ESPECTROFOT MOLECULAR 2da PARTE PDF

Dra.
Nicolasa Lourdes Vino Nina 1
UNIVERSIDAD MAYOR DE SAN ANDRES

Dra. Nicolasa Lourdes Vino Nina 2
3.1. ESPECTROFOTOMETRIA VISIBLE-

ULTRAVIOLETA (UV-VIS)
3.1.1. INTRODUCCIÓN
Es un método óptico de análisis. Técnica de análisis químico,

cuyo principio es medir la TRANSMITANCIA O ABSORCIÓN
de luz ó energía radiante emitida por una fuente de luz, que
atraviesa una muestra en la que está la especie química de
interés.
RANGO
La región Visible, (400 hasta cerca de 800nm). Las bandas de absorción
presentes en esta zona corresponden a transiciones electrónicas de muy baja
energía. Todos los compuestos coloreados absorben selectivamente en esta
región. Los compuestos fuertemente conjugados y ciertos complejos de metales
de transición absorben significativamente en la región visible
EL OJO HUMANO DISTINGUE ENTRE 380 nm y 780 nm
DE LONGITUD DE ONDA VISIBLE
La región ULTRAVIOLETA entre 200 y 400nm, llamada Ultravioleta cercano, es

de gran utilidad en la determinación estructural de insaturación conjugada,
aromaticidad o de ciertos grupos insaturados con pares electrónicos libres
(carbonilo, nitro, etc.),
COLORES
COMPLEMENTARIOS
SI UN ANALITO
ABSORBE AQUÍ
SE OBSERVA
ESTE COLOR
Spectropscopy in a suitcase. (2009).
LOS COLORES VISIBLES PRIMARIOS Y LOS COLORES SECUNDARIOS Y SU

RELACIÓN CON EL CONCEPTO DE LOS COLORES COMPLEMENTARIOS.
ESPECTRO VISIBLE Y COLORES COMPLEMENTARIOS

La luz blanca se descompone y resultan los siguientes
colores.
3.1.1. MECANISMOS DE ABSORCION DE LUZ POR LA MOLECULA
C=C; C=C; C=N e- enlazantes e- no comp. y heteroátomos
-----Trnas. Electrónicas pi----

Π---------π*
η--------------π*
η--------σ* Π-------------------------π*
σ------------σ*
10 100 200 300 400 500 600 700 800
---Trans. Por transf. carga-------

C-C-C (SAT.)
--Trans. Campo Ligando------
E mayor a 10000. Colores, orbitales d (incompl).
Org. E inorg.
a. Transiciones Electrónicas pi EN EL ESPECTRO VISIBLE

ULTRAVIOLETA.
Promover un electrón desde un orbital de baja energía a uno vacante

de alta energía
Transiciones electrónicas posibles entre orbitales
n: orbital que contiene par de electrones no compartidos (ej en O, N, Cl)
La absorción de luz en UV VIS por las moléculas orgánicas se debe a

TRANSICIONES ELECTRÓNICAS. Los electrones: a) compartidos por varios
átomos y que participan directamente en los enlaces, y b) no compartidos que
se localizan principalmente en los átomos de oxígeno, halogenuros, azufre y
nitrógeno.
Transiciones
π→π* y
n→π*:
• Se dan en
compuestos
orgánicos
insaturados
C=C, C=O,
C≡C, etc., la
primera
transición
(π→π*),
= electrón excitado
C
C C
UNA MOLECULA, tiene iguales o diferentes átomos compartiendo

electrones (hacen enlaces).
En la alanina, el C esta saturado.
El O ó el N, poseen electrones libres, que no forman enlace.
Ocurren las transiciones en esta molécula orgánica.
• La región del UV (lejano y cercano) –Vis, aporta la energía suficiente

para que tengan lugar transiciones electrónicas entre orbitales π→π*;
n→π*, transferencia de cargas.
• Las transiciones electronicas σ→σ*; n→σ*, necesitan mucha mas energía,
no se producen entre 190 a 1000 nm, por ejemplo.
Esta condición, sugiere que es conveniente trabajar entre las longitudes de onda
de 200 ó 220 nm en adelante (UV-VIS) a fin de buscar resultados analíticamente
importantes.
TRANSICIONES ELECTRONICAS EN ALGUNOS COMPUESTOS SEGÚN

