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2. Descripción de la actividad
De otra parte, el estudiante, debe consultar sobre donde está ubicado el sitio de la
práctica, el docente responsable de la actividad práctica, fecha y hora de realización
del laboratorio y la presentación personal que puede incluir vestuarios cómodos, pero
que a su vez protejan las distintas partes del cuerpo contra accidentes con productos
químicos o biológicos.
-El estudiante aplica los conceptos teóricos de la bioquímica a partir del desarrollo de
actividades experimentales.
El vestuario para asistir a la práctica de laboratorio debe ser apropiado, debe cubrir
porciones considerables de piel, con el fin de evitar posibles accidentes por
salpicaduras de productos químicos, para esto se recomiendan pantalones largos, tipo
jeans, blusas manga larga, la bata: blanca y de algodón, zapato cerrado, los guantes
de nitrilo. Otros elementos importantes son el tapabocas y la cofia. Durante la
permanecías en el laboratorio, no llevar ningún elemento a la boca, como lapicero
lápiz y los dedos. Igualmente se recomienda evitar recostarse en los mesones y no
oler sustancias químicas por agradables que puedan resultar.
2.2 Normas para la utilización de productos químicos
Llevar de regreso todos los recipientes que contienen los reactivos químicos en los
gabinetes correspondientes evitando mezclar productos que puedan reaccionar
generando explosiones o fuego.
Se hará la discusión sobre las normas de seguridad antes descriptas y las que
encuentran en el Reglamentación y Normas de Bioseguridad en los Laboratorios de la
UNAD y Otras Disposiciones.
Identifique la señalización que encuentra en el laboratorio, fotografié o dibuje los
pictogramas y describa en el informe de laboratorio que significan con que elementos
de seguridad se cuenta. (Duchas, extintores, cámaras extractoras, etc.)
Las biomoléculas son estructuras orgánicas que hacen parte de los seres vivos. Las
biomoléculas realizan las distintas funciones en los sistemas biológicos y las de mayor
importancia en bioquímica son: las proteínas, los lípidos carbohidratos y ácidos
nucleicos.
Las proteínas están formadas por aminoácidos, las cuales forman cadenas que
puede plegarse, dando origen a estructuras tridimensional más complejas que
cumplen distintas funciones biológicas y bioquímicas.
Los carbohidratos son la principal fuente de energía de los seres vivos, pero también
cumplen un papel estructural, como por ejemplo la celulosa, quitina entre otros.
Los lípidos son biomoléculas muy heterogéneas, tienen una característica común y es
que son moléculas hidrofóbicas, es decir, son insolubles en agua, pero pueden ser
solubles en solventes orgánicos como la acetona. Su función principal es de reserva,
pero también pueden hacer parte de estructuras como la mielina o servir de base
molecular a las hormonas.
La prueba de Molisch (llamada así por el botánico austriaco Hans Molisch) es una
prueba bioquímica sensible para detectar la presencia de carbohidratos, tiene como
principio la deshidratación de los carbohidratos por el ácido sulfúrico o ácido clorhídrico
para producir un aldehído, que se condensa con dos moléculas de fenol (generalmente
el alfa (α) naftol, aunque otros fenoles (p. ej., resorcinol, timol) también dan productos
coloreados), dando como resultado un compuesto de color rojo o púrpura.
Este ensayo utiliza ácido sulfúrico concentrado y deshidrata los carbohidratos que
están presentes en la muestra, actúa sobre cualquier enlace glucosídico y lleva a forma
de furfural a las pentosas y de hidroximetilfurfural a las hexosas. Estos se condesan
con alfa-naftol y producen sustancias coloreadas.
3.2.2 Materiales, Equipos e Insumos
5 tubos de ensayo
Una pipeta graduada de 1 ml
Una pipeta graduada de 5 ml
Un vaso de precipitados de 500 ml
Una varilla de vidrio
Una placa de calentamiento
Una gradilla para tubos de ensayo
Una pinza metálica para tubo de ensayo
Reactivos
3.2.3 Procedimiento
5 tubos de ensayo
Una pipeta graduada de 1 ml
Una pipeta graduada de 5 m
Un vaso de precipitados de 500 ml
Una varilla de vidrio
Una placa de calentamiento
Una gradilla para tubos de ensayo
Una pinza metálica para tubo de ensayo
Un matraz de Erlenmeyer 250 ml
Pipetas Pasteur
Probeta de 200 ml
Vaso de precipitados de 250 ml,
Espátula
3.3.3 Reactivos
El uso del reactivo de yodo de Lugol (I2/KI) es útil para distinguir el almidón y el
glucógeno de otros polisacáridos. La solución de Lugol no detectará azúcares simples
como la glucosa o la fructosa. El almidón y el glucógeno forman espacios helicoidales,
los átomos de yodo pueden acoplarse en estos espacios y formar un complejo de
almidón-yodo o glucógeno-yodo de color azul oscuro.
