PROYECTO INTEGRADOR - IIA

DETERMINACIÓN DE LAS SECUENCIAS DE PRIMERS PARA EL

DIAGNÓSTICO DE Babesia bigemina Y Babesia bovis MEDIANTE LA

TÉCNICA DE PCR.

Integrantes:

 Coello Bryan
 Fernández Eduardo
 Guamán Marcelo
 Salazar Alex

Docente: Ma. Augusta Chávez

NRC: 4860
TÍTULO: Determinación de las secuencias de primers para el diagnóstico de Babesia bigemina y

Babesia bovis mediante la técnica de PCR.

TEMA: Determinación de las secuencias de primers para el diagnóstico de Babesia bigemina y

Babesia bovis mediante la técnica de PCR, en la hacienda IASA, en la ciudad de Sangolquí.

ÁRBOL DE PROBLEMAS

Medidas de Mitigar
Desarrollo de
control perdidas Efectos
vacunas
tempranas económicas

Identificación de
Babesia bigemina
y Babesia bovis

Secuencia de Análisis Metodos

primers serológicos parasitologicos Causas

FORMULACIÓN DEL PROBLEMA

• ¿Qué secuencias de primers son empleados en el diagnóstico de hemoparásitos Babesia

bigemina y Babesia bovis, en la hacienda IASA?

Variable independiente: Secuencias de primers.

Variable dependiente: identificación de Babesia bigemina y Babesia bovis.

PLANTEAMIENTO Y DEFINICIÓN DEL PROBLEMA
La babesiosis es una enfermedad que afecta principalmente la industria ganadera, ya que causa
importantes pérdidas económicas en las regiones tropicales y subtropicales del mundo.
Tradicionalmente la detección de los hemoparásitos causantes de esta enfermedad en bovinos
(Babesia bigemina y Babesia bovis) involucraba análisis serológicos o métodos parasitológicos
directos sin embargo, se ha evidenciado que estos poseen una baja especificidad y sensibilidad.
Un primer o también conocido como cebador es una cadena de ácido nucleico, su función principal
es servir como punto de partida para el proceso de replicación del ADN. Cuando el diseño del
primer no es correcto, se pierde características como la especificidad que depende directamente de
la longitud, es decir el cebador no va a reconocer una secuencia única dentro del ADN.
Según (Figueroa & Álvarez, 2003) para la identificación de bovinos infectados con Babesia bovis
es necesario diseñar y sintetizar oligonucleótidos para usarlo en una prueba de detección
denominado mPCR, si los primers se encuentran mal diseñados no se va a amplificar la secuencia
de interés.

JUSTIFICACIÓN
La PCR es un método enzimático el cual permite la amplificación in vitro de una secuencia
específica de DNA descrita por Mullis en 1983; esta propuso un avance para la universalización
de técnicas moleculares. Este método posee varias características útiles en la identificación y
diagnóstico de patógenos, como son: especificidad, sensibilidad, versatilidad, rapidez y
accesibilidad (Bolívar, 2013).

En la actualidad existen diversos métodos directos e indirectos para el diagnóstico de infecciones

parasitarias. Los métodos directos se encuentran sujetos al criterio y a la experiencia profesional
de quien las ejecuta, como por ejemplo el frotis sanguíneo o la inoculación experimental (Vargas,
Bonet, Oliva, & Campano, 2004).

Los métodos indirectos por su parte, poseen una variabilidad más grande debido a que sus
resultados dependen del nivel de anticuerpos en la sangre del hospedero al momento de extraer la
muestra a analizar, como por ejemplo las pruebas serológicas, fijación del complemento,
fluorescencia indirecta y ELISA (Vargas, Bonet, Oliva, & Campano, 2004).
De esta manera es necesario estandarizar la identificación de un método molecular para la detección
de estos hemoparásitos mediante una técnica eficaz, directa, rápida, específica y sensible capaz de
diferenciar el parásito en bovinos. En el presente trabajo, se determinarán secuencias de primers
adecuadas para el diagnóstico de Babesia bigemina y Babesia bovis mediante una técnica eficaz de
PCR.

OBJETIVOS
Objetivo General
 Determinar las secuencias de primers para el diagnóstico de Babesia bigemina y Babesia bovis
mediante la técnica de PCR

Objetivos Específicos
 Implementar la técnica de PCR múltiple para el diagnóstico de Babesia bigemina y Babesia
bovis.
 Estandarizar el diseño de primers para un diagnóstico eficaz de Babesia bigemina y Babesia
bovis.
 Analizar la sensibilidad y eficacia de la identificación de hemoparásitos a través de técnicas
moleculares (PCR).

VIABILIDAD
El proyecto “Secuencias de primers utilizadas en el diagnóstico de hemoparásitos bovinos para la

identificación de Babesia bigemina y Babesia bovis, en la hacienda IASA, en la ciudad de

Sangolquí” se realizará en coordinación con la Doctora María Augusta Chávez para dar solución a

pequeños inconvenientes suscitados en proyectos de investigación mucho más extensos, el

proyecto será en su totalidad realizado en los Laboratorios de Docencia de la Universidad de las

Fuerzas Armadas ESPE, respaldado por texto bibliográfico.

Bibliografía
Bolívar, A. (2013). Metodología diagnóstica para hemoparásitos dentro de la ganadería

bovinacon énfasis en la reacción en cadena de la polimerasa y su variante múltiple.

Obtenido de Scielo - Artículo Reseña: http://scielo.sld.cu/pdf/rsa/v35n1/rsa01113.pdf

Figueroa, J., & Álvarez, J. (2003). Investigaciones sobre la aplicación de técnicas moleculares

en el diagnóstico y control de la Babesiosis Bovina. México D.F: Ciencia Veterinaria.

Vargas, D., Bonet, R., Oliva, P., & Campano, S. (2004). Implementación de la técnica de PCR

enla identificación de Babesia ssp en equinos. Obtenido de SciELO - Parasitología

latinoamericana: https://scielo.conicyt.cl/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S0717-

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