Alejandra Geraldine Quiroz Delgado

Luz Esmeralda Collazos Tobar

Programa Especial de Admisión y Movilidad Académica (PEAMA)
Universidad Nacional de Colombia
Ingeniería Química
Biología
Laboratorio De Membrana y Transporte Celular
1/05/2017

Introducción

Las células poseen estructuras que la recubren y separándola del medio circundante como
lo es la membrana plasmática que está compuesta por una doble capa de fosfolípidos los
cuales constan de un alcohol al cual se le unen dos ácidos grasos y un grupo de fosfato
poseen una cabeza hidrofilica y una cola hidrofobica , proteínas y carbohidratos que
permiten paso de ciertas sustancias al interior o al exterior de la célula debido a su
permeabilidad, que es la facilidad de las moléculas para a travesarla. Esto depende
principalmente de tres factores importantes como es la solubilidad en los lípidos, el tamaño
y la carga eléctrica que posea cada molécula, las moléculas pequeñas y moléculas con carga
eléctrica neutra pasan la membrana más fácilmente que elementos cargados eléctricamente
y moléculas grandes.

La entrada y salida de sustancias a la célula se verán regulados por la membrana plasmática

se pueden dar diversos casos físicos y químicos que llevan a la membrana a sufrir
modificaciones estructurales que afectan el funcionamiento normal de la membrana y llegar
a la destrucción total de la célula, para el buen funcionamiento celular se tiene en cuenta
cuatro principales características que son, la relación con el entorno, la comunicación
celular, la nutrición, la reproducción. Cuando la célula está encuentra en un ambiente
estable se conoce como homeostasis, La regulación del transporte de las moléculas depende
de su gradiente de concentración, las moléculas se mueven constantemente dependiendo de
su energía cinética y se inmersa a un fluido esto se conoce como movimiento browniano se
caracteriza por ser continuo y muy irregular, otros aspectos que se ven afectados por la
membrana es la osmosis y la difusión.

OBJETIVOS

Al finalizar este laboratorio el estudiante podrá:

1. Identificar factores que afectan la integridad de las membranas.
2. Explicar cómo la difusión y la osmosis son importantes para las células.
3. Mencionar factores que afectan la velocidad de difusión.
4. Explicar qué son soluciones hipotónicas, hipertónicas e isotónicas.
5. Explicar qué es osmolaridad en los tejidos.
 1. PROPIEDADES DE LAS MEMBRANAS

En los ejercicios que siguen a continuación se estudiará cómo algunos factores afectan el
funcionamiento de las membranas celulares.
A. Efecto de la temperatura
En este ejercicio se usará la planta de remolacha (Beta vulgaris), cuyas células almacenan
en la vacuola central el pigmento violeta betacianina.

MATERIALES
Por laboratorio:
 Agua destilada
 Baño de agua a 70 °C
 Baño de agua a 37 °C
 Hielo
 Nevera
Por mesa:
 Gradilla para tubos de ensayo
 Dos vasos de 150 a 200 ml
 Una remolacha
 Seis tubos de ensayo
 Vaso con hielo
 Navaja
 Agarradera de tubo de ensayo
 Plato para calentar
 Aguja de disección
 Probetas o pipetas de 5 ml
 Sacabocado
 Termómetro
 Regla
 Marcador de cera
 Envase con hielo
 Plato para calentar u hornilla

PROCEDIMIENTO
1. Corte seis pedazos de remolacha (15 mm de largo) con un sacabocado y colóquelos en
tubos
de ensayo rotulados del 1 al 6.
Realizamos
2. Añada 5 ml de agua al tubo 6 y colóquelo en el congelador por 30 min.
3. Añada 5 ml de agua al tubo 5 y colóquelo en el baño de hielo por 30 min.
4. Añada 5 ml de agua al tubo 1 y colóquelo en un baño de agua caliente a 70° C durante 1
min.
Después de 20 min, remueva el pedazo de remolacha del tubo.
5. Deje que la temperatura del baño baje a 55 °C y haga lo mismo con el tubo 2.
6. Repita el procedimiento de arriba con el tubo 3 a 37 °C y con el tubo 4 a 20 °C.
7. Compare la intensidad de color de las soluciones en los tubos.
8. Coloque los resultados (intensidad de color vs. temperatura) en la Tabla 1.
Tabla 1. Efecto de la temperatura
Tubo Temperatura Intensidad de color
(1=menos intenso; 6= más intenso)
1 70 °C 6
2 55 °C 5
3 37 °C 2
4 20 °C 3
5 En baño de hielo 2
6 En congelador 3