DISOLVENTE UTILIZADO
ALGUNOS TERMINOS Y EXPLICACION
Resulta conveniente definir algunos términos usuales en espectroscopia

UV-Vis que tienen en parte origen en antiguas teorías sobre el origen del
color de las sustancias.
Grupo cromóforo: grupo covalente insaturado que origina bandas de
absorción electrónicas (π). Ejemplos típicos son los grupos vinilo,
carbonilo, fenilo, nitro.
Grupo auxócromo: grupo saturado (generalmente con pares
electrónicos libres) que unido a un cromóforo altera tanto la posición
como la intensidad de la banda de absorción de éste. Auxócromos
típicos son los grupos –OH, -NHB2B, -Cl, -Br, -CHB3B.
Efectos batocrómico e hipsocrómico: desplazamientos del máximo de
absorción de una banda a mayores o menores longitudes de onda
respectivamente, debido a la introducción de un sustituyente, cambio
de solvente o pH o cualquier otra causa.
Efectos hipercrómico e hipocrómico: incremento o decremento de la
intensidad de una banda de absorción debido a la introducción de un
sustituyente, cambio de solvente o pH o cualquier otra causa.
b. Transiciones por efecto de campo ligando

Se observa en sales de
metales de transición
generalmente. En d se
encuentran orbitales libres ó
incompletos. Su absortividad
molar generalmente es baja.
Ejemplos de espectros de absorción atribuidos al mecanismo señalado.

c. Transiciones por transferencia de carga.
La absorción de la radiación implica la transferencia de un electrón

desde el dador hasta un orbital que está muy asociado con el aceptor.
EL ESTADO excitado es el producto de un tipo de proceso de
oxidación/reducción interno.
Sus absortividades molares son muy elevadas. ejemplos:

- complejos metálicos que suministran unos medios de gran
sensibilidad para la detección de especies absorbentes. EJ: Fe''' con
SCN-, Fe'' con o-fenantrolina y complejos ferrocianuro con colores
intensos: Fe(CN)63-.
Espectrograma de moléculas según el mecanismo señalado.

3.1.2. INSTRUMENTACION UV VIS
Los instrumentos varían en marcas, diseño, calidad, etc.

Podemos encontrar espectrofotómetros de simple haz y
espectrofotómetros de dobles haz……… .
Los instrumentos pueden ser analógicos, digitales y existen los de

barrido que ofrecen mayor y mejor captura de datos.
Estos instrumentos, poseen dos escalas de lectura:

a) Escala fotometrica, que hace al modo fotométrico. Se trabaja de 0 a
100% de transmitancia y de 0 a infinito de Absorbancia.
b) Escala Espectrofotometrica, modo espectrofotométrico. Se realizan
barridos espectrales entre 190 nm hasta 1100nm (variable según
propiedades del instrumento, ver catálogo).
Los instrumentos se califican, se calibraran en estas dos escalas, con

material de referencia certificado, antes de establecer el método.
Para verificar la escala fotométrica se usan soluciones de C conocida y
se leen las absorbancias o transmitancias (1, 3, 10, 30, 50, 90 %), en un
rango de 190 a 340 y hasta 900nm (depende).
En la escala espectrofotométrica se verifica las bandas de absorción o
transmisión con oxido de holmio en solución o sólido (vidrio) de 240 a
650 nm: con filtros de óxido de didimio (liquido ó sólido) entre 380 y
900nm.
Haz simple
La historia señala que el primer espectrofotómetro, de simple haz, fue inventado

por Arnold Beckman (1900-2004). Antes de estos instrumentos, la precisión en el
análisis era del 25% y se necesitaba más tiempo. Se introducen microprocesadores
en 1981. Con esos instrumentos se logró un 99% de precisión y en menos tiempo
el análisis. Los Instrumentos de doble haz surgen en 1985.
Haz doble
a. FUENTES
Fuentes : Dependen de la zona del espectro electromagnético.
Requisitos:
 Intensidad de radiación lámpara de

elevada.
intensidad lumínica
lámpara de Tungsteno
Deuterio
 Emitir en un amplio
rango de l (emisión
continua).
 Intensidad constante 300 500 700 900 1100
con el tiempo. longitud de onda (nm)

Zona Visible: Lámpara de Wolframio (lámpara de incandescencia).

