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CRONOGRAMA DE ACTIVIDADES:

Semanas
Descripción de 3/04/2017 2 3 4 5 6 7 8 9 10 10/06/2017
actividades
reunión del equipo de x
trabajo
aporte de ideas para tema x
de investigación
discusión de ideas para x
determinar el tema de
investigación
recopilación bibliográfica x
de fuentes informativas de
los lugares
visita a la CIFIA x
procesar la información x
solicitar materiales para x
realizar el muestreo
solicitar los medios de x
cultivo
realización del trabajo x x
experimental en el
laboratorio
resultados x
discusión x
redacción del informe final x
presentación y x
sustentación del informe
final del proyecto
METODOLOGIA:
Método de superficies (método del hisopado)

1. Elegir una superficie de muestra del CIFIA y delimitarla con la plantilla de aluminio.
2. Tomar el primero de tres hisopos y lo sumergimos en 10ml agua Peptonada con tween 80,
sacar el exceso de líquido presionando el hisopo en la pared del tubo y frotar la superficie
con una inclinación de 45° en líneas verticales.
3. Seccionar la porción del hisopo que contiene la muestra para sumergirla en 10 mL de agua
Peptonada.
4. Tomar un segundo hisopo y proceder en forma similar el paso 2 pero frotar esta vez en líneas
horizontales.
5. Repetir el paso 3.
6. Tomar el tercer hisopo y proceder en forma similar el paso 2 pero ahora frotar de forma oblicua
(de esta manera se asegura cubrir gran parte del área delimitada).
7. Repetir el paso 3.
8. Agitar el tubo con las tres secciones durante 20’ (este proceso se lleva a cabo para realizar
la revivificación de los microorganismos).
9. Proceder a desarrollar los métodos:

Método cuantitativo:
 Tomar 0.1 mL del agua con las muestras y diseminar en cada uno de los medios, para
cada medio de cultivo a incubar: Agar TSA, Manitol Salado, EMB y el Sabouraud Glucosado.
 Incubar las placas para bacterias a 35 – 37 °C por 48 h(Agar TSA, Manitol Salado, EMB) .
Incubar las placas para hongos a 20 – 24°C por 5 días (Sabouraud Glucosado)
 Realizar el conteo de colonias en N°colonias(UFC)/CM

Cualitativo:(presencia, ausencia)

 Tomar 1ml del paso 8 y sembrar en caldo BHI luego encubar 37°c por 24H
 Observar la turbidez del calo BHI y sembrar por estriado en cada uno de los medios,
para cada medio de cultivo a incubar: Agar TSA, Manitol Salado, EMB y el Sabouraud
Glucosado.
 Incubar las placas para bacterias a 35 – 37 °C por 48 h(Agar TSA, Manitol Salado, EMB) .
Incubar las placas para hongos a 20 – 24°C por 5 días (Sabouraud Glucosado)
Método cuantitativo:
Cualitativo: (Presencia, ausencia) para hallar los indicadores que están presentes o ausentes
Control de ambientes
1. Elegir una zona estratégica para exposición de los agares al aire.
2. Colocar los medios indicados en dichas zonas.
3. Abrir las tapas y exponer los agares por 15’.
4. Cerrar las tapas.
5. Incubar las placas para bacterias a 35 – 37 °C por 48 h (invertidas).
Incubar las placas para hongos a 20 – 24 h por 5 días (sin invertir)

Agar TSA Agar manitol Agar Endo Agar


salado o EMB Sabouraud
Glucosado

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