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metodos

Se utilizaron 30 ratas SD (Sprague-Dawley) libre de patógenos, estas se dejaron en la sala del


sistema de barrera a 22 ± 2 ° C con un ciclo alternativo de luz / oscuridad de 12 h, además de
alimentarlas con agua y comida a voluntad.

Para el proceso de inducción del infarto agudo en el miocardio, se les anestesió con isoflurano,
para luego realizar una incisión de 2 cm en el margen izquierdo del esternón en los intercostales
tercero al cuarto a lo largo del espacio intercostal, los músculos pectoral mayor y serrato anterior se
separaron para exponer las costillas, se separó del cuarto musculo intercostal, ya con el corazón
expuesto se ligó la arteria descendente anterior izquierda con una sutura invasiva, una vez que las
ratas pudieran respirar de manera espontánea se suturó cada capa de la pared torácica .

De las 30 ratas a las cuales se le indujo el infarto 22 sobrevivieron durante 1 semana después de
las operaciones, a 8 de ella se les trasplantó BMSCs no infectadas de Ad5-TGF, para el grupo
control negativo, mientras que a las otras 14 restantes se les trasplantó las BMSC que si estaban
infectadas con el adenovirus con TGF, de este último grupo a 5 de ellas se les realizaron imágenes
de micro PET/CT y bioluminiscencia, mientras que de las otras 9 ratas se obtuvieron imágenes de
fluorescencia.

Para las distintas preparaciones, las ratas se dispusieron en almohadillas de preservación de calor
durante la cirugía y hasta que estas despertaran, para minimizar el dolor se contuvo el corte
quirúrgico, es decir que se impido el este se expandiera, además de inyectar penicilina, por 4 a 5
después de la operación para prevenir las infecciones, además se monitorearon su signos
cardiacos, respiratorios, entre otros, por alrededor de una semana, y después de haber tomado las
imágenes necesarias para la investigación, las ratas fueron sacrificadas, con una sobredosis un
analgésico (pentobarbital, 150 mg / kg)no poner
Resultados pcr inmunohistoquimica

Imagen A

con respecto a esta imagen se puede decir que corresponden las bandas de emoción de ADN, en
las cuales las 1 y 2 corresponden la primera a tejido de miocardio, y la segunda a las células BMSC,
transfectadas con TGF, en las cuales se puede identificar claramente bandas específicas para
ambos, mientras que para las de tejido del grupo control negativo, siendo esta el número 3, las
bandas no se encuentran

imagen B y C

en estas imágenes se pueden observar mediante una tinción de H&E, en el caso de la primera
imagen, el como son las fibras del miocardio en su estado normal, teniendo estas una forma
regular y difusa, mientras que en la segunda imagen estas están más bien hinchadas,
desorganizadas, contenían muchas vacuolas e incluso se rompían, esto se debe a que la imagen c
corresponde al tejido de miocardio en el que se produjo del infarto

imagen D y E

corresponden a la muestra de tejido de la brecha tisular el miocardio, al cual se le fueron


trasplantadas las BMSC

imagen F
La fluorescencia de eGFP de BMSC transplantados en el miocardio infartado de ratas en el grupo
modelado se observó bajo un microscopio de fluorescencia

imagen G y H
La tinción positiva (marrón) de BMSC transfectadas con TGF transplantadas se detectó mediante
inmunohistoquímica con un anticuerpo anti-HSV1-tk y tinción con DAB

Imágenes I, J, K y L

La tinción de inmunofluorescencia mostró que las BMSC trasplantadas fueron positivas para Cy3-
CD90 (rojo, Figura 4I ), pero negativas para Cy3-CD45 ( Fig. 4K ). Los núcleos fueron teñidos y
representados en azul ( Figura 4J y 4L ).

Discusión

Gracias a este estudio se demostró que las imágenes multimodales, dan una mayor información,
con respecto a ciertas problemáticas, en las que se requiere un análisis completo del tejido, ya que
las técnicas por separado son no invasivas, y cada una muestra distintas regiones de las muestras a
tratar, además gracias a los estudios realizados se demostró que las imágenes multimodal en las
que se observan las células madre en modelos animales de infarto de miocardio, son más intuitivas
y confiables, para seguir aplicando terapia biológica como el tratamiento con células madre en el
futuro, en comparación a otros estudios realizados en animales normales, en los cuales no se refleja
de manera precisa la supervivencia de las células madre en un entorno lesionado.

¿es efectiva la utilización de imágenes multimodal al momento de analizar células madre


trasplantadas en modelos animales de infarto de miocardio?

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