Avance Laboratorio de Micro

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PRACTICA N°1
PRESENCIA DE COLIFORMES EN AGUA RESIDUAL
(método del número más probable)
1. OBJETIVOS:
 Evaluar la calidad sanitaria de muestras de agua o alimentos

mediante la búsqueda de microorganismos coliformes totales,
coliformes fecales y Escherichia coli.
 Determinar las diferencias de los organismos coliformes totales de

los microorganismos coliformes fecales.
2. MARCO TEORICO:
AGUAS RESIDUALES
Cuando hablamos de aguas residuales, estamos haciendo referencia a todo tipo de

agua que haya sido afectada de forma negativa por la acción del ser humano. De
este modo, quedarían fuera aquellas aguas que, por causas naturales, no sean aptas
para el consumo o por ejemplo, también todas las aguas que, habiendo sido
afectadas por la acción del hombre, sí que lo sean.
En este sentido, las aguas residuales son todas aquellas aguas que han sido usadas
en los entornos domésticos y urbanos, en las industrias y ganaderías, así como las
aguas naturales que, por accidente o mala praxis, se hayan mezclado con las
anteriores. De este modo, nos encontramos con que las aguas residuales son aguas
pero, además de agua, también contienen una gran cantidad de elementos
contaminantes, ya sean sólidos o disueltos en la misma agua. Respecto a la
contaminación que pueden portar las aguas residuales hay que decir que se trata
de una variedad casi tan amplia como las acciones que el ser humano puede
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realizar sobre el agua. Se pueden encontrar productos químicos procedentes de

uso doméstico (jabones, detergentes, cosméticos, etc.), productos sólidos (papel
higiénico, toallitas “desechables” de algodón, plásticos de diversos tamaños, etc.),
metales pesados y muy contaminantes procedentes de la industria (plomo, zinc,
mercurio, cadmio, bromo, etc.), y también restos orgánicos, procedentes,
principalmente, de la materia fecal y los orines. (perez, 2015)
Son materiales derivados de residuos domésticos o de procesos industriales, los
cuales por razones de salud pública y por consideraciones de recreación
económica y estética, no pueden desecharse vertiéndolas sin tratamiento
en lagos o corrientes convencionales, se clasifican según su origen en:
 Domésticas: aquellas utilizadas con fines higiénicos
(baños, cocinas, lavanderías, etc.). Consisten básicamente en residuos
humanos que llegan a las redes de alcantarillado por medio de descargas
de instalaciones hidráulicas de la edificación también en residuos
originados en establecimientos comerciales, públicos y similares.
 Industriales: son líquidos generados en los procesos industriales. Poseen
características específicas, dependiendo del tipo de industria.
 Infiltración y caudal adicionales: las aguas de infiltración penetran en el
sistema de alcantarillado a través de los empalmes de las tuberías, paredes
de las tuberías defectuosas, tuberías de inspección y limpieza, etc. Hay
también aguas pluviales, que son descargadas por medio de varias fuentes,
como canales, drenajes y colectores de agua de lluvia.
 Pluviales: son agua de lluvia, que descargan grandes cantidades de agua
sobre el suelo. Parte de esta agua es drenada y otra escurre por la
superficie, arrastrando arena, tierra, hojas y otros residuos que pueden
estar sobre el suelo. (ibarra, 2016)
 PRINCIPALES CONTAMINANTES
 Aguas residuales y otros residuos que demandan oxígeno (en su mayor

parte materia orgánica, cuya descomposición produce la desoxigenación
del agua).
 Agentes infecciosos.
 Nutrientes vegetales que pueden estimular el crecimiento de las plantas
acuáticas. Éstas, a su vez, interfieren con los usos a los que se destina el
agua y, al descomponerse, agotan el oxígeno disuelto y producen olores
desagradables.
 Productos químicos, incluyendo los pesticidas, varios productos
industriales, las sustancias tenso activas contenidas en los detergentes, y
los productos de la descomposición de otros compuestos orgánicos.
 Petróleo, especialmente el procedente de los vertidos accidentales.
 Minerales inorgánicos y compuestos químicos.
 Sedimentos formados por partículas del suelo y minerales arrastrados por

