Conocimiento y manejo del espectrofotómetro

Knowledge and use of Spectrophotometer

Carrillo Briones Alberto; Cárdenas España Diego Armado ; Mejía Velázquez Yaena, ;
Pérez Méndez Rigoberto, Jazmín

RESUMEN.
En esta práctica se realizó el manejo de diferentes espectrofotómetros; análogos visibles y digitales, para la
realización de identificación y cuantificación de diversas sustancias, en este caso se utilizó como muestra
problema CuSO4 y muestra patrón H2O. La espectroscopia de absorción de basa en ver las longitudes de
onda particulares de la luz que se absorben por moléculas que están en la trayectoria del haz. Por otra parte se
tomó lectura de diferentes longitudes de onda, así como su absorbancia y transmitancia, finalizando con la
comparación de los datos con los diferentes espectrofotómetros.

Palabras claves: espectrofotómetro, espectroscopia, muestra problema.

INTRODUCCION: energía interna. Esto permite que se inicien

Las espectroscopias ópticas están entre los
métodos físicos más usados en investigación
de estructuras moleculares, análisis
cuantitativo y cualitativo. Una gran ventaja de
los métodos es que no son destructivos por
ello nos permite estudiar estructuras químicas
y biológicas en condiciones iguales o
cercanas a las condiciones naturales, además
nos permite trabajar con cantidades
sumamente pequeñas.
La Espectrofotometría es una de las técnicas
experimentales más utilizadas para la
detección específica de moléculas. Se
caracteriza por su precisión, sensibilidad y su
aplicabilidad a moléculas de distinta
naturaleza (contaminantes, biomoléculas, etc)
y estado de agregación (sólido, líquido, gas).
Los fundamentos físico-químicos de la
espectrofotometría son relativamente
sencillos. Las moléculas pueden absorber
energía luminosa y almacenarla en forma de
ciclos vitales de muchos organismos, entre
ellos el de la fotosíntesis en plantas y
bacterias. La Mecánica Cuántica nos dice que
la luz está compuesta de fotones cada uno de
los cuáles tiene una energía:
Efotón = h⋅ν = h⋅c/λ
La espectroscopia de absorción se basa en las
longitudes de onda particulares de la luz que
se observan por moléculas que están en la
trayectoria de haz. Los primeros instrumentos
espectroscópicos fueron diseñas para la
región visible y en consecuencia recibieron la
denominación de instrumentos ópticos.
Los espectros de absorción se miden
mediante un instrumento denominado
espectrómetro. Los instrumentos que vamos a
usar en esta práctica constan de una fuente de
luz “blanca” caracterizada por un espectro de
emisión continuo en un intervalo amplio de
longitudes de onda (en nuestro caso 325 nm-
900 nm) y de un monocromador que actúa
como filtro óptico transmitiendo un haz de
luz de longitud de onda fija λ e intensidad I0.
Este haz de luz penetra en la cubeta de
análisis donde se encuentra la muestra. Un
detector sensible a la luz mide la intensidad
del haz a la salida.
4.- se ajustó a cero la transmitacia con la perilla
introduciendo una porta cubetas con agua
destilada (blanco).

5.- se retiró el blanco y se introdujo la celda con

METODOLOGÍA Y MATERIA.
CuSO4 al 0.1 N. (hacer la lectura con 0.05 y ´´x´´
repitiendo los pasos anteriores).
1.- Se utilizaron tres soluciones de CuSO4 al
0.1N, 0.05 N y una solución desconocida para
conocer su absorbancia

2.- previo se encendió el espectrómetro y se

6.- se tomó lectura de absorbancia y transmitancia,
calentó por 20 minutos hasta obtener un haz de luz
después se casó la muestra del contenedor y se
constante
volvió a repetir los pasos para las siguientes
pruebas. La longitud de onda fue de 550 y 560

3.- se seleccionó una longitud de onda de 540nm.

RESULTADOS Y DISCUSIONES. Espectrofotómetro análogo visible CuSO4
En la práctica realizada se demostró que la
absorbancia y la concentración son 0.1 M sulfato de
directamente proporcionales. También se Onda 540 cobre
comprobó en base a los resultados obtenidos, 0.1 absorbancia
que para una sustancia (en término de 98 transmitancia
concentraciones molares), a medida que una
0.5 absorbancia
disolución se encuentra más diluida, es decir,
está a menor concentración la Absorbancia es 89 transmitancia
menos, en otras palabras a mayor 0.05 M sulfato de
concentración de una disolución mayor es cobre
la Absorbancia. 0.05 absorbancia
99 transmitancia
Así mismo el conocer el adecuado uso del
espectrofotómetro permitió obtener en el
laboratorio resultados con una calidad
analítica en las mediciones que son emitidas Onda
por éste. Se identificó que el equipo presenta 0.05 M
una adecuada precisión y exactitud 560 0.05 absorvancia
determinando que las mediciones realizadas 99 transmitancia
en este pueden ser confiables. 0.01 M
Debido a que el sulfato de cobre presenta una 0.01 absorvancia
rango de 550 en el espectrofotómetro, se
0.02 98 transmitancia
puedo cuantificar su absorbancia y su Desconocido
transmitancia en un rango emitido de 540 a 0.6 absorvancia
560 y así poder comparar los datos en la 87 transmitancia
gráfica y concentraciones fueron de 0.1 N Y
0.05 N, estos datos arrojaron una Espectrofotómetro eléctrico (digital )
significativa diferencia debido a sus
diferentes concentraciones.

Onda
CONCLUSIONES.
Desconocido
Con los resultados obtenidos en el análisis de 78.5 transmitancia
- 0.075 absorvancia
los dos espectrofotómetros que son el análogo
0.1M
visible y el electrónico hubo una variación 550 - 0.168 absorvancia
debida que el electrónico arrojo los valores 96.8 transmitancia
más precisos en comparación del manual
0.05 M
porque a hay una interferencia con el entorno
- 0.156 absorvancia
y a la hora de tomar la lectura.
96.2 transmitancia
Onda
540 0.05 M Bibliografía
0 absorbancia Materiales (espectrofotometría)
100 transmitancia
http://materias.fi.uba.ar/6305/downlo
0.1 M ad/Espectrofotometria.pdf
0.05 absorbancia
99 transmitancia
Desconocido
0.4 absorbancia
91 transmitancia
Bioquímica espectrofotometría
Laboratorio. 2010.
http://www.bioquimica.dogsleep.net/
Laboratorio/Plummer/Chp04.pdf

Química Analítica Cuantitativa, Day

and Underwood. Química Analítica,
Skoog and West. Análisis
Instrumental, Douglas R. Skoog and
Donald M. West.

Quimica II . 2010
Espectrofotometria
file:///C:/Users/pedro/Downloads/Gui
a_TP_2_Quimica_II_2010.pdf