Filamento de W
Se basa en la o W+I2
incandescencia,
emite luz en el
visible e IR cercano
desde 350-2500 nm
regida por las leyes
de emisión del
cuerpo negro.
I 2 + W <–> W I2
La presencia de un halógeno dentro de la atmósfera de la

bombilla hace que el filamento de wolframio pueda alcanzar
una temperatura mayor a 2000ºC sin llegar a sublimar y, por tanto,
pueda emitir fotones de menor longitud de onda (más azulados).
un aumento de temperatura lo desplaza hacia la izquierda. De esta
forma, logramos regenerar el wolframio
Zona Ultravioleta: lámpara de

deuterio. Intervalo de utilidad 160-
390 nm Basada en la descarga de
un gas a baja presión.
Dos electrodos inmersos en una

atmósfera de Deuterio. La descarga
crea un arco eléctrico. El gas se
excita por el bombardeo con los
electrones, las moléculas D2 se
disocian.
* ' "
D 2  Energia  D 2  D  D  h
Energía descarga  E enlace  E cinética  h
con emisión contínua de fotones de l desde 160-500 nm.

b. SELECTOR DE LONGITUD DE ONDA

Monocromadores: PRISMA DE VIDRIO O DE CUARZO

Rendija de entrada
salida
Lente colimadora
Valor nominal Elemento dispersante
Paso de banda (prismas o redes de difracción)
Ancho espectral Espejos
Poder de resolución Lente focalizadora
Rendija de salida
MONOCROMADOR TIPO BUNSEN
MONOCROMADOR EN RED:
 TIPO CZERNEY-TURNER:
normal y cruzado.
 TIPO LITTROW
 TIPO EBERT FASTIE
Las primeras redes tenían 6.000 surcos/cm, hacia finales del XIX Henry
Rowland fabrico redes de 8.000 surcos/cm, que le sirvió para determinar el
valor exacto de la longitud de onda del ohmnio. En la actualidad es posible
controlar el trazado de las líneas con la ayuda de interferómetros con los
que se pueden conseguir 50.000 surcos/cm (el láser resulta muy útil para
la fabricación de estas).
Redes Holográficas de
difracción por
reflexión
c. PORTA CUBETAS....Celdas
El analito patrón, o la muestra con el analito se lleva en alícuota a una cubeta ó se
usan sistemas de flujo continuo.
 CUBETAS, DIFIERE EL MATERIAL y CAPACIDAD EN

VOLUMEN PARA EL ESPECTRO VIS Y UV.
 SU LIMPIEZA ES FUNDAMENTAL PARA EL PASO DE LUZ.
 SU CUIDADO ES FUNDAMENTAL PARA EVITAR
OPACIDAD U OTRAS PERTURBACIONES.
 EL MANEJO DEBE SER APROPIADO……………
El portacubetas varia, en el ejemplo está después del monocromador. Si

el instrumento es de un haz, hay sitio para colocar una sola cubeta. Si es
de doble haz (como el esquema) hay dos portacubetas para colocar dos
cubeta (VER DIAPOSITIVA ANTERIOR).
MATERIAL:
 VIDRIO
 CUARZO
 PLASTICO OPTICO
PARA DIFENTES VOLUMENES Y SEGÚN Tª DE TRABAJO.

