LA CELULA PROCARIOTA.

CHILO B., Yulieth Yised; RODRIGUEZ R., Jhonny; VARELA D., Daniela;
Universidad Santiago de Cali. Facultad de Ciencias Básicas. Programa de
Microbiología. Marzo/28/2017

PALABRAS CLAVES: Célula procariota, Tinción Gram, Bacterias.

RESUMEN.

En la práctica realizada se identificó las diferentes estructuras morfológicas y de

agrupación de las células procariotas, en este caso se usó como muestra algunas
bacterias, las cuales son: Klebsiella pneumonial, S. aureus, E. coli, Salmonella
spp y B. cereus; como complemento se observó las células eucariotas de
Saccharomyces cerevisiae, el cual es un hongo unicelular, tipo levadura
perteneciente al reino fungí.

INTRODUCCION

Las células procariotas son de menor tamaño, suelen medir entre 1 y 10 µm. A los
organismos que se encuentran conformados por células procariotas, mayormente
se les conoce como organismos unicelulares. El universo que
descubrió Leeuwenhoek estuvo conformado por bacterias y protozoarios de
diversas características, pero en este informe se basó principalmente en las
bacterias, las cuales se sabe que hay millones que se encuentran en todos
los lugares del planeta, por tanto, viven en el aire, agua y tierra, se les halla
tambien en los alimentos, en el exterior y el interior de los seres vivos. Estas
causan enfermedades y otras son beneficiosas para el ser humano.

Por eso es de vital importancia conocer sobre estos microorganismos, los tipos,
características y diferencias entre gramnegativas (color rojo) y grampositivas (color
morado), esto se establece a partir de la Tinción Gram, la cual es una prueba
potente y rápida que permite diferenciar las bacterias.

En el presente informe se dio a conocer las estructuras morfológicas de las

diferentes bacterias observadas, que tipo de bacterias son y cómo se agrupan.
MATERIALES Y METODOS.

1. Materiales:
 Placas pre montadas y microscopio.

2. Métodos:

Observación de Células Procariotas (Bacterias):

 Escherichia coli:

 Principalmente se procedió a montar en el microscopio la

placa previamente preparada.
 Se inició con el objetivo 4x, en el que se observó como una
especie de conjuntos de manchas de color rojizas, unas más
claras que otras, no se pudo observar una forma en específico
debido al poco aumento del objetivo (ver figura 1).
 Posteriormente se avanzó con el objetivo 10x, en este se
observó lo que se veía como unas manchas un poco más
amplias, y se pudo reconocer como un conjunto de puntos (ver
figura 2).
 Finalmente se observó en el objetivo 40x, en este se pudo ver
con más claridad la forma que contenía la muestra, esta era
cilíndrica y se pudo determinar que eran bacilos (ver figura 3).

Figura 1. Figura 2. Figura 3.

Escherichia coli, a través del microscopio visualizada con objetivos 4x, 10x y 40x,
Laboratorio de Biología General, USC.
  Staphylococcus aureus:

 Se procedió a montar en el microscopio la siguiente placa

previamente preparada.
 Se inició con el objetivo 4x, en el que se observó unos círculos
demasiado pequeños de color morado, unas más juntas que
otros (ver figura 4).
 Seguidamente se pasó al objetivo 10x, en este se observó con
más claridad la forma (ver figura 5).
 Ulteriormente se observó con el objetivo 40x, en este se pudo
ver de forma más clara como una especie de racimo de uvas,
y se pudo determinar que eran estafilococos (ver figura 6).

Figura 4. Figura 5. Figura 6.

Staphylococcus aureus, a través del microscopio visualizada con objetivos 4x, 10x y
40x, Laboratorio de Biología General, USC.

