FACULTAD DE CIENCIAS MÉDICAS

ESCUELA PROFESIONAL MEDICINA

GUÍA DE PRÁCTICAS:

FUNDAMENTOS DE AYUDA DIAGNÓSTICA I

I. DATOS GENERALES

1.1 Unidad Académica: Escuela Profesional de Medicina

1.2 Semestre Académico: 2018/01

1.3 Ciclo de estudios: IV

1.4 Experiencia curricular: MORFOFISIOLOGÍA Y BIOQUÍMICA III(SECE309)

1.5 Docente(s): Blgo. Brenda Milagros Morales Tapia (bmoralest@ucvvirtual.edu.pe)

II. SUMILLA:

La experiencia curricular de Fundamentos de Ayuda Diagnóstica I forma parte del área de estudios
específicos, es de naturaleza teórica – práctica, de carácter obligatorio y se orienta a capacitar al estudiante
para aplicar en casos predeterminados los fundamentos de Microbiología y Parasitología en el desarrollo del
plan de ayuda diagnóstica y en los mecanismos etiopatogénicos.

III. COMPETENCIA

Aplica fundamentos de Microbiología y Parasitología para elaborar planes de ayuda diagnóstica en

enfermedades cardiorrespiratorias, del sistema nervioso central, digestivas y genitourinarias más frecuentes,
mostrando conocimientos, razonamiento, pensamiento crítico, interés y responsabilidad.

PRÁCTICA Nro. 08

Laboratorio de: Fecha :

Farmacología
Temática: Diagnóstico viral: HIV y Hepatitis. Por Pruebas inmunocromatográficas.
Sesión: 14 Capacidad: Elabora planes de ayuda al
diagnóstico e interpreta los resultados de las
pruebas microbiológicas de patologías
genitourinarias.

Estudiante: Tiempo desarrollo de la guía: 4 horas

I. INTRODUCCIÓN

La inmunocromatografía es un tipo de prueba de interacción primaria que se utiliza en

ensayos sencillos y de lectura rápida.
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En esta prueba uno de los componentes está marcado con nanopartículas coloreadas, por
ejemplo con metales pesados (oro o selenio coloidal, generando bandas de color rosa o
azul respectivamente). Otros marcadores pueden ser partículas de látex coloreadas o de
carbón.
La reacción se lleva a cabo sobre una tira de un material poroso (por ejemplo,
nitrocelulosa). En las tiras reactivas se pueden distinguir 5 zonas:

1. Zona de siembra de la muestra

2. Zona del conjugado
3. Zona de detección
4. Zona de control
5. Región absorbente

El procedimiento es muy sencillo: la muestra con el Ag a analizar se coloca en la zona de

siembra de la muestra, y fluye por capilaridad hasta la zona del conjugado, en donde el Ac
específico marcado (conjugado) se encuentra inmovilizado. Al pasar la muestra solubiliza al
conjugado, y en caso de haber Ag en la muestra forma inmunocomplejos. Estos
inmunocomplejos formados siguen migrando lateralmente hasta la zona de detección, en
la cual se hallan fijados a la membrana Acs específicos contra otro epÍtope del Ag, de
manera que los inmunocomplejos son fijados en esta zona de detección, formando una
banda coloreada, rosa o azul dependiendo del metal utilizado en el conjugado.

La muestra fluye por capilaridad hasta la zona de control. Aquí el exceso de

conjugado es capturado por un Ac anti-conjugado, formándose una banda coloreada tanto
si el Ag está presente en la muestra como si no lo está. Este control indica que la
prueba ha sido realizada correctamente y todos los reactivos funcionan bien.
Finalmente el resto de la muestra es absorbida en la región absorbente (ver figura 1).

Esta prueba puede ser utilizada también para la detección de Acs. En este caso, el
conjugado es el Ag específico marcado. En la zona de detección está fijado un Ac anti Ig
(dependiendo de la especie en la cual se buscan los Acs), el cual capturará los complejos
inmunes formados si la muestra posee Acs específicos. En la zona de control un Ac
específico para el conjugado (en este caso el Ag marcado) captura el exceso de Ag
solubilizado por la muestra.

II. CONOCIMIENTOS PREVIOS:

Evaluación Inicial
 Bioseguridad

 Factores de virulencia de los virus VIH, HBV.

