Determinación del Potencial Hídrico en células vegetales.

Facundo Pauluk, Ivana Estecho, Nicolás Rios.

Abstract
El ingreso o egreso de agua a las células de la planta, eta determinado por el potencial del agua
en su interior, que está determinado en gran medida por la concentración de solutos en el
interior de la célula. Cuando el agua sale de la célula, la membrana plasmática se reduce y con
un egreso de agua suficiente, la membrana se separa de la pared celular, condición conocida
como plasmólisis. Las plasmólisis pueden causar que el tejido se dañe y que la planta se
marchite. Es por esto que el equilibrio que existe entre los potenciales hídricos del interior de
la planta y del medio, son muy importantes para mantener la integridad del organismo.

Introducción
El transporte de agua en los organismos
pluricelulares se da en una variedad de
formas. En el caso de las plantas, el agua y
los solutos disueltos en ella son
movilizados espontáneamente gracias a
diferencias en el potencial de agua sin
gastos adicionales de energía. Por lo tanto,
la potencial agua es un concepto
fundamental en la fisiología vegetal. Este
potencial se considera la suma de varios
términos, el potencial osmótico, de presión,
matricial y gravitatorio:
𝜓𝑤 = 𝜓𝑜 + 𝜓𝑝 + 𝜓𝑚 + 𝜓𝑔
En el estado de plasmólisis, el potencial
agua del tejido, se encuentra determinado
por la presión osmótica ejercida por la
solución (ya que las paredes de las células
plasmolizadas, no ejercen presión alguna
sobre las membranas celulares de las
células, y el experimento fue realizado a
altura cero). De esta manera, el potencial de
agua de la célula es igual al potencial
osmótico en su interior, que a su vez es
igual al potencial osmótico del exterior.
así, el potencial de del soluto se calculará
con la ecuación de van’t Hoff:
𝜓𝑜 = −𝑖. 𝐶. 𝑅. 𝑇
donde “i” es el factor de van’t Hoff (que
para la sacarosa es 1, pues no se disocia en
agua), C es la concentración de la solución,
R es la constante de los gases ideales, y T
es la temperatura absoluta.
Al haber una correspondencia entre la
concentración de solutos y el grado de
plasmólisis de un tejido, es posible
determinar el potencial agua de este último.
Para esto, es útil el método de plasmólisis
incipiente en el cual se analizan gráfica y
estadísticamente, datos relacionados con el
parámetro plasmólisis celular, y se realizan
los cálculos pertinentes. El criterio que se
adopta es el de plasmólisis incipiente, que
se define como el punto al que el 50% de
las células de un tejido se hallan en
plasmólisis

Metodología
Se extrajeron finas capas de tejido de base
foliar de Allium cepa (cebolla) de 5 cm de
longitud aproximadamente. Se sumergieron
las muestras en caja de Petri con soluciones
de sacarosa a distintas concentraciones, por
una hora, tiempo suficiente para que se
desarrolle el proceso de ósmosis. Pasado
ese tiempo se montaron las muestras en
portaobjetos con una gota de la solución en
la que reposaban (para no exponer a las
células a un potencial agua distinto, y
cambiar las condiciones del tejido a
analizar). Luego se las observó el
microscopio. Se eligieron 20 celular por
tejido y se contabilizó el número de células
plasmolizadas que fueron aquellas en las
que se observó separación de la membrana
de la pared celular. Posteriormente se
graficó el porcentaje células plasmolizadas
en función de la concentración de sacarosa.
A partir de un ajuste lineal a los datos
obtenidos se determinó el punto de
plasmolisis incipiente, que se define como
la concentración de soluto a la cual el 50%
de las células del tejido se encuentran
plasmolizadas. El valor de plasmólisis
incipiente se utilizó para calcular el
potencial hídrico del tejido, ya que se
consideraba que el potencial osmótico tiene
la misma concentración que las células a
plasmólisis incipiente. En la análisis se
realizó con los datos de los cuatro grupos
del laboratorio.

Resultados
A bajas concentraciones de glucosa, la mayoría de las células observadas se encontraban en
estado de turgencia, con la membrana celular completamente unida a la pared celular. Al
incrementar la concentración de sacarosa, creció el porcentaje de células plasmolizadas totales.

[Sacarosa] Grupo 1 Grupo 2 Grupo 3 Grupo 4 Promedio Porcentaje

(M)

0 0/20 0/20 0/20 0/20 0,000 0.00%

0,2 0/20 0/20 1/7 0/20 0,038 3.75%

0,4 1/3 1/5 2/5 2/5 0,338 33.75%

0,6 5/9 4/9 3/5 1/2 0,525 52.50%

0,8 4/5 8/9 8/9 3/4 0,838 83.75%

Tabla 1: Determinación del porcentaje de células plasmolizadas, para cada
solución de sacarosa. El conteo de cada grupo fue realizado cada 20
células, pero el resultado es expresado en su fracción irreducible.

Figura 1: Gráfico del porcentaje de células plasmolizadas, en función de la

concentración de sacarosa, con recta de regresión lineal.
La relación entre concentración de sacarosa y porcentaje de células plasmolizadas no resultó
lineal en toda su extensión, motivo por el cual se decidió eliminar el dato de porcentaje a
concentración cero.

Figura 2: Gráfico del porcentaje de células plasmolizadas, en función de la

concentración de sacarosa. Sin el porcentaje a concentración cero, y con
recta de regresión lineal.

Según la regresión lineal de la figura 2, plasmólisis incipiente (porcentaje de células

plasmolizadas = 50%) la concentración de sacarosa es 0,5507 M.
𝐿.𝑎𝑡𝑚
𝜓𝑜 = −𝑖. 𝐶. 𝑅. 𝑇 = −1.0,5507𝑀. 0,0821 𝐾.𝑚𝑜𝑙.293K = -8,7260atm

Conclusiones y Discusión
Los resultados muestran que el porcentaje
de celulas que experimentaron plasmólisis,
aumentaba a medida que las soluciones en
las cuales reposaron eran más concentradas.
Según datos bibliográficos, en
experimentos similares (realizados con
epitelios de base foliar de Allium cepa),
otros investigadores reportaron valores de
potencial hídrico de módulo 8,45 atm. Este
resultado fue muy similar al obtenido, 8,72
atm, lo cual nos lleva suponer que la
metodología seguida para realizar el
presente experimento, fue adecuadamente
escogido y llevado a cabo. Para obtener
resultados más exactos, se recomendaría
repetir las experiencias anteriormente
descriptas, con un número mayor de
repeticiones, y con mayor cantidad de
soluciones de molaridades similares y
cercanas al 0,5507M.

Bibliografía
Kowles R.V., Regulation of Water in Plant Cells. https://files.eric.ed.gov/fulltext/EJ889710.pdf