intermedia; estos resultados
podrían atribuirse a la liberación constante de esporas fúngicas acarreados por
los niños y profesores, asi como el tipo de actividades que realizan los niños, es
decir la manipulación de libros papeles, juguetes, etc, asi como el intercambio
constante del aire interior con el exterior.
24
Los géneros más frecuentes en las dos Instituciones Educativas son Penicillium
sp, Cladosporium sp. y Aspergillus sp. Estos resultados tambien concuerdan con
el estudio realizado por , Jaikel V, Hernandez V, Riggioni C, Salas C y Gross M.
(2015)5 En el estudio realizado a tres centros de enseñanza de nivel primario en
Costa Rica. En dicha institución los géneros más predominantes fueron Penicilliun,
Aspergillus y Cladosporium. Estos géneros son comunes en el ambiente y se
pueden encontrar en casi todas partes porque son géneros ubicuos, es por ello
que tambien encontramos estos géneros con frecuencia en nuestra investigación.
Las esporas del Penicillum sp. Pueden causar keratitis e infecciones del tracto
respiratorio y urinario38, cómo podemos ver en la tabla 6 el género penicillium sp
es el más predominante, en el salón de tres años de edad con niños, en la
Institución Educativa Inicial B, esto podría atribuirse a que este tipo de hongos es
cosmopolita y que para su desarrollo no necesita demaciada humedad.
Para controlar las condiciones atmosféricas del aire, suele estudiarse la calidad
del aire interior de las aulas, debido a que su acondicionamiento regula la
temperatura, humedad, limpieza y movimiento del aire, mediante procesos que
favorecen la generación de ácaros, hongos y bacterias causantes de
enfermedades39, Es por ello que en la investigación realizada muestra que
efectivamente hay hongos en el aire que los niños respiran en sus aulas, ya que
como se tiene entendido dentro de las aulas se guardan los papeles,pinturas,
libros, juguetes, etc. Materiales en los que los hongos saprófitos podrían encontrar
una fuente de nutrientes para su desarrollo.
25
VI CONCLUSIONES
26
VII RECOMENDACIONES
Realizar más estudios por periodos de tiempo más prolongado, para la evaluación
de la calidad del aire interior , como en épocas de lluvia frecuente y secano del
año.
27
VIII REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS
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31
ANEXOS
32
ANEXO 01. Solicitud para permiso de trabajo de investigación
33
ANEXO 02 Figuras sobre los diferentes procesos del tabajo
Tesista observando en el
Aula vacía microscópica
34
ANEXO 03 Identificación macroscópica y microscópica de géneros fúngicos
Colonia de Penicilliun sp
Penicilliun sp a 10x
35
ANEXO 04 Identificación macroscópica y microscópica de géneros fúngicos
36
ANEXO 05 Identificación macroscópica y microscópica de géneros fúngicos
37