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UNIVERSIDAD NACIONAL AUTÓNOMA DE NICARAGUA

FACULTAD DE CIENCIAS MÉDICAS


DEPARTAMENTO DE CIENCIAS FISIOLÓGICAS
SECCIÓN DE BIOQUÍMICA Y BIOLOGÍA
MOLECULAR

Práctica # 2: Propiedades de los Carbohidratos

PRIMER SEMESTRE 2017

Estudiante: Joyner Stephanne Salinas Almendárez - 16031944


Nubia Karolina Salgado Montalván- 16031658
Gaudy Jazmín Salinas Betancourt -

Docente de Laboratorio: Dra. Martha Elena Mendieta

Managua, Jueves 16 de Marzo de2017


Objetivos
 Evidenciar las propiedades químicas de los carbohidratos cuando se hacen
reaccionar con solución de Benedict y solución de Lugol.

 Fomentar el trabajo en equipo.

 Contribuir a la formación de una conciencia crítica.


Introducción
Marco teórico.
Reacciones Químicas

Como puede apreciarse ambas reacciones muestran el mismo resultado, sin embargo:

La segunda reacción:

 Es obtenida con el reactivo de Fehling.


 Se usa hidróxido de sodio como medio de reacción y medio estabilizante
tartrato sódico potásico.

La primera reacción:

 Usa carbonato de sodio anhidro como medio de reacción alcalino más débil y
medio estabilizante citrato sódico que le imparte a la reacción más
sensibilidad y estabilidad.
Lista de materiales
Materiales:

 10-Tubos de ensayos de 10 ml
 1-Gradilla para tubos (1 unidad)
 10-Punta de micropipetas de 100 µL y 1000 µL
 2-Micropipetas una de 100 µL y 1000 µL
 1-Vaso recolector de orina

Reactivos:

 Solución de glucosa 0.4 (%, g/v) acuosa.

 Solución de sacarosa 0.4 (%, g/v) acuosa.

 Solución de lactosa 0.4 (%, g/v) acuosa.

 Solución de galactosa 0.4 (%, g/v) acuosa.

 Solución de fructosa 0.4 (%, g/v) acuosa.

 Solución de Benedict 10 (%, v/v) acuosa.

 Solución de Lugol 10 (%, v/v) acuosa


Diagrama de flujos
Procedimientos para azucares reductores
con reactivos Benedict

 10 tubos de ensayo con


reactivos :(Glucosa,
sacarosa, lactosa, fructosa,
Coloque los tubos 1, 2, 3, 4, 5, 6 en
galactosa, orina, almidón, S- baño maría 70°C por 10 min.
benedict, S-Lugol)

 Frasco para muestra de


orina
Adicionar al tubo # 8 con una
 Amilasa salival micropipeta 1000 μ de S-Benedict

Procedimiento para hidrólisis de


Calentar en baño maría por 10 min
almidón con el reactivo de Lugol

Agregar 3-4 gotas de S-Lugol (tubo #


9) al tubo # 7 que contiene almidón.

Retirar del baño


maría y dejar
Dejar reposar por 5-10 min enfriar por 5 min

Adicionar enjuague bucal con la


amilasa salival previamente obtenida. Centrifugarlo a 3000 rpm durante 2
minutos.

Esperar que se detenga


Calentar en baño maría a 40 °C la centrifuga y retirar
por 10 min aproximadamente los tubos.
hasta la desaparición de la
coloración azul NO Realizar el otro
SI proceso

Hacer observaciones y
justificar los resultados
Resultados: Tabla de datos

Tabla de Resultados
Carbohidrato Precipitado
S-benedict S-Lugol Coloración
/Sustancia (Positivo/Negativo)
Glucosa Positivo R+++

Sacarosa Negativo NR

Lactosa Positivo R

Fructosa Positivo R++

Galactosa Positivo R+

Orina NR
Negativo

Almidón Positivo V

R: ROJO
NR: NO HUBO REACCION
V: VIOLETA
0++ : Indican la intensidad del color
Análisis de Resultados
Glucosa
Al reaccionar la glucosa con la S-Benedict
se evidenció la presencia de azucares
reductores mediante la presencia de su
grupo carbonilo libre de la glucosa que
reacciona con el cobre reduciéndolo.
Al mezclar el reactivo Benedict con un
azúcar reductor (llámese en este caso
glucosa) y llevarlo hasta la ebullición se
produce una reacción que favorece la
formación de óxido cuproso (Cu2 O) que
precipita es por esto que el tubo de ensayo
se torna de color rojo ladrillo.

Sacarosa
En la muestra de sacarosa, el compuesto que actúa como oxidante
es el Cu+2 y por ende no se forma un precipitado, por lo que se
deduce en base a la evidencia de una coloración azul, lo cual
significa que se trata de un azúcar no reductor.
Es por tanto, la razón el cual la S-Benedict con la Sacarosa es
negativa ya que además de lo antes mencionado sus carbonos
anoméricos están siendo ocupados para forman en enlace
glucosúdico entre los componentes de la sacarosa (Glucosa+
Fructosa).