 Bacillus cereus:

 Se inició con el objetivo 4x, en el que se observó cómo

conjuntos de pequeñas telarañas de color morado, unas más
unidas que otras por lo cual se veían más oscuras (ver figura
7).
 Se procedió a avanzar con el objetivo 10x, en este se observó
más ampliamente y se veían figuras con forma de palos (ver
figura 8).
 Finalmente se observó en el objetivo 40x, en este se pudo ver
con más claridad una forma cilíndrica determinando que eran
bacilos (ver figura 9).
 Figura 7. Figura 8. Figura 9.
Bacillus cereus, a través del microscopio visualizada con objetivos 4x, 10x y 40x,
Laboratorio de Biología General, USC.

 Klebsiella pneumoniae:

 Se inició con el objetivo 4x, en el que se observó cómo

pequeños puntos, unos más juntos que otros, estos se veían
de color rojo claro (ver figura 10).
 Posteriormente se observó con el objetivo 10x, en este se
observó más amplio los conjuntos y ya las figuras se veían
mas alargadas (ver figura 11).
 Ulteriormente se observó en el objetivo 40x, en este se pudo
ver formas cilíndricas determinando que eran bacilos (ver
figura 12).

Figura 10. Figura 11. Figura 12.

Klebsiella pneumoniae, a través del microscopio visualizada con objetivos 4x, 10x y 40x,
Laboratorio de Biología General, USC.
  Salmonella spp:

 Principalmente se procedió a observar con el objetivo 4x la

placa, se pudo visualizar una mancha roja parcialmente
grande con unos espacios en blanco, no se pudo observar una
forma en específico (ver figura 13).
 Después se observó con el objetivo 10x, en este se pudo ver
formas un poco circulares, pero no tanto, por ende, no se pudo
determinar en ese momento que tipo de bacteria era (ver
figura 14).
 Finalmente se observó con el objetivo 40x, en este se pudo
ver un poco más de cerca la bacteria y se determinó que lo
más probable era que fueran bacilos, descartando la opción
de cocos, debido a que la forma de esta no era tan circular
(ver figura15).

Figura 13. Figura 14. Figura 15.

Salmonella spp, a través del microscopio visualizada con objetivos 4x, 10x y 40x,
Laboratorio de Biología General, USC.

Observación de Células Eucariotas (Reino fungí):

 Saccharomyces cerevisiae:

 Se observó con el objetivo 40x, en este se pudo ver conjuntos

de formas circulares de color azul por la tinción del azul de
metileno, en el centro de esta se observó una mancha de color
más oscuro, lo cual, de acuerdo a definiciones anteriores, se
pudo determinar que era el núcleo de esta (ver figura 16).
 Figura 16.
Saccharomyces cerevisiae, a través del microscopio visualizada con el objetivo 40x,
Laboratorio de Biología General, USC.

RESULTADOS Y DISCUSION.

Observación de células procariotas.

Las células procariotas se caracterizan por no presentar núcleo. Son células de

menor tamaño que las eucariotas y suelen medir entre 1 y 10 µm. Los seres vivos
más representativos de este tipo son las bacterias.

Este tipo de células presentan las siguientes estructuras:

 Membrana plasmática: Estructura flexible que delimita la célula y permite y

regula los intercambios con el medio exterior. Tiene unos repliegues
internos, donde tiene lugar la mayoría de las reacciones químicas propias
de la nutrición celular.
 Pared bacteriana: Envoltura rígida, externa a la membrana plasmática.
 Citoplasma: Espacio que ocupa el interior de la célula, constituido por una
sustancia líquida y otros componentes celulares inmersos en él.
 Ribosomas: Orgánulos encargados de la síntesis de proteínas. Son los
únicos orgánulos presentes en las células procariotas.
 Material genético: Cadena de ADN que flota libremente en el citoplasma.
 Flagelo: Lo presenta algunos grupos de bacterias. Los flagelos son
estructuras filamentosas que salen al exterior desde la membrana
plasmática y permiten el movimiento de la célula.
La forma de las células bacterianas es muy diversa, algunas de ellas son: bacilos
(forma de bastón), cocos (forma esférica), espirilos (forma de tirabuzón) o vibrios
(forma de coma) (ver figura 17).