Se puede usar a partir de 220 nm y se

caracteriza por su volumen
extremadamente pequeño. Apenas 70 μl
de muestra son suficientes para llevar a
cabo la medición. Han sido
especialmente concebidas para la
determinación fotométrica de proteínas,
ADN, ARN y oligonucleidos en el
espectro UV.
POLICUBETAS.
CUBETAS PARA AUTOANALIZADORES

d. DETECTOR
Propiedades del detector ideal
 Elevada sensibilidad
 Elevada relación señal ruido
 Respuesta constante en un intervalo considerable de longitudes de
onda
 Señal de salida igual a cero en ausencia de iluminación (corriente
oscura)
 Señal proporcional al poder radiante
Dos tipos de detectores:
 Detectores que responden a los fotones: detectores fotoeléctricos (A-G)
 Detectores que responden al calor (H-I)
1. Célula Fotovoltaica
SON DISPOSITIVOS
QUE TRANSFORMAN transducción 2. Fototubo
LA ENERGIA RADIANTE
EN SEÑAL ELÉCTRICA 3. Tubo Fotomultiplicador
4. Fotodiodos
Hertz
• Cuando incide luz sobre algunas

superficies metálicas se emiten
partículas cargadas (Hertz 1887).
J.J. Thomson
• Thomson demostró (1899) que
son electrones: Efecto
fotoeléctrico. Los electrones
emitidos se llaman fotoelectrones.
• Einstein en 1905 dio una

explicación satisfactoria del efecto
fotoeléctrico y recibió en 1921 el
premio Nobel.
DETECTORES DE FOTONES
Tubo fotomultiplicador: Al ser iluminado el cátodo
fotosensible se emite electrones que son acelerados por el
campo eléctrico e inciden sobre varias superficies liberando
una cascada de electrones secundarios, 106- 107 electrones
por cada fotón incidente.
Ventana
de cuarzo Constituido por un cátodo
Dínodo 1 fotosensible (similar al
Fotocátodo h fototubo) y un ánodo
Dínodo 2 colector separados por
Dínodo 3
una serie de electrodos
positivos de MgO, GaP
Ánodo (entre 5-11), llamados
dínodos (cada uno a un
voltaje 90 V superior al
anterior) que emiten de 2
a 5 electrones cuando
son golpeados con
electrones de suficiente
energía.
DETECTORES DE FOTONES
Fotodiodos de silicio: La absorción de la radiación
electromagnética aumentan la conductividad a través de una unión pn de
polarización inversa. – electrones
+ huecos
•Sensibles entre 190-
Unión pn de
1100 nm, se pueden
polarización inversa miniaturizar y utilizar en
series lineales de
fotodiodos (p.e. 1024
diodos).
La polarización inversa crea una capa de depleción que reduce casi a

cero la conductividad del dispositivo. Sin embargo, cuando sobre esta
zona de depleción incide la radiación, se forman en ella agujeros y
electrones libres que dan lugar a un aumento de la conductividad y se
crea una corriente eléctrica que es proporcional a la potencia radiante.
Fotodiodo InGaAs detectors are high performance InGaAs detectors poerating

over the spectral range from 0.8µm to 2.6µm. These detectors provide fast rise
time, uniformity of response, excellent...
E.SISTEMAS DE LECTURA DE LOS DATOS
ABSORBANCIA
0.3
1
2 50 0
%TRANSMITANCIA
0 100
FOTOCOLORÍMETRO LEITZ
N
EQUIPOS PARA
ESPECTROSCOPIA
UV, VIS.
4. LEY DE ABSORCION
DESIGUAL.. NO
Io es 100 %
PASO ÓPTICO
CONSTANTE
100% %
Ley DE BOURGUER-LAMBERT = Efecto de la longitud de onda.

LEY DE BEER = Efecto de la cantidad de analito.
100 % = Abt % + T %
A = 2 - log T %
LECTURA
ABSORBANCIA, escala logaritmica
 1.0 0.8 0.5 0.3 0.2 0.1 0
0 10 20 30 40 50 60 70 80 90 100
TRANSMITANCIA %, escala lineal
120 1.600
1.523
1.400
100 99.8 1.347
1.200
TRANSMITANCIA %
It= I0 T=100 A = 0
ABSORBANCIA
80 1.097
1.000
70
60 0.824 0.800
A= 
42 0.569 0.600
40
0.377 27 0.400 I t= 0 T=0
20
15 0.200
0.155
8 4.5 3
0 0.001 0.000
0 5 10 15 20
CONCENTRACION
Matemático y astrónomo francés Pierre Bouguer en 1729.