las tormentas y escorrentías desde las tierras de cultivo, los suelos sin
protección, las explotaciones mineras, las carreteras y los derribos
urbanos.
 Sustancias radiactivas procedentes de los residuos producidos por
la minería y el refinado del uranio y el torio, las centrales nucleares y el
uso industrial, médico y científico de materiales radiactivos.
 El calor también puede ser considerado un contaminante cuando el vertido
del agua empleada para la refrigeración de las fábricas y las centrales
energéticas hace subir la temperatura del agua de la que se abastecen.
 EDAR (Estación Depuradora De Aguas Residuales )
 FASE DE PRE TRATAMIENTO. Se eliminan los residuos de mayor

tamaño, las grasas flotantes y las arenas y sólidos de mayor grosor.
 TRATAMIENTO PRIMARIO. Se deja reposar el agua en grandes
estanques (decantadores). En la superficie se acumulan los residuos
flotantes y en el fondo los más pesados (fangos). Todos ellos serán
retirados de forma automática.
 TRATAMIENTO SECUNDARIO. El agua, siguiendo su camino, pasa a
unas grandes balsas pobladas por millones de diferentes tipos
de bacterias (un tipo de seres vivos). Las bacterias se alimentan de los
restos orgánicos que aún llevan las aguas residuales. Durante este proceso
las aguas son removidas constantemente por unas potentes "batidoras"
para que las bacterias dispongan de la mayor cantidad posible de oxígeno.
Después, las aguas pasan a otros estanques decantadores donde se siguen
retirando los lodos que aún permanecen en el agua. Finalmente, el agua es
devuelta de nuevo a su curso natural, el río, o bien se canaliza para otros
usos.
 Todos los fangos retirados de los decantadores pasan a otra instalación
(digestor) donde son tratados antes de ser almacenados o destinados a otros
usos. En esta fase se produce gas que es utilizado como combustible en la
propia instalación para la calefacción de los edificios o para producir
energía eléctrica. (capo, 2013)
3. MATERIALES Y PROCEDIMIENTO
MATERIALES, INSTRUMENTOS Y REACTIVOS
Materiales, instrumentos Gráficas
Bagueta
Luna de reloj
Asa Bacteriológica
Agua destilada
Probeta
Pipeta
Vaso precipitado
Mechero, ron
Propipeta
Tubos de ensayos
Balanza Analítica
Agua de río
Campana durham
PROCEDIMIENTO
I. PREPARACIÓN DE CALDOS
1) Pesar 1,1 gramos de caldo peptonado y diluirlo en 110 ml de agua destilada. Con
la ayuda de una bagueta remover hasta que quede una solución homogénea.
2) Verter 90 ml de la solución de caldo peptonado en una botella de vidrio

previamente esterilizada.
3) Verter en dos tubos de ensayo, 9 ml

de la solución de caldo peptonado en
cada tubo.
4) Para la preparación del caldo lauril sulfato (CLS), necesitamos pesar 3,026
gramos de este y diluirlo en 85 ml de agua destilada.
5) Repartir la solución de CLS en 9 tubos de ensayo, conteniendo así cada uno 9 ml

de la disolución homogénea.
6) Colocar campanas Durham a cada uno de los 9 tubos que contienen la solución
CLS, el orificio de la campana debe estar hacia abajo.
7) Esterilizar la botella y los dos tubos de ensayo que contienen el caldo peptonado,
más los nueve tubos que contiene el caldo lauril sulfato por 30 minutos a 100 °C.
Cubrir las tapas con papel aluminio.
8) Enfriar
II. SOLUCIÓN MADRE Y DILUCIONES
1) Con la ayuda de una pipeta, tomar 10

ml de muestra de agua (agua de río ) y
agregar a la botella que contiene 90 ml
de caldo peptonado a la cual la
llamaremos SOLUCIÓN MADRE
(10−1 ).
2) Repartir a cada tubo, 1ml de la

