UNIVERSIDAD NACIONAL AGRARIA LA MOLINA

FACULTAD DE CIENCIAS
DEPARTAMENTO ACADEMICO DE QUIMICA

LABORATORIO DE BIOQUÍMICA

PRACTICA N° 4
TITULACIÓN POTENCIOMÉTRICA DE UN ÁCIDO POLIPRÓTICO Y UN
AMINOÁCIDO

INTEGRANTES:
Crespo Caballero, Marelly Grey Gabriela 20161343
Del Carpio Ramírez ,Amada Zoila 20170436
Espinoza Villanueva, Lucia Patricia 20161344
Perez Del Rosario, Eduardo Javier 20161366
Mayta Solis, Benjamin Francisco 20161358

GRUPO: Lunes de 2:00p.m-4:00p.m

FECHA DE LA PRÁCTICA: 16/04/18
FECHA DE ENTREGA DEL INFORME: 23/04/18
1. INTRODUCCIÓN:

La titulación potenciométrica se realiza cuando no es posible la detección del punto

final de una valoración empleando un indicador visual. Se considera uno de los
métodos más exactos, porque el potenciómetro sigue el cambio real de la actividad
y, el punto final coincide directamente con el punto de equilibrio. Las principales
ventajas del método potenciométrico son su aplicabilidad a soluciones turbias,
fluorescentes, opacas, coloreadas, cuando sean inaplicables o no se puedan
obtener indicadores visuales adecuados.

El método de titulación potenciométrica ácido – base se fundamenta en que los

iones hidrógenos presentes en una muestra como resultado de la disociación o
hidrólisis de solutos, son neutralizados mediante titulación con un álcali estándar. El
proceso consiste en la medición y registro del potencial de la celda (en milivoltios o
pH) después de la adición del reactivo (álcali estándar) utilizando un potenciómetro
o medidor de pH. Para hallar la concentración se construye una curva de titulación
graficando los valores de pH observados contra el volumen acumulativo (ml) de la
solución titulante empleada. La curva obtenida debe mostrar uno o más puntos de
inflexión (punto de inflexión es aquel en el cual la pendiente de la curva cambia de
signo). (Oyola, 2014)

La titulación de un ácido fuerte con una base fuerte se caracteriza por tres etapas
importantes:

● Los iones hidronios están en mayor cantidad que los iones hidróxidos antes
del punto de equivalencia.
● Los iones hidronios e hidróxidos están presentes en concentraciones iguales,
en el punto de equivalencia.
● Los iones hidróxidos están en exceso, después del punto de equivalencia.
TITULACIÓN POTENCIOMÉTRICA DE UN AMINOÁCIDO:

Las proteínas son macromoléculas compuestas por unidades más pequeñas

conocidas como aminoácidos. En las proteínas se encuentra básicamente veinte
aminoácidos diferentes, los cuales contienen un grupo carboxilo y un grupo amino
unidos al mismo átomo de carbono (carbono α) estos aminoácidos difieren unos de
otros solo por la naturaleza de sus cadenas laterales, o grupos “R” que varían tanto
en estructura, como en tamaño y carga eléctrica e influyen en la solubilidad en agua
(Fessenden, 1983).
Los grupos carboxilo y amino de los aminoácidos funcionan como ácidos y bases
débiles, respectivamente, y como tales, se ionizan cuando están en solución. Los
aminoácidos tienen al menos dos pK, por lo que tienen mayor capacidad
amortiguadora, ya que presentan de tres a cuatro formas iónicas diferentes.
(Fessenden, 1983). Cuando la forma iónica tiene una carga neta de cero se dice
que se encuentra en su punto isoeléctrico o pI. Al variar de pH, cambia la
proporción de la forma iónica y es posible ver la capacidad amortiguadora de los
aminoácidos.

Cada aminoácido tiene sus propio pK, puesto que presenta diferentes sustituyentes
en sus cadenas laterales. Mediante una titulación, se puede determinar el pK de un
aminoácido.

Glicina:

A pH ácido la Glicina se encuentra como un ácido diprótico, ya que tanto el grupo

amino como el carboxilo se encuentran protonados, es decir, a pH = 1, el 100% de
las moléculas de aminoácido se encuentran en forma de catión.(U.Salamanca)

Al ser éste un amino ácido neutro, posee un grupo amino y un grupo carboxilo es el
aminoácido más sencillo, es decir su grupo R es un hidrógeno.

Ácido glutámico:
Hay que tener en consideración el hecho de que este aminoácido presenta tres
grupos ionizables: el grupo α- carboxilo, el grupo carboxilo de la cadena lateral y el
grupo α-amino.

