INFORME DE PRÁCTICA # 01

“PREPARACIÓN DE LA FASE MÓVIL E IDENTIFICACIÓN DEL

ADSORBENTE DE LA FASE ESTACIONARIA EN CROMATOGRAFÍA DE
CAPA FINA.”

Ronald Cadavid1; Isabella Valencia2; Yulis Elena Zuñiga3; Nombre

APELLIDO4; Nombre APELLIDO5.
Universidad Nacional Abierta y a Distancia. Escuela de Ciencias Básicas,
Tecnología e Ingeniería – ECBTI. Cromatografía. Grupo #1 CEAD: Palmira.
Palmira - Colombia.
Sesión:1, 31, marzo de 2019
Entrega Informe: xxxxxx

Estudiante Correo electrónico Código

Ronald
ejemplo@unadvirtual.edu.co 94480490
Cadavid1
Isabella
ivalenciapr@unadvirtual.edu.co 1113680055
Valencia2
Yulis Elena
yezunigab@unadvirtual.edu.co 1192895026
Zúñiga 3
Nombre
ejemplo@unadvirtual.edu.co
APELLIDO 4
Nombre
ejemplo @unadvirtual.edu.co
APELLIDO 5

RESUMEN
En el desarrollo de esta práctica, se emplearon diferentes solventes orgánicos
como fase móvil, con el fin de evaluar la separación de diferentes mezclas;
logrando así, determinar las características de separación de diferentes
mezclas al varias la composición de la fase móvil en cromatografía de capa
fina.
Palabras claves: fase móvil, cromatografía capa fina, distancia recorrida por el
solvente, adsorción.
OBJETIVOS
GENERAL
● Determinar las características
de separación de diferentes
mezclas al variar la
composición de la fase móvil
en cromatografía de capa fina.
ESPECÍFICOS
 Emplear diferentes solventes
en la preparación de la fase
móvil.
 Identificar las características
de separación de diferentes
mezclas.
MARCO TEÓRICO
FASE MOVIL: Es un fluido que
penetra a través o a lo largo del
lecho estacionario, en una dirección
determinada. Puede ser un líquido
(cromatografía de líquidos) o un gas
(cromatografía de gases) o un fluido
supercrítico (cromatografía de
fluidos supercríticos). En
cromatografía de gases se puede
utilizar la expresión gas portador
para designar la fase móvil, y en
cromatografía de elución se puede
utilizar la palabra eluyente para
designar esta misma fase.
CROMATOGRAFIA DE CAPA
FINA: La Cromatografía en Capa
Fina es una técnica altamente
versátil y económica para ensayos
analíticos y preparativos. La
cromatografía capa fina es
especialmente popular para el
monitoreo de reacciones, la
purificación de muestras y la
identificación de compuestos y
contaminantes en las mezclas.
SOLVENTES ORGANICOS: Los
disolventes orgánicos son
compuestos orgánicos volátiles que
se utilizan solos o en combinación
con otros agentes, para disolver
materias primas, productos o
materiales residuales, utilizándose
como agente de limpieza, para
modificar la viscosidad, como
agente tenso activo, como
plastificante, como conservante o
como portador de otras sustancias
que, una vez depositadas, quedan
fijadas y el disolvente se evapora.
POLARIDAD SOLVENTES:
En química, se denomina polaridad
de un disolvente al parámetro que
mide su polaridad y le confiere
propiedades de solubilización de
diferentes solutos.
La polaridad es una característica
muy importante de los disolventes
debido a que determina la
solubilidad y el orden de elución de
los compuestos en técnicas de
separación como la cromatografía.