Enlace
Glucosúdico

Lactosa
Fructosa
Una explicación química el cual la fructosa da positivo dado que es un monosacárido y
por tanto posee un carbono anomérico libre ya que no se encuentran formando ningún
enlace glucosídico
A diferencia con los otros monosacáridos como la glucosa, ribosa, manosa, entre otros,
el cual poseen como grupo funcional un grupo aldehído, la fructosa es una cetopentosa
capaz de dar positivo a las pruebas de azucares reductores. Esto ocurre por las
condiciones en que se realiza la reacción: en un medio alcalino caliente esta se
tautomeriza (pasando por un intermediario enolico) a glucosa. Aunque no contiene un
grupo aldehído, la reacción ocurre porque la fructosa se isomeríza con rapidez a una
aldosa en solución básica mediante algunos desplazamientos tautomericosceto-
enolicos.

+ CU2O-------------

Galactosa
Porque es un azúcar reductor

Orina
Porque no posee azucares, es decir que se puede descartar una diabetes.

Almidón
Aplicación en la profesión

El estudio de los carbohidratos son de mucha importancia para nuestra formación


profesional ya que estos por ser una fuente principal de la energía para el organismo y
debido a que realizan múltiples funciones biológicas de gran relevancia su estudio nos
permite conocer como es su mecanismo en el cuerpo humano y como se pueden generar
ciertas patologías por el incorrecto metabolismo de estas molécula; logrando de esta
forma comprender y dar solución a los problemas de salud de los pacientes.

Conclusiones
Concluimos que por medio de esta práctica de laboratorio se ha logrado cumplir el
objetivo de tener la capacidad de evidenciar las propiedades químicas que poseen
carbohidratos (Glucosa, sacarosa, lactosa, fructosa, almidón) frente a soluciones
reactivas como Benedict y Lugol. No obstante se observó este mismo procedimiento en
la orina humana.
Todo estos procedimientos nos permitió conocer que son azucares reductores, en qué
consisten y como ellos actúan; además descubrir como la presencia de ellos en la orina
indican la presencia de una patología.
Preguntas para orientar la discusión
1. Porque la solución de sacarosa no manifiesta propiedades reductoras.

La sacarosa tiene estructuras químicas cerradas, donde los átomos abiertos son
utilizados para unir a la estructura en su conjunto y, por lo tanto, no tienen electrones
libres para donar a la molécula de unión. Debido a esto, la oxidación no se reduce
durante la reacción.

La sacarosa no manifiesta propiedades reductoras ya que los dos monosacáridos que la


componen están unidos mediante esos carbonos anoméricos que son capaces de
oxidarse, al estar comprometidos en la unión glucosídica, no están aptos a reducir nada.

2. Identifique las soluciones de la tabla No.1 que manifiestan propiedades


reductoras, justifique sus respuestas.

Entre las sustancias que presentan propiedades reductores encontramos: Glucosa,


Fructosa, Lactosa, almidón, galactosa tiene propiedades reductoras ya que tienen su
carbono anomérico en estado libre que permiten (en caso de reaccionar con S-
Benedict) que su ion de cobre actue con su carbono anomérico libre, reduciéndolo y
dejando un precipitado oxidado.

En cuanto al almidón que se hizo reaccionar con la S-Lugol se logró identificar la


presencia de su azúcar reductor ya que el Yodo que es el elemento clave del Lugol actúa
sobre los enlaces de amilosa que es uno de los componentes del este carbohidrato.

3. Justifique el comportamiento de la solución de almidón más Lugol y sin


adición de enjuague bucal.

Teniendo en cuenta de que el almidón posee dos componentes como son la amilosa y la
amilopectina, la amilosa es de estructura lineal, con enlaces α (1-4), que forma hélices
en donde se juntan permite que las moléculas de yodo proveniente del reactivo de Lugol
logre actuar introduciéndose entre las espiras de la molécula del almidón. Formándose
un compuesto que modifica las propiedades físicas del almidón y formando un color
azul oscuro

4. Justifique el comportamiento de la solución de almidón más Lugol con


adición de enjuague bucal, cuando se calienta a 40 grados centígrados.

La solución resultante es sensible a la temperatura, ya que si se calienta la solución, el


color desaparece esto se debe a que en las espiras del almidón se produce una
modificación y el yodo se libera.
5. Diga que otro reactivo se puede usar para la identificación de
azucares reductores.
El carácter reductor de azucares puede ponerse de manifiesto por medio de los reactivo
de Fehling y el reactivo de Tollen, el cual tienen el mismo fin de dar resultados positivos
ante azucares reductores.

6. Que significa azúcar reductor.

El término azúcar reductor se utiliza para denominar azúcares que actúan como
agentes reductores y pueden donar electrones a otra molécula. Específicamente, un
azúcar reductor es un tipo de carbohidrato o azúcar natural que contiene un grupo
aldehído o cetona libre.

7. Diga usted que resultados obtendríamos sí agregamos solución de


Benedict a plasma humano.