1 2 3 4 5 6

Img 1.resultado del procedimiento de temperatura en la remolacha

9. ¿Qué tubo mostró más intensidad de color?
R.// el tubo 1 que se encontraba a 70 grados.
10. ¿Qué indica la intensidad del color?
R.//indica el rompimiento de las vacuolas donde se encontraban los pigmentos de la
remolacha a través de la separación de pared celular y la membrana plasmática, los
pigmentos salen y se disuelven en la solución dando el color y la intensidad depende de
cuan destruida esta la membrana.
11. ¿Cómo afectan las temperaturas altas a las membranas celulares?
R.// a exponer a temperaturas altas las células puede afectar tanto a la membrana y a las
proteínas que la componen , Las colas de ácidos grasos en la bicapa de fosfolípidos pueden
fundirse a altas temperaturas, lo que significa que se convierten en más fluido y permitir
más movimiento. Esto afecta a la permeabilidad de la célula que puede permitir que las
moléculas en las células que no deben entrar terminen ingresando.
La trans-membrana o las proteínas periféricas pueden también verse dañadas por las altas
temperaturas, que causan una desnaturalización de las proteínas o su desmembramiento.
También pueden producir una aceleración de las reacciones que suceden en el seno de la
célula, hasta que la temperatura se vuelva demasiado alta, momento en el cual se produce la
destrucción de la proteína, las reacciones y las células también pueden provocar
disminución o el freno total de las reacciones celulares.
12. ¿Qué le pasa a las células en temperaturas bajas?
R.// Las células al llegar a temperaturas bajas tienen un efecto sobre las membranas
debido a que Las colas de ácidos grasos presentes en los fosfolípidos se tornan más rígidas
cuando se exponen a temperaturas frías. Esto afecta la fluidez, la membrana se
impermeabiliza y la capacidad de supervivencia de las células. Cuando las células pierden
fluidez, quedan imposibilitadas de moverse y de crecer. El descenso de la permeabilidad
implica que moléculas vitales no puedan ingresar a las células.

B. Efecto de solventes
En este ejercicio se observará cómo algunos solventes actúan sobre las membranas. El
instructor preparará este experimento.
MATERIALES
En la mesa del instructor:
 Soluciones de acetona y metanol
 2 a 4 huevos de gallina
 10 ml de aceite
 Por mesa:
 Gradilla para tubos de ensayo
 Una remolacha

PROCEDIMIENTO

1. Rotule seis tubos de ensayo de 1 al 6

2. Añada 5 ml de las siguientes soluciones a los tubos de ensayo:
-Tubo 1: metanol 1 %
-Tubo 2: metanol 25 %
-Tubo 3: metanol 50 %
-Tubo 4: acetona 1 %
-Tubo 5: acetona 25 %
-Tubo 6: acetona 50 %
3. Corte seis pedazos de remolacha de 15 mm y colóquelos en los tubos de ensayo.
4. Luego de 30 min, remueva la remolacha y observe la intensidad de color para cada solución.
5. ¿Qué tubo mostró la mayor intensidad de color?
R//.El tubo 6 que contenía acetona al 50%