 Virus asociados a ITS
III. MATERIAL
A. Materiales:
 Kit de Inmunocromatográficas tanto de Hepatitis, HIV, SIFILIS.
 Lancetas
 Algodón y alcohol
 Goteros
 Pipetas automáticas graduables p20,p200,p1000
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 Punteras

IV. DESARROLLO DE LA PRÁCTICA

o Prepare los insumos.

o Etiquete la tira de prueba con el número de identificación
o Saque la cubierta.
o Coloque la tira reactiva de HEPATITIS, VIH Y SIFILIS, en posición horizontal, Dispense una
gota de sangre del capilar en la tira. O Como lo indique cada inserto.
o Toma de muestra capilar: Tomar la muestra con de la palma de la mano hacia arriba.
o Es preferible utilizar el dedo anular.
o Aplique presión intermitente con el dedo.
o Limpie el dedo con torundas con alcohol.
o Pinchar con la lanceta en el pulpejo del dedo
o Limpie la primera gota de sangre con una gasa o algodón.
o Dispense una gota de sangre del capilar en el área de muestra de la tira.
o Indique al paciente que presione el sitio de punción con el algodón hasta que el sangrado
pare.
o Luego colocar una gota de buffer sobre la sangre.
o Deshágase apropiadamente de todos los suministros contaminados
o Después de 15 minutos leer los resultados

V. PRECAUCIONES Y BIOSEGURIDAD
Precauciones generales:
 Utiliza tu EEP.
 Desarrolla la práctica con la guía del docente, con respeto y compromiso.
 Mantener las aéreas de trabajo limpias y desinfectadas antes de iniciar el trabajo y después con una
parte de lavandina (hipoclorito de sodio al 1%) más 99 partes de agua preparada recientemente.
 Deshágase de los desechos contaminados en bolsa de plástico o basureros que estén etiquetados
como biomateriales de riesgo y siempre selle los residuos contaminantes.
o Nunca coma, beba o fume en el área de la realización de las pruebas.
o Nunca permita que su boca toque cualquier cosa del trabajo, como bolígrafos,
lápices, etc.
o Nunca pipetear con la boca.
o Nunca deje lancetas utilizadas fuera del contenedor de basura adecuada.
o Nunca deje sangre/salpicaduras de sangre sin descontaminar.
o Limpie cualquier derrame de sangre y desinfecte
o Manipule TODAS LAS MUESTRAS como potencialmente infecciosas
VI. CONCLUSIONES

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VII. EVALUACIÓN
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VIII. OBSERVACIONES Y RECOMENDACIONES

a. Explique la relevancia clínica de las pruebas realizadas.

b. Describa algunas variantes de esta prueba
c. Ventajas y desventajas de las pruebas de inmunocromatografía para el diagnóstico
y monitoreo de enfermedades

IX. BIBLIOGRAFÍA

 Macalupù s. 1997. Procedimientos de laboratorio. Editorial impresora Amarilys e.i.r.l Lima Perú.
Kaminisky, R. 1996 “Manual de Parasitologìa” 2da. Edición. Editorial Rossany Auceda Tegucigalpa
Honduras..D.F

 De Vos, P., Garrity, G., Jones, D., Krieg, N. R., Ludwing, W., Rainey, F. A., Schleifer, K.H. and Whitman,
W. B. (2009). Bergey’s Manual of Systematic Bacteriology. 2nd Ed. Springer Verlag. USA.

 Brooks, G.F., Jawetz, E., Butel, J.S., Melnick, JL, Orston, L.N. y Adelberg, E.A. (1991). Microbiología
Médica de Jawetz, Melnick y Adelberg. Manual Moderno. 14a Ed. México.

X. ANEXOS

A. CARTILLA DE EVALUACIÓN

CRITERIO INDICADORES Y PUNTUACIÓN

No cumple con las normas de bioseguridad al ingresar l
0
laboratorio.

Bioseguridad 1 Sólo trae guardapolvo y guantes

2 Solo trae guardapolvo, guantes y mascarilla
3 Trae guardapolvo, guantes, mascarillas y gorro (cofia – toca)
0 No asistió a práctica
Asistencia y
1 Asistió dentro de 10 minutos de tolerancia
puntualidad
2 Asistió puntualmente
1 Trabajó en su mesa de manera desordenada
Orden en trabajo
2 Trabajó en su mesa de manera ordenada
de laboratorio
3 Trabajó ordenadamente y dejó material y ambiente limpio
Manejo de 0 No reconoce material ni equipos de laboratorio
materiales, Identifica el material y equipo de laboratorio pero manipula con
reactivos y equipos 2
dificultad
3 Identifica y manipula adecuadamente el material y equipo de
laboratorio
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Manipula adecuadamente el material de laboratorio observando
4
en todo momento normas de bioseguridad
0 No contestó preguntas propuestas
1 Contestó parcialmente preguntas propuestas
Estudio y revisión
de protocolo 2 Contestó correctamente preguntas propuestas
Contestó correctamente preguntas y aportó información
3
relevante
0 Presenta dentro del tiempo
1 Precisa conceptos previos
Presentación del 3 Desarrolla organizadamente los contenidos de la práctica
Informe
Obtiene conclusiones adecuadas y pertinente, Cita bibliografía
5 relacionada, Se proyecta a problemas de salud, Hace juicio
perinente y coherente
La suma de puntos acumulados corresponde a la nota final de la
Nota
sesión práctica