Por lo tanto, la adición de equivalentes de base produce la liberación secuencial de

protones al medio, y estos equilibrios están determinados por sus correspondientes
constantes: el grupo α- carboxilo (pKC), el grupo carboxilo de la cadena lateral
(pKR) y el grupo amino (pKN). En este caso, existen tres regiones de capacidad
tamponante, y el pI se calcula como el promedio del pKC y del pKR.

TITULACIÓN POTENCIOMÉTRICA DEL ÁCIDO FOSFÓRICO

Los ácidos polipróticos (o ácidos polibásicos) son ácidos que tienen más de un
hidrógeno ionizable, por ejemplo, el ácido fosfórico. Estos ácidos disocian en más
de una etapa y cada etapa presenta su propia constante de equilibrio.

Los ácidos polipróticos no ceden de una vez y con la misma facilidad todos los
protones, sino que hacen de forma escalonada, y cada vez con mayor dificultad. Las
correspondientes constantes de disociación, disminuyen mucho (aproximadamente
un factor de 10-5) para cada una de las sucesivas ionizaciones. (G. Crhistian, 2009)

El ácido fosfórico (a veces llamado ácido ortofosfórico) es un compuesto químico

ácido (más precisamente un compuesto ternario que pertenece a la categoría de los
oxácidos) de fórmula H3PO4. Es un ortofosfato cuyo código en el Sistema
Internacional de Numeración es E-338. No se debe usar agua para remover este
químico, puesto que esta produce su activación.
RESULTADOS
Al agregar a una solución de ácido fosfórico algunos mL de NaOH, se obtiene los
siguientes pH medidos con un potenciómetro:
mL pH mL pH mL NaOH pH
NaOH NaOH

0 1.19 20 4.90 40 10.03

1 1.23 21 5.45 41 10.42

2 1.27 22 5.74 42 10.64

3 1.32 23 5.89 43 10.81

4 1.42 24 6.06 44 10.92

5 1.46 25 6.19 45 11.03

6 1.53 26 6.30 46 11.12

7 1.59 27 6.41 47 11.21

8 1.79 28 6.51 48 11.29

9 1.86 29 6.60 49 11.39

10 1.95 30 6.70 50 11.46

11 2.04 31 6.80 51 11.51

12 2.13 32 6.90 52 11.59

13 2.24 33 6.99 53 11.63

14 2.35 34 7.12 54 11.70

15 2.48 35 7.34 55 11.76

16 2.60 36 7.52 56 11.83

17 2.81 37 7.73 57 11.91

18 3.10 38 8.02 58 11.95

19 3.48 39 8.87 59 12.01

 Discusiones

Ácido fosfórico:
El ácido fosfórico se encuentra en forma libre además de tener tres disociaciones
disponibles debido a los tres protones que puede donar. Entonces, se pueden establecer
tres equilibrios de disociación, cada uno con una constante característica a 25ºC.

Cuando se valora un ácido poliprótico, se

producen tantos saltos como protones tiene el
ácido. Por ello, el ácido fosfórico presenta tres
saltos en su curva de titulación.

En este tipo de ácido, con los valores de sus

constantes bien separadas, los distintos protones
se valorarán de forma secuencial; el primero
siempre es más ácido que el segundo. Por tanto,
el primer H+ se desprende con facilidad aún a pH
ácido (a pH=2,1 la mitad del H3PO4 se ha
disociado para formar H2PO4-), lo que quiere decir
que el H3PO4 es un ácido moderadamente fuerte.
Gráfica 1: Curva de titulación del ácido fosfórico.
http://www.ehu.eus/biomoleculas/buffers/buffer1.htm

Desde un punto de interés biológico, el pK de la segunda disociación (7,2) es el más

próximo al pH del medio interno y por lo tanto, es esta segunda disociación la que tiene
lugar reversiblemente en el medio interno, y la que posee acción amortiguadora. El tercer H+
es atraído fuertemente por el radical fosfato así que se necesita una gran cantidad de
NaOH, entonces puede disociarse en medio muy alcalino (pH=12,7).

CONCLUSIONES:
1. Hemos comprobado que los sistemas buffer del ácido fosfórico se forman debido a
que este es un ácido es poliprótico que tiene 3 protones ionizables, esta irá
perdiendo sus protones al agregar NaOH, ya que estos protones se unirán al NaOH
formando agua y una sal que es su par conjugado, al seguir agregándole más NaOH
esta base conjugada se desprotonizará y hará el papel de ácido que seguirá
desprotonizándose hasta agotar sus tres protones. Algo similar ocurre con la glicina
que es un aminoácido.

2. En cada desprotonización del ácido por adición de NaOH se formará un sistema

buffer, y cada reacción tendrá valores distintos de pka, siendo así, la primera
desprotonización de mayor Ka y menor pka por ser más ácido y me menor Ka y
mayor pka al ir perdiendo más protones, esto nos generará una curva, donde se
muestran todos los sistemas amortiguadores que el compuesto pueda formar.