Img2. Muestra 6 y 5 después de los 30min

6. Rotule seis tubos adicionales y añada lo siguiente a cada uno:
Tubo A: 1 ml de agua + 1 ml de acetona
Tubo B: 1 ml de agua + 1 ml de metanol
Tubo C: 1 ml de aceite + 1 ml de acetona
Tubo D: 1 ml de aceite + 1 ml de metanol
Tubo E: Un poco de clara de huevo + 1 ml de metanol
Tubo F: Un poco de clara de huevo + 1 ml de acetona
7. Agite cada tubo suavemente y observe los resultados. ¿En qué tubos se observaron
reacciones?
Se observaron cambios en:
 Tubo C,el aceite se mezcló completamente con la acetona haciendo una mezcla
homogénea ya que eran compatibles.
 Tubo D, el aceite no se mezcló ubicándose todo en la superficie haciendo una solución
heterogenia con el metanol.
 Tubo E, la clara de huevo no se mezcló por completo con el metanol teniendo unas
burbujas en la superficie
 Tubo F, la clara de huevo no se mezcló por completo solo una tercera parte del soluto.
8. Basado en lo que se observó en los tubos de ensayos (refiriéndose a los tubos 1 - 6 y A -
F), ¿cómo afecta la acetona a la membrana?
La acetona es un solvente que afecta a la membrana repelando desintegrando y
desnaturalizando las enzimas que la componen porque su presencia disminuye la capacidad
de los solventes acuosos para separar y solubilizar a los ácidos grasos.
9. ¿Cómo afecta el metanol a la membrana?
El efecto del metanol provoca un bloqueo de absorción, induciendo una separación
adicional entre las cadenas de lípidos, incrementando la razón área superficial sobre el
número de las cadenas, esta separación adicional es probamente la causa del incremento de
fluidez de las membranas celulares lo cual se manifiesta en una mayor reducción de la
tensión interfacial del sistema, lo cual también provocaron un efecto de sorbedor y,
finalmente un aumento de fluidez de la membrana celular.
10. ¿Qué indican los resultados sobre los componentes de la membrana?
Que los componentes de la membrana plasmática son solubles con ciertos solutos y con
otros no debido a los enlaces que poseen y esto afecta todo el medio de la membrana y eso
afecta en gran medida a la membrana.

2. TRANSPORTE CELULAR: DIFUSIÓN

Difusión A.
1. Difusión de moléculas en agua En este ejercicio, se estudiará el movimiento browniano
de las moléculas y el efecto de la temperatura sobre dicho movimiento.
MATERIALES
Por mesa:
 Dos vasos de precipitación (beakers)
 Agua fría
 Agua a temperatura ambiente
 Colorante vegetal

PROCEDIMIENTO
1. Añada agua a temperatura ambiente a un vaso y al otro vaso añada agua fría.
2. Deje los vasos reposar por 10-15 min para que no haya movimiento del agua.
3. Añada cuidadosamente una gota de colorante a cada envase y observe la dispersión de la
gota.
4. ¿Afectó la temperatura la difusión del tinte? Explica tu observación.

Img 3.Vasos con el colorante.

Si lo afecto; Esté movimiento se debe al choque de las moléculas del agua con las del
colorante, la temperatura afecto al movimiento de las moléculas del tinte ya que cuando es
mayor la temperatura se mueven más rápido las moléculas haciendo que la dispersión del
colorante sea mayor, esto no pasa con las temperatura más bajas porque el movimiento de
las moléculas es más lento quedándose todo el tinte concentrada en la superficie.

3. ESTIMAR LA OSMOLARIDAD EN LAS CÉLULAS VEGETALES

En los siguientes ejercicios se observará cómo soluciones con diferentes molaridades1
afectan el equilibrio y el funcionamiento de las células vegetales. La osmolaridad se
expresa como moles de soluto por litro de solución; mientras más alta es la osmolaridad,
mayor es la concentración de soluto. Comparando la diferencia en el peso de las muestras
de papa se determinará si las células adquieren o pierden agua en soluciones de diferentes
molaridades y se determinará en qué osmolaridad las células vegetales se encuentran en
homeostasis o equilibrio.

MATERIALES
Por mesa:
 Una papa mediana o grande
 Sacabocado
 Vasos desechables o beakers
 Papel toalla
 Pedazo de cartón
 Navaja
 100 ml de solución de sacarosa de 0.1, 0.2, 0.3, 0.4, 0.5 y 0.6 M
 Agua destilada (solución 0.0 M)
 Balanza y papel para pesar
PROCEDIMIENTO

1. Rotule seis vasos para cada solución de sacarosa (0.1 a 0.6 M) y un vaso para agua
destilada (0.0 M).
2. Añada 100 ml de la solución correspondiente a cada uno (Fig. 7.5a).
3. Con el sacabocado obtenga siete cilindros de papa (Fig. 5b) de aproximadamente 5 cm
de largo.
Figura 5
4. Pese los cilindros de papa, anote en la Tabla 2 el peso inicial para cada uno.y
transfiéralos inmediatamente a los vasos rotulados.
5. Deje los cilindros en los vasos durante 2 horas.
6. Saque los cilindros de los vasos y remueva el exceso de agua con papel toalla. Asegúrese
de mantener separados los cilindros correspondientes a cada vaso.
7. Anote si hubo cambios en textura y anote en la Tabla 2 el peso final de los cilindros.
8. Con los datos de la Tabla 2, calcule el cambio en peso para cada cilindro y prepare una
gráfica señalando los cambios en peso.