1760. Físico y matemático alemán, August Beer (1852).
Beer-Lambert, publican el libro Fotometria en 1760.
Potencia radiante Coeficiente de
antes de pasar la absortividad molar
cubeta (L mol-1 cm-1). Paso óptico
(cm).
A= = Ebc
Absorbancia Concentración (M).
Potencia radiante
después de pasar
la cubeta
A=abc
LEY DE LAMBERT Y BEER
A una longitud de onda en la que pueda ocurrir
absorción, la potencia de la radiación transmitida a través
de una sustancia absorbente, disminuye logarítmicamente
a medida que la longitud del trayecto óptico y el numero de
especies absorbentes aumentan aritméticamente.
5 APLICACIÓN DEL ESPECTRO UV CON C.C. EXTERNA
A. Analito patrón en disolución, contra su blanco, el barrido

espectral a fin de conocer a que longitud de onda absorbe (nivel
cualitativo) la especie química. Ejm. Varios colorantes.
SELECCIÓN DE LONGITUD DE ONDA

B. Con el analito patrón, prepare soluciones a diferentes

concentraciones, en el ejem., se muestran sucesivos barridos, luego la
curva de calibración a una long., de onda. Debe cumplir la ley de
Lambert y Beer, preparar la muestra y leer y/o seguir con otras
aplicaciones analíticas de esta herramienta.
Selección del rango lineal, a elevada concentración la absorbancia será

inestable
C. Preparar MUESTRA, leer y realizar la interpolación en la c.c a fin de
hallar la concentración incógnita.
Los instrumentos son

construidos en empresas
especializadas y pasan
por control riguroso
(normativa). Sin embargo,
una vez que llegan a un
laboratorio para usarlo
deben seguirse pasos que
aseguren su utilidad.
Los instrumentos obedecen a un diseño y las especificaciones técnicas se

describen en sus manuales. El diseño está dado y su instalación debe ser
adecuada en el laboratorio donde funcionará.
Set de MRC
La calificación del para calibración.
instrumento es una
tarea planificada, se
documenta. Se
demuestra
cumplimiento de
requisitos. Use
soluciones ó materiales
de referencia de
preferencia
certificados.
Según el instrumento, existen criterios establecidos para realizar o verificar la

calibración. El fotocoloriímetro o espectrofotometros uv-vis, en EL MARCO DE
LA BPL, es deseable que genere DATOS DE ALTA CALIDAD.
A continuación describen algunos criterios establecidos para el

control de QO y QP (nivel III, según ):
a) Exactitud de la longitud de onda. Uso del método del punto isosbéstico.
- Solución de Rojo Congo, en medio ácido y básico
Intervalo óptimo: Corrimiento: entre +/-2 nm
b) Exactitud fotométrica. Medición de c) Linealidad Fotométrica.

absorbancias de soluciones certificadas, comparar Rango de absorbancias con
con los de referencia. respuestas proporcionales a los
Exactitud fotométrica óptima: error entre +/- 2% cambios de concentración
d) Luz errática. Se mide el porcentaje de e) Precisión Fotométrica.

transmitancia de nitrito de sodio 50 g/L; Con soluciones….
(ópticamente opaca a la luz). Luz parásita óptima: Precisión óptima: CV%
T% menor del 0,5%. menor de 0,5%.
f) Estabilidad Fotométrica.
Deriva = ((Abs final - Abs inicial)/ Abs inicial) x 100.
Ruido = (desviación estándar / Abs media) x 100.
Estabilidad óptima: ruido + deriva menor de 0,5%.
Gouthami, B., Venkatesshwarlu. 2014. Calibration and validation of HPLC, GC and UV VIS spectroscopy.
IJMCAS.
Exactitud de longitud de onda
Fuente: Hellma, 2009. Calibration standards for spectrophotometers.

