UNIVERSIDAD CENTRAL DEL ECUADOR

FACULTAD DE CIENCIAS QUÍMICAS

CARRERA DE BIOQUÍMICA CLÍNICA

INFORME DE LABORATORIO DE BIOQUÍMICA I

IDENTIFICACIÓN DE CARBOHIDRATOS

Asignatura: Bioquímica I

Número de práctica: 1

Fecha de realización: 22/10/2018 Fecha de entrega: 29/10/2018

Integrantes / Grupo N°: Paredes Priscila; Quinga Jenny /

1. Título: Identificación de carbohidratos

2. Objetivo:
○ Identificar la presencia de carbohidratos
○ Reconocer si el carbohidrato es o no un azúcar reductor con base en algunas
reacciones coloreadas
○ Determinar el tipo de carbohidrato presente en la muestra
○ Diferenciar cetosas de aldosas presentes en la muestra.

3. Fundamento Teórico:
Orientado a los objetivos y metodología
“Los carbohidratos son constituyentes importantes del alimento de los animales y del tejido
de éstos. Se caracterizan por el tipo y número de residuos monosacárido en sus moléculas”.
(Harper, 2013). Las pruebas para la determinación de los carbohidratos pueden ser generales
como la reacción de T imol, α − N af tol; ó Antrona , las cuales no discriminan el tipo de
carbohidrato analizado, o específicas si el resultado final logra la identificación de un
carbohidrato en particular.
Reactivo De Benedict: ​Una de las reacciones más comunes en la identificación de
carbohidratos. Esta reacción es específica para azúcares con grupo reductores libres (C=O).
Todos los monosacáridos poseen un grupo reductor libre. Los disacáridos maltosa y lactosa
tienen grupos reductores libres, pero la sacarosa no los posee, ya que se pierden los grupos
reductores de sus componentes cuando ésta es formada.(Watson, 1998)
Reactivo De Barfoed: ​Sirve para distinguir monosacáridos reductores de disacáridos
reductores, basándose en la velocidad de reacción; en los monosacáridos la formación del
óxido cuproso es más rápido que en los disacáridos.(Watson, 1998)
Prueba Salliwanoff: ​Los glúcidos que se clasifican como cetosas tienen en el carbono 2 una
función cetona, en presencia de un ácido fuerte producen rápidamente derivados furfúricos
que reaccionan con un difenol llamado resorcina. La sacarosa (un disacárido formado por
 glucosa y fructosa) y la inulina (un polisacárido de la fructosa) dan positiva la reacción, ya
que el HCI del reactivo provoca en caliente la hidrólisis del compuesto liberando fructosa
(responsable de la reacción positiva).(Watson, 1998)

4. Procedimiento:
Descripción breve lo más condensada posible, sin excluir equipos, reactivos,
concentraciones y material empleado
Identificación de carbohidratos:
● En un tubo de ensayo se colocó 2 ml de la muestra problema
● Se procedió a añadir 4 gotas de timol
● Finalmente se agregó en pequeña cantidad ácido sulfúrico con la ayuda de una pipeta
volumétrica por las paredes del tubo de ensayo.

Azúcares reductores:
● En un tubo de ensayo se colocó 2 ml de la muestra problema.
● Se añadió 1 ml de solución Nylander.
● Posteriormente, se colocó a baño maría.

● En otro tubo de ensayo se colocó 1 ml de la muestra problema.

● Se añadió 1 ml de solución Fehling A.
● Se añadió 1 ml de solución Fehling B
● Posteriormente, se colocó a baño maría

Tipo de carbohidrato:
● En un tubo de ensayo se colocó 1 ml de la muestra problema.
● Se añadió 2 ml de solución Barfoed
● Posteriormente, se colocó a baño maría por 3 minutos.

Diferenciación de cetosas y aldosas:

● En un tubo de ensayo se colocó 1 ml de la muestra problema
● Se añadió 2 ml de solución Seliwanoff
● Posteriormente, se colocó a baño maría.