3. Se determinó los valores de pka experimentalmente mediante la titulación

potenciométrica del ácido fosfórico en la cual observamos diferentes valores de pH
que formaron distintos sistemas amortiguadores.

PROBLEMAS ENCARGADOS
1. ¿En qué se diferencian estructuralmente y funcionalmente los tres aminoácidos
estudiados?
 ● La glicina, presenta un solo grupo carboxilo y una sola estructura 𝐶𝐻2 en su
composición. Es un neurotransmisor inhibidor, actuando sobre unos receptores
específicos del tronco cerebral y la médula.

Imagen 1: Glicina. Fuente: https://www.ecured.cu/Glicina

● La lisina presenta dos estructuras de 𝑁𝐻3+ y más de una estructura 𝐶𝐻2 . Tiene la
función de ayudar a mantener el equilibrio de nitrógeno, formar anticuerpos y
colágeno.

Imagen 2: Lisina. Fuente: https://periodicosalud.com/lisina-que-es-beneficios-efectos-secundarios-formula-comprar/

● El ácido glutámico cuenta con dos grupos carboxilo y una estructura 𝑁𝐻3+ . Además
ayuda a potenciar el sabor de los alimentos que lo contienen y favorece la síntesis
proteica.

Imagen 3: Ácido glutámico. Fuente: https://es.wikipedia.org/wiki/%C3%81cido_glut%C3%A1mico

2.
3. Proponga las reacciones producidas en la titulación de la lisina con NaOH a partir
de sus especies iónicas más positivas.
4. Calcule los componentes de un litro de tampón glicina de pH 8.8 y concentraciones 0.1 M
a partir de glicina sólida (PM=101.6) Y NaOH solido (PM=40) si el pKa1=2,35 y pKa2=9.78.
[buffer]= 0.1M= [S2]+[A2]
Pka2=9.78 (más cercano al pH)
pH = pKa + Log ([S2]/[A2])
8.8 = 9.78 + Log ([S2]/[A2])
10-0.98 = [S2]/[A2]
[A2] = 0.09
[S2] = 0.009
0.099 moles de glicina X 101.6 = 10.06 gr de glicina
0.108 moles de NaOH x 40 = 4.32 gr NaOH

5. ¿Químicamente cómo define a un aminoácido, cuantos sistemas buffer puede

formar?
Los aminoácidos contienen grupos a-carboxilo débilmente ácidos y grupos a-amino,
débilmente básicos. Además, cada uno de los aminoácidos ácidos y básicos, contiene un
grupo ionizable en su cadena lateral. De esta manera, tanto los aminoácidos libres como los
combinados en uniones peptídicas pueden actuar, potencialmente, como buffers. La
relación cuantitativa entre [H+] y los ácidos débiles puede describirse según la ecuación de
Henderson-Hasselbalch.
Un aminoácido puede formar cierto número de sistemas buffer según cuántos grupos
ionizables contenga en su estructura. Por ejemplo, el ácido glutámico contiene 3 grupos
ionizables (Dos grupos carboxilo y una estructura 𝑁𝐻3+ .) Así que puede generar 3 sistemas
buffer.
7. ¿Que es el punto isoeléctrico y para que se usa?
Se le conoce como punto isoeléctrico (pI) a aquel pH en la cual la forma neutra, molécula
con carga cero, se encuentra presente en la máxima cantidad. En los aminoácidos y
proteínas nos indica la menor solubilidad de la solución, por lo que su conocimiento es muy
útil en el aislamiento o purificación. (Cueva P. 2015)

8. Escriba la fórmula de los siguientes aminoácidos y explique cuantos buffers se podrían

preparar con cada uno de ellos:
● Ácido aspártico: C4H7NO4, presentará tres buffer debido a sus grupos amino y
carboxilo, y otro grupo carboxilo que se halla en el grupo R de aminoácido.
● Arginina: C6H14N4O2, presentará tres buffer debido a los grupos amino y carboxilo, y
un NH enlazado con un carbono a través de doble enlace.
● Triptófano: C11H12N2O2, presenta solo dos buffer ya que el grupo R es muy estable,
esta capacidad para aceptar y donar electrones es debido a su grupo amino y grupo
carboxílico.
● Cisteina: C3H7NO2S, presentará dos buffers debido a su grupo amino y carboxilo.

BIBLIOGRAFÍA

-Oyola Martínez, Rolando (2014), Titulación potenciométrica Universidad de Puerto

Rico-Humacao.

-Fessenden Ralph J., Fessenden Joan S. (1983), Química Orgánica, University of

Montana, GRUPO EDITORIAL IBEROAMÉRICA, DF México.