Control de linealidad y exactitud fotometrica con dicromato de

potasio (MRC).
Absorbancias esperadas aproximadas a diferentes longitudes de onda
Concentración 235nm 257nm 313nm 350nm

20 mg/l 0,243 0,281 0,095 0,209
40 mg/l 0,492 0,572 0,192 0,4260
60 mg/l 0,741 0,862 0,289 0,634
80 mg/l 0,996 1.159 0,385 0,853
100 mg/l 1.243 1.448 0,480 1.069
Calibración metodológica
Dependiendo de los criterios de selección de

longitud de onda, la condición de tu analito en
solución (pH, M, solventes, etc.), estarás
estableciendo cual será ó como de manejas en el
aspecto cuantitativo a través de las rectas de
calibración, cuyas pendientes pueden variar y
afectar la sensibilidad por ejemplo.
Datos experimetales Y
eje x Prom Prom ABSORTANCIA

No. tubos C ppm A1 A2 A3 %T1 %T2 %T3 de A de T % FACTOR DS de A % CV deA (100-%T) DC/C/DT
blanco 0 0 0 0 100 100 100 0 100 0.000 0.00
2 0.1 0.11 0.12 0.105 77.62 75.86 78.52 0.11 77.34 1.117 0.008 6.84 22.66 4.412
3 0.2 0.219 0.227 0.215 60.39 59.29 60.95 0.22 60.21 1.102 0.006 2.77 39.79 2.920
4 0.4 0.44 0.435 0.447 36.31 36.73 35.73 0.44 36.25 1.102 0.006 1.37 63.75 2.087
5 0.6 0.63 0.628 0.635 23.44 23.55 23.17 0.63 23.39 1.052 0.004 0.57 76.61 2.591
6 0.8 0.86 0.857 0.863 13.80 13.90 13.71 0.86 13.80 1.075 0.003 0.35 86.20 2.608
7 1 1.127 1.125 1.122 7.46 7.50 7.55 1.12 7.50 1.125 0.003 0.22 92.50 3.175
8 1.5 1.85 1.95 1.775 1.41 1.12 1.68 1.86 1.40 1.239 0.088 4.72 98.60 5.464
9 2 2.5 2.33 2.15 0.32 0.47 0.71 2.33 0.50 1.163 0.175 7.52 99.50 27.559
1.122
0.054
4.85367
CURVA DE CALIBRACION CON LA TOTALIDAD DE
DATOS GENERAL
RINGBOM intervalo para la determinacion analitica. Crowford, idem.
absortancia (100- %T) vs lg Concentración
30.000
120.00 25.000
100.00 20.000
DC/C/DT%
80.00
ABSORTANCIA
15.000
60.00
10.000
40.00
5.000
20.00
0.00 0.000
0.1 1 10 0.00 20.00 40.00 60.00 80.00 100.00
CONCENTRACION ppm TRANSMITANCIA %
2.5
ABSORBANCIA
2
1.5
0.5
0
LD = 0 0.5 1 1.5 2 2.5
LQ = CONCENTRACION PPM
Rango dinámico =
Rango lineal=
Y=a + b x x = y - a
a = si cero. b
b = no cero. X es concentración
r=1 Y es la señal.
-Exactitud
-Precisión
-Sensibilidad: LD, LQ, LL, RD.
0 Cd Cc
0 YB YB + 3SB YB + 10SB
Región de detección
Región de cuantificación
-La linealidad e intervalo del sistema: Graficar A vs C, la

gráfica de Ringbom (Absortancia vs Transmitancia).
- Error instrumental: gráfica de Crawford (ΔC/C/ΔT vs C).

APLICACIONES, LAS QUE A CONTINUACIÓN REALIZAREMOS ..
María Dolores Marín Hortelano / Manuel Ruiz Rojas (2008).