Tabla1. Disolventes más usados en
orden de polaridad
DISTANCIA RECORRIDA POR EL
SOLVENTE:
La relación entre las distancias
recorridas por el soluto y por el
eluyente desde el origen de la placa
se conoce como Rf, y tiene un valor
constante para cada compuesto en
unas condiciones cromatográficas
determinadas (adsorbente,
disolvente, tamaño de la cubeta,
temperatura, etc.).
Debido a que es prácticamente
imposible reproducir exactamente
las condiciones experimentales, la
comparación de una muestra con
otra debe realizarse eluyendo
ambas en la misma placa.
Para calcular el Rf se aplica la
siguiente expresión:
Rf = distancia recorrida por el
compuesto (X) / distancia recorrida
por el eluyente (Y)
La distancia recorrida por el
compuesto se mide desde el centro
de la mancha. Si ésta es
excesivamente grande se obtendrá
un valor erróneo del Rf. Se
recomienda elegir un eluyente en el
que los componentes de la mezcla
presenten un Rf medio en torno a
0.3‐0.5. Para compuestos poco
polares, se debe utilizar un
disolvente apolar como el hexano.
En el caso de compuestos con
polaridad media, se aconseja utilizar
mezclas hexano/acetato de etilo en
distintas proporciones. Los
productos más polares, requieren
disolventes más polares como
mezclas de diclorometano/metanol
en distintas proporciones.
PARTE EXPERIMENTAL
MATERIALES
 Placas de gel de sílice
 Aplicador capilar
 Mechero
 Cámara cromatográfica
  Lápiz cm del borde superior el
 Probetas frente de disolvente.
 Erlenmeyer
 Lámpara de luz UV
 Regla
 Tijeras
 Pinzas
 Papel filtro
 Vasos de precipitado
 Gotero
 Pipetas aforadas 2. Tome un capilar y caliéntelo
 Pipeteador en el mechero hasta que se
 Plancha de calentamiento torne maleable.
3. Retire el capilar del mechero y
REACTIVOS estírelo firmemente de cada
extremo, hasta obtener un
 Tolueno capilar muy fino.
 Diclorometano
 Éter etílico
 Pentano
 Vainilla
 Benzaldehído
 Cloro anilina
 Cristales de yodo
Nota: Cuando manipule el capilar y
PROCEDIMIENTO el mechero asegúrese de emplear
las gafas de seguridad. Para este
proceso no emplee los guantes.
PARTE I. PREPARACIÓN DE PLACAS
Y CAPILARES PARTE II PREPARACIÓN DE LA FASE
MÓVIL
1. Corte las placas de gel de
sílice según el tamaño de la 1. Rotule 6 vasos de precipitado de
cámara cromatográfica. 25 mL como: Ensayo 1, Ensayo
Marque a 0.5 cm del borde 2, Ensayo 3, Ensayo 4, Ensayo
inferior una línea base y a 1.0 5 y Ensayo 6.
2. En cada vaso de precipitado,
prepare las siguientes mezclas
de disolventes:
PARTE III PREPARACIÓN DE LAS
MUESTRAS
1. Pese 4 mg y disponga en tubos
de ensayo y por separado, las
siguientes sustancias: vainilla y
benzaldehído. Agregue a cada
tubo de ensayo 2 gotas de
diclorometano.

NOTA: si en el laboratorio no hay

Ensayo Ensayo
1 2 disponibilidad de las sustancias
Tolueno (mL) 5 2,5 mencionadas, puede sustituirlas
Diclorometano 2,5 por otras con similitud de
(mL)
Éter etílico polaridad.
(mL)
2. Prepare la siguiente muestra
problema: mida 0,5 mL de
3. Cubra la cámara
pentano y dispóngalos en un
cromatográfica con papel filtro
Erlenmeyer y tápelo con un
para alcanzar un equilibrio en
corcho.
la atmósfera de disolventes.
3. Posteriormente, agregue 0,5
mL de diclorometano, agite
suavemente y tape nuevamente
el Erlenmeyer.

PARTE IV APLICACIÓN DE LAS

4. Agregue hasta cubrir el fondo
MUESTRAS
(máximo a 0.5 cm de altura)
con la mezcla de disolventes 1. Tome los capilares y
preparada y tape sumérjalos por separado y en
inmediatamente. Realice este cada tubo de ensayo donde se
procedimiento por separado prepararon las muestras.
para cada ensayo.
 2. Aplique la muestra con el
capilar en la línea base de la
placa cromatográfica en el
siguiente orden de izquierda a
derecha: vainilla,
benzaldehído y muestra
problema. Cuando aplique la
muestra, asegúrese de tocar
ligeramente el adsorbente.

1. Deje secar el exceso de

disolvente, puede emplear
una plancha de calentamiento
o esperar que el proceso
ocurra.

PARTE VI REVELADO

3. Deje evaporar la mayor parte

del disolvente de la placa
cromatográfica.

