Práctica N°1: Bioseguridad en el laboratorio de Microbiología

1. ¿Qué tipo de laboratorio es el de Microbiología?

Por las características del laboratorio es uno del grupo de riesgo I, puesto que se trabaja con
microoganismos con pocas probabilidades de provocar enfermedades, se tiene escasos
dispositivos de protección personal y se carece de cámaras de seguridad biológica.

2. Resuelva la tabla:

Tipo de Medida de
Accidentes Medida de Seguridad
Riesgo bioseguridad
Tener una llave que cierre la Evitar desorden que
La ocurrencia de
Físico distribución del gas alejada del pudiera derramar
incendio
lugar de trabajo. Tener extintores. algún cultivo.
Planificar una vía y protocolo de Evitar tener
Los sismos Físico
escape. recipientes en bordes.
Conocer riesgos y
Irradiación UV Físico Utilización de gafas y guantes.
limitaciones del UV.
Mantener un buen estado de las Alejarlas de tomas de
Conexiones eléctricas Físico
conexiones. agua.
Uso de líquidos Trabajarlos alejados de fuentes Vestimenta
Físico
inflamables térmicas. antiincendios
Derrame de un Dejar el derrame en su lugar, Tras la limpieza,
cultivo bacteriano Biológico vertiéndole alcohol u otro descartar el trapo u
sobre la mesa antibacteriano. otro.
Eliminación de Separar los desechos
Tener un protocolo de
desechos Biológico contaminados de deshechos
eliminación.
contaminados normales.
Pincharse con aguja
No pretender re-encapsularlas, Mantener al personal
de extracción de Biológico
uso meticuloso. vacunado.
sangre

3. Investigue acerca de las especies microbianas que se ubican en cada nivel de bioseguridad.

Nivel de Bio-riesgo Tipo Microorganismos

Bacterias,
I hongos, virus Rhizobium, Bacillus subtilis, Mycoplasma hominis.
y parásitos.
Escherichia coli cepas
Bacterias,
enterotoxigénica/invasiva/hemorrágica, Chlamydia
II hongos, virus
pneumoniae,Yersinia enterocolitica, Y.
y parásitos.
pseudotuberculosis.
Virus de la inmunodeficiencia humana (HIV todos los
Bacterias,
III aislados), Herpesvirus ateles, Yersinia pestis, Pasteurella
hongos, virus.
multocida, Mycobacterium tuberculosis.
Virus de Marburg, virus de Ebola, Herpes B virus (virus
IV Virus.
del mono).
 Práctica N°2: Utilidad y preparación de materiales usados en
microbiología
1. ¿Por qué es necesario preparar el material de vidrio antes de hacer los cultivos?
Preparar el material de vidrio es primordial para poder trabajar con la seguridad de que no se
contaminará el cultivo por culpa de los propios utensilios, así como porque en el momento del
cultivo no habrá tiempo ni lugar a error para recién buscar por el instrumento idóneo.

2. ¿Por qué no se pueden usar tubos con tapones de jebe?

Los tapones de jebe al someterse al calor pueden deteriorarse y provocar dificultades a la hora
de manipular los tubos de ensayo, incluso sin haberse deteriorado, para retirar un tapón de jebe
podría precisarse de ambas manos, lo cual es un gran impedimento a la hora del trabajo de
laboratorio.

3. ¿Qué efecto tendría el algodón quemado sobre el crecimiento de los microorganismos?

El algodón quemado presenta cualidades anticoagulantes que podrían afectar de distintas
maneras al cultivo en cuestión, dependiendo del mismo. Asimismo podría ser aprovechado
como una fuente de carbono en parte por algunas colonias bacterianas.

4. ¿Por qué no se puede utilizar material de vidrio roto o con rayaduras?

Además del riesgo del daño humano (cortes, raspaduras), un material de vidrio en ese estado
será sensiblemente menos preciso (como en el caso de las pipetas) y además se estaría
trabajando con material que presenta sitios de difícil acceso para el lavado donde pudieran
alojarse diferentes microorganismos, entre ellos los patógenos.
Práctica N°3: Preparación de medios de cultivo (comunes y especiales)
1. ¿Cuál es la razón de calentar el medio sólido en preparación, antes de esterilizarlo?
Esto se realiza para poder homogeneizar el medio de cultivo, evitando residuos de agar sin
fundir.

2. ¿Puede usted medir y ajustar el pH a un medio caliente? ¿Por qué?

No, puesto el que pH se determina para una temperatura específica, por lo que si se evalúa este
en un medio caliente. Cuanto mayor sea la temperatura, menor será el valor del pH, de modo
que si uno ajusta el pH a 7 en un medio caliente, cuando este medio se halle a una temperatura
media, en realidad nos encontraremos con un medio básico. Cabe resaltar que el famoso pH
neutro del agua se mide a exactamente 25ºC.

Práctica N°4: Coloración Gram y Ziehl Neelsen

Visualizaciones:

Staphylococcus aureus (Gram negativo)

Tinción de Ziehl-Nielsen, bácilos tuberculosos (BAAR) de rosa, bácilos normales azules.

 1. ¿Afecta la edad del cultivo a la coloración de Gram?
Sí. Es posible que una bacteria Gram (+) pierda el grosor de su capa de peptidoglucano y por
consiguiente su característico tinte morado frente a la coloración de Gram, además de la edad, el
estrés, infecciones o daño en general podrían inducir a falsos positivos con respecto a Gram (-).

2. ¿Existen diferencias químicas que expliquen la velocidad de decoloración en las

bacterias Gram (+) y Gram (-)?
La presencia de una capa gruesa de peptidoglucano desacelera la decoloración de las bacterias
Gram (+).

3. ¿Qué componentes bacterianos permiten la resistencia a la decoloración con alcohol

ácido?
Los ácidos grasos de sus paredes celulares y citoplasma (ácido micólico, ceras, ácidos grasos
instaurados, etc).

4. ¿Qué significa BAAR y cuál es su interpretación?

Bacilo Alcohol Ácido Resistente, este tipo de microorganismo se debe interpretar como aquellos
teñidos de rosado/fucsia en la coloración Ziehl-Nielsen. Puede indicar que sea un caso de
Tuberculosis (M. tuberculosis) u otro patógeno, aunque no es exclusivo.