Figura 17. Morfología bacteriana. Consultado el 23/03/2017

http://blogs.redalumnos.com/52b3c6fe5da465e8/BACTERIAS.

Las bacterias pueden presentarse como células aisladas o formando grupos, las
principales formas de agrupamiento que se pueden observar son estreptococos y
estreptobacilos (cadenas de cocos o de bacilos), estafilococos (agrupaciones en
forma de racimos de cocos), diplococos (parejas de cocos), agrupaciones en
tétradas o sarcinas (grupos de ocho dispuestos en forma de cubo), (ver figuras 18
y 19).

Figura 18. Formas de agrupamiento de las bacterias. Consultado el 23/03/201,

http://www.mastiposde.com/bacterias.html.
Figura 19. Formas de agrupamiento de las bacterias. Consultado el 23/03/201,
http://www.mastiposde.com/bacterias.html.

Tinción Gram.

Gracias a este método de manera rápida se pudo establecer que las bacterias
grampositivas, como lo son Staphylococcus aureus y Bacillus cereus, se tiñen
de morado debido a que el colorante se queda atrapado en la capa gruesa de
peptidoglicano que rodea a la célula. Por otro lado, las bacterias gramnegativas,
como lo son Escherichia coli, Klebsiella pneumoniae y Salmonella spp, tienen
una capa de peptidoglicano (protege a las bacterias de una ruptura osmótica en
ambientes acuáticos y da a los tipos diferentes de bacterias sus formas) mucho
más delgada es por ello que no retiene el violeta cristal y por esto las células se
tiñen con safranina y las observamos rojas.
Este método tiene una serie de pasos, mencionados a continuación (ver figura 20):

1. Se empapa la muestra con cristal violeta.

2. Enjuaga suavemente el cristal violeta, no enjuagar excesivamente, lo cual
puede quitar la tinción de las bacterias Gram positivas.
3. Se empapa la mancha con yodo y luego se enjuaga, esto atrapa el color del
cristal violeta en la célula, en el lugar en el que la haya teñido.
4. Se agrega un decolorante y luego enjuaga se rápidamente, la realización de
este paso debe calcularse cuidadosamente.
5. Empapa la mancha con un colorante secundario y luego enjuaga. Se usa
un colorante secundario, normalmente safranina o fucsina, para agregar un
contraste adicional entre las bacterias Gram positivas y Gram negativas,
tiñendo las bacterias decoloradas (Gram negativas) de rosado o rojo, se
 deja el colorante en la muestra por lo menos por 45 segundos para
posteriormente enjuagar.
6. Secar el portaobjetos.

Figura 20. Tinción Gram, bacterias. Consultado el 23/03/201,

http://campus.usal.es/~micromed/Practicas_odontologia/unidades/labv/LabMicro/Diag_dir
ecto.html

DIFERENCIAS MOLECULARES ENTRE UNA BACTERIA GRAM POSITIVA Y

OTRA GRAM NEGATIVA.

BACTERIAS GRAM POSITIVAS BACTERIAS GRAM NEGATIVAS

Poseen una pared celular más

Poseen una pared celular interna y una compleja:
pared de peptidoglicano.
No tiene membrana externa
-pared celular interna
-pared de peptidoglicano
- bicapa lipídica externa
Membrana externa: forma un saco
rígido alrededor de la bacteria,
mantiene estructura y es barrera
impermeable a macromoléculas,
ofrece protección en condiciones
adversas

Espacio periplasmático: espacio entre

No tiene espacio periplasmático
La red de mureína está muy
desarrollada y llega a tener hasta 40
capas
la superficie externa de la membrana
citoplasmática y la interna de la
membrana externa.
La red de mureína presenta una sola
capa
 La penicilina mata a las gram positivas,
ya que bloquea la formación de
enlaces peptídicos entre las diferentes
cadenas del peptidoglicano
En la tinción de Gram, retienen la
tinción azul
La penicilina no mata a las Gram
negativas, a causa de la capa de
lipopolisacáridos situada en la parte
externa de la pared celular.
Quedan decoloradas.

