UNIVERSIDAD DEL CAUCA.

FACULTAD DE CIENCIAS AGRARIAS

PROGRAMA DE INGENIERÍA AGROINDUSTRIAL. TALLER BIOTECNOLOGÍA

1. Realice un comparativo entre la PCR (desnaturalización, anillamiento y elongación) y el

proceso de replicación in vivo. Realice el esquema para 4 ciclos de PCR, definiendo el
producto obtenido.

2. Se tiene un proceso de fermentación a partir de suero de leche. Cuál sería el esquema de

un operón lactosa y triptófano, teniendo en cuenta que la composición media del suero de
leche reporta contenido de lactosa y triptófano en suficiente concentración para el
adecuado metabolismo del microorganismo.

3. Si la secuencia de nucleótidos en una cadena de una doble hélice codifica la información

necesaria para sintetizar una enzima (amilasa). Cree que la secuencia de nucleótidos en
la otra cadena de la doble hélice también codificaría para la enzima? Explique
gráficamente, de acuerdo a la siguiente secuencia: 5 ́ ATGCGCTAGCTAAACGGGACT 3 ́

4. TCA CCA GCC AGG ATA ATC AGC CAT

De la anterior cadena molde de ADN, encontrar:
RNAm y la proteína. Asignar dirección a la cadena
Si hay un cambio en la posición 9 de la cadena molde por una G (mutación por 
cambio
de base), cuál sería el efecto en la proteína. Si en esta misma posición ocurre una
deleción (pérdida de una base) o una inserción (aumento de una base A), cuál sería el
efecto sobre la proteína.

5. Describa la formación de la cadena líder y cadena rezagada, de acuerdo al esquema de la

figura 1.

Figura 1. Burbuja de replicación

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6. En la figura 2, se observa un plásmido de 4000 pb, con 5 sitios de restricción y 3 enzimas

diferentes (a, b y c).
 Indicar en cada uno de los recuadros del plásmido T1, a que enzima de restricción
corresponde.
 Los tres últimos carriles del gel de agarosa corresponden a las combinaciones de corte
bc, ab y ac. Ubicar la combinación sobre la banda correspondiente.

Figura 2. Plásmido T1 – Gel de agarosa

7. Los polihidroxialcanoatos son gránulos intracelulares acumulados por bacterias. Para su

síntesis, requieren el gen de la PHA sintasa, enzimas encargadas de la polimerización
final del gránulo. Si el gen de la PHA sintasa está en la posición 320 a 930 (Figura 3),
determine que enzima de restricción requiere para insertar el gen en un vector de
clonación.

Nota: el vector de clonación presenta en su sitio de inserción, posibilidad de corte de las

enzimas de restricción descritas a continuación.

 EcoRI GAATTC
 HaeII GGCC
 BamHI GGATCC
 HindIII AAGCTT
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Figura 3. Secuencia de la PHA sintasa

1 gggcccttgt ttcgccgcga gcacggccag tgcgcgactc aggacattgg agcgtcgtag

61 atgagtgaca agaataacga agacctgaaa cgccaggcct cggaaaacac gctgggcctc
121 aacccggtga ttggcatccg cggcaaggat cttttgacct ctgcccgcat ggtgctcgcc
181 caggcactca aacaaccctt ccacagcgcc aagcatgtcg cccatttcgg cctcgaactg
241 aagcatccca tgctcggcca gtccgcgcta aagcccgaag acggtgaccg ccgctttgcc
301 gaattcgcca ggatccgcaa cccgctgtac cgccgctacc tgcagactta cctggcctgg
361 cgcaaggagc tgcacgactg ggtcgagcac agctcgctgt ccgagcagga cgccagccgc
421 ggcaccttcg tgatcaacct gatgaccgaa gacatggcac cctccaacag catggccaac
481 ccggcagcgg tcaaacgctt cttcgaaacc ggcggcaaga gcctgctcga cggcctgtcg
541 cacctggcca aggacatggt aagcttcggc ggcatgccga gtcaggtgaa tatggaggcc
601 ttcgaggtcg gcaagaacct ggccaccacc gacggcgccg tggtgtttcg caacgatgtg
661 ctggagctga tccagtacaa gccgatcacc gagagcgtgc atgagcgccc gttgctagtg
721 gtgccgccgc agatcaacaa gttctatgtc ttcgacctgt cgccggacaa gagcctggcg
781 cgcttcctcc tgcgcagcca ggtgcagacc ttcgtggtca gctggcgcaa cccgaccaag
841 gcgcagcgcg agtggggcct gtccacctac atcgaggcgc gaattcaagc catcgacgtc
901 atctgcgcca tcaccggcag caaagacgtg aacaggatcc aagcttactg aacataaagt
961 ctgcagagctt cgctgctcgg ccactacgcc gcgctcggcc aacataaagt caatgccctg
1021 accttgctgg tcagcgtgct cgacacccag ctcgacaccc aggtagcgct gttcgccgac