2 tubos de ensayo
Una pipeta graduada de 1 ml
Una pipeta graduada de 5 m
3.4.3 Reactivos
Lugol
3.4.4 Procedimiento
a. Seleccionar dos tubos de ensayo limpios y secos.
b. Al tubo 1 adicionar 3 mL de solución de almidón de papa al 1%.
c. Al tubo 2 adicionar 3 mL de solución sacarosa al 1%
d. Agregar a cada tubo de ensayo 5 gotas del reactivo de lugol.
e. Observar y tomar apuntes de los cambios de coloración.
3.6 Generalidades
3.6.2 Reactivos
Grasa de fuente animal o vegetal
Hidróxido de sodio (NaOH)
Hidróxido de potasio (KOH)
3.6.3 Procedimiento
Generalidades de la solubilidad
Las grasas y los aceites son insolubles en agua y son altamente solubles en solventes
orgánicos tales como éter, hidrocarburos aromáticos e hidrocarburos halogenados. La
solubilidad de las grasas está asociada a su estructura química, la cual está dada por
largas cadenas de hidrocarburos no polares.
1 tubo de ensayo
Una pipeta graduada de 1 ml
3.6.4.3 Reactivos
Hexano (C6H14)
Aceite de cocina
3.6.4.4 Procedimiento
a. Llene con un cuarto de aceite de cocina un tubo de ensayo, agregue 2ml de
hexano y agite.
b. Para comparar tome un segundo tubo de ensayo con la misma cantidad aceite
de cocina y agregue 2 ml de agua. Observe las diferencias.
2 tubos de ensayo
Una pipeta graduada de 1 ml
Una pipeta graduada de 5 m
Un vaso de precipitados de 500 ml
Una varilla de vidrio
Una placa de calentamiento
Una gradilla para tubos de ensayo
Una pinza metálica para tubo de ensayo
Un matraz de Erlenmeyer 250 ml
Un mortero
Probeta de 200 ml
Vaso de precipitados de 250 ml,
Espátula
Reactivos
Ácido sulfúrico (H2SO4)
Cloroformo (CHCl₃)
Reactivo de Sudán III
Tinta roja
Yeso (CaSO4·2H2O)
Técnica:
Tubos de ensayo
Una pipeta graduada de 1 ml
Una pipeta graduada de 5 m
Un vaso de precipitados de 500 ml
3.6.7.3 Reactivos
Sudan III (1-((4-(fenildiazenil)fenil)diazenil) naftaleno-2-ol)
Tinta roja
3.6.7.4 Procedimiento
El ácido ribonucleico (ARN) es una molécula similar al ADN. El ARN difiere en que es
monocatenario, es decir, presenta una hebra de ARN; tiene un esqueleto formado por
grupos alternantes de azúcar ribosa y fosfato. Se adjunta a cada azúcar una de las
cuatro bases: adenina A, uracilo U, citosina C o guanina G.
3.6.8.4 Procedimiento
En las pentosas del ADN y del ARN se produce la reacción con orcinol. El ácido sulfúrico
hidroliza las uniones fosfodiester y N-glicosídicas, liberando ribosa, bases púricas,
pirimidínicas y ácido fosfórico.
La ribosa en medio ácido se deshidrata originando furfural que reacciona con el orcinol
y da un color verde que indica la presencia de ARN.
Papa.
Cuchillo.
Manzana.
Mortero.
Cuchara o espátula.
Portaobjetos.
Pipeta Pasteur.
Vaso de precipitados 50 ml.
4.1.3 Reactivos
100 ml de peróxido de hidrógeno o “agua oxigenada” comercial.
1 Pastilla de vitamina C.
4.1.4 Procedimiento
4.2.2 Procedimiento
a. Cortar una rebanada de papa y colocarla sobre un portaobjetos.
b. Agregar 3 gotas de agua oxigenada sobre la rebanada de papa.
c. Ver la actividad de la catalasa por el burbujeo de oxígeno que se desprende.
d. Observar el tiempo en el cual se lleva a cabo la reacción.
Kappa caseína de la leche, es una proteína, la cual está asociada al calcio en forma
de fosfato de calcio. Esta proteína es globular y tiene gran influencia en la
composición de la leche, se encuentra en la fase acuosa y presenta un predominio
en la composición de la leche relacionada con la coagulación, el tiempo de formación
del cuajo y en general en la formación de quesos.
2.