PARTE V CÁMARA
CROMATOGRÁFICA

1. Retire la tapa de la cámara

cromatográfica, introduzca la
placa en forma vertical y
tápela inmediatamente.
2. Cuando la mezcla de
solventes haya alcanzado la
línea de frente de disolvente,
retire la placa cromatográfica.
1. La determinación de la
ubicación de las muestras en
las placas las podrá realizar
por el método físico o el
método químico, según la
disposición de material que
tenga el laboratorio:
Método físico:
Ubique la placa en un lugar con poca
luz y acerque una lámpara de luz UV
a una distancia aproximada de 10
cm. Cuando la lámpara irradie la
placa, todos los compuestos
orgánicos adsorbidos y que tengan
un cromóforo aparecerán con un
color oscuro. Cuando realice este
procedimiento, marque con el lápiz
la posición de las muestras.
Método químico:
Prepare una cámara de revelado
introduciendo en un recipiente con
tapa cristales de Yodo; tape el
recipiente y espere a que se haga
visible un vapor coloreado encima
de los cristales.
Destape el recipiente, introduzca las
placas y tape inmediatamente;
retire la placa del recipiente cuando
observe la coloración oscura de las
muestras en la placa y vuelva a
tapar inmediatamente el recipiente.
Marque con el lápiz la posición de las
muestras.
PARTE VII DETERMINACIÓN DEL
FACTOR DE RETARDO (RF)
1. Después de marcar la posición
de las muestras en la placa
cromatográfica, mida con una
regla la distancia recorrida de
cada muestra desde la línea
base (DRM) y la distancia
recorrida por la fase móvil
desde la línea base hasta el
frente de disolvente (DRD).
2. Aplique la siguiente ecuación:
drm
R f=
drd
En donde DRM corresponde a
la distancia recorrida por la
muestra y DRD a la distancia
recorrida por el disolvente.
3. Determine el factor de retardo
en cada ensayo. Tenga en
cuenta que el mejor Rf se
encontrará en el rango de 0.3
a 0.7
RESULTADOS Y CÁLCULOS
ANÁLISIS DE RESULTADOS
Los análisis de resultados deben
realizarse en base a los resultados
obtenidos del proceso práctico. En
este espacio deberán justificar el
porqué de los resultados, si eran los
esperados o fueron diferentes.
También deberán argumenta las
causas de los resultados y los
posibles errores que se presentaron.
Se debe hacer un soporte con
búsqueda bibliográfica y teórica, por
lo que se debe hacer una relación
teórico- experimental citando.
CUESTIONARIO:
1. ¿Cuáles son los factores que
se deben tener en cuenta para
 tener una separación 3. ¿Por qué la cámara
cromatográfica exitosa? cromatografica se debe cubrir
con papel filtro?
 Polaridad de los
solventes que se Porque que el papel filtro
emplean en la fase permite observar el frente del
móvil. disolvente y el desarrollo del
 Material de la fase cromatograma también evita
estacionaria (celulosa, que la cámara se sature con el
sílice, etc.) vapor del disolvente acelerando
 Las especies
el desarrollo del cromatograma.
individuales quedan
retenidas en la fase
estacionaria en función
de las interacciones que 4. ¿Qué es polaridad y qué
tienen lugar tales como: relación tiene con los ensayos
Adsorción superficial de cromatografía de capa
Solubilidad carga. fina?
2. ¿Qué es un cromóforo? 5. Clasifique las muestras
Un cromóforo es la parte o analizadas de la más polar a la
conjunto de átomos de menos polar.
una molécula responsable de
su color. También se puede
definir como una sustancia CONCLUSIONES
que tiene muchos electrones
capaces de absorber energía o Es importante el propósito de esta
luz visible, y excitarse para así práctica ya que nos permite
emitir diversos colores, identificar y relacionar los
dependiendo de las longitudes procedimientos de laboratorio con
de onda de la energía emitida los conceptos teóricos vistos en
por el cambio de nivel cromatografía, la preparación de la
energético de los electrones, fase móvil e identificación del
de estado excitado a estado adsorbente de la fase estacionaria.
basal.
BIBLIOGRAFÍA
 Abott, D., & Andrews, R. (1966). Introducción a la
Cromatografía. Madrid: Alhambra, S.A.
 (2019). Polaridad solventes orgánicos. Retrieved from
http://organica1.org/1311/1311tablas.pdf
 (2019). Retrieved from
http://www2.ulpgc.es/hege/almacen/download/39/39360/separ
aciones_por_cromatografia_1.pdf
 Cromóforo. (2019). Retrieved from
http://www.quimica.es/enciclopedia/Crom%C3%B3foro.html