Conservan el complejo yodo colorante

Pierden el complejo yodo colorante

Son esporulantes y no esporulantes,

Pueden ser anaerobios o aerobios
como Streptococcus.

Poseen otros componentes: ácidos

Poseen proteínas con concentraciones
teicoicos y lipoteicoicos, y
elevadas.
polisacáridos complejos.

Tabla 1. Diferencias moleculares entre una bacteria gram positiva y otra gram negativa.

MEDIDAS DE LAS BACTERIAS, FORMAS Y CLASIFICACIÓN.

Tamaño
Bacteria Forma. Clasificación
(diámetro)
2 µm largo x 0,5
Escherichia coli Bacilos Gramnegativa.
µm ancho
Staphylococcus aureus 0,8 a 1,5 µm Estafilococos. Grampositiva
Bacillus cereus 4 a 10 µm Bacilos Grampositiva
Klebsiella pneumoniae 0,5 a 2,0 µm Bacilos. Gramnegativa.
0.7 a 1,5 µm x
Salmonella spp Bacilos. Gramnegativa.
2,5 µm

Tabla 2. Medidas, formas y clasificación de las bacterias que se usaron en el laboratorio

para la visualización.

De acuerdo con el conocimiento que se obtuvo anteriormente sobre el diámetro de

los objetivos en el microscopio se puede establecer que estas bacterias son una
especie de punto en comparación a todo el campo visual de este, por ejemplo el
diámetro de la bacteria Staphylococcus aureus oscila entre 0.8 µm y 1,5 µm, si se
compara con el diámetro del objetivo 4x, el cual tiene un diámetro de 4000 µm, se
establece que el tamaño de la bacteria es demasiado diminuto en comparación al
campo visual que se tiene para observar.

Objetivo Razón Milímetros (mm) Micras (µm)

4x 1 4 mm 4000 µm
10x 2.5 1.6 mm 1600 µm
40x 10 0.4 mm 400 µm
100x 25 0.16 mm 160 µm

Tabla 3. Diámetro de los objetivos del microscopio.

BIBLIOGRAFIA.

 Staphylococcus aureus, S. epidermidis, y S. saprophyticus,

consultado el 23/03/2017:
http://microbitosblog.com/2011/08/03/staphylococcus-aureus-epidermidis-
saprophyticus/

 Staphylococcus aureus, consultado el 23/03/2017:

http://www.insht.es/RiesgosBiologicos/Contenidos/Fichas%20de%20agente
s%20biologicos/Fichas/Bacterias/Staphylococcus%20aureus.pdf

 Información microbiológica, consultado el 23/03/2017:

http://www.who.int/water_sanitation_health/dwq/gdwq3_es_11.pdf

 Microbitos blog, consultado el 23/03/2017:

http://microbitosblog.com/2015/04/20/klebsiella_medio_cultivo_infecci
on_gram/

 Salmonella spp, características generales, consultado el 23/03/2017:

http://www.insht.es/RiesgosBiologicos/Contenidos/Fichas%20de%20agente
s%20biologicos/Fichas/Bacterias/Staphylococcus%20aureus.pdf

 Tipos de bacterias, consultado el 23/03/2017:

http://www.mastiposde.com/bacterias.html

 Como hacer una tinción de Gram, consultado el 23/03/2017:

http://es.wikihow.com/hacer-una-tinci%C3%B3n-de-Gram
 Biología medica, bacterias gram positivas y gram negativas,
consultado el 23/07/2017:
http://biologiamedica.blogspot.com.co/2010/09/bacterias-gram-positivas-y-
gram.html