El punto isoeléctrico
Las moléculas grandes adquieren una carga eléctrica y se puede definir como el pH
en el cual una proteína tiene cargas netas cero. Puede presentar grupos con cargas
positivas y negativas y la suma de las mismas debe ser cero. La caseína, como las
proteínas, está formada por muchos cientos de aminoácidos individuales. Cada uno
puede tener una carga positiva o negativa, dependiendo del pH del sistema, en este
caso la leche. A algún valor de pH, todas las cargas positivas y todas las cargas
negativas en la proteína (caseína) estarán en equilibrio, por lo que la carga neta en
la proteína será cero. Ese valor de pH se conoce como el punto isoeléctrico (IEP) de
la proteína y generalmente es el pH en el que la proteína es menos soluble.
Aistamiento de la caseína
6.
5.5 Preparación de soluciones
Preparar:
400 mL ácido acético 0,01 N (0,24 g acético glacial en 400 mL agua destilada)
Las proteasas son enzimas que catalizan la degradación de péptidos y proteínas, estas
enzimas catalizan la hidrólisis de los enlaces peptídicos de las proteínas, y ocupan un
papel importante en numerosos procesos fisiológicos en los seres vivos, así como por
su uso en diferentes procesos industriales. Del látex producido por la papaya, higuera,
piña y en menor medida de otras especies vegetales se extraen este grupo de
enzimas.
Trípode
Licuadora
Pipetas
Cajas de Petri
Tamiz
2 Vasos de precipitados de 400ml
2 Vasos de precipitados de 100ml
Plancha calentadora
Balanzas
6.3 Reactivos
6.4 Procedimientos
a. Preparar la gelatina sin sabor; para ello, pesar 12g y disolver en 60 mL de agua
caliente.
b. Repetir en seis vasos de precipitados de 50 mL y llevarlo a la nevera para que
solidifique.
c. Licuar 100g de la papaya y piña con 150 ml agua destilada.
d. Filtrar el licuado y recoger en vaso de precipitado limpio.
e. Marcar cada uno de las muestras del licuado.
f. Tomar la mitad del contenido de los filtrados de piña y papaya, y calentar a 100
⁰C por cinco minutos.
g. A partir de los filtrados anteriores agregar el contenido de acuerdo como se
indica en la tabla.1, en un vaso de precipitados de 50 mL.
h. Para la gelatina realizar observaciones a los 40 minutos y anotar los cambios
i. Para la carne determinar los cambios en la consistencia a través del tacto,
después de una hora.
Jugo de papaya - 4 ml -
fresca
Jugo de papaya - - 4 ml
hervido
En la muestra cárnica determinar a través del tacto la consistencia una hora después.
La bromelina y la papaína son enzimas endopeptidasas e hidrolizan los enlaces
peptídicos de las proteínas, evidenciándose en el vaso dos de la tabla1
Cuestionario
¿Cuál es la acción bioquímica de la bromelina y la paina en la industria cárnica?
¿Qué otras enzimas de origen Enzimas proteolíticas de origen vegetal?
Planeación
Los estudiantes que conforman pequeños grupos de trabajo
de
colaborativo, toman sus datos y organizan la información para la
actividades
construcción del informe de laboratorio. Debe tenerse en cuanta que
para el
las prácticas pueden programarse en dos o más fechas, por eso es
desarrollo
importante los avances de los productos finales, se realicen el tiempo
del trabajo
que hay entre fechas.
colaborativo
Roles a
desarrollar
por el
El estudiante dentro del grupo de trabajo en el laboratorio, propicias
estudiante
un ambiente de buenas relaciones con los compañeros, para que
dentro del
pueda el avance del trabajo.
grupo
colaborativo
Roles y
responsabilid
ades para la
producción Los estudiantes organizan los apuntes de la práctica y entregan un
de informe de laboratorio que puede ser individual o en pequeños
entregables grupos de máximo 4 integrantes.
por los
estudiantes
Uso de
Para referenciar los documentos debe hacer uso de la Norma APA.
referencias
En el acuerdo 029 del 13 de diciembre de 2013, artículo 99, se
considera como faltas que atentan contra el orden académico, entre
otras, las siguientes: literal e) “El plagiar, es decir, presentar como
de su propia autoría la totalidad o parte de una obra, trabajo,
documento o invención realizado por otra persona. Implica también
el uso de citas o referencias faltas, o proponer citad donde no haya
coincidencia entre ella y la referencia” y liberal f) “El reproducir, o
copiar con fines de lucro, materiales educativos o resultados de
productos de investigación, que cuentan con derechos intelectuales
reservados para la Universidad.
Políticas de
plagio Las sanciones académicas a las que se enfrentará el estudiante son
las siguientes:
a) En los casos de fraude académico demostrado en el trabajo
académico o evaluación respectiva, la calificación que se
impondrá será de cero puntos cero (0.0) sin perjuicio de la
sanción disciplinaria correspondiente.
b) En los casos relacionados con plagio demostrado en el trabajo
académico cualquiera sea su naturaleza, la calificación que se
impondrá será de cero puntos cero (0.0), sin perjuicio de la
sanción disciplinaria correspondiente
4. Formato de Rubrica de evaluación