SOLUCIÓN MADRE (10−1 ) en tres
tubos que contengan 9 ml de CLS.
3) Con la ayuda de una pipeta estéril tomar 1 ml de la SOLUCIÓN MADRE (10−1 )

y llevarlo a un tubo que contenga 9 ml de caldo peptonado, a la cual le llamaremos
10−2 . Homogenizar o agitar manualmente.
4) Agregar 1 ml de la dilución 10−2 a

cada uno de tres tubos que
contengan 9 ml de CLS
5) Con la ayuda de una pipeta estéril transferir 1 ml de la dilución 10−2 a un tubo

que contenga 9 ml de caldo peptonado, al cual denominaremos10−3 .
6) Repartir en tres tubos que contengan

9 ml de CLS, 1 ml del diluyente
10−3 , cada uno.
7) Incubar los 9 tubos a 35 °C por 24 horas (primera lectura) y 48 horas (segunda

lectura)
8) Después de 48 horas de la
inoculación se hace la lectura final,
de los tubos que dieron resultado
positivo (producción de gas,
aparición de turbidez), se pasa al
proceso de sembrado.
9) Preparar el agar Mac conkey y sembrar por el método de estrías e incubar a 37 °C

por 24 horas.
4. RESULTADOS
Previamente los tubos esterilizados a 100°C aproximadamente y enfriados, se llevan

a la incubadora por 48 horas (cada 24 horas tomar lectura y observar la presencia de
gas, indicando la 1/3 del tubo de ensayo en relación a la campa Durham).
1era lectura después de 24 horas:

1era conclusión:
Se observan los 3 grupos de tubos; desde el derivado 10-1 hasta el 10-3.

Se hace la lectura correspondiente de los 9 tubos, identificando un cambio de mayor
concentración de turbidez en el grado 10-2, colonialmente el 10-1, y fuera de esta
característica el 10-3. Presencia ligera de gas en los rangos 10-1 y 10-2..
2da lectura después de 48 horas:
2da conclusión:
Se observan nuevamente los 2 grados desde 10-1 hasta 10-2, con cambios ligeramente en
la turbidez de los tubos y la presencia de gas. Existe una variación que puede influenciar
en el recuento total de coliformes, debido su presencia en un tubo más. Se obtiene
finalmente un recuento experimental de: +3, +1, 0. Estadísticamente según la tabla
previamente establecida y tomando como factor divisor al 10. Nro. Total de coliformes:
43x10=430.
Donde 43 es el NMP y el 10 es el factor de división; así se obtiene la población de
coliformes totales.
Lectura de tubos
Lectura de tubos a las 24 horas:
Dilución de 1er tubo 2do tubo 3er tubo Nro de tubos

tubos positivos
10-1   2
10-2  1
10-3 0
Lectura de tubos a las 48 horas:
Dilución de 1er tubo 2do tubo 3er tubo Nro de tubos

tubos positivos
10-1    3
10-2  1
10-3 0
NPM estadístico=43
Factor de división=10
Población de coliformes totales= 430 NMP/ml

Siembra de tubos positivos en agar MacConkey.
El Agar MacConkey es un medio de cultivo selectivo que se utiliza para el aislamiento

de bacilos Gram negativos de fácil desarrollo, los cuales, a partir de muestras clínicas,
agua y alimentos permiten la diferenciación sobre la base de la fermentación de la lactosa.
El grupo de coliformes incluye bacilos, Gram negativos, los cuales puedes aislarlos para
determinar la presencia de Escherichias, por ejemplo.
MUESTRA Agua del río Chillón
LUGAR DE RECOLECCIÓN Puente Piedra

FECHA Y HORA DE RECOLECCIÓN 04/12/19- 14:00 h
MÉTODO Mas probable
MEDIO DE CULTIVO Mac-Conkey
FECHA Y HORA DE SIEMBRA 10:52 am
T° Y TIEMPO DE INCUBACIÓN 24h-48 h
Se finaliza la siembre en agar Mac-Conkey para la identificación de coliformes.

