FUNDACIÓN UNIVERSITARIA JUAN N.

CORPAS
BIOLOGÍA MOLECULAR
GUIA DE MONITORÍA
TEMA: TÉCNICAS DE DIAGNÓSTICO

1. OBJETIVOS

1.1 Generales

● Determinar las técnicas de diagnóstico en biología molecular como base importante

para el desarrollo científico y avances clínicos.

1.2 Específicos

● Relacionar los conceptos adquiridos en clase con las prácticas de laboratorio.

● Identificar las diferentes técnicas utilizadas en el diagnóstico molecular y saber las
características específicas de cada una.
● Diferenciar los usos respectivos de cada una de las técnicas y enfocarlas a un uso
clínico.

2. INTRODUCCIÓN}

El diagnóstico molecular es un área dinámica en constante desarrollo que ha revolucionado

el diagnóstico clínico. La detección y cuantificación específica de material genético en una
muestra biológica ha mostrado un significativo impacto en todas las áreas de la salud, sobre
todo en las áreas de las enfermedades infecciosas y el cáncer. El desarrollo de nuevas
tecnologías, más rápidas y precisas, ha transformado al diagnóstico molecular en una
herramienta clave para el equipo clínico en directo beneficio del paciente. Esta revisión se
enfoca en el impacto de la biología molecular en el diagnóstico, describiendo algunos
aspectos históricos, las principales técnicas utilizadas y sus proyecciones como enuncia
Farfán (1).
También teniendo en cuenta el concepto de “diagnóstico molecular” dado por Montes (2)
es un término amplio que incluye técnicas de biología molecular en beneficio de la salud
humana, detectando y/o cuantificando secuencias genéticas específicas de ácido
desoxirribonucleico (ADN), ácido ribonucleico (ARN) o proteínas. Inicialmente, el concepto
de “Biología Molecular” se aplicó a los trabajos realizados sobre el ADN.

3. ACTIVIDAD A DESARROLLAR

3.1 Determina coherente y analíticamente el término de “fenotipo”.

3.2 Describa brevemente el proceso por el cual se lleva a cabo la remoción de proteínas, en
el aislamiento de un ácido nucleico.

3.3 Defina los 3 principales pasos para realizar la secuenciación de ácidos nucleicos.

3.4 Complete el siguiente cuadro con la descripción de la herramienta de diagnóstico

mencionada.

Técnica diagnostica Descripción

Marcaje del ADN

Polimerasa termoestable que puede

utilizarse en el PCR.

Reacción en cadena de la polimerasa PCR

 Desarrollo de máquinas automatizadas con
la capacidad de determinar la secuencia de
miles de pares de bases por día.

3.5 Identifique los componentes de la reacción de PCR. Complete frente a cada esquema
los respectivos materiales.

3.6 Explique en qué consisten los métodos de “Maxam y Gilbert y el de “Sanger” para
secuenciar ADN.
3.7 Con referencia al punto 3.6 ¿Qué relación existe entre estos dos métodos?

3.8 Relacione lo tipos de enzimas restrictivas con el sitio de corte colocando entre el
paréntesis la letra correspondiente.

a. Tipo I. ( ) 25 pb del sitio de reconocimiento.

b. Tipo II. ( ) Al azar lejos del sitio de reconocimiento.
c. Tipo III. ( ) El sitio de restricción o adyacente.

3.9 ¿cómo se lleva a cabo la visualización del producto de PCR mediante electroforesis en
gel?

3.10 ¿Cuáles son los errores experimentales más frecuentes que pueden ocurrir en una
electroforesis?
3.11 Describa la principal aplicación de las enzimas de restricción

3.12 Identifique los tipos de clonación y llene la tabla con su correspondiente descripción.

Tipo de clonación Descripción

Partición (fisión) de embriones tempranos

Paraclonación

Clonación verdadera

3.13 Complete las características correspondientes a cada grupo de cromosomas que se

pueden identificar en un cariotipo.
 Grupo A (del 1 al 3).

 Grupo B (pares 4 y 5).

 Grupo C (del 6 al 12 y el cromosoma X).

 Grupo D (del 13 al 15).

 Grupo E (del 16 al 18).

  Grupo F (19 y 20).

 Grupo G (21 y 22 y el cromosoma Y).

3.14 desarrolle la sopa de letras, en donde se encuentran las principales técnicas de

diagnóstico en biología molecular.

AISLAMIENTO

SECUENCIACIÓN

ENZIMAS

ELECTROFORESIS

RESTRICCION

SONDAS

HIBRIDACION

CLONACIÓN

MICROARRAYS

CARIOTIPO

3.15 Analice los siguientes cariotipos, determine la alteración que corresponde y explique
la cromosopatía.
 4. ANÁLISIS DE ARTÍCULO
Para profundizar y contextualizar los temas trabajados en esta guía, realice la lectura del
artículo “Utilidad de las técnicas de biología molecular en el diagnóstico de las infecciones
cutáneas” [3] que puede consultar https://doi.org/10.1016/j.piel.2018.07.010 y responda
las siguientes preguntas.

4.1 Defina las circunstancias en las cuales es necesario utilizar métodos moleculares para la
identificación de las infecciones cutáneas y ¿cuáles son sus beneficios?
4.2 Mencione 3 características diferenciales entre los métodos moleculares caseros y
comerciales.

4.3 identifique cuáles son las principales técnicas utilizadas, y describa a qué situaciones
moleculares se puede aplicar.

4.4 ¿que nos permite identificar los métodos de biología molecular en las infecciones de
piel?

4.5 describa el término “panbacteriana” y ¿cuáles son los principales organismos

detectados que originan infecciones cutáneas?
4.6 Escriba los virus que pueden ser detectados por la técnica de PCR.

5. REFERENCIAS

1. Farfán M. Biología molecular aplicada al diagnóstico clínico Revista Médica Clínica

Las Condes [internet]. 2015 [citado 20 de Diciembre de 2018];Volumen 26:Páginas
788-793.Recuperado a partir de :
https://www.sciencedirect.com/science/article/pii/S0716864015001546.

2. Montes A. Rodríguez A. Borunda J.Biología Molecular. Fundamentos y aplicaciones

en las ciencias de la salud [internet]. 2ed. Nueva York: McGraw; 2012. [citado 20 de
Diciembre de 2018]; Recuperado a partir de: https://bit.ly/2FFadhS

3. Alcaide, Fernando. Utilidad de las técnicas de biología molecular en el diagnóstico

de las infecciones cutáneas. Piel. Formación Continuada en Dermatología, 2019-01-
01, Volumen 34, Número 1, Páginas 40-44, Copyright © 2018 Elsevier España, S.L.U.

4. Carroll KC. Hobden JA. Miller S. Morse SA. Mietzner TA. Detrick B. Mitchell TG.
McKerrow JH. Sakanari JA. Microbiología médica [internet]. 27ed. Nueva York:
McGraw-Hill; 2014. [citado 20 de Diciembre de 2018]; Recuperado a partir de:
https://bit.ly/2CofdnC