El plasma sanguíneo consta de 90% agua, 7% proteínas y 3% por grasa, glucosa,


vitaminas, hormonas, gases, proteínas, sales productos de desecho, entre otros
productos. Al agregar solución de Benedict al plasma (en un medio alcalinizado) se
obtendría una reacción positiva por el contenido reductor de la glucosa, la cual posee
electrones disponibles para donar y el cobre acepta estos electrones y se reduce, con lo
cual se vuelve un azúcar reductor.

8. Diga porque es tan importante el resultado del análisis de la glucosa en


estudios clínicos.

Porque los resultados de este examen indican si la glucosa en sangre está aumentada,
disminuida o si está normal. Mediante estos resultados se puede diagnosticar diabetes
principalmente, aunque también, cáncer pancreático, pancreatitis, acromegalia,
hipopituitarismo, hipotiroidismo, etc. Con estos resultados podemos hacer dietas y
determinar la cantidad de insulina apropiada a los niveles de glucemia detectados,
además, para tener una idea clara del impacto que tiene en nuestros cuerpos los
alimentos que consumimos, el ejercicio y los efectos que tienen otros medicamentos en
la glucosa.

9. Diga cuales son las funciones biológicas de los carbohidratos.

1. Fuente energética principal (p. ej., la glucosa).


2. Estructura (como la celulosa en las plantas y la quitina en el exoesqueleto de los
insectos).
3. Precursores de biomoléculas complejas, como los ribonucleótidos del ácido
ribonucleico (como la ribosa) y los desoxirribonucleótidos (la desoxirribosa).
4. Almacén de energía, en forma de almidón en los vegetales y de glucógeno en los
animales.

10. Explique el fundamento químico de la solución de Benedict.

El fundamento de esta reacción radica en que en un medio alcalino, el ion cúprico


(otorgado por el sulfato cúprico) es capaz de reducirse por efecto del grupo aldehído
del azúcar (CHO) a su forma de Cu+. Este nuevo ion se observa como un precipitado
rojo ladrillo correspondiente al óxido cuproso (Cu2O).

El medio alcalino facilita que el azúcar esté de forma lineal, puesto que el azúcar en
solución forma un anillo de piranósico o furanósico. Una vez que el azúcar está lineal,
su grupo aldehído puede reaccionar con el ion cúprico en solución.

Los disacáridos como la sacarosa (enlace α (1 → 2) O) y la trehalosa (enlace α (1→1) O),


no dan positivo puesto que sus OH del C anomérico están siendo utilizados en el enlace
glucosídico.

11. Explique el fundamento químico de la solución de Lugol.

La prueba de Lugol se da como consecuencia de la formación de cadenas de poliyoduro


a partir de la reacción entre el almidón y el yodo presente en el reactivo de Lugol.

Con la reacción del Lugol podemos identificar de modo general polisacáridos, pero de
modo específico entre uno de ellos se encuentra el almidón

El almidón al ponerse en contacto con el Lugol presenta una coloración violeta, esto se
debe a que cuando el Lugol reacciona con las dos estructuras que forman el almidón,
con la amilosa proporciona un color azul y cuando reacciona la amilopectina con Lugol
proporciona un color rojo y la combinación de estos dos colores nos proporciona el
color violeta característico del almidón

12. Justifique resultado positivo y negativo para azucares reductores en la


orina.

Cuando se utiliza un reactivo como el Lugol por ejemplo en la orina y el resultado es


positivo, se llega a la conclusión de que hay azúcar presente en la orina (glucosuria);
esto ocurre cuando la capacidad máxima del riñón (T-Max) es superada y se pierde este
exceso mediante la micción. En el caso de la glucosa la capacidad máxima de absorción
es de 180 mg/dl. Por ejemplo, en la diabetes mellitus es común esta sintomatología. En
el caso de que el resultado sea negativo sería normal, ya que no se evidencia azúcar en
la orina, porque toda es absorbida por el riñón.
Lista de referencias bibliográficas
 Curtis, Schnek, A., & Massarini, A. (2008). Biologia. Editorial médica
Panamericana.
 Murray, R., Bender, D., Botham, K., Kenelly, P., Rodwell, V., & Weil, A. (2013).
Harper Bioquimica Ilustrada. China: McGrawHill.

 https://en.wikipedia.org/wiki/Benedict%27s_reagent [Consultado febrero


2017].

 http://www.jbc.org/content/5/5/485.full.pdf [Consultado febrero 2017].

 https://www.quora.com/How-does-Benedicts-reagent-work-when-it-is-
mixed-and-boiled-with-monosaccharide-disaccharide-and-polysaccharide-
respectively [Consultado febrero 2017].

 http://es.slideshare.net/lizbethdamazogalvez/hidrlisis-del-almidn-por-la-
amilasa-salival[Consultado febrero 2017]

 Espectrofotómetro

https://www.youtube.com/watch?v=laHsQIUUaJ4

https://www.youtube.com/watch?v=6Eiv0kOdbxM

 Centrifuga

https://www.youtube.com/watch?v=Z9GIWHZx8HY

https://www.youtube.com/watch?v=LWZMmCgC5rQ

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