5. CONCLUSIONES
 No se encontró coliformes en la muestra 10−3; debido a su

concentración de tipo simple.
 Se encontraron un total de 430 coliformes en la lectura de tubos a las
48 h.
 De los resultados obtenidos se establecen que el agua recaudada no
cumple con los parámetros de salud.
 Según muestra de agua recolectada del rio Chillón: estás se
encontrarían contaminadas, por lo cual no es apto para un consumo
directo, ya que podría traer complicaciones como enfermedades
gastrointestinales.
6. CUESTIONARIO
1. COLIFORMES. CLASES.
Grupo de bacterias aerobias y facultativamente anaerobias, Gram-negativas, no

esporulantes, fermentadoras de lactosa y habitantes típicos del intestino grueso
humano y animal.
Muchas de ellas no son capaces de reproducirse fuera del intestino, por lo que
sirven de indicadores de la contaminación por aguas fecales.
El grupo coliforme es constante, abundante y casi exclusivo de la materia fecal,

sin embargo, las características de sobrevivencia y la capacidad para multiplicarse
fuera del intestino también se observan en aguas potables, por lo que el grupo
coliforme se utiliza como indicador de contaminación fecal en agua; conforme
mayor sea el número de coliformes en agua, mayor será la probabilidad de estar
frente a una contaminación reciente.
Cuando los coliformes llegan a los alimentos, no sólo sobreviven, sino que se
multiplican, por lo que en los alimentos el grupo coliforme adquiere un significado
distinto al que recibe en el agua. En productos alimenticios que han recibido un
tratamiento térmico (pasteurización, horneado, cocción, etc.), se utilizan como
indicadores de malas prácticas sanitarias.
Los microorganismos coliformes constituyen un grupo heterogéneo con hábitat
primordialmente intestinal para la mayoría de las especies que involucra.
El grupo de bacterias coliformes totales comprende todos los bacilos
Gramnegativos aerobios o anaerobios facultativos, no esporulados, que fermentan
la lactosa con producción de gas en un lapso máximo de 48 h. a 35°C ± 1ºC. Este
grupo está conformado por 4 géneros principalmente: Enterobacter, Escherichia,
Citrobacter y Klebsiella.
Otra clasificación que poseen los coliformes, está dada por:

 Coliformes totales
Son aquellos que se utilizan para determinar la calidad bacteriológica de los
efluentes de los sistemas de tratamiento de aguas servidas. Además, los coliformes
totales son Enterobacteriaceae lactosa-positiva.
Constituyen un grupo de bacterias que se definen más por las pruebas usadas para
su aislamiento las cuales tienen la característica de tener la capacidad para
fermentar la lactosa, producir ácidos y gases.
 Coliformes Termo tolerantes o fecales:

El grupo de coliformes fecales, está constituido por bacterias Gram-negativas
capaces de fermentar la lactosa con producción de gas a las 48 h. de incubación a
44.5 ± 0.1°C. Este grupo no incluye una especie determinada sin embargo, la más
prominente es Escherichia coli.
2. MEDIOS PARA DETECTAR COLIFORMES
 Base de Agar para Coliformes Fecales (m-FC): medio para detección y

enumeración de Coliformes fecales.
 Agua Peptonada con Lactosa (ISO 9308-1): para confirmación de Coliformes en
agua.
 Agar Triptonado de Soja (ISO 9308-1): detección y enumeración de E.coli y
otras bacterias coliformes a través del método de filtración por membrana.
 Agar Chapman TTC (ISO 9308-1): enumeración de Coliformes en aguas
POTABLES A TRAVÉS DE FILTRACIÓN POR MEMBRANA.
3. PRUEBAS PRESUNTIVAS Y CONFIRMATIVAS PARA COLIFORMES
PRUEBA PRESUNTIVA
Consiste en un procedimiento de criba en el que una reacción negativa excluye la
presencia del grupo coliforme y una reacción positiva indica su posible presencia.
Dispondremos de un matraz con 50 ml y dos series de tubos conteniendo 10 y 1
ml respectivamente de caldo MacConkey, y provistos de una campana de recogida
de gases (campana Durham). Mediante pipetas estériles, se siembran el matraz y
las dos series de tubos con un volumen igual de agua ya homogeneizada debido a
ello el medio deberá prepararse a doble concentración. Después de la siembra,
será necesario una buena homogenización de los tubos que se llevaran a incubar
durante 24 h a 37ºC.
Lectura e interpretación de los resultados.