Prat, Viñas, L. (2013). Dispositivos optoelectrónicos.UPC..
http://sabersiocupalugar.blogspot.com/2015/05/el-espectro-electromagnetico.html
http://intekgroup.com.co/espectroscopia/

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Dra.

Nicolasa Lourdes Vino Nina 1

UNIVERSIDAD MAYOR DE SAN ANDRES

3.1. ESPECTROFOTOMETRIA VISIBLE-

Es un método óptico de análisis. Técnica de análisis químico,

La región ULTRAVIOLETA entre 200 y 400nm, llamada Ultravioleta cercano, es

Spectropscopy in a suitcase. (2009).

LOS COLORES VISIBLES PRIMARIOS Y LOS COLORES SECUNDARIOS Y SU

ESPECTRO VISIBLE Y COLORES COMPLEMENTARIOS

3.1.1. MECANISMOS DE ABSORCION DE LUZ POR LA MOLECULA

C=C; C=C; C=N e- enlazantes e- no comp. y heteroátomos

-----Trnas. Electrónicas pi----

10 100 200 300 400 500 600 700 800

---Trans. Por transf. carga-------

a. Transiciones Electrónicas pi EN EL ESPECTRO VISIBLE

Promover un electrón desde un orbital de baja energía a uno vacante

La absorción de luz en UV VIS por las moléculas orgánicas se debe a

UNA MOLECULA, tiene iguales o diferentes átomos compartiendo

• La región del UV (lejano y cercano) –Vis, aporta la energía suficiente

TRANSICIONES ELECTRONICAS EN ALGUNOS COMPUESTOS SEGÚN

ALGUNOS TERMINOS Y EXPLICACION

Resulta conveniente definir algunos términos usuales en espectroscopia

b. Transiciones por efecto de campo ligando

Ejemplos de espectros de absorción atribuidos al mecanismo señalado.

c. Transiciones por transferencia de carga.

La absorción de la radiación implica la transferencia de un electrón

Sus absortividades molares son muy elevadas. ejemplos:

Espectrograma de moléculas según el mecanismo señalado.

3.1.2. INSTRUMENTACION UV VIS

Los instrumentos varían en marcas, diseño, calidad, etc.

Los instrumentos pueden ser analógicos, digitales y existen los de

Estos instrumentos, poseen dos escalas de lectura:

Los instrumentos se califican, se calibraran en estas dos escalas, con

La historia señala que el primer espectrofotómetro, de simple haz, fue inventado

 Intensidad de radiación lámpara de

con el tiempo. longitud de onda (nm)

Zona Visible: Lámpara de Wolframio (lámpara de incandescencia).

La presencia de un halógeno dentro de la atmósfera de la

Zona Ultravioleta: lámpara de

Dos electrodos inmersos en una

con emisión contínua de fotones de l desde 160-500 nm.

b. SELECTOR DE LONGITUD DE ONDA

Monocromadores: PRISMA DE VIDRIO O DE CUARZO

 CUBETAS, DIFIERE EL MATERIAL y CAPACIDAD EN

El portacubetas varia, en el ejemplo está después del monocromador. Si

PARA DIFENTES VOLUMENES Y SEGÚN Tª DE TRABAJO.

Se puede usar a partir de 220 nm y se

CUBETAS PARA AUTOANALIZADORES

• Cuando incide luz sobre algunas

• Einstein en 1905 dio una

La polarización inversa crea una capa de depleción que reduce casi a

Fotodiodo InGaAs detectors are high performance InGaAs detectors poerating

E.SISTEMAS DE LECTURA DE LOS DATOS

Ley DE BOURGUER-LAMBERT = Efecto de la longitud de onda.

Matemático y astrónomo francés Pierre Bouguer en 1729.

5 APLICACIÓN DEL ESPECTRO UV CON C.C. EXTERNA

A. Analito patrón en disolución, contra su blanco, el barrido

SELECCIÓN DE LONGITUD DE ONDA

B. Con el analito patrón, prepare soluciones a diferentes

Selección del rango lineal, a elevada concentración la absorbancia será

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