MOLARIDADES DE LAS SOLUCIONES

0.0 0.1 0.2 0.3 0.4 0.5 0.6
Peso 3,753 gr 3,590 gr 4,045 gr 2,739 gr 2,886 gr 2,327 gr 2,355 gr
inicial (gr)
Peso final 4,298 gr 3,999 gr 4,399 gr 2,739 gr 3,059 gr 2,275 gr 2,052 gr
(gr)
Cambio en 14,52 11,39 8,75 0 5,99 -2,23 -12,86
peso %
Tabla 2. Representación de los pesos.

9. ¿Se observó diferencia en la textura de los cilindros antes y después del experimento?
¿Por qué?
Si porque al sumergirlos en el solvente estos afectaron su textura debido a tiene diferentes
concentraciones y por lo cual hacen que la membrana celular al reaccionar con estos,
provoque que haga un cambio en su gradiente de concentración afecte su medio.

10. ¿Cuál es la variable independiente en este experimento?

La variable independiente seria el eje y que es el peso .

11. ¿A qué molaridad de sacarosa se observa un cambio en la gráfica (dónde la curva va de
negativo a positivo o viceversa)?

Se observa cambio en el tubo con molaridad 0,3 que paso 11,392 pasa a 0.0 de peso de
cambio y el tubo con molaridad 0,4 que pasa de 5,99 a -2,23 en un cambio en su peso
perdido bajando notoriamente en la grafica 1.

12. ¿Qué significan los resultados con respecto a la osmolaridad de la papa?

El comportamiento de osmolaridad en las diferentes muestras de la papa con la sacarosa se

debió a que la concentración de sacarosa hace que el transporte y el ambiente de las
células cambie por ejemplo en el soluto 0,3 la células tomaron un ambiento isotónico
porque conservaron su peso inicial y no absorbieron nada en cambio en el soluto 0,1 las
células tomaron un ambiente hipertónico perdiendo peso y el soluto 0,6 las células tomaron
ambiente hipotónico ganando peso y absorbiendo del soluto.

13. ¿Variará este resultado con un cambio en temperatura?

Por supuesto que sí porque al aumentar la temperatura se afectaría la permeabilidad
permitiendo que la papa absorbiera en gran medida la sustancia que la rodea y al en el caso
de que absorbiera la acetona o el metanol seria mortal para las células de papa y se
degradarían.

Img4.trozos de papas al final del procedimiento

Grafica 1.Representacion del cambio de peso
CONCLUSIONES

 En el movimiento browniano el colorante se disuelve más rápido en el solvente

que se encuentra a mayor temperatura ya que las partículas del agua están
chocando entre si debido a la energía provocada por el calor.

 Gracias a lo observado en los resultados del laboratorio mientras mayor

temperatura la membrana se pierde su permeabilidad y a bajas temperaturas la
membrana se impermeabiliza, El cambio de temperatura afecta en que pierde sus
características originales volviéndose irreversible en su funcionamiento
principalmente por el aumento de calor.

 Cuando la célula está expuesta a diferentes sustancias estas reaccionan de diferente

manera como es el caso de el metanol que vuelve la membrana en un ambiente
hipotónica y la acetona que hace que se hipertónica.

DISCUSIÓN

Respecto al procedimiento de las papas nos dimos cuenta como en la transfusión de las
sustancias se dio un proceso de osmosis ya que la reacción de la sacarosa con la papa a
mayor concentración se dio proceso hipotónico, “el agua se mueve desde donde el potencial
es mayor hacia donde es menor. El movimiento de agua ocurre por flujo global y por
difusión. La osmosis es la difusión del agua a través de una membrana semi-permeable”
(Curtis, 2008). La reacción que obtuvimos está dada por la interacción de la sacarosa con la
membrana.
BIBLIOGRAFIA

 Curtis,H.,Barnes,S.,Schnek A.(2008) . Biología .(7 ed).Madrid: Editorial Medica

Panamericana.

 W.H. Freeman,(2004).Biología Celular y Molecular (5 ed) Editorial Medica

Panamericana.