Se consideran tubos positivos aquellos en los que se observe viraje del indicador
debido a la acidificación del medio, y aparición de gas en la campana Durham.
PRUEBA DE CONFIRMACION DE COLIFORMES TOTALES

Es un procedimiento mediante el cual, una reacción negativa excluye la presencia
del grupo coliforme, mientras que una reacción positiva indica su presencia
inequívoca.
Deben someterse a esta prueba todos los tubos que hayan resultado positivos en
la prueba presuntiva. A partir de ellos y tras homogenizar su contenido, se
procederá a sembrarlos mediante asa en estría, sobre la superficie de placas Petri
conteniendo medio de agar-lactosa-eosina-azul de metileno (medio de Teague
Levine o EMB). A continuación, se incubarán las placas a 37ºC durante 24h.
Las bacterias fermentadoras de lactosa crecen sobre este medio dando colonias
opacas y pigmentadas en rosa, azul violeta oscuro con o sin brillo metálico,
mientras que las colonias que aparezcan distintas a las descritas pertenecerán a
bacterias no fermentadoras de lactosa. Posteriormente, de cada placa,
seleccionaremos una colonia de cada uno de los diferentes aspectos descritos
como característicos y se resiembra mediante hilo o asa sobre agar nutritivo
inclinado y a continuación y sin recargar se resiembra un tubo de caldo
MacConkey, con campana Durham, incubándose a 37ºC durante 24 h.
Al término de la incubación, se comprueba la producción de gas en el tubo
lactosado y en el caso de que sea positiva, se toma mediante asa o pipeta Pasteur
una porción del cultivo desarrollado sobre el agar inclinado y se le practica la
prueba de la oxidasa. O bien se siembra la bacteria en agua de peptona y se le
realiza la prueba del indol. Esta prueba sirve para medir la producción de indol a
partir de triptofano debido a la acción de la enzima Triptofanasa. Esta enzima
degrada el triptofano hasta indol y pirúvico, el cual es utilizado como fuente de
energía. El indol por el contrario se acumula en el medio y puede ser puesto de
manifiesto con el reactivo de Kovacs el cual va a extraer el indol que va a
reaccionar con el paradimetilaminobenzaldehido dando lugar en medio acido a un
complejo de color rojo denominado Rosindol el cual queda concentrado en forma
de un anillo en la parte superior del tubo, ya que el alcohol amílico no se mezcla
con el agua y al ser menos denso que esta, se queda por encima.
Si en la placa de medio EMB no se desarrollan colonias o bien las aparecidas no
son fermentadoras de lactosa con producción de gas la prueba de confirmación es
negativa.
En el caso de que la colonia aislada sea fermentadora de la lactosa con producción
de gas y oxidasa negativa o indol positiva, la presencia de coliformes totales se
considera confirmada. Si la reacción de la oxidasa es positiva, o la del indol es
negativa, la presencia de coliformes totales se considerará negativa, aunque la

colonia aislada haya fermentado la lactosa con producción de gas.
Para el cálculo del NMP de coliformes totales se contabilizarán como positivos
aquellos tubos de la serie que hayan dado una prueba de confirmación positiva.
PRUEBA DE CONFIRMACION DE COLIFORMES FECALES