5. Resultados:
Tablas / figuras/ cálculos/ gráficos
○ La prueba de Molisch con timol y ácido sulfúrico dió positivo a la presencia de carbohidratos,
lo que explica la formación de un anillo violeta en la parte superior del tubo de ensayo.
○ Al realizar la prueba de azúcar reductor se observa que los resultados para Fehling A/B y
Nylander son positivos dando un precipitado rojo y un color negro respectivamente.

○ Para el reconocimiento de disacárido o monosacárido se usó la prueba de Barfoed, y se

evidenció la formación de un precipitado rojo . como evidencia tentativa de Fructosa

○ Se utilizó la prueba de Seliwanoff para distinguir aldosas y cetosas dando como resultado una
coloración roja guinde evidenciando tentativamente la cetosa fructosa

6. Discusión de resultados:
Análisis e interpretación de los resultados
La reacción de Barfoed nos permite diferenciar si estamos en presencia de un monosacárido o
un disacárido reductor. Para lograr esta diferenciación, el cobre se encuentra disuelto en un
medio ligeramente ácido, retardando la aparición del Cu2O unos cinco minutos en el caso de
 los monosacáridos. La tardanza será mayor para los disacáridos, que puede llegar a ser de 15
minutos o más. (Al, 2012)
En la Prueba de Seliwanoff las cetosas se deshidratan más rápidamente que las aldosas dando
derivados de furfural que se condensan con resorcinol para formar un complejo rojo; por lo
tanto, debe evitarse un calentamiento prolongado de la muestra que se está estudiando.
(Freifelder. 1991). Esta prueba es utilizada para el reconocimiento de fructosa, se basa en
azúcares que pueden hidrolizarse, la reacción es positiva cuando las soluciones luego
detenerlas por un tiempo en baño María presentan colores amarillos,anaranjados rojizos. La
fructosa es una cetosa se hidroliza en sacarosa más inulina, esto hace que la reacción positiva
manifieste un cambio de color.
La Prueba de Barfoed es una prueba utilizada para detectar monosacáridos. Se basa en la
reducción de cobre(II) (En forma de acetato) a cobre (I) (En forma de óxido), el cual forma un
precipitado color rojo ladrillo. (Freifelder. 1991). Este ensayo se emplea para diferenciar a los
mono de los disacáridos. Estos últimos reaccionan más lentamente con el acetato cúprico,
debido probablemente al tamaño molecular, aunque también pueden estar implicados otros
factores tales como una interacción más compleja con los dos anillos monosacáridos. En la
solución de fructosa también se presentó el precipitado color ladrillo a los tres minutos de
reaccionar, ya que ésta es un monosacárido.

7. Conclusiones​:

○ Se identificó que la muestra problema, es un carbohidrato debido al resultado positivo

para la reacción de Timol.
○ Se reconoció que la muestra es un azúcar reductor debido a que tanto para Fehling
A/B y para la prueba de Nylander el resultado fue positivo.
○ Se determinó que es un monosacárido debido al resultado positivo de la prueba de
Barfoed.
○ Se diferenció que es una cetosa debido a la prueba positiva para Seliwanoff, lo que
indica la presencia de fructosa en la muestra.
○ Utilizando la prueba de Molisch con Timol se determinó la presencia de
carbohidratos; con la prueba de Seliwanoff se determinó la presencia de fructosa
(cetosa); y con la prueba de Barfoed se diferenció la presencia de un monosacáridos
mediante la formación de precipitados.
○ Efectuar una comparación entre la literatura o datos bibliográficos

8. Bibliografía:
○ Al, O. (2012). Reacciones De Identificación Y, 1–9.
○ Harper, 2013, Bioquímica Ilustrada. 29va Edición. The McGraw-Hill Companies, Inc.
México, D.F. Pág
○ Freifelder. 1991 técnicas de bioquímica y biología molecular.Reverte. Biblioteca.
○ Watson, 1998. Biología molecular. 3ed. Edit. Omega biblioteca
○
○ Netgrafías: Apellido, año, Título documento, Institución/ Organización [fecha
de acceso], Pág. WEB
9. Anexos:
muestra inicial Positivo Timol Positivo Nylander

Positivo Fehling A/B Positivo Barfoed Positivo Seliwanoff