Es un procedimiento por el cual una reacción negativa excluye la presencia de
coliformes fecales, mientras que una reacción positiva indica su presencia
inequívocamente.
Deben someterse a esta prueba, todos los tubos que hayan resultado positivos en
la prueba presuntiva. A partir de los tubos positivos obtenidos se resiembra
mediante asa ó bien con dos gotas de cultivo tomadas con pipeta Pasteur tantos
tubos de caldo MacConkey como tubos positivos presuntivos haya, incubándose
inmediatamente a 44ºC durante 24 horas.
Cuando se observe crecimiento bacteriano con producción de gas a las 24 h ó
antes, la presencia de bacterias coliformes fecales quedara confirmada y para el
cálculo del NMP de coliformes fecales, se contabilizarán como positivos aquellos
tubos de la serie que hayan dado prueba de confirmación positiva. Las aguas aptas
para consumo humano deben tener ausencia de coliformes tanto totales como
fecales en un mínimo de 100 ml de agua analizada.
4. MÉTODO DEL NÚMERO MÁS PROBABLE. FUNDAMENTO.
FUNDAMENTO
La determinación de microorganismos coliformes totales por el método del
Número más Probable (NMP), se fundamenta en la capacidad de este grupo
microbiano de fermentar la lactosa con producción de ácido y gas al incubarlos a
35°C ± 1°C durante 48 h., utilizando un medio de cultivo que contenga sales
biliares. Esta determinación consta de dos fases, la fase presuntiva y la fase
confirmativa.
En la fase presuntiva el medio de cultivo que se utiliza es el caldo lauril sulfato de
sodio el cual permite la recuperación de los microorganismos dañados que se
encuentren presentes en la muestra y que sean capaces de utilizar a la lactosa como
fuente de carbono. Durante la fase confirmativa se emplea como medio de cultivo
caldo lactosado bilis verde brillante el cual es selectivo y solo permite el desarrollo
de aquellos microorganismos capaces de tolerar tanto las sales biliares como el
verde brillante.
La determinación del número más probable de microorganismos coliformes
fecales se realiza a partir de los tubos positivos de la prueba presuntiva y se
fundamenta en la capacidad de las bacterias para fermentar la lactosa y producir

gas cuando son incubados a una temperatura de 44.5 ± 0.1°C por un periodo de
24 a 48 h.
La búsqueda de Escherichia coli se realiza a partir de los tubos positivos de caldo
EC, los cuales se siembran por agotamiento en medios selectivos y diferenciales
(Agar Mac Conkey, Agar eosina azul de metileno) y posteriormente realizando
las pruebas bioquímicas básicas (IMViC) a las colonias típicas.
5. TEST O PRUEBA DE EIJKMAN
La prueba de Eijkman o la prueba de coliformes diferenciales o el recuento

confirmado de Escherichia-coli es una prueba utilizada para la identificación
de bacterias coliformes de animales de sangre caliente según la capacidad de las
bacterias para producir gas cuando se cultivan en medios de glucosa a 46 ° C
(114.8 ° F).
La prueba para determinar si las bacterias coliformes provienen de animales de
sangre caliente. Mediante esta prueba se puede establecer fácilmente si el agua ha
sido contaminada por defecación humana y animal que contiene bacilos de coli .
La prueba fue presentada por Christiaan Eijkman (1858–1930) en su artículo en
1904.
Las bacterias coliformes se definen como en forma de vara Gram-
negativo no formador de esporas y móviles o bacterias no móviles que
pueden fermentar la lactosa con la producción de ácido y gas cuando se incuba a
35-37 ° C. Debido a la capacidad limitada de ciertas bacterias coliformes para
fermentar la lactosa, la definición ha cambiado a bacterias que contienen la enzima
B-galactosidasa. Son un indicador de uso común de la calidad sanitaria de los
alimentos y el agua. Los coliformes se pueden encontrar en el medio ambiente
acuático, en el suelo y en la vegetación; Están universalmente presentes en
grandes cantidades en las heces de sangre caliente.los animales Si bien los
coliformes en sí mismos no son normalmente causas de enfermedades graves, son
fáciles de cultivar y su presencia se utiliza para indicar que
otros organismos patógenos de origen fecal pueden estar presentes. Dichos
patógenos incluyen bacterias , virus o protozoos que causan enfermedades y
muchos parásitos multicelulares. Los procedimientos de coliformes se realizan
en condiciones aeróbicas o anaeróbicas.
Géneros clasificatorios:
 Citrobacter
o Enterobacter
o Hafnia
o Klebsiella
o Escherichia

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 Evaluar la calidad sanitaria de muestras de agua o alimentos

 Determinar las diferencias de los organismos coliformes totales de

Cuando hablamos de aguas residuales, estamos haciendo referencia a todo tipo de

realizar sobre el agua. Se pueden encontrar productos químicos procedentes de

 Aguas residuales y otros residuos que demandan oxígeno (en su mayor

 Sedimentos formados por partículas del suelo y minerales arrastrados por

 EDAR (Estación Depuradora De Aguas Residuales )

 FASE DE PRE TRATAMIENTO. Se eliminan los residuos de mayor

MATERIALES, INSTRUMENTOS Y REACTIVOS

Materiales, instrumentos Gráficas

2) Verter 90 ml de la solución de caldo peptonado en una botella de vidrio

3) Verter en dos tubos de ensayo, 9 ml

5) Repartir la solución de CLS en 9 tubos de ensayo, conteniendo así cada uno 9 ml

II. SOLUCIÓN MADRE Y DILUCIONES

1) Con la ayuda de una pipeta, tomar 10

2) Repartir a cada tubo, 1ml de la

3) Con la ayuda de una pipeta estéril tomar 1 ml de la SOLUCIÓN MADRE (10−1 )

4) Agregar 1 ml de la dilución 10−2 a

5) Con la ayuda de una pipeta estéril transferir 1 ml de la dilución 10−2 a un tubo

6) Repartir en tres tubos que contengan

7) Incubar los 9 tubos a 35 °C por 24 horas (primera lectura) y 48 horas (segunda

9) Preparar el agar Mac conkey y sembrar por el método de estrías e incubar a 37 °C

Previamente los tubos esterilizados a 100°C aproximadamente y enfriados, se llevan

1era lectura después de 24 horas:

Se observan los 3 grupos de tubos; desde el derivado 10-1 hasta el 10-3.

Dilución de 1er tubo 2do tubo 3er tubo Nro de tubos

Lectura de tubos a las 48 horas:

Dilución de 1er tubo 2do tubo 3er tubo Nro de tubos

Población de coliformes totales= 430 NMP/ml

Siembra de tubos positivos en agar MacConkey.

El Agar MacConkey es un medio de cultivo selectivo que se utiliza para el aislamiento

MUESTRA Agua del río Chillón

LUGAR DE RECOLECCIÓN Puente Piedra

Se finaliza la siembre en agar Mac-Conkey para la identificación de coliformes.

 No se encontró coliformes en la muestra 10−3; debido a su

Grupo de bacterias aerobias y facultativamente anaerobias, Gram-negativas, no

El grupo coliforme es constante, abundante y casi exclusivo de la materia fecal,

Otra clasificación que poseen los coliformes, está dada por:

 Coliformes Termo tolerantes o fecales:

2. MEDIOS PARA DETECTAR COLIFORMES

 Base de Agar para Coliformes Fecales (m-FC): medio para detección y

3. PRUEBAS PRESUNTIVAS Y CONFIRMATIVAS PARA COLIFORMES

Lectura e interpretación de los resultados.

PRUEBA DE CONFIRMACION DE COLIFORMES TOTALES

negativa, la presencia de coliformes totales se considerará negativa, aunque la

PRUEBA DE CONFIRMACION DE COLIFORMES FECALES

4. MÉTODO DEL NÚMERO MÁS PROBABLE. FUNDAMENTO.

fundamenta en la capacidad de las bacterias para fermentar la lactosa y producir

5. TEST O PRUEBA DE EIJKMAN

La prueba de Eijkman o la prueba de coliformes diferenciales o el recuento

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